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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE MEDICINA INFORME PRÁCTICA DE LABORATORIO UNIDAD N°:

1

NOMBRE DE LA UNIDAD:

BIOQUÍMICA Y MEDICINA

NÚMERO DE HORAS POR UNIDAD: 18 Horas (6 horas Teoría, 12 horas Práctica) RESULTADOS DE APRENDIZAJE DE LA UNIDAD: Aplica desde el punto de vista teórico científico, las bases moleculares, celulares, los procesos bioquímicos y fisiológicos del cuerpo humano.

CARRERA

Medicina

ASIGNATURA CURSO

Bioquímica I PRIMERO B

PRÁCTICA DE LABORATORIO No:

2

TEMA

EXTRACCIÓN Y MANEJO DE MUESTRA SANGUÍNEA

HORARIO Martes 07H00 a 10H00 FECHA REALIZACIÓN PRÁCTICA:

DE

LA Martes 14 de noviembre 2017 grupo 4

FECHA DE ENTREGA DEL INFORME Martes 21 de noviembre 2017 grupo 4 DE LA PRÁCTICA:

DOCENTE

DRA. MARÍA ANGÉLICA BARBA MAGGI, M Sc.

-1-

ESTUDIANTES APELLIDOS Y NOMBRES CÉDULA COMPLETOS ESTUDIANTE Barragán Campos Jessyca Viviana

0604374231

Campoverde Semiterra Anthony David

1400781587

Salas Ochoa Erik Shoel

1400749048

Sánchez Merino Vanessa Gabriela

1850224252

Vinueza Loaiza Talisheva Margarita

0604329078

OBSERVACIONES

CALIFICACIÓN

-2-

FIRMA

1. TEMA: EXTRACCIÓN Y MANEJO DE MUESTRA SANGUÍNEA 2. OBJETIVOS 2.1

OBJETIVO GENERAL:

Describir y aplicar desde el punto de vista teórico práctico las generalidades de la Bioquímica Práctica para la extracción y manejo de muestra sanguínea y sus derivados. 2.2

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

2.2.1 Extraer Muestra Sanguínea, obtener suero y plasma, aplicando normas de bioseguridad 2.2.2 Determinar el tiempo de coagulación sanguínea y establecer su importancia biomédico. 3. MATERIALES / REACTIVOS /SOLUCIONES (INSUMOS) MATERIAL Y EQUIPOS POR RETIRAR EN LABORATORIO  1 gradilla  1 vaso de precipitación  5 tubos de ensayo pequeños 

5 tubos de ensayo grandes

 1 pipeta de vidrio de 5 ml  1 pera de succión  1 cronómetro  Centrífuga  1 pipeta semiautomática de 100 a 1000 ul

MATERIAL QUE TRAER EN EL GRUPO QUE NO SE RETIRA EN LABORATORIO GRUPALES: 

2 franelas de 40 cm cada una



1 frasco de cloro



1 frasco de agua destilada de 500 ml



1 frasco estéril para torundas de algodón



Torundas de algodón



1 frasco de alcohol

-3-



10 gasas estériles



1 frasco de jabón líquido



1 dermográfico (o marcador de material de vidrio)



2 cepillos para lavar tubos de ensayo pequeños (de 5 ml y grandes de 10 ml)



1 par de guantes de uso doméstico



1 frasco con detergente (para lavado de materiales)



1 frasco grande para cortopunzantes con etiqueta (recipiente vacío de los desinfectantes que reutilice en casa con tapa, grande de plástico grueso) ROTULAR CON EL CURSO Y EL NUMERO DE GRUPO



4 recipientes de plástico de 100 ml de capacidad con tapas



100 puntas azules



100 puntas amarillas



Tiras multipeg



1 lavacara pequeña

INDIVIDUALES: 

2 tubos al vacío de tapa roja (sin anticoagulante)



2 tubos al vacío con anticoagulante (tapa lila o celeste)



2 jeringuillas descartables de 10 ml y 2 de 5 ml



2 agujas vacuntainer tapa verde



2 lancetas



2 venditas o curitas



1 torniquete



1 cápsula



1 mascarilla



1 par de guantes de manejo de látex



1 cobertor de cabello (gorra para laboratorio)



1 mascarilla



1 par de gafas para laboratorio



1 mandil con el nombre del estudiante y sello de la universidad - Carrera de Medicina



1 toalla de mano para uso personal

-4-

4. GRÁFICO

FOTOGRAFÍA N° 1 MATERIALES DE LABORATOTIO (Gradilla, vaso de precipitación, tubos de ensayo pequeños, tubos de ensayo grandes, pipeta de vidrio de 5 ml, entre otros)

Elaborado por: Vanessa Sánchez

FOTOGRAFÍA N° 2 MATERIALES GRUPALES

franelas de 40 cm cada una, frasco de cloro, frasco de agua destilada de 500 ml, frasco estéril para torundas de algodón, Torundas de algodón, frasco de alcohol, gasas estériles, frasco de jabón líquido, dermográfico (o marcador de material de vidrio, cepillos para lavar tubos de ensayo pequeños (de 5 ml y grandes de 10 ml), entre otros)

Elaborado por: Erik Salas y Anthony Campoverde

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FOTOGRAFÍA N° 3 MATERIALES INDIVIDUALES (tubos al vacío de tapa roja (sin anticoagulante), tubos al vacío con anticoagulante (tapa lila o celeste), jeringuillas descartables de 10 ml y 2 de 5 ml, agujas vacuntainer tapa verde, lancetas, 2 venditas o curitas, torniquete, cápsula, mascarilla, par de guantes de manejo de látex entre otros)

Elaborado por: Talisheva Vinueza

FOTOGRAFÍA N° 4 EQUIPO DE LABORATORIO (Centrifuga)

Elaborado por: Jessyca Barragán

-6-

5. FUNDAMENTO TEÓRICO

I.

LA SANGRE

La sangre es un tejido líquido que recorre el organismo, a través de los vasos sanguíneos que transporta las células necesarias para llevar a cabo las funciones vitales como respirar, formar sustancias y defenderse de agresiones. La cantidad de sangre de una persona está en relación con su edad, peso, sexo y altura. Una persona adulta tiene entre 4,5 y 6 litros de sangre, es decir, un 7% de su peso corporal. La sangre transporta los principios nutritivos desde el aparato digestivo hasta las células, donde se recogen también las sustancias de desecho para eliminarlas gracias a los riñones, el hígado y otros órganos de excreción. También es la encargada de regular el transporte de oxígeno y la eliminación del anhídrido carbónico. Tiene un papel importante en funciones como la coagulación, la inmunidad y el control de la temperatura corporal.

II.

COMPONENTES DE LA SANGRE A) Los glóbulos rojos, también denominados hematíes o eritrocitos, son las células sanguíneas más numerosas, cuyo característico color rojo se debe a una proteína que se encuentra en su interior llamada hemoglobina, responsable de ligar el oxígeno para transportarlo desde los pulmones a todos los tejidos del organismo para que las células respiren y eliminar el dióxido de carbono que se produce por la actividad celular. Los glóbulos rojos se forman en la médula ósea, que se localiza dentro de los huesos del esqueleto, desde donde son liberados al torrente sanguíneo. Su déficit (anemia) provoca una carencia de oxígeno en los órganos vitales de los enfermos. En este caso deben administrarse concentrados de hematíes. B) Los glóbulos blancos, o leucocitos, se encargan de proteger al organismo contra el ataque de bacterias, virus, hongos y parásitos. Cuando hay una infección aumentan su número para mejorar las defensas. Unos se forman en la médula ósea y otros en el sistema linfático (bazo, ganglios, etc.). Los glóbulos blancos están constantemente atentos a cualquier signo de enfermedad. Cuando aparecen los gérmenes utilizan diferentes maneras para atacarlos; por ejemplo, produciendo anticuerpos protectores que inutilizan a los gérmenes; o rodeando y devorando a la bacteria invasora.

-7-

C) Las plaquetas, o trombocitos, son las células sanguíneas más pequeñas. Intervienen en la coagulación de la sangre impidiendo las pequeñas hemorragias que se producen habitualmente en las arterias, venas y capilares; además de producir diversas sustancias que ayudan a la cicatrización de las heridas. Se producen en la médula ósea y viven entre 6 y 7 días. Su déficit (trombopenia), que es frecuente en enfermedades como la leucemia, o tras algunos tratamientos del cáncer, provoca la aparición de hemorragias graves. El tratamiento prioritario en estos casos es la transfusión de concentrados de plaquetas.

D) El plasma es la parte líquida de la sangre. Compuesto fundamentalmente de agua y proteínas, interviene en múltiples procesos metabólicos básicos para el organismo como la coagulación de la sangre, la inmunidad y el transporte de varias sustancias y medicamentos. Entre las sustancias más importantes que transporta el plasma se encuentran las siguientes: 

La Albúmina: Es una proteína que ayuda a mantener el agua del plasma en una proporción equilibrada.



Las Globulinas: Son los anticuerpos encargados de la defensa de nuestro organismo frente a las infecciones. Su disminución ocasionará una baja de defensas.



Factores de Coagulación: Son imprescindibles para evitar las hemorragias. La ausencia de algún factor de coagulación puede ocasionar trastornos hemorrágicos ya que se dificulta la formación del coágulo.



Otras proteínas transportan sustancias necesarias para el normal funcionamiento de las células (grasas, azúcares, minerales).

El plasma se utiliza para elaborar concentrados específicos de proteínas, que constituyen el tratamiento de varias enfermedades como la hemofilia y otros defectos de la coagulación, inmunodeficiencias con riesgo de padecer múltiples infecciones graves, la trombosis y otras.

III.

MUESTRAS DE SANGRE: SITIOS DE PUNCION

Es el fluido más utilizado. Las venopunciones se deben estandarizar en términos de la hora de recolección. Se debe definir muy bien el protocolo de preparación de muestras, el tiempo de aplicación del torniquete, la postura durante la toma de sangre, la temperatura, de transporte y

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el almacenamiento. Los datos obtenidos de sangre venosa no pueden compararse con los obtenidos de sangre de capilares. Los valores hematológicos también dependen de la edad, sexo, hábito de fumar, hora de día, posición erecta o supina del paciente durante la toma, duración de las estasis venosas producida por el torniquete y la administración de líquidos y drogas. Los 3 métodos más importantes para obtenerlo son:

1) Punción venosa

2) Punción capilar

3) Punción arterial.

La sangre oxigenada por el pulmón es bombeada por el corazón hacia todos los órganos y tejidos para cubrir las necesidades metabólicas. Esta sangre arterial tiene prácticamente una composición uniforme en todo el cuerpo. La venosa varía según la actividad metabólica del órgano o tejido por lo que el punto donde se extrae la muestra puede influir en la composición de la sangre venosa. Esta tiene menos Oxigeno que la arterial también se diferencia por el pH, por su concentración en Dióxido de Carbono y su hematocrito. La sangre obtenida por punción de la piel, que a veces se denomina sangre capilar incorrectamente, es una mezcla de sangre procedente de arteriolas, vénulas y capilares por lo tanto es en parte arterial, y en parte venosa. El aumento de presión en las arteriolas hace que la muestra sea más rica en sangre arterial, pero contiene también líquido intersticial e intracelular.

IV.

PUNCIÓN CUTÁNEA PARA SANGRE CAPILAR

Una vez realizada la toma, se retira la aguja y la sangre de la jeringa se transfiere, con una presión suave sobre el émbolo, a los tubos adecuados. Los que contengan anticoagulantes deben taparse y mezclarse por inversión. El sistema de recogida de muestras de sangre con tubos de vacío., permite obtener sangre en diversas condiciones de recogida, usando la misma aguja y con un mínimo de molestias. La aguja se enrosca en el dispositivo de sujeción y se inserta en la vena. Se presiona el tubo sobre el extremo de la aguja situado dentro del dispositivo de sujeción, hasta pinchar el tapón y liberar el vacío. Cuando la sangre comienza a fluir al tubo, se suelta el torniquete sin mover la aguja y el tubo se llena hasta que se agota el vacío. En este momento se saca el tubo del dispositivo

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de sujeción y se coloca otro. De esta manera pueden utilizarse los tubos que sean necesarios. Las agujas llevan en la parte interior del dispositivo de sujeción una camisa de goma que se cierra

V.

ANTICOAGULANTES Y PRESERVANTES

El anticoagulante debe elegirse de acuerdo con las determinaciones que se vayan a realizar, asegurándose de que su presencia no afecte a la medida. Así, por ejemplo, si se quieren medir los iones sodio o potasio, no puede utilizarse como anticoagulante ninguna sustancia que contenga estos iones.

a) La heparina es el anticoagulante que menos interfiere en la mayoría de las determinaciones de sustancias químicas. Se trata de un polisacárido presente en la mayoría de los tejidos, en concentraciones menores a las necesarias, para evitar la coagulación de la sangre. La heparina se presenta como sal sódica, potásica, de amonio o de litio, y la dosis a utilizar es de unas 20 U/ml de sangre extraída. La heparina puede usarse como solución o secarse sobre las paredes de los tubos donde se recoge la sangre. Parece ser que actúa como anticoagulante evitando la transformación de protrombina en trombina y, por tanto, evitando la formación de fibrina a partir del fibrinógeno.

b) El oxalato actúa como anticoagulante por la formación de complejos con el calcio, ion que es fundamental en el mecanismo de coagulación. La sal más utilizada es el oxalato potásico, en una concentración de alrededor de 2 mg/ml de sangre. Como en el caso de la heparina, puede utilizarse como solución o secarse sobre las paredes de los tubos de recogida. Las sales de oxalato se utilizan como anticoagulantes en las determinaciones hematológicas de recuentos celulares y hematócrito.

c) El citrato es otro anticoagulante que actúa por formación de complejos con el calcio. Alrededor de 30 mg/ml de sangre es la concentración que suele utilizarse. El citrato sódico se emplea para las medidas de velocidad de sedimentación y estudios de coagulación.

- 10 -

d) El EDTA (etilendiaminotetracetato) sódico o potásico se utiliza en concentraciones de 1a 2 mg/ml de sangre para los recuentos hematológicos. Su acción anticoagulante se debe también a la formación de quelatos con el calcio.

e) Fluoruro es un preservador que inhibe un gran número de enzimas, por lo que impide el metabolismo de diversas sustancias sanguíneas. Resulta especialmente útil para las determinaciones de glucosa cuando entre la toma y la centrifugación de la sangre haya de transcurrir más de una hora.

VI.

TUBOS DE RECOLECCIÓN DE SANGRE

6. DISEÑO EXPERIMENTAL 6.1

OBTENCIÓN DE SANGRE VENOSA Y SU FRACCIONAMIENTO EN SUERO Y PLASMA

A)

TÉCNICA PARA LA OBTENCIÓN DE SANGRE VENOSA



Rotule previamente los tubos donde va a recolectar las muestras.



Elija la vena de buen calibre, mire y verifique al tacto. De preferencia se utilizan las venas del pliegue del codo y en especial la mediana cefálica en los adultos. En los niños en el dorso del pie o de la mano.



Desinfecte la zona con torunda algodón – alcohol yodado para lo cual se emplean dos métodos el circular y el perpendicular.



Aplique un torniquete con nudo a una distancia de 10 a 15 cm del sitio de extracción. Concomitada mente se pide que el paciente realice puño.

- 11 -



Verificando el funcionamiento adecuado de la jeringuilla tome la misma con los dedos índice y pulgar descansando el dedo medio en el antebrazo del paciente, formando un ángulo de 45 grados con la horizontal.



Retire el protector de la aguja.



Atraviese firmemente la piel e introduzca la aguja una distancia aproximada de 1 a 1,5 cm con el bisel hacia arriba dentro del lumen de la vena. En este instante fluye espontáneamente la sangre.



Ayúdese con el émbolo para extraer la cantidad deseada de sangre; retire el torniquete y pida que abra el puño.



Coloque una torunda de algodón – alcohol en el sitio de la extracción y retire lentamente la jeringuilla. Realice una ligera presión para favorecer la hemostasia.



Retire la aguja de la jeringuilla.



En el tubo de recolección de la muestra, forma un ángulo de 30 grados con la jeringuilla, deslice lentamente la sangre por las paredes laterales del tubo con una presión constante para evitar hemólisis.



Obtenida la muestra se procede a realizar las diferentes determinaciones.

B)

CONTROL DE TIEMPO DE COAGULACIÓN: Una vez obtenida la muestra de sangre en el tubo de tapa roja desde su recolección completa marque el cronómetro, observe hasta la completa coagulación y registre el tiempo exacto de cada muestra.

C)

OBTENCIÓN DE SUERO: Una vez obtenida la muestra de sangre, siga los siguientes pasos: 

Formado el coágulo en los tubos de tapa roja, se somete a centrifugación por un lapso de 5 minutos a 3000 r.p.m. (revoluciones por minuto)



Retirar el líquido sobrenadante por medio de una pipeta manual o semi –automática para no contaminar la muestra. A otro tubo de ensayo el cual debe tener rotulación.



D)

Establecer características organolépticas factibles en el suero.

OBTENCIÓN DE PLASMA: La muestra debe ser obtenida con anticoagulante. 

Obtener una muestra de sangre en un tubo que contenga anticoagulante, debidamente etiquetado.

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

Mezclar uniformemente por medio de inversión del tubo en forma lenta, nunca agitando bruscamente el tubo con la muestra.



Dejar en reposo por pocos minutos.



Llevar el tubo a la centrifuga 5 minutos a 3000 r.p.m.



Retirar el líquido sobrenadante por medio de una pipeta manual o semi –automática para no contaminar la muestra. A otro tubo de ensayo el cual debe tener rotulación.



Establecer características organolépticas factibles en el plasma.

7. REGISTRO DE DATOS DE LA PRÁCTICA 

(Ver en Anexos)

8. CUESTIONARIO 1. ¿Qué factores y condiciones influyen en la toma de una muestra sanguínea? Para la obtención de una muestra sanguínea influyen factores fisiológicos, técnicos o de procedimiento, como: -

La situación dietética del paciente al igual que si se encuentra en ayunas es importante para ciertas pruebas.

-

La ingestión de alcohol y el fumar induce cambios en la composición de los lípidos corporales

-

Si el paciente está consciente o inconsciente

-

La postura durante la toma de sangre, es decir, si su posición es de cubito prono o se encuentra sentado

-

El tiempo de aplicación del torniquete

-

El almacenamiento de la muestra sanguínea con el cuidado y la temperatura correspondiente.

-

Edad

-

Sexo

-

Etnicidad

-

Embarazo

-

Ciclo Menstrual

-

Ejercicio

- 13 -

-

Fármacos

-

Condiciones psicológicas

2. ¿Qué condiciones para almacenamiento y transporte debe tener una muestra de sangre total, suero, plasma? Se recomienda verificar que los elementos a utilizar en la extracción de sangre se encuentren en buenas condiciones como: 

Fecha de caducidad de jeringas, tubos al vacío y con anticoagulante.



Empaques estrictamente sellados, en caso de jeringas observar que el émbolo no haya sido manipulado.



Limpieza y esterilización de otros materiales del laboratorio.

Una vez verificadas las condiciones de los materiales serán utilizadas adecuadamente para la extracción sanguínea. Al momento del almacenamiento se encontrarán debidamente cerradas y en los tubos adecuados, es decir si es para sangre total y suero se colocará en tubos que generalmente vienen con tapa de color rojo, mientras que para el plasma se colocará en tubos con anticoagulante. El volumen recomendable en cada caso es de 5ml y en caso de no ser utilizada al instante se almacenará en una heladera a 4 °C hasta el momento de envío al laboratorio. Cuando se envasa sangre o suero no debe quedar un espacio vacío en el recipiente o jeringa para evitar las pérdidas de la muestra. Por otro lado, los recipientes utilizados para colocar sangre entera, plasma o suero no deben enjuagarse nunca con alcohol ni con ningún otro solvente orgánico. TRANSPORTE Es importante tener rotulados correctamente todos los materiales donde se haya recogido la muestra, en este caso sanguínea, para que el momento de entrar a equipos de laboratorio como la centrífuga no se confunda la pertenencia. Estas muestras deberán acondicionarse de buena manera para evitar vuelcos, derrames, roturas de los recipientes, entre otros, por ello también se recomienda utilizar la indumentaria respectiva para una bioseguridad.

- 14 -

QUIMICA CLINICA DETERMINACION

ESTABILIDAD REFRIGERADO A 4ºC

ESTABILIDAD FRIZADO A -18ºC

TIPO DE MUESTRA

Ácido Úrico

1 semana

6 semanas

suero

Albúmina

1 mes

6 meses

suero

1 semana

6 meses

suero

Bilirrubina directa)

(Total

y

CPK

1 semana

Calcio

1 día

1 año

suero o plasma heparinizado

Cloro

4 semanas

1 año

suero o plasma heparinizado

Colesterol (Total) Creatinina

Hacer en el día 1 semana

Eritropoyetina Fosfatasa ácida Fosfatasa alcalina

suero

2 meses 2 días

suero suero suero o plasma con EDTA

1 mes Estable 4 horas. a temperatura ambiente

suero suero o plasma heparinizado

Procesar lo antes posible

suero o plasma (urgencia)

Glucemia Hemoglobina glicosilada

5 días

sangre total anticoagulada con EDTA

Hierro sérico

1 semana

suero o plasma heparinizado

Ionograma plasmático Triglicéridos

1 día

Procesar antes de las 8 horas de tomada la muestra

suero o plasma heparinizado

Urea

1 semana

suero o plasma heparinizado

1 año

6 meses

suero o plasma heparinizado

COAGULACION El Tiempo de Protrombina (TP) y el Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada (APTT) requieren sangre entera anticoagulada con citrato (1 parte de anticoag. Y 9 partes de sangre), se centrifugan rápidamente 10 a 15 min. a 3500 rpm y se deben procesar antes de las 2 hs. (lo ideal es separar el plasma del paquete globular y procesar dentro de las 4 hs.) Las determinaciones de Anticoagulante Lúpico (tambien llamada Inhibidor Lúpico), Proteína C, Proteína S, Antitrombina III y Resistencia a la proteína C Activada (RPCA) requieren las mismas muestras que las utilizadas en las pruebas de rutina (TP y APTT), solo que aquí debemos hacer una segunda centrifugación para obtener un plasma pobre en plaquetas. Una vez separado el plasma podemos guardar las muestras congeladas a -20 ºC por un mes. La determinación de Fibrinógeno y Dímero D requieren sangre entera anticoagulada con citrato (1 parte de anticoag. Y 9 partes de sangre), se centrifugan rápidamente 10 a 15 min. a 3500 rpm y se deben procesar antes de las 2 hs. (lo ideal es separar el plasma del paquete globular y procesar dentro de las 4 hs.). El plasma separado puede guardarse a -20ºC una semana para el Fibrinogeno y un mes para el Dímero D.

Elaborado por: Grupo numero 4 Bioquímica.

- 15 -

3. ¿Qué importancia biomédica, tiene la determinación del tiempo de coagulación? La capacidad de coagulación de la sangre requiere de la participación de las plaquetas (trombocitos) y de unas proteínas denominadas "factores de coagulación". Cuando se rompe un vaso sanguíneo, las plaquetas son las primeras en llegar al área de la lesión para sellar el escape de sangre y detener o reducir temporalmente el sangrado. Pero, para que el coágulo se vuelva resistente, duro y estable, también deberán intervenir los factores de coagulación. Las pruebas que determinan el tiempo de coagulación son conocidas como TTP (tiempo de tromboplastina parcial), esta evalúa la actividad de 5 factores coagulantes (I, II, V, VII y X), este tiempo se alarga cuando alguno de estos factores no es detectado o son defectuosos. Por otro lado, cuando el tiempo de coagulación es irregularmente largo se puede indicar lo siguiente: 

una deficiencia de base hereditaria en los factores de coagulación (lo que ocurre en trastornos hemorrágicos como la hemofilia y la enfermedad de van Willebrand)



una enfermedad hepática (puesto que la mayoría de los factores de coagulación se fabrican en el hígado)



una deficiencia en vitamina K (debido a que la vitamina K es un componente esencial de varios factores de coagulación)

En conclusión, el tiempo de coagulación es importante para determinar tanto el estado bueno o malo del paciente o la persona sometida a un examen de extracción sanguínea. 4. ¿Qué tipo de agujas (calibre) se debe utilizar para el muestreo de sangre y de qué depende su selección? La razón del empleo de las agujas se fundamenta en la necesidad de atravesar la piel hasta la profundidad de la vena. Las agujas vienen en presentaciones de diferentes diámetros, los cuales se representan con números.

El diámetro de la aguja está indicado por el calibre de la aguja. Cada calibre tiene una serie de diferentes longitudes para el uso que ameriten. Hay una serie de sistemas para medir el calibre de las agujas. Las agujas más comúnmente usadas en el campo médico van en escala desde la número 7 y la más ancha, hasta la número 33, la más pequeña: el calibre mayor es reservado para las agujas de menor diámetro. Las agujas de calibre 21 son las que más se usan para la

- 16 -

venopunción, mientras que las de calibre 16 son agujas comúnmente utilizadas para la donación de sangre, ya que son lo suficientemente gruesas como para permitir que los glóbulos rojos pasen a través de la aguja sin que se rompan; además, el calibre más grueso permite que más sangre se recoja o entregue en un período más corto. Aunque las agujas reutilizables tienen aplicación en situaciones de investigación científica, las agujas desechables son mucho más comunes en el uso de la Medicina con la finalidad de evitar la transmisión de enfermedades.

El calibre de la aguja también depende de lo espeso que pueda ser el medicamento administrado si el medicamento es espeso, una aguja con un calibre pequeño y gran diámetro sería la aguja a elegir. Los medicamentos intramusculares se administran con agujas largas, mientras que los medicamentos subcutáneos se administran con agujas más cortas.

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5. En un mapa conceptual indique la composición y funciones de la sangre.

LA SANGRE COMPOSICIÓN

FUNCIONES

Plasma: El plasma es una sustancia compleja, su componente principal es el agua. También contiene proteínas plasmáticas, sustancias inorgánicas azúcares, hormonas, enzimas, lípidos, aminoácidos y productos de degradación como urea y creatinina. Eritrocitos: O glóbulos rojos de la sangre, son los transportadores primarios del oxígeno de las células y de los tejidos corporales. La hemoglobina, una proteína de las células rojas de la sangre, su función es el transporte de oxígeno desde los pulmones a las células del organismo, donde capta dióxido de carbono que conduce a los pulmones para ser eliminado hacia el exterior. Leucocitos o glóbulos blancos: son células polimorfonucleares que tienen un aspecto granular, de ahí su nombre común. Linfocitos: O glóbulos blancos de la sangre, se generan en la médula. Estas células son las principales responsables del control de las infecciones, ya que atacan de manera directa a los antígenos, o sustancias extrañas al organismo. Plaquetas: Los trombocitos, o plaquetas, son los componentes celulares más pequeños de la sangre. Los trombocitos o plaquetas se adhieren a la superficie interna de la pared de los vasos sanguíneos en el lugar de la lesión y ocluyen el defecto de la pared vascular.

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Respiración, nutrición, excreción, mantenimiento del equilibrio ácido–base, regulación de la temperatura, mecanismos de defensa del organismo, participa en el transporte de los metabolitos. El quimismo sanguíneo no solo varía en estados patológicos, sino que también en condiciones fisiológicas por ello es importante conocer: Estado de actividad o reposo, dieta, estado emotivo, edad entre otros.

6. Establezca la diferencia entre suero, plasma y sangre total.

Suero: El suero es la parte líquida de la sangre después de la coagulación. Contienen 6-8% de las proteínas que forman la sangre. Están más o menos, igualmente divididas entre la albúmina y las globulinas de suero. Cuando la sangre es extraída y dejada a coagular, el coágulo se reduce después de algún tiempo. El suero es la parte de la sangre que queda una vez que se han eliminado los factores de coagulación como fibrina. Plasma: El plasma es un líquido amarillento y claro que es parte de la sangre. También se encuentra en las linfas o en fluidos intramusculares. Esta es la parte de la sangre que contiene fibrina y otros factores de coagulación. El plasma hace el 55% del volumen total de sangre. El principal componente del plasma sanguíneo es el agua. El plasma es la parte de la sangre que contiene ambas, el suero y los factores de coagulación Sangre total: Se conoce por sangre total aquella que no ha sido separada en sus diferentes componentes. Una unidad tiene un volumen de 450 a 500 mL y es recolectada en una solución con anticoagulante y conservante que permite la supervivencia de sus elementos.

7. En la bibliografía referida en el aula virtual, se solicita revisar los videos 1, 2 y 3 y se establezcan aspectos correctos e incorrectamente realizados en el proceso de extracción de muestra sanguínea.

Aspectos correctos

-

La bandeja debe estar completa y

Aspectos incorrectos

-

en orden -

Identificar al paciente y el tipo de

identificación al final -

examen a realizarse -

-

Uso de torniquete más de dos minutos

Verificar que la ajuga esté bien

-

Punción demasiada profunda

sujeta a la jeringa

-

Extracción de muestra insuficiente

Tensar la piel antes de realizar la punción

-

Rotular el tubo al vacío con la

Llenar y tubo hasta la marca indicada.

- 19 -

8. Mediante un video grupal con la participación de los estudiantes de los grupos se demostrará la obtención de sangre y sus derivados, se identificará a la Universidad, la Facultad, la carrera, asignatura e integrantes. Recuerden que para cada video se utilizarán los implementos de protección personal. El video se muestra en el siguiente link: https://youtu.be/4ZsGg8LfMW0 9. Se realizará una lectura del artículo científico, “Guías para la transfusión de sangre y sus componentes”. Se establecerán 4 conclusiones de su importancia en el trabajo de la Bioquímica práctica.

Dirección: http://www.scielosp.org/pdf/rpsp/v13n2-

3/15737.pdf?tag=stupides-21 -

Tener en cuenta que existe un riesgo, tanto legal para el practicante como de la salud para el paciente, al momento de realizar una transfusión sanguínea; se debe adquirir un buen conocimiento en base a las formas de actuar si algo llegase a suceder mal y los parámetros para que sea exitoso el proceso.

-

La transfusión de sangre y sus componentes ha sido un método muy eficiente para mejorar la calidad de vida de las personas que sufren alguna patología, ya que al ser receptoras y compatibles con las mismas aportarán a su organismo ciertos componentes faltantes que alteran al mismo.

-

Al realizar una extracción sanguínea debemos tener en cuenta el estado de salud del paciente, aplicando correctamente el manejo de la aguja al momento de introducirla y retirarla de la zona que hemos extraído la sangre, para evitar posibles infecciones causadas por bacterias que están en nuestro medio.

-

También debemos cuidar los aspectos de salud, revisar que los materiales que utilizaremos para realizar la extracción de sangre estén en buen estado, manteniendo una limpieza adecuada de los mismos.

- 20 -

9. CÁLCULOS Y RESULTADOS MUESTRA Nº

APELLIDOS Y TIEMPO

DE SUERO

NOMBRES

CUAGULACION

DEL

(minutos)

PLASMA

PACIENTE Color: Amarillento Color: Amarillo Erik Salas

4.1

13.30

ESSO

Olor: Látex

Olor: Látex

Aspecto:

Aspecto:

Trasparente

Transparente

APELLIDOS DEL ESTUDIANTE RESPONSABLE DE LA EXTRACCIÓN Y MANEJO DE MUESTRA Y OTROS DERIVADOS: Vanessa Gabriela Sánchez Merino

MUESTRA Nº

APELLIDOS Y TIEMPO

DE SUERO

NOMBRES

CUAGULACION

DEL

(minutos)

PLASMA

PACIENTE

Vanessa Sánchez

4.2

8.23

VGSM

Color: Rojo Turbio

Color:

Rojo

Olor: Inodoro

Turbio

Aspecto:

Olor: Inodoro

Hemolizado

Aspecto: Hemolizado

APELLIDOS DEL ESTUDIANTE RESPONSABLE DE LA EXTRACCIÓN Y MANEJO DE MUESTRA Y OTROS DERIVADOS: Campoverde Semiterra Anthony MUESTRA Nº

APELLIDOS

Y TIEMPO

DE SUERO

NOMBRES

DEL CUAGULACION

PACIENTE

(minutos) Color:

4.3

Jessyca Barragán

7.07

JVBC

- 21 -

PLASMA

Amarillo Color: Amarillo

Transparente

Transparente

Olor: Hierro

Olor: Inodoro

Aspecto:

Aspecto:

Transparente

Transparente

APELLIDOS DEL ESTUDIANTE RESPONSABLE DE LA EXTRACCIÓN Y MANEJO DE MUESTRA Y OTROS DERIVADOS: Vinueza Loaiza Talisheva Margarita

MUESTRA

APELLIDOS

Nº

NOMBRES

DEL CUAGULACION

PACIENTE

(minutos)

4.4

Anthony

ADCS

Campoverde

Y TIEMPO

DE SUERO

11.45

PLASMA

Color:

Amarillo Color: Amarillo

rojizo

rojizo

Olor: Hierro

Olor: Inodoro

Aspecto: Turbio

Aspecto: Turbio

APELLIDOS DEL ESTUDIANTE RESPONSABLE DE LA EXTRACCIÓN Y MANEJO DE MUESTRA Y OTROS DERIVADOS: Salas Ochoa Erick Shoel

MUESTRA Nº

APELLIDOS Y TIEMPO

DE SUERO

NOMBRES

CUAGULACION

DEL

(minutos)

PLASMA

PACIENTE Color: 4.5

Talisheva

TMVL

Vinueza

7.10

Amarillo Color: Amarillo

Transparente

Transparente

Olor: Inodoro

Olor: Inodoro

Aspecto: Turbio

Aspecto: Turbio

APELLIDOS DEL ESTUDIANTE RESPONSABLE DE LA EXTRACCIÓN Y MANEJO DE MUESTRA Y OTROS DERIVADOS: Barragán Campos Jessyca Viviana

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10. OBSERVACIONES En la práctica realizada se pudo observar lo siguiente: -

En la muestra 4.2 realizada por el estudiante Erik Salas, perteneciente a la estudiante Vanessa Sánchez, se presento un inconveniente al momento de realizar la extracción sanguínea debido a que al momento de el cambio de tubo en el vacuntainer se perdió la vía ya que el ejecutante no mantuvo firme su mano, por esta razón la muestra del segundo tubo rojo (sin anticoagulante) fue escasa, además de 10 min de centrifugación se pudo observar que la muestra tenía aspecto muy turbio y de color rojo obscuro por acción de la hemolisis, termino usado para describir la ruptura de hematíes por la liberación de hemoglobina.

-

El hierro es uno de los minerales que se encuentran presente en la hemoglobina, participa en la oxigenación de la sangre, además interviene en la eliminación de dióxido de carbono. En algunas de las muestras obtenidas observamos que estas eran inodoras, la razón primordial por la que no presentan olor es porque la cantidad de sangre que se obtuvo pues fue escasa; pese a la gran cantidad de hierro presente en la misma.

-

En cuanto a la realización de las demás extracciones no se presentaron anomalías, después de la centrifugación de 10 min a 3500rpm se pudo observar que las muestras no presentaban hemolisis por su correcto manejo a la hora de la extracción, se pudo observar que varias muestras tenían un aspecto totalmente claro y de otras un poco turbio en cuanto al plasma. El plasma posee en un 91% agua y el resto se debe a los electrolitos, proteínas, enzimas, aminoácidos, glúcidos, lípidos, hormonas y urea.

11. CONCLUSIONES 1. Para dar cumplimiento al objetivo general se realizó lo siguiente: -

Se realizó una lectura previa a las generalidades de la extracción y manejo de muestra sanguínea, así como la revisión de conceptos básicos como: sangre, los componentes y funciones de la misma, anticoagulantes y manejo correcto de los métodos de extracción sanguínea y sus derivados.

2. Para dar cumplimiento a al primer objetivo específico se realizó lo siguiente: -

Una vez que conocimos las normas de bioseguridad en el laboratorio de bioquímica fue necesario ponerlas en práctica para evitar lesiones.

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-

Al momento de la extracción sanguínea fue preciso seguir todas las indicaciones previas mencionadas por nuestra docente.

-

Es importante tomar en cuenta todos los consejos mencionados ya que de esto depende el resultado de los análisis clínicos; para así evitar falsos resultados o realizar nuevamente la extracción.

-

Luego de la extracción sanguina se procedió a la extracción de suero y plasma, el mismo que se realizó a través de un proceso cuidadoso, es decir tomando en cuenta el tiempo de coagulación.

3. Finalmente, para dar cumplimiento el segundo objetivo específico se realizó lo siguiente: -

Una vez que las muestras sanguíneas se encontraran en los tubos se realizó movimientos leves para mezclar el líquido sanguíneo con los anticoagulantes y así obtener sus derivados (suero y plasma).

-

Posterior a esto se procedió a tomar el tiempo de coagulación el mismo que sirvió para establecer las condiciones de salud en la que se encontraba el paciente. El tiempo de coagulación de las muestras sanguíneas se encontraba en un rango 8 a 13 minutos respectivamente.

1. RECOMENDACIONES

1. Hacer cumplimiento de las normas de bioseguridad antes, durante y después de una práctica o de cualquier proceso en el que exista una proximidad riesgosa. 2. Tomar una posición investigativa y viable para que exista una buena retroalimentación y la recolección de datos sea óptima para el conocimiento estudiantil. 3. Tener en consideración las acciones que se van a realizar y el daño que pueden causar, evitar cualquier contratiempo con una forma de actuar segura y ordenada en todo momento. 4. Estar seguros de que tenemos los materiales a usar al alcance y que estos presenten la debida salubridad y el correcto manejo en todo momento. 5. Preocuparnos por la integridad y salud física de la persona sobre la cual estamos ejerciendo una actividad riesgosa, considerando: el tiempo máximo de aplicación de torniquete, movimientos bruscos que se pueden dar en el momento de tener un objeto punzante en contacto con la persona, manejo correcto de los desechos infecciosos que se hayan utilizado.

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6. Utilizar de forma correcta los materiales y equipos para cualquier proceso, con el fin de que no exista un daño o deterioro acelerado con estos. Un ejemplo es equilibrar el peso en una maquina centrifugadora.

2. BIBLIOGRAFIA 1. Mauricio, S (S.F). SCielo. Guías para la transfusión de sangre y sus componentes. Brasil. 2. Mauricio, M (1995). Ministerio de Salud Presidencia de la Nación. Guía para la obtención, conservación y transporte de muestras para análisis toxicológicos. Argentina. 3. Julieta (2011). La Diferencia Entre Plasma Y Suero. http://www.diferenciaentre.net/la-diferencia-entre-plasma-y-suero/

Obtenido

de

4. Jacobed, R. (2012). Toma de muestra sanguínea. Obtenido de http://laboratorioclinico-612.blogspot.com/2012/06/toma-de-muestra-sanguinea.html 5. Rendón, M. (2012). Punción Venosa. Obtenido marysebastian.blogspot.com/2012/03/puncion-venosa.html

de

http://marisol-

6. Gonzales J. (2010), Técnicas y métodos de laboratorio Clínico, Elsevier. 7. QUINTANAR, García Elisa. El banco de sangre y la medicina transfusional, Editorial Médica Panamericana 8. Salazar, M. (s,f). Guías para la transfusión de sangre y sus componentes. Obtenido de http://moodle.unach.edu.ec/pluginfile.php/131016/mod_resource/content/3/Gu%C3% ADas%20para%20Transfusion%20de%20Sangre%20y%20sus%20componentes.pdf

Video https://youtu.be/4ZsGg8LfMW0

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3. ANEXOS NEXOS

Foto Nº1: Desinfección de la zona de trabajo Elaborado por: Grupo Nº4

Foto Nº2: Selección de materiales a utilizar Elaborado por: Grupo Nº4

Foto Nº3: Aseo correcto de manos Elaborado por: Grupo Nº4

Foto Nº4:Ordenar los materiales para fácil acceso Elaborado por: Grupo Nº4

Foto Nº5: Selección de la vena de buen calibre Elaborado por: Grupo Nº4

Foto Nº6: Aplicación de torniquete y preparación de los materiales a usar Elaborado por: Grupo Nº4

Foto Nº8: Muestras de sangre obtenidas Elaborado por: Grupo Nº4

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Foto Nº8: Maquina de centrifugado Elaborado por: Grupo Nº4

Foto Nº8: Recolección de resultados Elaborado por: Grupo Nº4

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