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PRACTICA DE BIOQUIMICA N# 3

INTEGRANTES: -

PEREZ RAMOS ALVARO POMA HERNANDEZ TATHIANA PURILLA BELLIDO JANNET QUISPE DIAZ FABIOLA SALCEDO MONTES JHETSON TORRES HUAMANI DANTE

ANÁLISIS DE GLUCOSA EN SANGRE, DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA Y HEMATOCRITO 1-2. OBJETIVO GENERAL Determinación del hematocrito, hemoglobina y glucosa en una muestra sanguínea e interpretar sus resultados, ya que se pueden variar diversas enfermedades debido a un valor anormal de estos.

3. OBJETIVOS ESPECÍFICOS a) Conocer Los fundamentos del hematocrito, hemoglobina, sus valores normales, e importancia clínica b) Seleccionar Los pasos correspondientes para obtener los resultados más fidedignos con respecto a los valores normales. c) Analizar En base a los resultados obtenidos los otros valores que se pueden obtener de él. Y los diagnósticos que pueden derivar con respecto a este.

4. MARCO TEÓRICO: HEMATOCRITO El hematocrito es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende del número de glóbulos rojos y de su tamaño. El resultado se expresa en porcentaje. El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguíneo completo (hemograma). Para la realización de esta prueba, con el macrométodo, la sangre se extrae típicamente de una vena, por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano. Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras sólo sienten un pinchazo o sensación de picadura. Posteriormente, puede haber algo de sensación pulsátil.

Un volumen de sangre se deposita en un tubo de Wintrobe, por medio de una pipeta, hasta la marca del 10 y se debe de centrifugar. Al terminar la prueba, deben de quedar separados el plasma de la sangre y las células, depositándose en el fondo y presentando un color rojo intenso. Para la realización del micrométodo, se utilizan unos tubos de un calibre muy delgado, llamados capilares, y pueden ser llenados con la misma sangre venosa o de capilar. Este último es el más usado, por ser más rápido y menos riesgoso al usar sangre capilar. Para su lectura se usa una escala estandarizada. A partir del valor obtenido del hematocrito se puede obtener el valor de la hemoglobina. Se realiza dividiendo entre 3 el valor del hematocrito dándonos así el valor de la hemoglobina. Se define como hematocrito al porcentaje de volumen de la sangre que ocupa los glóbulos rojos. VALORES NORMALES: Hombres: de 40.8 a 50.3 % Mujeres: de 36.1 a 44.3 % ALTERACIONES: Hematocrito aumentado:   

Deshidratación. Hipoxia Eritrocitosis

Hematocrito disminuido:   

Anemia Leucemia Artritis reumatoide

HEMOGLOBINA La hemoglobina es una proteína conjugada que sirve para el transporte de oxígeno y dióxido de carbono. La masa total de eritrocitos de un adulto contiene unos 600gr. De hemoglobina capaces de transportar 800ml de oxígeno. Una molécula de hemoglobina consta de 2 pares de cadenas poli pépticas (unión de aminoácidos) (globina) y 4 grupos proteicos HEM que contienen cada uno un átomo de fe en estado ferroso. Cada punto HEM se localiza en una zona determinada de una de las cadenas de polipéptidos. Localizando cerca la

superficie de la molécula, el HEM se combina de forma reversible con una molécula de oxígeno y dióxido de carbono. Este grupo HEM es el responsable del color rojo de la hemoglobina (hb). La parte proteica o globina tiene 4 cadenas polipeptidicas que se denominan con las letras α, β, γ, δ. Existe una cadena más la ε que está presente durante los 3 primeros meses de vida se diferencian unas de las otras en el numero o posición (de los aminoácidos de los que están compuestas). Por lo tanto existen varios tipos de hb. En el ser humano se pueden encontrar las siguientes hemoglobinas normales: Hemoglobina A: consta de 2 cadenas α y 2 cadenas β en un adulto normal corresponde a más del 95% del total. Hemoglobina A´: consta de 2 cadenas α y 2 cadenas δ en un adulto sano esta en porción menor de 3%. Hemoglobina F (fetal): consta de 2 cadenas α y 2 cadenas γ. Es la hemoglobina principal en el feto desde el 4° mes del embarazo hasta aproximadamente los 6 meses de edad. La Hb F tiene mayor afinidad por el oxígeno. Hemoglobina Gower: consta de 2 cadenas α y 2 cadenas ε. Desaparece casi por completo en el tercer mes de embarazo y empieza a aparecer la Hb fetal. Algunos datos se obtienen examinando a simple vista una muestra de sangre. Un aspecto normal del suero o del plasma revela que el pigmento esta en los glóbulos rojos. Si se agita en una sangre total normal en el aire durante 15 min. Adquiere un color rojo claro por convertir la Hb en oxihemoglobina. La sangre tiene un color rojo cereza brillante cuando el pigmento es carboxihemoglobina en la intoxicación por CO. El color es chocolate en la metahemoglobulemia y la banda malvada en alsulfohemoglobulemia. Las distintas Hb tienen espectros de absorción características a las que determina en un espectrofotómetro. La identificación de diferentes formas de la Hb con la determinación de sus espectros de absorción puede hacerse de una manera sencilla

Valores de referencia: Niños al nacer…………………………….. 13,6 - 19,6 g/dL Niños de 1 año…………………………..... 11,3 - 13,0 g/dL Niños de 10 -12 años……………………... 11,5 - 14,8 g/dL Mujeres……………………………………... 11,5 - 16,5 g/dL Hombres……………………………………. 14,0 - 18,0 g/dL

5. DETERMINACIÓN GLUCOSA EN SANGRE La glucosa es un glúcido o carbohidrato, más precisamente un monosacárido, la estructura más sencilla dentro de los azúcares simples, presente en forma libre en las frutas y la miel. Entre los carbohidratos de absorción rápida, la glucosa es la que se absorbe más rápidamente. La glucosa es una fuente importante de energía para la mayoría de las células del cuerpo, incluidas las del cerebro. Los carbohidratos que se encuentran en las frutas, los cereales, el pan, la pasta y el arroz se transforman rápidamente en glucosa en el cuerpo, lo que eleva el nivel de dicho azúcar en la sangre. Las hormonas producidas en el cuerpo llamadas insulina y glucagón ayudan a controlar los niveles de azúcar en la sangre. Es un examen que mide la cantidad de un azúcar llamado glucosa en una muestra de sangre. La razón fundamental para la determinación de la glicemia es el diagnóstico de una serie de alteraciones metabólicas que comparten el fenotipo de hiperglicemia y se denomina Diabetes mellitus. La otra razón importante para determinar glicemia es el diagnóstico de hipoglicemia, la cual se produce por diversas causas, pero en general si no es bien manejada aumenta las posibilidades de desarrollar Diabetes mellitus. Los criterios para el diagnóstico de diabetes mellitus son:   

Síntomas clásicos de diabetes (poliuria, polidipsia, pérdida de peso) y prueba al azar de glicemia (sin tener en cuenta el momento de la última comida) mayor o igual a 11.1 mmol/L (200 mg/dL). Glucosa plasmática en ayunas (sin comer por 8 horas) mayor o igual a 7 mmoles/L (126 mg/dL). durante una prueba de tolerancia, glucosa a las dos horas mayor o igual a 11.1 mmol/L (200 mg/dL). La positividad de alguno de estos tres criterios debe ser reevaluada mediante exámenes en una segunda oportunidad.

VALORES: VALORES DE REFERENCIALES:    

PREMATUROS: 30mg/dl(1.6 mmol/L) RECIÉN NACIDOS: 40-60mg/dl(2.2 ÷ 3.3 mmol/L) NIÑOS: 60 - 100 mg/dl (3.8 ÷ 6.10 mmol/L) ADULTOS: 70 - 110 mg/dl (3.8 ÷ 6.10 mmol/L)

VALORES NORMALES: Si le hicieron un examen de glucemia en ayunas, un nivel entre 70 y 100 miligramos se considera normal. Si le hicieron un examen de glucemia aleatorio, los resultados normales dependen de cuándo fue la última vez que comió. La mayoría de las veces, los niveles de glucemia estarán por debajo de 125 mg/dL. Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre laboratorios.

6. REACCIONES QUÍMICAS QUE OCURREN EN LA PRÁCTICA En la práctica para conocer la cantidad de hemoglobina, se empleó una solución de ferrocianuro de potasio y cianuro de sodio para combinarse con una muestra de sangre el ferrocianuro convierte el hierro ferroso de la hemoglobina en férrico para formar metahemoglobina, la cual se combina con el cianuro de sodio, para formar cianometahemoglobina: la densidad del color producido es directamente proporcional a la cantidad de hemoglobina presente en la muestra y se registra en el fotocolorímetro o espectrofotómetro. Notamos que al agregar dicha solución la muestra se fue tiñendo de rosado al ser frotada con delicadeza durante unos 5 min. Si bien sabemos el hematocrito es el volumen de eritrocitos expresados como un porcentaje del volumen de sangre total, existente después de centrifugar una muestra de sangre. Se basa en la separación de los glóbulos rojos y el plasma mediante una adecuada duración y velocidad de centrifugación capaz de separar el plasma y sedimentar los hematíes el volumen del plasma que queda entre la masa globular empaquetada.

MATERIALES   

Espectrofotómetro o fotocolorímetro. Material volumétrica adecuada. Tubos de fotocolorímetro o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas. Baño de agua a 37°C Capilares con heparina y sin heparina. Jeringas. Ligadura. Alcohol. Toruntas de algodón. Agua destilada. Plastilina.

       

Reactivos   

Ferrocianuro de potasio. Cianuro de potasio. Bicarbonato de potasio.

Reactivo Biológico 

Sangre venosa.



Sangre capilar.

7. PROCEDIMIENTO a) Preparar los inyectables, torundas, y todo el material necesario para que la extracción de la muestra de sangre sea aséptica.

b) Aplicar un torniquete con la ligadura en el brazo y limpiar con la torunda remojada en alcohol la flexura del codo de donde sacaremos la muestra de alguna de las venas que sea visible, la técnica debe ser de adentro hacia afuera en forma concéntrica.

c) Punzar con la aguja, soltar la ligadura y jalar en embolo hasta que se obtengan aproximadamente 03 ml de sangre para el experimento.

d) Una vez obtenida la muestra retirar cuidadosamente la aguja y colocar algodón sobre el sitio de punción.

e) En un tubo limpio y seco, vaciar el contenido del inyectable (después de haber retirado la aguja). El tubo no debe contener anticoagulante.

f)

Llevar el tubo a la centrifuga por un espacio de 5 minutos a fin de separar el paquete globular del plasma.

g) Con un capilar extraer la sangre restante en la jeringa o en su defecto efectuar una punción en el dedo índice y extraer de allí la muestra. El capilar debe llenarse hasta sus 2/3.

h) Luego debe ser sellado con plastilina en sus extremos a fin de evitar el derrame de la sangre.

i)

Llevarlo a la micro centrifuga por un espacio de 5 minutos.

j)

Con una micropipeta extraer 0.01 ml de plasma y vaciarlo en otro tubo.

k) Con la micropipeta extraer 01 ml de reactivo y vaciarlo en el tubo descrito en el paso anterior. Esperar un espacio de 5 a 7 minutos con la finalidad que ocurra un cambio de color gracias a la reacción de ambos componentes.

l)

Transcurrido el tiempo vaciarlo y colocarlo en el espectrofotómetro (ya prendido hace 15 minutos y calibrado con el blanco de reactivo) para obtener la lectura de la absorbancia y realizar los cálculos correspondientes.

m) El capilar centrifugado después de 5 minutos debe ser medido en la regla que contiene la microcentrífuga o en su defecto con una regla y obtener todos los datos para los cálculos correspondientes.

8. TABLA DE DATOS Y RESULTADOS A. Absorbancia TUBO PROBLEMA 0.275

TUBO ESTANDAR 0.325

B. CAPILAR LLENADO TOTAL 80 ml

PLASMA 38 ml

PAQUETE GLOBULAR 42 ml

9. CÁLCULOS 1) Calcular la concentración de glucosa usando la siguiente fórmula 𝐴𝑏𝑠 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝐴𝑏𝑠 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟 0,275 0,325

x100

x100₌ 84,6

2) Calcular el hematocrito usando la siguiente fórmula 𝐿1 Hto ₌ x100 Hto ₌

𝐿2 38

x100 ₌ 47,5

80

3) Calcular la hemoglobina usando los siguientes métodos 1°MÉTODO 𝐻𝑡𝑜 Hb ₌ Hb ₌

3 47,5 3

₌ 15,8

2°MÉTODO 𝐿1 Hb ₌ Hb ₌

3 38 3

₌ 12,67

Promedio 15,8+12,67 2

₌ 14,23

10 – 11 . ANÁLISIS DE RESULTADOS 1) En la primera ecuación - Valores normales de glucosa en ayunas: 70-100 mg/dL Si se hizo la prueba en ayunas, y se encuentra en este rango, el valor se considera normal. Si se hizo la prueba habiendo consumido alimento, los resultados normales depende de cuándo fue la última vez que comió. La mayoría de las veces, los niveles de glucemia estarán por debajo de 125 mg/dL. 2) En la segunda ecuación Los resultados normales varían, pero en general son los siguientes: 

Hombres: de 40.7 a 50.3%



Mujeres: de 36.1 a 44.3% Los resultados normales para los niños varían, pero en general son:



Recién nacido: 45 a 61%



Lactante: 32 a 42%

Descripción de la ecuación: L1: Concentración globular L2: Plasma + concentración globular 3) En la tercera ecuación Valores normales de Hemoglobina: 12 – 16 g/dl Varones 14 – 18 g/dl Mujeres Existen 2 métodos para hallar la hemoglobina, pero para encontrar un rango aceptable, se debe promediar ambos resultados y así obtener un valor real.

12. APLICACIONES EN SU PROFESIÓN 1. En la medicina de utiliza las medidas de cantidad de hemoglobina y glucosa para evaluar el estado de salud del paciente que tienen síntomas como: 

Un aumento en la frecuencia de la necesidad de orinar



Visión borrosa



Episodios de desmayo



Convulsiones (por primera vez)

 Prueba de diabetes

detección

para

 Sobrepeso (índice de masa corporal, o IMC, de 25 o más alto) y otros factores de riesgo 2. Un conteo sanguíneo completo es un examen de laboratorio que se realiza comúnmente. Se puede emplear para detectar o vigilar muchas afecciones diferentes. Su proveedor de atención médica puede solicitar este examen: 

Como parte de un chequeo de rutina.



Si está presentando síntomas como fatiga, pérdida de peso, fiebre u otras señales de una infección, debilidad, hematomas, sangrado o algún signo de cáncer.



Cuando esté recibiendo tratamientos (medicamentos o radiación) que puedan cambiar los resultados de su conteo sanguíneo.



Para vigilar un problema médico crónico que pueda cambiar los resultados de su conteo sanguíneo, como una nefropatía crónica.

13. CONCLUCIONES:  El valor medido de glucosa en la sangre es de 84.6 mg/dl. por lo tanto se encuentra entre los valores normales ya que en ayunas (sin consumir alimento va de 70 a 100 mg/dl. y dos horas después de comer es menos de 140 mg/dl.  El valor medido de hemoglobina en la sangre es de 14.23 mg/dl. por lo tanto se encuentra entre los la Organización Mundial de la Salud, un nivel de hemoglobina normal para un varón adulto está entre 13,8 y 17,2 g/dL. Un nivel normal para una mujer adulta no embarazada está entre 12,1 y 15,1 g/dL. Un nivel normal para una mujer embarazada está en o por encima de 11,0 g/dL  valores normales ya que Según Los resultados hallados deben acercarse lo más posible a la verdad por ello se recomienda utilizar las 2 fórmulas para hallar cantidad de hemoglobina y sacar un promedio de estos, siendo este el valor que más se aproxime a la realidad.  Es importante conocer los procedimientos de cálculo de hemoglobina y la glucosa ya que estas pruebas son las más comunes en utilizarlas en una atención medica que requiera evaluación del medio interno corporal.

14. RECOMENDACIONES Nuestras recomendaciones se basan en 2 puntos, lo cuales se enfocan en el procedimiento y en el análisis de la cantidad de glucosa y glóbulos rojos:

 Al momento de sacar sangre deber tener todo el equipo de bioseguridad necesario para poder realizar bien el procedimiento, teniendo mucho cuidado al momento de introducir la aguja de la jeringa.  Al momento de sacar las enzimas glucocinasa y peroxidasa se debe sacar la cantidad necesaria manejando bien el instrumento de laboratorio.  Al realizarse el análisis de las muestras no se debe confundir el primer resultado, se debe obtener un resultado promedio.

PREGUNTAS DEL DOCUMENTO DE PRACTICAS 1-¿Por qué se produce mayor concentración de lactato en los musculos, en el cual hace que se produzca dolor en periodo largo de ejercicios? Lejos quedaron los tiempos en los que se pensaba que las agujetas eran por culpa del ácido láctico. No obstante, esta sustancia resultante del metabolismo del azúcar es la responsable en gran parte de que en una sesión de ejercicio empecemos a acumular fatiga y acabemos por retirarnos. El ácido láctico proviene de la descomposición de glucosa cuando no hay presente oxígeno (metabolismo glucolítico), es decir, en un ejercicio anaeróbico como sería el levantar pesas o correr a velocidad elevada, donde hay mucha intensidad y poca duración. En condiciones normales ese ácido láctico y cuando estamos entrenados se reutiliza y no hay mayor problema.

Pero cuando seguimos con intensidad un ejercicio, el ácido láctico comenzará a acumularse al no darle tiempo al organismo a retirarlo. Esto provoca la acidificación de fibras musculares, que tiene dos consecuencias importantes: 



Se inhiben las enzimas encargadas de romper la molécula de glucosa para obtener energía, por lo que se nos corta el grigo energético de esta vía y como sabemos, si no hay energía, no hay movimiento. Se impide que el calcio se una a las fibras musculares y consecuentemente se de la contracción.

Por tanto, cuando hay mucho ácido láctico en el cuerpo, no tenemos ni energía ni capacidad para contraer los músculos, esto no es otra cosa que fatiga y lo mejor que podemos hacer es parar el ejercicio o actividad. 2- Dónde se efectúa la regulación de la glucólisis y cuáles son los que inhiben su mecanismo? La glucólisis se regula enzimáticamente en los tres puntos irreversibles de esta ruta, esto es, en la primera reacción (G → G-6P), por medio de la hexoquinasa; en la tercera reacción (F-6P → F-1,6-BP) por medio de la PFK1 y en el último paso (PEP → Piruvato) por la piruvato quinasa. 

La hexoquinasa es un punto de regulación poco importante, ya que se inhibe cuando hay mucho G-6P en músculo. Es un punto poco importante ya que el G-6P se utiliza para otras vías.



La fosfofructoquinasa-1 es la enzima principal de la regulación de la glucólisis, actúa como una llave de agua, si está activa cataliza muchas reacciones y se obtiene más fructosa-1,6-bisfosfato, lo que permitirá a las enzimas siguientes transformar mucho piruvato. Si está inhibida, se obtienen bajas concentraciones de producto y por lo tanto se obtiene poco piruvato. Esta enzima es controlada por regulación alostérica: por un lado se activa por concentraciones elevadas de ADP y AMP, inhibiéndose en abundancia de ATP y citrato, y por otro se activa en presencia de un regulador generado por la PFK2 que es la fructosa-2,6-bisfosfato (F-2,6BP), que no es un metabolito ni de la glucólisis ni de la gluconeogénesis, sino un regulador de ambas vías que refleja el nivel de glucagón en sangre. La lógica de la inhibición y activación son las siguientes: 

ATP: inhibe esta enzima pues si hay una alta concentración de ATP entonces la célula no necesita generar más.



Citrato: Si la concentración de citrato es alta el Ciclo de Krebs va más despacio de lo que el sustrato (acetil-CoA) llega para degradarse, y la concentración de glucosa será más alta. En el Ciclo de Krebs se produce mucho NADH y FADH2, para que funcionen se han de reoxidar en la cadena de transporte

electrónico creando gradiente de protones, si el gradiente no se gasta los coenzimas no se reoxidan y el Ciclo de Krebs se para. 



AMP, ADP: la alta concentración de estas moléculas implica que hay una carencia de ATP, por lo que es necesario realizar glucólisis, para generar piruvato y energía.

La piruvatoquinasa se regula distintamente según el tejido en el que trabaje, pero en hígado se inhibe en presencia de ATP y Acetil CoenzimaA (Acetil-CoA), y se activa gracias de nuevo ante la F-1,6-BP y la concentración de fosfoenolpiruvato.

3. Realiza el balance de la energía de glucolisis y ¿Cuál es el balance neto en ATP y calorías? Glucosa + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+---> 2 piruvatos + 2 ATP + 2 (NADH + H+) La energía total que se puede obtener de la glucosa por oxidación aeróbica es = 688 kcal/mol. La energía total acumulada en 2 ATP = 2 x 7.3 = 14.6 kcal/mol. Esto es un ~ 2% de rendimiento, si se tiene en cuenta la posibilidad de oxidar completamente la glucosa, es decir que el 98% de la energía potencialmente disponible no es usada por la célula. Los dos NADH + H+ pasan a la cadena de transporte de electrones en ambiente aerobios y pueden dar más ATP, recuperándose el NAD en su forma oxidada. El balance energético es una ecuación equilibrada la cual podemos calcular el rendimiento energético que acompaña a la conversión de 1 mol de glucosa. Para la glucolisis anaeróbica o para la fermentación del ácido láctico podemos escribir las siguientes ecuaciones equilibradas. Glucosa +2ADP+2P 2LACTATO+2ATP+2H2O De igual manera podemos escribir una ecuación equilibrada para la fermentación; Glucosa +2ADP+2P+2H 2etanol+2CO+2ATP+2HO Se produce un cambio neto del estado de oxidación; ni el ADN ni el NADH que participan en las rutas de reacciones, aparecen reacciones globales .durante la glucolisis aerobia, los nucleicos de nicotinamina se aparecen en la ecuación global. Glucosa+2ADP+2P+2H 2etanol+2CO+2CO?2ATP+2HO El NADH genera equivalencias reductora en ninguno de los dos procesos se produce un cambio neto del estado de oxidación ni el ADN ni el NADH que participan en las rutas de reacción globales. Durante la glucolisis aerobia los nucleótidos de nicotinamina se aparecen en la ecuación global. En la cadena

transportadora de electrones cada molécula de NADH y FADH producida en los procesos anteriores se transforma en moléculas de ATP.  Cada molécula de NADH se convierte en 3 de ATP (1 NADH x 3 = 3 ATP)  Cada molécula de FADH en 2 de ATP (1 NADH x 2 = 2 ATP) ahora se ha obtenido  La glucólisis produce 2 moléculas de ATP y 2 de NADH. (2 NADH x 3 = 6 ATP) Total=8 ATP.  La conversión de ácido pirúvico en AcetilCoA en la matriz mitocondrial, da 2 de NADH por cada molécula de glucosa. (2 NADH x 3 ATP= 6 ATP).  En el ciclo de Krebs entran 2 moléculas de acetil-CoA y dan dos de GTP y 6de NADH y 2 de FADH2:2 GTP= 2 ATP 6 NADH X 3 ATP= 18 ATP 2 FADH X 2 ATP= 4 ATP total de moléculas de ATP en ciclo de Krebs: 24 ATP total. La suma de todas las moléculas de ATP, formadas en el mecanismo de oxidación completa de una molécula de glucosa, da un balance de 38moléculas de ATP sintetizadas. El retorno energético tiene lugar en la fase de beneficio, que implica otras cinco reacciones y que comienza con la oxidación y fosforilación de las dos moléculas de GALP producidas en la fase anterior, las que se convierten finalmente en dos moléculas de ácido 1,3-difosfoglicérico, lo que genera dos moléculas de NADH. 4. ¿Qué ruta de la glucolisis se efectúa por la fermentación? La glucolisis es, seguramente, la ruta metabólica más antigua que se conserva, como lo prueba su presencia en todos los seres vivos y la naturaleza química de las reacciones que tienen lugar en ella. Se trata de un conjunto de procesos que hacen posible la degradación oxidativa de la glucosa (y de otros monosacáridos que pueden transformarse en ella) en ausencia de oxígeno. Sin embargo, en estas condiciones la oxidación de los monosacáridos es solo parcial, dando lugar a compuestos orgánicos que no están totalmente oxidados. La producción de energía en la fosforilación ocurre exclusivamente mediante fosforilación a nivel de sustrato, mientras que los electrones y los protones que se arrancan de la glucosa a lo largo del proceso acaban siendo transferidos al NAD+ para dar lugar a NADH+H+. El compuesto final que se obtiene como resultado de la degradación es el piruvato. Fermentaciones Las fermentaciones son, igual que la glucolisis, rutas metabólicas características de la falta (o insuficiencia) de oxígeno ambiental. En esas condiciones, el NADH+H+ no puede ser utilizado por la célula para transformarlo en ATP, sino que su función celular consiste simplemente en recibir los protones y los electrones desprendidos en otras reacciones celulares. Una vez conseguido esto, su papel se agota, y lo que la célula necesita es regenerar el NAD+, cuya síntesis es costosa, para seguir realizando su metabolismo Algo similar ocurre con el piruvato. Mientras que las células aerobias pueden seguir degradándolo y obteniendo la energía que aún contiene, si no hay oxígeno disponible es una molécula que resulta "inútil" para la célula, por lo que su destino final.

Las fermentaciones van a dar solución a ambos problemas cuando la célula se encuentra en un ambiente anaerobio: por una parte, van a ceder los electrones y los protones del NADH+H+ al piruvato (o a una sustancia relacionada con él), regenerando así la coenzima que necesitan para seguir funcionando, y por otra van a sintetizar un derivado del piruvato, que incluya esos protones y esos electrones, que va a ser eliminado. Evolutivamente, por tanto, las fermentaciones constituían la fase final de la degradación anaerobia de la glucosa, en la que la célula se liberaba de sus residuos y regeneraba sus coenzimas. En la actualidad, la mayor parte de los organismos que llevan a cabo fermentaciones lo hacen como adaptación a condiciones de falta de oxígeno, ya sea porque escasea en el ambiente en el que se encuentran, ya sea porque el metabolismo de la propia célula es tan activo que no recibe la cantidad suficiente de este gas para mantenerlo (por ejemplo, las células musculares en condiciones de un esfuerzo muy intenso no llegan a recibir un aporte de oxígeno suficiente para quemar completamente la glucosa, y se ven obligadas a degradar el piruvato mediante la fermentación láctica). Existen diferentes tipos de fermentación, que dan lugar a la transformación del piruvato en distintos compuestos:







La fermentación láctica transforma el piruvato en lactato. Es la que se produce en las células musculares cuando escasea el oxígeno y la que llevan a cabo algunas bacterias. La fermentación alcohólica transforma el piruvato en etanol, después de eliminar una molécula de dióxido de carbono (descarboxilación). Es característica de muchas levaduras. La fermentación acética transforma el piruvato en acetato, también tras una descarboxilación. Es propia de bacterias del género Acetobacter.

5. Realiza un cuadro con las diferencias entre la glucólisis anaerobia y la glucólisis aerobia GLUCÓLISIS ANAEROBIA - Genera 2 ATP. - El producto final (piruvato) es reducido por el NADH a lactato en el citosol. - No hay producción neta de NADH.

GLUCÓLISIS AEROBIA - Genera 32 ATP. - El producto final (piruvato) entra en la mitocondria, donde es oxidado por el ciclo del ATC. - Se generan 2 moles de NADH a partir de la oxidación de un mol de glucosa.

6. ¿Para qué sirve los NADH+? Es usado como agente reductor para donar electrones. También se utiliza en reacciones anabólicas como la gluconeogénesis. Esta coenzima está implicada en rutas como la biosíntesis de ácidos grasos y la fotosíntesis.

7. ¿QUE APORTA EL CICLO DE KREBS Y POR QUÉ ES IMPORTANTE?

El Ciclo de Krebs es un conjunto de reacciones que puede oxidar completamente el acetil-CoA a CO2 a fin de liberar la energía para sintetizar el ATP, la moneda energética de la célula y está constituido por un conjunto de reacciones a través de las cuales se completa la degradación total de los productos de la glucólisis. Es importante ya que gracias al ciclo de Krebs obtenemos grandes cantidades de energía que son requeridas para que nuestro organismo realice todas sus funciones programadas de manera normal. 8. GRAFIQUE UD. LA ETAPA DE LA HEMOSTASIA

PREGUNTAS ELABORADAS POR EL GRUPO SOBRE EL TEMA 1. ¿QUÉ ES HEMATOCRITO? Es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende del número de glóbulos rojos y de su tamaño. 2. ¿CUÁLES SON LOS VALORES NORMALES DEL HEMATOCRITO SEGÚN SU SEXO? VALORES NORMALES:  Hombres: de 40.8 a 50.3 %  Mujeres: de 36.1 a 44.3 %

3. ¿Qué factores influyen para que el valor del hematocrito este alterado?  Causas por aumento en el valor del Hto: - Deshidratación - Policitemia vera - Hipoxia  Causas por aumento en el valor del Hto: - Anemias - Embarazo 4. ¿Cuáles son las causas de niveles anormales de glucosa en sangre?  Hiperglucemia persistente - Diabetes mellitus - Síndrome de Cushing - Hipertiroidismo - Acromegalia  Hiperglucemia transitoria - Feocromocitoma - Descarga eléctrica - Convulsiones  Hipoglucemia persistente - Insulinoma - Enfermedad de Addison - Hipopituitarismo - Galactosemia  Hipoglucemia transitoria - Ingestión aguda del alcohol - Intolerancia hereditaria de la fructosa. 5. ¿de qué está compuesto el plasma sanguíneo? Está compuesto por un 90 % de agua, un 7 % de proteínas, y el 3 % restante por grasa, glucosa, vitaminas, hormonas, oxígeno, dióxido de carbono y nitrógeno, además de productos de desecho del metabolismo como el ácido úrico. A estos se les pueden añadir otros compuestos como las sales y la urea.

6. ¿Cuáles son las desventajas de la obtención de sangre venosa?   

Puede provocar coagulación si el procedimiento lleva mucho tiempo Algunos componentes no son estables en sangre anticoagulante Puede dificultarse en niños, pacientes obesos o en estado de shock

7. ¿Cuándo se puede considerar a una persona anémica? Se considera anemia leve cuando los niveles de hemoglobina se sitúan entre 10,5 y 12 gr por dl de sangre; se considera anemia moderada cuando los valores están entre 8 y 10,5 gr/dl, y se califica de grave cuando dichos niveles no superan los 8 gr/dl. Otro tipo de anemia es la megaloblástica, producida por el déficit de la vitamina B12 o de ácido fólico y que también puede ser debida a alcoholismo, tratamientos de quimioterapia, trastornos hereditarios. En este tipo de anemia, los niveles de hemoglobina son normales; sin embargo, las células rojas son anormalmente grandes. Los síntomas de anemia megaloblástica incluyen entumecimiento; pérdida de sensibilidad y hormigueo en manos y pies; cambios en el color de la piel; cefaleas; úlceras en boca y lengua; cansancio; diarreas e inapetencia. 8. ¿Cuándo se puede considerar a una persona diabética? Una cifra de glucosa (azúcar) en el plasma (una fracción de la sangre obtenido por extracción venosa) o por punción capilar (en el dedo) mayor de 140 miligramos por cada 100 mililitros tras ocho horas de ayuno y repetida en dos ocasiones diferentes, se considera diabetes mellitus y requiere valoración y tratamiento por un médico. Cifras entre 110 y 140 se consideran prediabéticas y entre 70 y 110, normales. Los valores obtenidos en ausencia de ayuno son muy variables. La determinación de azúcar en orina es menos fiable, aunque, en general, la presencia de azúcar en orina de ayunas confirma la diabetes, aunque su ausencia no la descarta. 9. ¿A qué se debe el síndrome de la anemia hemolítica? La anemia es una afección en la cual el cuerpo no tiene suficientes glóbulos rojos sanos. Los glóbulos rojos proporcionan el oxígeno a los tejidos del cuerpo. Normalmente, los glóbulos rojos duran aproximadamente unos 120 días en el cuerpo. En la anemia hemolítica, los glóbulos rojos en la sangre se destruyen antes de lo normal. Una de las causas en bases a la bioquímica es la deficiencia deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, conocida también como favismo, es la deficiencia enzimática más común en el mundo1 caracterizada por disminución de la actividad de la enzima glucosa-6-fosfato deshidrogenasa en los eritrocitos. Es probable que más de 400 millones de personas en el mundo estén afectadas por deficiencia de esta enzima.

10. ¿Cuáles son las causas y patogenia para el desarrollo de una anemia hemolítica? La deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa es una enfermedad hereditaria ligada al cromosoma X. La deficiencia de G6PD es transmitida por madres que llevan una copia del gen en uno de sus cromosomas X a la mitad de sus hijos; los hijos varones estarán afectados (al carecer de una segunda copia), y las hijas que reciben el gen son portadoras. La patogenia Al reducir la potencia antioxidante intracelular de NADPH, producto de la función de la enzima glucosa6-fosfato deshidrogenasa (enzima esencial en la ruta de las pentosas fosfato), la hemoglobina se oxida y desnaturaliza, y la vida media de los glóbulos rojos disminuye, ocasionando anemia hemolítica. La fiebre y ciertos medicamentos con efecto oxidante, incluyendo la aspirina, pueden activar una crisis hemolítica en estos pacientes. Otros medicamentos a evitar son los compuestos contra la malaria (primaquina), las quinolonas y las sulfonamidas. La enfermedad puede desencadenar una crisis hemolítica severa al comer habas, efecto por el cual se le da el nombre de favismo. Las habas contienen compuestos altamente oxidantes como la vicina. Los eritrocitos, al no poseer maquinaria para generar poder reductor, se lisan. La destrucción acelerada por el bazo de los eritrocitos afectados ofrece una resistencia real en contra de la malaria, similar al efecto de la anemia drepanocítica. Este fenómeno puede dar lugar a una ventaja adaptativa en portadores de esta deficiencia, lo que explicaría su alta prevalencia. En estos pacientes, el ejercicio excesivo puede generar hemolisis por las mismas causas planteadas anteriormente.

15. BIBLIOGRAFIA http://kidshealth.org/es/parents/test-glucose-esp.html https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003644.htm Química Analítica Cuantitativa, Day and Underwood. Química Analítica, Skoog and West. Análisis Instrumental, Douglas R. Skoog and Donald M. West.