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Luis Tenorio Hernández

Cuestionario. Esterilización de materiales y Preparación de medios de cultivo. 1.- ¿Cómo actúa el calor húmedo sobre los microorganismos para provocar su destrucción? Por la desnaturalización de proteínas, lo que es causado por la rotura de los puentes de hidrógeno que son los que mantienen a las proteínas en su forma tridimensional, las proteínas por lo tanto regresan a su estructura secundaria y se convierten en proteínas no funcionales.

2.-Mencionar 3 desventajas del método de esterilización por calor húmedo.   

No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metálicos No es considerado un agente esterilizante ya que la destrucción de las esporas bacterianas y la inactivación de virus no puede ser siempre asegurada.

3.-En el control de la esterilización por calor húmedo se emplean indicadores físicos tales como termómetros y manómetros, pero los indicadores biológicos son los que realmente permiten saber si la esterilización fue efectiva. ¿Cuáles son los indicadores biológicos comunes? Advertencios (tiras, discos, arena, plásticos, etc.) y producto inoculado.

4.- ¿Cómo se clasifican los medios de cultivo bacterianos de acuerdo con su función? 1) Medios comunes: Son aquellos que poseen los componentes mínimos para que pueda producirse el crecimiento de bacterias que no necesiten requerimientos especiales 2) Medios de enriquecimiento: Son aquellos que, además de las sustancias nutritivas normales, incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento de microorganismos exigentes. 3) Medios selectivos: Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias contenidas en una población polimicrobiana 4) Medios inhibidores: Cuando las sustancias añadidas a un medio selectivo impiden totalmente el crecimiento de una población microbiana, se denomina inhibidor. Los medios inhibidores podrían considerarse como una variante más restrictiva de los medios selectivos. 5) Medios diferenciales: Se utilizan para poner en evidencia características bioquímicas que ayuden a diferenciar géneros o especies. 6) Medios de identificación: Son los destinados a comprobar alguna cualidad específica que puede servirnos para reconocer la identidad de un microorganismo. 7) Medios de multiplicación: Sirven para obtener una gran cantidad de células a partir de un microorganismo ya aislado. 8) Medios de conservación: Se utilizan para conservar una cepa que, por diversas razones nos interese mantener.

9) Medios de transporte: Se usan para el transporte de muestras clínicas que no pueden sembrarse inmediatamente.

5.- Completar el siguiente cuadro sobre las características de algunos medios de cultivo MEDIO DE CULTIVO

TIPO DE MEDIO

COMPOSICIÓ N

PH

COLORAN TE

COLOR

FUNCIÓN

GSP

Definido y selectivo

7.2

Rojo fenol

Anaranj ado

Identificar Pseudomonas y Aeoromonas

Agar nutritivo

Medio común

6.8

-

-

Usado normalmente como rutina para todo tipo de bact eria.

Eosina azul de metileno (EMB)

Selectivo y Diferencial

Glutamato de Sodio Almidón hidrosoluble Fosfato de potasio Sulfato de Magnesio 0,5 % de peptona; 0,3 % de extracto de carne/extracto de levadura 1,5 % de agar 0,5 % de cloruro de sodio agua destilada Peptona Lactosa Sacarosa Fosfato dipotásico Agar Eosina Azul de Metileno

7.2 ± 0.2

Azul de Metileno y Eosina como indicador

Rojo Verde Azul Púrpura

MCConkey

Selectivo y diferencial

Peptona Pluripeptona Lactosa Sales biliares Cloruro de sodio Agar Rojo neutro Cristal Violeta

7.1 ± 0.2

Cristal Violeta Rojo Neutro

Rojo

inhibe el crecimiento de bacterias Gram positivas y algunas Gram negativas y muestra si las Gram negativas que crecen son o no fermentadoras de lactosa. Sirve como un indicador visual de pH, distinguiendo así las bacterias gram negativas que pueden fermentar la lactosa (Lac+) y las que no

Anaranja do

Amarillo

Verde brillante

Enriquecim iento y Selectivo

Pluripeptona. Extracto de levadura Cloruro de sodio Lactosa Sacarosa Rojo fenol. Verde brillante. Agar. Agua purificada

6.9 ± 0.2

Rojo Fenol Verde Brillante

Verde Amarillo Rojo

Hierro y triple azúcar (TSI)

Diferenciac ión

Extracto de carne Pluripeptona Cloruro de Sodio Lactosa Sacarosa Glucosa Sulfato de hierro y amonio Trisulfato de sodio Agar Rojo fenol

7.3 ± 0.2

Rojo de fenol

Rojo Anaranja do

Amarillo

pueden (Lac-). Aislamiento de Salmonella spp., excepto Salmonella typhi y Salmonella paratyphi, a partir de muestras clínicas, alimentos, y otros materiales de importancia sanitaria. Medio universalmente empleado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa, lactosa, sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico.