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• juan del rancho

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DETERMINACION CUALITATIVA DE PROTEINAS EN ORINA I.

INTRODUCCION: La orina normal contiene una pequeña cantidad de proteínas solubles (albúminas, algunas enzimas, etc.); la cantidad es pequeña alcanzando máximo de 150 mg en orina de 24 horas, menos de 10 mg/dl. Las proteínas son casi completamente absorbidas en los túbulos. Cuando el glomérulo es injuriado por enfermedad, moléculas proteicas de variado tamaño incluyendo las más largas, escapan en el filtrado de forma que los túbulos son incapaces de captar la gran cantidad de proteínas y resulta una masiva proteinuria. Las proteínas de peso molecular relativamente bajo y de pequeño tamaño pasan primero a través de los glomérulos injuriados, por ejemplo, la proteína de Bence Jones, hemoglobina, albúmina; luego las globulinas. El fibrinógeno es una molécula muy larga y escapa solo en enfermedad renal severa. La proteinuria puede ser renal o extrarremal. Son causas de proteinuria Renal: glomerulonefritis difusa, glomerulonefritis focales proliferativas, síndrome nefrótico, nefropatía diabética, nerfropatía lúpica, nefropatía tóxica, en la eclampsia, tuberculosis renal, riñón poliquístico etc. Extrarrenal: proteinuria ortostática, gravídica, febril, mieloma múltiple. La proteinuria fisiológica (proteinuria ortóstatica) se presenta después de ejercicios y de permanecer largo tiempo en posición de pie, sin que exista evidencia de lesión renal. En el mieloma múltiple y macroglubinemia de Waldestrom, aparece la proteína de Bence Jones. La proteína de Bence Jones está constituída por las cadenas ligeras de las inmunoglobulinas que constituye la proteína Monoclonal. La presente práctica tiene por finalidad determinar la presencia de proteínas en la orina y de cuantificarlas en caso que estén presentes en casos normales y en estados patológicos.

II.

REACTIVOS A UTILIZAR. -

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III.

Acido tricloroacético, 12,5% (en agua destilada) Cloruro de sodio 0,85%. Standard de proteína: Pueden usarse suero claro normal de concentración conocido o un suero control adquirido comercialmente. Se diluye con cloruro de sodio 0,85% a una concentración final de 25 mg/ml. Esta dilución debe ser preparada el mismo día. Ácido acético al 2%.

ACTIVIDADES INSTRUCCIONALES: Procedimiento DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE LAS PROTEÍNAS EN ORINA: Coagulación por el calor.

COMPONENTE (ml) TUBO Orina previamente a filtrada 5,0 Someter a ebullición. Si aparece un precipitado o enturbamiento se puede deber a la presencia de proteínas o fosfatos. Añadir: Solución de ácido acético al 2% IV gotas Si desaparece la turbidez, se trata de fosfatos que se han disuelto en medio ácido. Si la turbidez desaparece o se ha hecho más intenso o se forma un precipitado, se trata de proteínas. Anote los resultados

IV.

CUESTIONARIO: 1. ¿Cómo diferencia usted un precipitado en un tubo de ensayo que no corresponde a proteínas en orina? 2. Señale algunos tipos de proteínas anormales que pueden ser encontradas en la orina. 3. En qué consiste el método de Heavy para la determinación de proteínas 4. Señale algunas causas de proteinuria fisiológica y patológica.