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--_ NORMA TÉCNICA COLOMBIANA

NTC 5698-1 2009-08-19

MICROBIOLOGíA DE ALIMENTOS Y ALIMENTOS PARA ANIMALES. METODO HORIZONTAL PARA LA ENUMERACiÓN DE MOHOS Y LEVADURAS. PARTE 1: TÉCNICA DE RECUENTO DE COLONIAS EN PRODUCTOS CON ACTIVIDAD ACUOSA (Aw) SUPERIOR A 0,95

~~. E:

I ONTEC

MICROBIOLOGY OF FOOD ANO ANIMAL FEEDING STUFFS - WITH HORIZONTAL METHOD FOR THE ENUMERATION OF YEASTS ANO MOULDS. PART 1: COLONY COUNT TECHNIQUE IN PRODUCTS WATER ACTIVITY GREATER THAN 0,95.

CORRESPONDENCIA:

esta norma es idéntica (IDT) con respecto a su documento de referencia, la norma ISO 21527-1:2008.

DESCRIPTORES:

microbiología de alimentos; método horizontal; enumeración de levaduras; enumeración de mohos; recuento de colonias.

I.C.S.: 07.100.30 Editada por el Instituto Colombiano de Normas Técnicas y ce~ificac(i~91~IC~2~~¡~~ Apartado 14237 Bogotá, D.C. - Tel. (571) 6078888 - ax

Prohibidasu reproducción

Editada2009-09-01

© ICONTEC2013 Reservados todos los derechos. Ninguna parte de esta publicación puede ser reproducida o utilizada en cualquier forma o por cualquier medio, electrónico o mecánico incluyendo fotocopiado y microfilmación, sin permiso por escrito del editor. Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación, ICONTEC

PRÓLOGO

ICONTEC, es el organismo . El Instituto Co Iom birano de Normas Técnicas 2269yd Certificación, 1993 nacional de normalización, según el Decreto e .

1~?aN~~~:~

. ... d lucro cuya Misión es fundamental ~~;o~~ti~a~e~~r~~~~c~r ~;~~au~~~:I~~~~~~ci~n al ~onsumido.r. Colabor~. con el ~ector gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo. La representación de todos los está garantizada por los C caracterizado por la pa

en el proceso de Normalización Técnica de Consulta Pública, este último

de que responda en

de esta norma a 3MC ALlM ALPINA ANNAR D ARCHIVO MAYOR DE BO ASBIOQUIM LTDA BIANÁLlSIS BIOCONTROL LTOA BIOQUILAB LTOA BIOTRENDS LABORATOR CALIDAD INDUSTRIAL LTDA CARULLA VIVERO SA CONGELAGRO SA CASA LUKER S.A REPES & WAFFLES SA ONGELAGRO ORPOLAC - CORPOICA COKAPKA NZIPÁN LABORATORIO SA I DUSTRIAS ALIMENTICIAS ZENÚ SA I DUSTRIA PRODUCTORA DE ACEITES ENOVABLES I STITUTO DE GENÉTICA UNIVERSIDAD CIONAL DE COLOMBIA

TORIO LTDA

TORIO

DE

OBIÓLOGOS ASOCIADOS ULAB LTDA PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA PURIFICACiÓN Y ANÁLISIS DE FLUIDOS LTDA QUALA SA SECRETARIA DISTRITAL DE SALUD DE BOGOTÁ SUIZO SA UNIVERSIDAD DE LOS ANDES UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA VECOL SA VlLASECA LTDA VITROFARMA SA

Además de las ant enores . . . e sIgUientes empresas'. ,n

C onsulta Pública el Proyect o se puso a consideración de las

ACEGRASAS S.A. ACUAGYR S.A. E S P ALGARRA SA .. . ALIMENTOSCÁRNICOSSA PLANTASUIZO AQUALAB AREPAS DOÑA ALEJA ASEBIOL ASINAL ASOCIACiÓN COLOMBIANA DE CIENCIA Y TECNOLOGIA COSMÉTICA - ACCYTEC ASOCIACiÓN COLOMBIANA DE MICROBIOLOGIA BAVARIA S.A. BECTON DICKINSON DE COLOMBIA LTDA. CERVECERIA LEONA S.A. COLOMBINA SA CORPORACiÓN PARA EL AVANCE DE LA MICROBIOLOGIA y LA MICROSCOPIA -MICROSDUPONT QUALlCON

EMPRESA DE ACUEDUCTO ALCANTARILLADO DE BOGOTÁ E S P Y FÁBRICA DE ESPECIAS . . y CONDIMENTOS EL REY S A FRUGAL S.A. .. INSTITUTO DE GENÉTICA UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA JOHNSONDIVERSEY KLlK S.A LABORATORIO A.B.B.A LABORATORIO DE GENÉTICA Y BIOLOGIA MOLECULAR LA CAMPIÑA MULTIDIMENSIONALES S.A. NESTLÉ DE COLOMBIA S.A. QUIKLTDA. ROCHE DIAGNOSTICS SERVICIOS DE LABORATORIO CLiNICO LTDA. UNIVERSIDAD MANUELA BELTRÁN

ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados normas internacionales, regionales Y nacionales y otros documentos relacionados.

DIRECCiÓN DE NORMALIZACiÓN

NORMA TÉCNICA COLOMBIANA

NTC 5698-1

CONTENIDO

Página NTRODUCCIÓN

1

ALCANCE

.

.

REFERENCIAS N

2 •.....,

2 .................................... 2

................... 3

5 51 52

............................... 4

.

6. .

6 .

6

YO

7

7.

MUESTREO

8.

PREPARACiÓN DE LA MU

9.

PROCEDIMIENTO

7

9.

PORCiÓN DE ENSAYO, SUSPENSiÓN INICIAL Y DILUCIONES

7

9.

INOCULACiÓN E INCUBACiÓN

7

9.

RECUENTO Y SELECCiÓN DE LAS COLONIAS PARA LA CONFIRMACiÓN

8

10

EXPRESiÓN DE RESULTADOS Y LíMITES DE CONFIANZA

8

NORMA TÉCNICA COLOMBIANA

NTC 5698-1

Página

11.

INFORME DE ENSAYO

8

BIBLIOGRAFíA

10

DOCUMENTO DE REFERENCIA

11

NTC 5698-1

LOGíA DE ALIMENTOS Y ALIMENTOS PARA ANIMALES. DO HORIZONTAL PARA LA ENUMERACiÓN DE MOHOS Y LEVADURAS 1: TÉCNICA DE RECUENTO DE COLONIAS EN PRODUCTOS CON IVIDAD ACUOSA (Aw) SUPERIOR A 0,95

neral de Microbiología de alimentos para la enumeración de mohos y

n actividad acuosa (Aw)

acuosa (Aw)

as aplicaciones del C 5698-2 pueden no En este cas ueden utilizar métodos es abso necesario por razones todo el para aplicar el método en la NTC 5698-2 , en la medida de lo

se realice con el máximo cuidado para proteger de mohos.

Es esencial que la rario y evitar la contaminación de la

1 de 11

NORMA TÉCNICA COLOMBIANA 1.

NTC 5698-1

ALCANCE

La NTC 5698-1 especifica un método horizontal para la enumeración de levaduras y mohos viables en productos destinados para consumo humano o alimentación de animales, que tienen una actividad de agua superior a 0,95 (huevos, carne, productos lácteos (excepto la leche en polvo), frutas, verduras, pastas frescas, etc.), por medio de la técnica de recuento de colonias a una temperatura de 25 ± 1 -c (referencias [1] y [2]).

-c

Esta parte de NTC no permite la enumeración de las esporas de mohos, ni la identificación de la flora de hongos, el examen de los alimentos para determinar micotoxinas tampoco está dentro del alcance de esta norma. El método que se especifica en esta parte no es adecuado para la enumeración de hongos resistentes al calor, como el Byssochlamys fulva o Byssochlamys nivea, en frutas y verduras enlatadas o embotelladas.

2.

REFRENCIAS NORMATIVAS

Los siguientes documentos normativos referenciados son indispensables para la aplicación de este documento normativo. Para referencias fechadas, se aplica únicamente la edición citada. Para referencias no fechadas, se aplica la última edición del documento normativo referenciado (incluida cualquier corrección). NTC 4491 (todas las partes), Microbiología de alimentos y alimentos para animales. preparación de muestras para ensayo, suspensión inicial y diluciones decimales para análisis microbiológico. Parte 1: Reglas generales para la preparación de la suspensión inicial y de diluciones decimales. NTC 4092 Microbiología de alimentos y de alimentos para animales. reglas generales para el análisis microbiológico. NTC 5698-2, Microbiología de alimentos y productos de alimentación animal. Método horizontal para la enumeración de levaduras y mohos. Parte 2: Técnica de Recuento de colonias en productos con Actividad Acuosa (Aw) inferior o igual a 0,95. GTC 171, Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Guía para la preparación y producción de medios de cultivo. Guía general para los ensayos de desempeño de medios de cultivo. ISO 8261, Milk and Milk Products. General Guidance for the Preparation of Test Samples, tnltie! Suspensions and Decimal Dilutions for Microbiological Examinations.

3.

TÉRMINOS Y DEFINICIONES

Para los propósitos de este documento, se aplican los siguientes términos y definiciones. NOTA Existen algunas formas intermedias y la distinción entre una levadura (véase el numeral 3.1) y un moho (véase el numeral 3.2) puede ser arbitraria.

3.1 Levadura. Microorganismo aeróbico mesofílico que, a 25 "C usando un medio de agar micológico bajo las condiciones descritas en esta NTC, desarrolla colonias (véase el numeral 3.4) redondas brillantes o mate sobre la superficie del medio, que usualmente tienen un contorno regular y una superficie más o menos convexa. 2

NTC 5698-1 Las levaduras dentro, en lugar de sobre un medio, desarrollan colonias redondas, lenticulares.

Moho. Microorganismo filamentoso aeróbico mesofílico que, sobre la superficie de un de agar micológico bajo las condiciones que se describen en esta NTC, usualmente rlo,¡'..,r·~nlll", gérmenes/propágulas de proliferación planas o esponjosas (véase el numeral 3.3) o (véase el numeral 3.4) con estructuras con color fructíferas o que forman esporas. Los mohos dentro, en lugar de sobre un medio, pueden desarrollar colonias redondas, lenticulares.

Propágula. Germen. Entidad viable capaz de crecer en un medio nutritivo. PLO

Células vegetativas, grupos de células, esporas, cúmulos de esporas o una porción de micelio de

Colonia. Acumulación visible un medio nutritivo sólido a

microbiana, desarrollada sobre o dentro le.

o de cultivo selectivo una cantidad

do diluciones

oc

durante 5 d. Si es durante 1 d a 2 d. :>nr\rrrlcnte, y si así se requiere (para bacterias) se confirma la identidad de

Se calcula el número de por gramo o por mililitro de muestra a del número de colon es que se obtuvieron sobre las placas leccionadas en niveles de dilución colonias contables. Si es necesario, los rlV\hr", y las levaduras se cuentan independientemente.

DILUYENTE Y MEDIO DE CULTIVO on respecto a la práctica actual de laboratorio, véase la NTC 4491 (todas las partes). DILUYENTE Generalidades la NTC 4491 (todas las partes), ISO 861 y las normas específicas que tratan de los uctos en cuestión.

3

NORMA TÉCNICA COLOMBIANA

NTC 5698-1

NOTA Es posible adicionar agentes tensoactivos como poli(oxietileno)sorbatitan rnonooleato" sódico [0,05 % (concentración de masa)] a los diluyentes para reducir la formación de grumos de esporas de mohos y conidias (referencia [2]). . Excepto para la preparación específica de la muestra de ensayo, se recomienda utilizar como diluyente caldo de agua de peptona al 0,1 % (concentración de masa).

5.1.2

Composición

del caldo de agua de peptona al 0,1 % (concentración

5.1.3

Preparación del caldo de agua de peptona al 0,1% (concentración

de masa)

de masa)

Disuelva los componentes en agua, mediante calentamiento, si es necesario. Si es necesario, ajuste el pH de manera que, después de la esterilización, esté en 7,0 ± 0,2 a 25 -c. 5.2

MEDIO DE CULTIVO

5.2.1

Agar de Dicloran rosa de bengala y cloranfenicol

(DRBC) (referencias [3] y [4])

5.2.1.1 Composición Producto de la digestión enzimática de tejidos animales y vegetales D -Glucosa (C6H1206) Dihidrogeno fosfato de potasio (KH2P04) Sulfato de magnesio (MgS04 . H2O) Dicloran (2,6-dicloro-4-n itroanilina) Rosa de bengala Agar Cloranfenicol ~gua, destilada o desionizada a Dependiendo de la resistencia de gel del agar.

5,0 9 10,Og 1,0__a 0,5 9 0,002 9 0,025 9 12ga15ga 0,1 9 1000 mi

NOTA Teniendo en cuenta la legislación nacional vigente se puede considerar la utilización de medios de cultivo de la GTC 125; para reportar según las indicaciones de esta Norma Técnica Colombiana se debe utilizar el medio de cultivo referenciado en el mismo.

5.2.1.2 Preparación 5.2.1.2.1 Generalidades Elabore una suspensión en agua de todos los ingredientes, excepto el cloranfenicol, y lleva a ebullición hasta disolverlos completamente. Si es necesario, ajuste el pH (véase el numeral 6.4) de modo que después de la esterilización esté en 5,6 ± 0,2 a 25 "C. Agregue 10 mi de una solución al 1 % (concentración de masa) de cloranfenicol en etanol y mezcle. Dispense el medio en cantidades en recipientes (6.5) con capacidad adecuada. Esterilice llevando a autoclave a 121°C durante 15 mino

1)

Tween 80 es un ejemplo de un producto adecuado disponible en el comercio. Esta información se brinda para conveniencia de los usuarios de esta norma y no constituye una aprobación de este producto por parte de ISO.

4

NORMA TÉCNICA COLOMBIANA

NTC 5698-1

nfríe inmediatamente el medio en un baño de agua (6.3) conservado a una temperatura entre 4 "C y 47 "C. Enfríe hasta alcanzar temperatura inferior a 50 "C y dispense en cantidades de 5 mi en cajas de Petri estériles (véase el numeral 6.6). ermita que el medio se solidifique y, si es necesario, seque la superficie de las placas tal omo se describe en NTC 4092 y GTC 171 (todas las partes). tilice inmediatamente o almacene en un lugar oscuro, según la GTC 171 (todas las partes) asta que se necesite. RECAUCIÓN evite la exposición del medio a la luz ya que los productos de la ruptura citotóxica pueden dar amo resultado una subestimación de la micoflora en las muestras.

ser un problema (por ejemplo en carnes rtetraciclina (50 mg/I). En este caso, lamente con 50 mg de cloranfenicol, también una solución al 0,1% agua (relativamente inestable en . Justo antes de la utilización, io básico y vierta en las que causa inhibición de

rudas), se recomienda clo repare el medio básico tal ispénselo en cantidades ( oncentración de masa) de lución, se debe pre dicione 5 mi de

pigmentos que presentes en el nte solución de ZnS04 7H20 19;

r

n el fin de evitar omienda la adición de Te

las placas de agar, se

.1.3 Ensayo de desempe

de la calidad del medio de cultivo

.1.3.1 Generalidades El agar DRBC es un medio sólido. La productividad y la selectividad se deben someter a e sayo de acuerdo con la GTC 171 según las siguientes especificaciones 5. .1.3.2 Productividad In ubación: C pas:

2)

5 d a 25° C ± 1° C Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 Candida albicans ATCC 10231 Aspergillus niger ATCC 16404

Ejemplo de un producto disponible en el comercio. Esta información se suministra para conveniencia de los usuarios de esta norma y no constituye una aprobación del producto por parte de ICONTEC .

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NTC 5698-1 Mucor racemosus ATCC 42647 o cepas registradas como colecciones de hongos.

Medio de referencia: Método de control: Criterios: Reacción característica:

equivalentes

en

otras

Lotedel medioSDA (agarde dextrosaSabouraud)ya validado. Cuantitativo Relación de productividad, PR ¿0,5 Colonias/propágulas/gérmenes característicos de acuerdo con cada especie.

5.2.1.3.3 Selectividad Incubación: Cepas:

5 d a 25 -c ± 1 -c Escherichia coli ATCC 24922 o Bacillus subtilis ATCC 6633 o cepas registradas como equivalentes en otras colecciones de bacterias.

Método de control: Criterios:

Cualitativo Inhibición total

6.

EQUIPO Y MATERIAL DE VIDRIO

El equipo desechable es una alternativa aceptable para el siempre que tenga las especificaciones correctas.

material de vidrio reutilizable,

Equipo común de laboratorio de microbiología (véase la NTC 4092) y, en particular, el siguiente: 6.1

Incubadora, con capacidad para funcionar a 25 "C ± 1°C.

6.2 Pipeta o micropipeta de descarga total, estériles, con capacidad nominal de 1 mi y graduadas en divisiones de 0,1 mI. 6.3

Baño de agua, o equipo similar, con capacidad de funcionar entre 44 "C y 47 "C.

6.4

pHmetro, con exactitud de 0,1 unidades de pH a 25 "C.

6.5 Frascos, matraces y tubos, para ebullición y almacenamiento del medio de cultivo y para hacer las diluciones. 6.6

Cajas de Petri, estériles, de vidrio o plástico, con un diámetro de 90 mm a 100 mm.

6.7 Microscopio, para diferenciar las levaduras de las células bacterianas (campo luminoso, amplificación de 250 veces a 1 000 veces). 6.8 Esparcidores, de vidrio o plástico (diámetro inferior a 2 mm y longitud de 80 mm). Es recomendable que el diámetro no exceda 2 mm con el fin de minimizar la cantidad de muestra que se adhiere a ellos al final del procedimiento de esparcido.

7.

MUESTREO

Es recomendable enviar al laboratorio una muestra representativa. Dicha muestra no debe haber sufrido daños ni cambios durante el transporte ni el almacenamiento. La muestra de

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RMA TÉCNICA COLOMBIANA

NTC 5698-1

oratorio no debe estar congelada. El muestreo no es parte del método que se especifica en esta NTC. El muestreo debería 11 arse a cabo de acuerdo con la norma específica, adecuada al producto en cuestión. Si no e iste norma específica, se recomienda que las partes involucradas lleguen a un acuerdo sobre e e tema.

8.

PREPARACiÓN DE LA MUESTRA DE ENSAYO

pare la muestra de ensayo según la NTC 4491 (todas las partes), NTC 4092 y la norma e ecífica que trate del producto en cuestión. Si no existe norma específica, se recomienda q e las partes involucradas lleguen a un acuerdo sobre este tema.

9.

PROCEDIMIENTO

9.

PORCiÓN DE ENSA dilución primaria) y las diluciones la norma específica que trate

mienda usar caldo de un homogenizador

ipeta, Agite la partículas que

9. 9..1 Sobre una ropipeta estéril ida, o 0,1 mi de la su bre una segunda placa de 0, mi de la primera dilución (o ros productos).

), utilizando una pipeta o

pipeta o micropipeta estéril, transfiera líquido) o 0,1 mi de la dilución de 10-2

ra facilitar la enumeración de poblac es bajas de levaduras y mohos, sobre tres de las e as se pueden dispersar volúmenes de hasta 0,3 mi de una dilución de 10-1 de la muestra, o d la muestra de ensayo, si es líquida. pita estas operaciones con diluciones posteriores utilizando una pipeta o micropipeta estéril ra cada dilución decimal. Si se sospecha la presencia de mohos de crecimiento rápido, utilice la norma ISO 21527-2[6]

9..2 Disperse el líquido sobre la superficie de la placa de agar con un esparcidor estéril (v ase el numeral 6.8) hasta que el líquido se absorba por completo en el medio. mbién se puede utilizar la inoculación de las placas mediante el método de vertido en placa, ro en este caso la equivalencia de los resultados se debe convalidar en comparación a la 7

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NTC 5698-1

inoculación sobre la superficie, y la discriminación y diferenciación de mohos y levaduras no son admisibles. El método de esparcido sobre la superficie puede dar enumeraciones superiores. La técnica de esparcido de la placa facilita la exposición máxima de las células al oxígeno atmosférico y evita el riesgo de desactivación térmica de las propágulas de hongos. Los resultados pueden depender del tipo de hongos. 9.2.3 Incube aeróbicamente en posición invertida las placas preparadas (véanse los numerales 9.2.2 y 6.1) a 25 "C ± 1 "C durante 5 d. Si es necesario, deje las placas de agar en reposo en luz natural difusa durante los 2 primeros días. Se recomienda incubar las cajas (véase el numeral 6.6) en una bolsa plástica abierta con el fin de no contaminar la incubadora en el caso de diseminación de los mohos fuera de las cajas. 9.3

RECUENTO Y SELECCiÓN DE LAS COLONIAS PARA LA CONFIRMACiÓN

Seleccione y cuente las cajas que tienen menos de 150 colonias/propagulas/gérmenes. Si el crecimiento rápido de los mohos causa problemas, realizar conteo a los 2 d y luego a los 5 d. NOTA 1 Los métodos de enumeraciónpara levadurasy, en especial para los mohos, son imprecisosdado que consisten en una mezcla de micelio y esporas sexuales y asexuales. Las cantidadesde unidades formadorasde colonias dependendel grado de fragmentacióndel micelio y de la proporciónde esporas capaces de crecer en el medioen la placa. NOTA2 A menudose presentala no linealidadde los recuentosde las placasque contienenla dilución,es decir, las diluciones de 10 veces de la muestra con frecuencia no dan como resultado reduccionesde 10 veces en los númerosde colonias recuperadasdel medio en la placa. Esto se ha atribuido a la fragmentacióndel micelio y a la ruptura de los cúmulos de esporas durante la dilución además de la inhibición competitiva cuando hay un gran númerode coloniassobre las placas. PRECAUCiÓN las esporas de los mohos se dispersanen el aire con gran facilidad. Manipulelas cajas de Pe tri con cuidadopara evitar el desarrollode coloniassatélitesque ocasionaríanuna sobreestimaciónde la poblaciónen la muestra.

Si es necesario, realice un examen (véase el numeral 6.9) con microscopio (véase el numeral 6.7) con el fin de diferenciar entre células de levaduras o de mohos y bacterias provenientes de las colonias. Cuente las colonias de levaduras y las colonias/propágulas de mohos independientemente, si es necesario. Para la identificación de levaduras y mohos, seleccione áreas de crecimiento de hongos y retírelas para examen con microscopio o realice la inoculación en un medio adecuado de aislamiento o de identificación.

10.

EXPRESiÓN DE RESULTADOS y LíMITES DE CONFIANZA

Registre las colonias de levaduras y las colonias/propágulas de mohos independientemente, si es necesario. Véase la NTC 4092

11.

INFORME DE ENSAYO

El informe de ensayo debe incluir por lo menos la siguiente información: a)

toda la información necesaria para la identificación completa de la muestra,

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N RMA TÉCNICA COLOMBIANA

NTC 5698-1

b)

el método de muestreo utilizado, si se conoce;

e)

el método de ensayo utilizado, con referencia a esta NTC;

d)

todos los detalles operativos que no se especifican en esta norma o que se consideran opcionales, junto con los detalles de todos los incidentes que hayan podido tener influencia en los resultados de ensayo,

e)

resultados de ensayo obtenidos.

9

NORMA TÉCNICA COLOMBIANA

NTC 5698-1 BIBLIOGRAFíA

[1]

Bell, C., Neaves, P., Williams, AP. Blackwell, Oxford, 2005. 324 p.

Food Microbiology and Laboratory Practice.

[2J

Beuchat, L.R. Media for Detecting and Enumerating Yeasts and Moulds. In: Corry, J.E.L., Curtis, G.D. w., Baird, R.M, Editors. Handbook of Culture Media for Food Microbiology, pp. 369-386. Elsevier, Amsterda m, 2003. (progress in Industrial Microbiology, Vol 37).

[3J

Beuchat, L.R., Frandberg, E., Deak, T., Alzamora, S.M, Chen, J., Guerrero, AS., López-Malo, A, Ohlsson, t., Olsen, M., Peinado, J.M, Schenurer, J., De Siloniz, MI., Tornai-Lehoczki, J. (2001) Performance of Mycological Media in Enumerating Desiccated Food Spoilage Yeasts: An Interlaboratory study. Int. J. Food Microbiol. 2001, 70, pp 8-96.

[4J

King Jr., AD., Hocking, Ad., Pitt, J.I. (1979) Dichloran-Rose Bengal Medium for Enumeration and Isolation of Moulds from Foods. Appl. Environ. Microbiol. 1979, 37, pp. 959-964.

[5]

ISO 6107-6:2004, Water Quality. Vocabulary. Part 6.

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NTC 5698-1

DOCUMENTO DE REFERENCIA

o,

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION. Microbiology Food and Animal Feedings Stuffs. Horizontal Method for the Enumeratíon of Yeasts and Moulds. Part 1: Colony Count Technique in Products with Water Actívity Greater than 0,95. Géneva: ISO, 2004, 8 p (ISO 21527-1 :2008 (E).

11