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• irving valadez

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Métodos inmunológicos Reacciones Ag-Ac

Lineal

Inmunodifus ión única o simple

Radial

Inmunodifus ion doble

Técnica

Según los elementos

Técnica

Según la forma de movimiento

Oudin Mancini

Análisis de Ouchterlony

Difusión simple monodimensional (método de Oudin): 

En un sistema de difusión simple, el anticuerpo se incorpora en un gel de agar dentro  del cual se difunde en el antígeno. En el método de inmunodifusión en tubo (Oudin), el  antígeno  se  siembra  sobre  el  agar  que  contiene  el  anticuerpo  y  se  forma  una  o  mas  líneas de precipitación en las zonas de equivalencia.

La técnica de precipitación difusión simple en placa o inmunodifusión radial ( Mancini ). En la inmunodifusión radial, se incorpora el anticuerpo en un agar que forma  una capa sobre  un portaobjetos. Luego se coloca el material que contiene el antígeno dentro de un pocillo circular  cortado en el agar. Durante la incubación el antígeno se difunde dentro del agar y forma un anillo  de  precipitación.  El  cuadrado  del  radio  del  anillo  es  directamente  proporcional  a  la  cantidad  de  antígeno presente en el material de estudio.  Utilizando una dilución seriada del antisuero es posible determinar de manera semicuantitativa las  [antígeno] comparando los diámetros de la reacción de precipitación producidos por una solución  de antígeno de [  ] conocida con el diámetro del anillo producido por la solución en estudio.

Difusión doble monodimensional (método de Oakley Fulthorpe): En este caso se coloca en la parte inferior del tubo un volumen de agar 1% fundido, mezclado con un  volumen  igual  del  antisuero,  se  deja  solidificar  y  agregamos  igual  volumen  de  agar  0,5%,  dejamos  solidificar y por ultimo agregamos agar 1% donde se encuentra disuelto el Ag. Tanto  el  Ag Como el  Ac migrarán hacia  la  zona  media  de  menor  concentración,  de  manera  que,  otra  vez, se formarán gradientes que harán que en determinado punto los reactivos estén en equivalencia y  precipiten.

Difusión doble bidimensional (método de Oüchterlony) :  En  este  caso  los  reactivos  difunden  en  forma  radial  a  partir  del  pocillo  generando  bandas  de  precipitación  cuyas  características  dependerán de varios factores.

Inmunodifusión doble difusión. En esta técnica el Ag y el Ac se colocan en pocillos adyacentes y   se  difunden  uno  hacia  el  otro.  Luego,  se  forma  una  línea  de  precipitación  entre  los  pocillos  cuando se alcanzan las [  ] de equivalencia. La doble difusión puede requerir una incubación de  ahsta 48 horas antes de obtener un resultado interpretable. 

Mediante  la  técnica  de  Ouchterlony  podemos  determinar  la  existencia  o  no  de  determinantes  comunes entre Ag. Según las características de las bandas formadas.