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REV: 1

MEDIOS DE CULTIVO

MC-OVB-O01

OGY & VERDE BRILLANTE

VIGENTE: 10/06/2022

PÁGINAS 1 A 5

MEDIOS DE CULTIVO OGY VERDE BRILLANTE Presentado por:  José Alfredo castilla gil  Luis Guillermo Agudelo  Yoimar Torres

Profesora: Grey Muños Ficha: 1136144

Tecnólogo en control de calidad de los alimentos 2016

Elaboro: José Castilla, Luis Agudelo, Yoimar Torres

Fecha:09-08-16

Reviso: Greys Muños

Fecha:11-21-16

Aprobó: Greys Muños

Fecha:11-10-16

MEDIOS DE CULTIVO

MC-OVB-O01

OGY & VERDE BRILLANTE

REV: 1

VIGENTE: 10/06/2022

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MEDIO OGYE Fundamentos El agar OGY (Agar-Oxitetraciclina-glucosa-extracto de levadura). Es un agar selectivo para la demostración y numeración de mohos y levaduras en todo tipo de material de investigación (alimentos, material clínico, etc.) El agar-oxitetraciclina-glucosa-extracto de levadura ha sido recomendado como medio de rutina para la investigación de mantequilla. Composición: Está compuesto por extracto de levadura, D-glucosa, Agar-agar, Oxitetraciclina 0,1 o Gentamicina 0,05. Procedimiento Se prepararon diluciones logarítmicas a base 10 (10-1,10-2y 10-3). Semarco un frasco como dilución10-1 y se adicionaron 90ml de agua peptonada al 0.1%; marcamos dos tubos de vidrio tapa rosca como 10-2y dilución 10-3 y adicionamos 9ml de agua peptona da al 0.1%. Dilución 10-1: pesamos 10g del alimento (cande de cerdo) y lo agregamos al frasco marcado como dilución 10-1 y mesclamos hasta homogenizar la mezcla. Dilución 10-2: Tomamos 1ml de la dilución 10-1 y lo agregamos al tubo marcado como 10-2 Y se mesclo hasta homogenizar. Dilución 10-3: tomó 1ml de la dilución anterior y se agregó al tubo marcado como 103 Obteniendo así las tres diluciones: A partir de estas tres diluciones realizamos la determinación para mohos y levaduras y la determinación de esporas de Clostridium sulfito reductor.

Elaboro: José Castilla, Luis Agudelo, Yoimar Torres

Fecha:09-08-16

Reviso: Greys Muños

Fecha:11-21-16

Aprobó: Greys Muños

Fecha:11-10-16

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VIGENTE: 10/06/2022

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Determinación de mohos y levaduras en carne de cerdo. Se realizaron siembras en profundidad, para esto tomamos 3 cajas de Petri estériles y las marcamos como 10-1,10-2y 10-3.

Mezclamos unas diez veces con la pipeta de la dilución 10-1 y tomamos 1ml de esta dilución y lo adicionamos en la caja marcada como 10-1, mezclamos de igual forma con la pipeta marcada como 10-2y tomamos 1ml de la dilución 10-2 y lo adicionamos en la caja marcada con la misma dilución, de la misma forma se tomó 1ml de la dilución 10-3y fueron agregados a la caja marcada como 10-3. Adicionamos 15ml de agar Extracto de malta-oxitetraciclina (OGY) fundido a 45°C a cada una de las cajas. Una vez agregado el agar mezclamos varias veces en forma de ochosén dirección de las manecillas del reloj con el fin de que se produzca una distribución homogénea de la muestra en el medio de cultivo, se dejó en reposo para que se solidificara el agar y se incubaron a 22°Cpor 7 días.

Elaboro: José Castilla, Luis Agudelo, Yoimar Torres

Fecha:09-08-16

Reviso: Greys Muños

Fecha:11-21-16

Aprobó: Greys Muños

Fecha:11-10-16

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MEDIO DE CULTIVO VERDE BRILLANTE Es un medio altamente selectivo utilizado para el aislamiento de microorganismos pertenecientes al género Salmonella con excepción de la Salmonella typhi. PRINCIPIO O FUNDAMENTO La selectividad de este medio se basa en la concentración del verde brillante, que inhibe microorganismos Gram positivos y parcialmente a Gram negativos. La lactosa y la sacarosa permiten diferenciar la flora acompañante que utiliza estos carbohidratos, del género Salmonella que no los degrada.

CLASIFICACION, EN QUE TIPO DE MEDIO SE ENCUENTRAN Y POR QUE? MEDIOS SELECTIVOS: son aquellos medios a los que se les incorporan sustancias para inhibir al crecimiento de la mayor parte de los microorganismos con excepción de aquellos para los que fueron ideados, por ejemplo, el medio telurito para el bacilo productor de la difteria y el agar citratodexosicolato para los grupos de Salmonella sp y Shigella sp. MEDIOS COMPLEJOS O DE COMPOSICIÓN INDEFINIDA: Estos medios llevan ingredientes como extracto de levadura, peptona, infusión de cerebro, extracto de carne, etc. que contienen nutrientes en abundancia pero sin saber con exactitud la composición cualitativa ni cuantitativa de estos nutrientes.

Elaboro: José Castilla, Luis Agudelo, Yoimar Torres

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Aprobó: Greys Muños

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TIPO DE MICROORGANISMOS QUE CRECEN EN EL MEDIO Y QUE FUNCION CUMPLEN CADA UNO? Microorganismos

Características

Escherichia coli Salmonella enteritidis Salmonella typhi Salmonella typhimurium Shigella flexneri Staphylococcus aureus

Amarillo-verdosas sobre fondo amarillento Rosas, blancas o transparentes sobre fondo rojo Crecimiento inhibido Rosas, blancas o transparentes sobre fondo rojo Crecimiento inhibido Crecimiento inhibido

TECNICA DE IDENTIFICACION (PROCESO Y MATERIALES) Método: Suspender 58g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121°c (15 libras de presión) durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50°c y vaciar en placas de Petri estériles. ES IMPORTANTE PROTEGERLO DE LA LUZ. Conservar en refrigeración de 2 a 8ºC. Procedimiento: 1. para el aislamiento de salmonella a partir de muestras clínicas, inocular una muestra de materia fecal o del hisopo rectal en la placa y sembrar por el método de la estría. 2. incubar las placas a 35°c durante 18-24 horas y examinar el desarrollo colonial. ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS Bacterias que fermentan la lactosa y/o sacarosa: colonias amarillo-verdosas, rodeadas por un halo de color amarillo verdoso del medio de cultivo. Bacterias que no fermentan la lactosa y/o sacarosa: colonias de color blanco rosadas o transparentes rodeadas por un halo rojizo del medio de cultivo.

Elaboro: José Castilla, Luis Agudelo, Yoimar Torres

Fecha:09-08-16

Reviso: Greys Muños

Fecha:11-21-16

Aprobó: Greys Muños

Fecha:11-10-16