Métodos inmunológicos Reacciones Ag-Ac Lineal Inmunodifus ión única o simple Radial Inmunodifus ion doble Técnica
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Métodos inmunológicos Reacciones Ag-Ac
Lineal
Inmunodifus ión única o simple
Radial
Inmunodifus ion doble
Técnica
Según los elementos
Técnica
Según la forma de movimiento
Oudin Mancini
Análisis de Ouchterlony
Difusión simple monodimensional (método de Oudin):
En un sistema de difusión simple, el anticuerpo se incorpora en un gel de agar dentro del cual se difunde en el antígeno. En el método de inmunodifusión en tubo (Oudin), el antígeno se siembra sobre el agar que contiene el anticuerpo y se forma una o mas líneas de precipitación en las zonas de equivalencia.
La técnica de precipitación difusión simple en placa o inmunodifusión radial ( Mancini ). En la inmunodifusión radial, se incorpora el anticuerpo en un agar que forma una capa sobre un portaobjetos. Luego se coloca el material que contiene el antígeno dentro de un pocillo circular cortado en el agar. Durante la incubación el antígeno se difunde dentro del agar y forma un anillo de precipitación. El cuadrado del radio del anillo es directamente proporcional a la cantidad de antígeno presente en el material de estudio. Utilizando una dilución seriada del antisuero es posible determinar de manera semicuantitativa las [antígeno] comparando los diámetros de la reacción de precipitación producidos por una solución de antígeno de [ ] conocida con el diámetro del anillo producido por la solución en estudio.
Difusión doble monodimensional (método de Oakley Fulthorpe): En este caso se coloca en la parte inferior del tubo un volumen de agar 1% fundido, mezclado con un volumen igual del antisuero, se deja solidificar y agregamos igual volumen de agar 0,5%, dejamos solidificar y por ultimo agregamos agar 1% donde se encuentra disuelto el Ag. Tanto el Ag Como el Ac migrarán hacia la zona media de menor concentración, de manera que, otra vez, se formarán gradientes que harán que en determinado punto los reactivos estén en equivalencia y precipiten.
Difusión doble bidimensional (método de Oüchterlony) : En este caso los reactivos difunden en forma radial a partir del pocillo generando bandas de precipitación cuyas características dependerán de varios factores.
Inmunodifusión doble difusión. En esta técnica el Ag y el Ac se colocan en pocillos adyacentes y se difunden uno hacia el otro. Luego, se forma una línea de precipitación entre los pocillos cuando se alcanzan las [ ] de equivalencia. La doble difusión puede requerir una incubación de ahsta 48 horas antes de obtener un resultado interpretable.
Mediante la técnica de Ouchterlony podemos determinar la existencia o no de determinantes comunes entre Ag. Según las características de las bandas formadas.