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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA

MATERIA: LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA PRÁCTICA #8 TEMA: TAMIZAJE FITOQUIMICO ESTUDIANTE: HERRERA DUQUE LEONELA ANABELLE DOCENTE: ING. WILFRIDO TERÁN 4to Semestre - Paralelo “G” 1er Parcial CICLO II 2017-2018

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MARCO TEÓRICO METABOLITOS PRIMARIOS Y SECUNDARIOS Los principios activos son sustancias que se encuentran en las distintas partes u órganos de las plantas y que alteran o modifican el funcionamiento de órganos y sistemas del cuerpo humano y animal. La investigación científica ha permitido descubrir una variada gama de principios activos, de los cuales los más importantes desde el punto de vista de la salud, son los aceites esenciales, los alcaloides, los glucósidos o heterópsidos, los mucílagos y gomas, los taninos. Existen en las plantas otros principios activos relevantes denominados nutrientes

esenciales, como las vitaminas, minerales,

aminoácidos, carbohidratos y fibras, azúcares diversos, ácidos orgánicos, lípidos y los antibióticos. 1.1 Metabolitos primarios: Son comunes a todas las células y son necesarios para el funcionamiento adecuado de las células y organismos. 

Glúcidos:

Drogas con oligósidos (caña de azúcar, remolacha azucarera). Drogas con polisacáridos elaborados por microorganismos (dextrano). Drogas con Polisacáridos aislados de algas (ácido algínico, carragenanos, otras). 

Polisacáridos de los vegetales superiores:

Polisacáridos homogéneos: Almidón, celulosa, fibras alimentarias, inulina, otras. 

Polisacáridos heterogéneos:

Gomas (goma karaya, otras) Mucílagos (goma de algarrobo, zaragatonas, otras). Pectinas.

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

Metabolismo Primario

El metabolismo primario comprende los procesos químicos que cada planta debe realizar cada día para sobrevivir y reproducirse: Fotosíntesis Glicólisis Ciclo del ácido cítrico Síntesis de aminoácidos Transaminación Síntesis de proteínas y enzimas Síntesis de coenzimas Síntesis de materiales estructurales Duplicación de material genético Reproducción celular (crecimiento) Absorción de nutrientes Fundamento químico de marchas fitoquímicos



Tamizaje Fitoquímicos

El tamizaje fitoquímico o screening fitoquímico es una de las etapas iniciales de la investigación fitoquímica, que permite determinar cualitativamente los grupos químicos presentes en una planta y a partir de allí, orientar la extracción y/o fraccionamiento de los extractos para el aislamiento de los grupos de mayor interés. El tamizaje fitoquímico consiste en la extracción de la planta con solventes apropiados y la aplicación de reacción de color y precipitación. Debe de permitir la evaluación rápida, con reacciones sensibles, reproducibles y de bajo costo.

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Los resultados del tamizaje fitoquímico constituyen únicamente en una orientación y debe de interpretarse en conjunto con los resultados del screening farmacológico. Así cuando una planta revela acción sobre el sistema nervioso central durante el tamizaje farmacológico y presencia de alcaloides en el tamizaje fitoquímico, es bastante probable que la acción farmacológica se deba a la fracción alcaloidal. De la misma manera, el hecho de evidenciarse acción antiinflamatoria en el tamizaje farmacológico y la presencia de flavonoides en el tamizaje fitoquímico, puede dar lugar a procesos de aislamiento y sometimiento a pruebas más específicas de estos compuestos. Efectos catárticos pueden ser asociados a las antraquinonas. La presencia de glicósidos cianogénicos la marcha fitoquímica puede dar lugar a la descartación de la planta por su alta toxicidad. La confirmación de la actividad farmacológica o antimicrobiana justifica la continuación de los estudios. El screening fitoquímico proporciona datos preeliminares sobre los constituyentes químicos de la planta que, junto con los resultados del tamizaje farmacológico, pueden orientar la continuación de los estudios. Diversos métodos de tamizaje fitoquímico están descritos en la literatura.

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Algunos evalúan pocos grupos de sustancias, en compensación, otros evalúan la presencia de compuestos de poco interés, como ácidos grasos, azucares reductores, polisacáridos y mucílagos. La cantidad de material vegetal para realizar las pruebas varia de 5 g a 200 g.



Ensayo de resinas._ Para detectar este tipo de compuesto, adicione a 2 ml de la solución alcohólica, 10 ml de agua destilada. La aparición de un precipitado, indica un ensayo positivo.



Compuestos reductores. Ensayo de Fehling._ Para ello, si la alícuota del extracto no se encuentra en agua, debe evaporarse el solvente en baño de agua y el residuo re disolverse en 1 – 2 ml de agua. Se adiciona 2 ml del reactivo y se calienta en baño de agua 5 – 10 minutos la, mezcla. El ensayo se considera positivo si la solución se colorea de rojo o aparece precipitado rojo. El reactivo se prepara de la siguiente forma: Solución A: Se pesa 35 gramos de sulfato cúprico hidratado cristalizado y se disuelven con agua hasta un volumen total de 1000 ml.

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Solución B: Se pesan 150 gramos de tartrato de sodio y potasio y 40 gramos de hidróxido de sodio y se disuelven con agua hasta un volumen total de 1000 ml. Las soluciones se tiene preparadas de forma independiente y se mezcla igual cantidad en volumen de cada de ellas justo en el momento de realizar el ensayo. Dicha mezcla es la que se adiciona a la alícuota a evaluar. 

Saponinas. Ensayo de la espuma._ Permite reconocer en un extracto la presencia de saponinas, tanto del tipo esteroidal como triterpénica. De modo que si la alícuota se encuentra en el alcohol, se diluye con 5 veces su volumen en agua y se agita la mezcla fuertemente durante 5 – 10 minutos. El ensayo se considera positivo si aparece espuma en la superficie del líquido de más de 2 mm de altura y persistente por más de 2 minutos.



Compuestos fenólicos. Ensayo del cloruro férrico. Si el extracto de la planta se realiza con alcohol, el ensayo determina tanto fenoles como taninos. A una alícuota del extracto alcohólico se le adiciona 3 gotas de una solución de tricloruro férrico al 5 % en solución salina fisiológica ( cloruro de sodio al 0,9 % en agua) 

Desarrollo de una coloración rojo – vino, compuestos fenólicos en general.



Desarrollo de una coloración verde intensa, taninos del tipo pirocatecólicos.



Desarrollo

de

una

coloración

azul,

taninos

del

tipo

pirogalotánicos. 

Flavonoides. Ensayo de antocianinas._ se calienta 2 ml del extracto etanolico 10 minutos con 1 ml de HCL concentrado. Se deja enfriar y se adiciona 1 ml de agua y 2ml de alcohol amílico. Se agita y se deja separar las dos fases. La aparición de color rojo a marrón en la fase amílica, es indicativa de un ensayo positivo.

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

Alcaloides. Ensayo de Dragendorff._ Permite reconocer en un extracto la presencia de alcaloides, para ello, si la alícuota del extracto esta disuelta en un solvente orgánico, este debe evaporarse en baño de agua y el residuo re disolverse en 1 ml de ácido clorhídrico al 1 % en agua. Si el extracto es acuoso, a la alícuota se le añade 1 gota de ácido clorhídrico concentrado, (calentar suavemente y dejar enfriar hasta acidez). Con la solución acuosa acida se realiza el ensayo, añadiendo 3 gotas del reactivo de Dragendorff, si Hay opalescencia se considera (+), turbidez definida (++), precipitado (+++)



Alcaloides. Ensayo de Mayer._ proceda de la forma descrita anteriormente, hasta obtener la solución acida. Añade una pizca de cloruro de sodio en polvo, agite y filtre. Añade 2 o 3 gotas de la solución reactiva de Mayer, si se observa opalescencia (+), Turbidez definida (++), precipitado copos (+++). Observación: en el caso de alcaloides cuaternarios y/o amino-óxidos libres, estos solo se encontraran en el extracto acuoso y para considerar su presencia la reacción debe ser (++) o (+++), en todos los casos, ya que un resultado (+), puede provenir de una extracción incompleta de bases primarias, secundarias o terciarias.

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Tablas y resultados Tipos

de Aceite

chocolate

Quinua

Ensayos Ensayo

de

-

-

-

+

_

+

_

+

-

resinas Compuestos reductores. Ensayo

de

Fehling Saponinas. Ensayo

de

la

espuma Compuestos

verde

Verde

verde

fenólicos. Ensayo

del

cloruro férrico Flavonoides. Ensayo

+

+

+

++

++

+

++

++

++

de

antocianinas Alcaloides. Ensayo

de

Dragendorff._ Alcaloides. Ensayo de Mayer

Conclusiones    

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Para el ensayo de resina en las tres sustancias nos dio negativo. En el ensayo de Fehling solo hubieron dos compuestos reductores Hubo presencia de saponinas en el compuesto de aceite y quinua. En el ensayo de cloruro férrico se desarrolló una coloración verde intensa, tanto en el aceite, chocolate y quinua; quiere decir que se presentaron taninos del tipo pirocatecólicos.







Para el ensayo de antocianinas se presentó un color marrón en la fase amílica en el chocolate, aceite y la quinua, por lo tanto hubo presencia de flavonoides. En el ensayo de Dragendorff se presentó presencia de alcaloides 1, en aceite y chocolate con turbidez definida (++), y opalescencia en la quinua (+). Mientras que para el ensayo de Mayer, se presenció alcaloides 2, en aceite y quinua se presenció turbidez definida (++), mientras que en el chocolate aparecieron precipitados copos.

Recomendaciones

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

controlar adecuadamente los tiempos y medidas.



tomar las medidas adecuadas al momento de manejar los ácidos.



rotular y utilizar una gradilla.



Tomar bien la diferencia de colores en los compuestos.

Anexos

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