• Author / Uploaded
• Zuñiga Andres

Citation preview

Practica N° 4 Pruebas cualitativas para carbohidratos

Integrantes: Payares García Camilo Andrés Doria Pedroza Camilo Andrés Correa Londoño Omar Santos Paternina Rafael Iván parra Andrés Felipe manchego

Docente: Pardo Plaza Yury Janio

30-09-2019

Universidad de Córdoba

Montería-Córdoba

OBJETIVOS   

Reconocer la presencia de carbohidratos en una muestra problema mediante la prueba e molish Diferenciar carbohidratos reductores de no reductores por su comportamiento frente al reactivo de Benedict. Realizar ensayos cualitativos para el reconocimiento de carbohidratos específicos .

INTRODUCCION Los carbohidratos son compuestos orgánicos, formados primordialmente por carbono, hidrógeno y oxígeno. Se encuentran en muchos productos naturales y son una de las fuentes principales de energía para los organismos quimio tróficos. La unidad fundamental de los carbohidratos son los monosacáridos, estos son polihidroxialdehídos o polihidroxicetonas. Los monosacáridos se combinan, con la pérdida de moléculas de agua uniéndose mediante enlaces glicosídicos, formándose oligosacáridos y polisacáridos. En presencia de ácidos no oxidantes, los carbohidratos se deshidratan y forman furfural si el monosacárido es una pentosa o hidróximetilfurfural, si el monosacárido es una hexosa. Cuando la reacción de deshidratación se efectúa con la ayuda del ácido sulfúrico concentrado y el color se desarrolla con alfa naftol, la prueba se denomina reacción de Molisch. Otra prueba basada en la formación de furfural es la prueba de Seliwanoff. Esta prueba consiste en la reacción del resorcinol (1,3 dihidróxibenceno) con las cetosas deshidratadas por el HCI concentrado. Se observa la formación de un complejo rojo. La prueba de Bial se utiliza para identificar pentosas y consiste en calentar la pentosa con HCI. se forma furfural que se condensa con orcinol en presencia de iones férricos para dar un color verde azuloso. Para la Prueba para azúcares reductores las propiedades reductoras de los azúcares dependen de la presencia de grupos aldehídos o cetonas, reales o potenciales. Al calentar ciertas soluciones de azúcares, en presencia de determinados iones metálicos, el grupo carbonilo se oxida y el ion metálico se reduce. Algunas de estas pruebas son: La de Benedict, que identifica carbohidratos en general y es positiva cuando se observa la aparición de un precipitado amarillo, anaranjado o rojo ladrillo; y la prueba de Barfoed, que es similar a la de Benedict, excepto que el reactivo es ligeramente ácido o sirve para detectar la presencia de monosacáridos. Los polisacáridos son cadenas muy largas o polímeros de monosacáridos, lineales o ramificados. Se dividen en heteropolisacáridos y homopolisacáridos dependiendo si la forman distintos o iguales unidades simples. Algunos polisacáridos de reserva importante lo son el almidón formado por dos constituyentes: amilosa y amilopectina; y el glucógeno llamado “almidón animal”, se encuentra en el hígado y músculos. En la siguiente practica reconoceremos la presencia de carbohidratos en una muestra problema mediante la prueba de Molish, diferenciaremos carbohidratos de no reductores por su comportamiento frente al reactivo de Benedict. y Realizaremos ensayos cualitativos para el reconocimiento de carbohidratos específicos.

MATERIALES Y REACTIVOS                   

Estufa o calentador Pipetas de 5 y de 10ml Beakers de 100 y 400ml 10 tubos de ensayo Pinza para tubos de ensayo Gradilla Gotero Papel tornasol Soluciones de: glucosa, galactosa, ribosa, arabinosa, sacarosa, lactosa, fructosa, almidón, leche (traer de la casa) Solución de yodo. Reactivo de Molish Ácido sulfúrico concentrado Reactivo de Benedict Reactivo de Barfoed Reactivo de Bial Reactivo de Selliwanoff Alcohol Amilico Ácido clorhídrico concentrado Hidróxido de sodio 1M

PROCEDIMIENTO 1.Prueba de Molish Se tomó un tubo de ensayo y se le agregó un ml de leche y se le agregó 5 gotas de reactivo de Molish y de inmediato se desnaturalizo la leche al mezclar, después se le agregó 1 ml de ácido sulfúrico por las paredes del tubo y se formó un anillo de color morado en la parte inferior del tubo de ensayo, lo que indica que hay presencia de azúcar.

2.prueba de Benedict se tomaron tres tubos de ensayo y al tubo N° 1 se le agregó 0,5 ml de solución de lactosa, al tubo N° 2 se le agregó 0,5 ml de solución de glucosa y al tubo N° 3 se le agregó 0,5 de sacarosa y se procedió a agregarle 0,5 ml de solución de reactivo de benedict y se apreció un cambio de color azul en cada tubo, luego se procedió a calentar en baño de maría por 3 min y se observó una precipitación y cambio de color rojo ladrillo en el tubo N° 1 y 2, indicando presencia de un azúcar reductor, en el tubo N° 3 no presento cambios.

3.prueba de Barfoed Se tomaron 3 tubos de ensayo y al tubo n° 1 se le agregó 0,5 ml de solución de galactosa, al tubo n°2 se le agregó 0,5 ml de solución de ribosa y al tubo N°3 se le agregó 0,5 de solución de almidón y a cada tubo se le adiciono 1 ml de reactivo de Barfoed y para alcalizar se le agregó una gota de hidróxido de sodio y se procedió a calentamiento por 2 min luego se dejó reposar y se observó en el tubo N° 1 y 2 hubo precipitación y se tornó de un color rojo ladrillo lo que indica presencia de azúcar reductor y el tubo N°3 no hubo cambios.

4. prueba de Bial En este punto se tomaron 3 tubos de ensayo y al tubo N° se le agregó 0,5 ml de solución de fructosa al tubo N°2 se agregó 0,5 ml de solución de arabinosa y al tubo N°3 se le agregó 0,5 ml de solución de glucosa y a cada tubo se le agregó 0,5 ml de reactivo de Bial y se procedió a calentamiento hasta hervir cada sustancia, dando lugar a un enfriamiento para así agregar ácido sulfúrico, el cual reemplazo el alcohol aluminico para así observar la presencia de pentosa en las sustancias, donde se evidencia un anillo que identifica la presencia de pentosa en gran proporción en la arabinosa, medianamente en fructosa y muy leve en la glucosa, caracterizando así los buenos procesos bioquímicos.

5. prueba de salliwanoff se tomaron 3 tubos de ensayo y el tubo N°1 se le agregó 0,5 de solución de fructosa al N°2 se le agregó 0,5 de solución de arabinosa y el tubo N°3 se le agregó 0,5 de solución de glucosa, a cada tubo se le agregó 10 gotas de reactivo de salliwanoff, y luego se procedió a calentar las muestras por un minuto y se observó que en la glucosa se formó un precipitado y una coloración rojo ladrillo y la fructosa con la arabinosa se tornaron de una coloración rosado esto indica la presencia de cetosas.

6. prueba para sacarosa Se agregó en un tubo de ensayo 2 ml de sacarosa a este se le agregaron 3 gotas de ácido clorhídrico, luego se calentó por 5 min y se dejó reposar, luego se le agregó un ml de hidróxido de sodio y se procedió a dividir en dos tubos de ensayo, a uno se le agrego tres gotas de benedict y al otro tubo se le agrego tres gotas de salliwanoff luego se sometió a calentamiento y hubo un cambio de color el tubo con la solución de benedict, se tornó de un rojo ladrillo y el de salliwanoff también tuvo una coloración roja con esto podemos decir que ambas pruebas fueron positivas.

7.prueba para polisacáridos Se añadió 1 mL de solución de almidón en un tubo de ensayo, luego añadimos 1 gota de solución de yodo y se observó un cambio de coloración azul, luego lo sometimos a calentamiento y observamos una precipitación de color azul, luego dejamos enfriar el tubo y observamos que se tornó completamente una solución de color azul.

CONCLUSIÓN Los carbohidratos al poseer en su estructura aldehídos o cetonas, presentan un comportamiento químico ligado a los grupos funcionales de estos, como por ejemplo la capacidad de oxidarse con agentes oxidantes suaves como el reactivo de Fehling o de Tollens o la capacidad de formar osazonas, además esta clase de reacciones permiten diferenciar monosacáridos de disacáridos como la sacarosa. Los monosacáridos se diferencian de los disacáridos (sacarosa) por su poder reductor, poder que es otorgado por el carbono libre que posee, los monosacáridos a su vez se subdividen en aldosas y cetosas, y en pentosas o hexosas, estos fueron identificados y diferenciados mediante la prueba deTollens, de Seliwanoff y de Bial, en las que se evidencio la velocidad de deshidratación de las aldosas y cetosas, y la formación de furfural ohidroximetil furfural, según provenga una pentosa o hexosa. La sacarosa al hidrolizarse libera a sus monosacáridos constituyentes: la glucosa y la fructosa, debido a esto la sacarosa presento resultados positivos en la prueba para disacáridos y en la prueba de Seliwanoff.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS 2. Explique los resultados de cada una de las pruebas realizadas? R//: La respuesta está en el procedimiento 3. Explique estructuralmente, porque la maltosa es un azúcar reductor y porque el almidón no lo sus observaciones R//: La maltosa es un azúcar reductor ya que posee un grupo carbonilo intacto, y que a través del mismo pueden reaccionar con otras especies. El almidón es un polisacárido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la amilopectina. Y los polisacáridos no son reductores 4. Consulte las enfermedades producidas por el mal metabolismo de los carbohidratos R//: Diabetes: Tema de salud de MedlinePlus Enfermedad de almacenamiento de glucógeno tipo 5 Enfermedad de Von Gierke Enfermedad del almacenamiento de glucógeno tipo V Galactosemia Intolerancia hereditaria a la fructosa Mucolipidosis Mucopolisacáridos Mucopolisacáridos tipo I Mucopolisacáridos tipo II Mucopolisacáridos tipo III Mucopolisacáridos tipo IV Síndrome de Hunter

5. Porque la celulosa a pesar de estar formada por moléculas de glucosa es insoluble en agua R//: Estructura de la celulosa; a la izquierda, β-glucosa; a la derecha, varias βglucosa unidas. La celulosa tiene una estructura lineal o fibrosa, en la que se establecen múltiples puentes de hidrógeno entre los grupos hidroxilo de distintas

cadenas yuxtapuestas de glucosa, haciéndolas impenetrables al agua, lo que hace que sea insoluble en agua, y originando fibras compactas que constituyen la pared celular de las células vegetales.

6. ¿Porque la sacarosa es un azúcar no reductor? Consulte las posibles estructuras de las muestras problemas R//: No contiene ningún átomo de carbono anomérico libre, puesto que los carbonos anoméricos de sus dos unidades monosacáridos constituyentes se hallan unidos entre sí, covalentemente mediante un enlace O-glucosídico. Por esta razón, la sacarosa no es un azúcar reductor y tampoco posee un extremo reductor.

7. Consulte el fundamento de otras técnicas usadas para la determinación de la glucosa en el laboratorio R//: a) Métodos basados en el poder reductor de los hidratos de carbono (reacción de Benedict t, método de la o-toluidina) b) Métodos enzimáticos: son los más utilizados, utilizan enzimas como reactivos (ej. glucosa oxidasa, hexoquinasa) a fin de aumentar la especificidad. Los dos métodos que vamos a citar se pueden utilizar para determinar la glucosa en muestras de suero, orina y líquido cefalorraquídeo

b.1.) Método de la hexoquinasa: Es el método de referencia y consiste en dos reacciones acopladas. b.2.) Método de la glucosa oxidasa: Al igual que el anterior consiste en dos reacciones acopladas