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Guía de Prácticas de Bioquímica

 A. PREPARAR UNA SOLUCIÓN AMORTIGUADORA DE BUFFER FOSFATO *

Preparar 100 ml de una solución buffer fosfato 0.2 M de pH 7,0,usando las sales de fosfato monobásico y dibásico. Cálculos:

Datos.A.- NaH2PO4.2HOH - M = 156,01 g/mol B.- Na2HPO4.7HOH - M = 268,07 g/mol Molaridad del Buffer = 0,2 M aportado por NaH2PO4.2HOH (sal monobásica) y Na2HPO4.7HOH (sal bibásica). Donde:

A + B = 0,2 A = 0,2 - B B = 0,2 - A

Por lo que, ¿Cuál será el valor de A ó B? - Se recurre a la relación B/A. pH = pKa + log B/A 7,00 = 7,21 + log B/A 7,0 - 7,21 = log B/A -0,21 = log B/A Aplicando antilog, se tiene: Por lo tanto:

0,62 B

= B/A = 0,62A

B

= 0,2 - A

Reemplazando en :

0,62 A = 0,2 - A 0,62 A + A = 0,2 1,62 A = 0,2 A = 0,123 M B = 0,2 - 0,123 B = 0,077 M ¿Cuánto de Acido debemos de pesar y Cuánto de base, si queremos preparar 100 ml de cada una de estas soluciones? Sí: 156,01 g ------- 1000 ml ------- 1,000 M X g ------- 1000 ml ------- 0,123 M X = 19,19 g/1000 ml

Lic. BRENDA ROMERO CHUQUIYAURI

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19,19 g ------- 1000 ml ------- 0,123 M X g ------- 100 ml ------- 0,123 M X = 1,919 g NaH2PO4.2HOH 268,07 g ------- 1000 ml ------- 1,000 M X g ------- 1000 ml ------- 0,077 M X = 20.64 g/1000 ml 20,64 g -------- 1000 ml ------- 0,077 M X g -------- 100 ml ------- 0,077 M X = 2,064 g Na2HPO4.7.HOH Pesar ambas sustancias por separado y disolver con agua bidestilada, llevando a enrase en fiolas de 100 ml.

Lic. BRENDA ROMERO CHUQUIYAURI

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