• Author / Uploaded
• Pao Morante

Citation preview

RECUENTO MICROBIANO

La determinación del crecimiento microbiano y/o biomasa celular dentro de una muestra clínica, de un bioproceso u otras, constituye una etapa muy importante para la evaluación de su cinética de crecimiento, de allí que el conocimiento de las diferentes posibilidades de cómo ejecutarlas es de sumo interés dentro de la formación en microbiología

METODOS DE RECUENTO MICROBIANO

METODOS DIRECTOS

METODOS INDIRECTO S

Cámara de Neubauer

Turbidimetria

Recuento en Placa Filtración Numero mas probable (NMP)

Nefelometria

RECUENTO MICROSCÓPICO EN CAMARA DE NEUBAUER

El hemocitómetro o cámara de Neubauer

Se introduce la suspensión de células en el hemocitómetro

La región de recuento del hemocitómetro

Si 10 células promedio por cuadrícula En las 25 serán 250 células Si estas 250 en 0.1 mm3 entonces en 1 mm3 habrán 2500 células En con secuencia, en 1000 mm3 (= 1 mL) un total de 2.5 x 106 células/mL Desventajas: El método no sirve para cultivos poco densos, celulas móviles. Frecuentemente es necesario teñir

RECUENTO EN PLACA Se determina el número de microorganismos en una muestra en relación a las colonias que forman, las UFC (Unidades Formadoras de Colonias). Se emplean soluciones diluidas o diluciones de una muestra concentrada para que cada colonia formada provenga de un solo microorganismo aunque algunas agrupaciones no pueden ser separadas por las diluciones. Se utilizan principalmente para la cuantificación de bacterias, levaduras y hongos filamentosos. Se reporta como: •UFC ****/unidad de volumen o peso

RECUENTO EN PLACA

Antes de la siembra, el cultivo debe diluirse para obtener 30-300 UFC en

MÉTODOS DE SIEMBRA Siembra en superficie o en camada

Siembra por incorporación o placa vertida

FILTRACIÓN La membrana de celulosa retiene a los microorganismos en su malla con poros de 0.25-0.45mm. Esta membrana se transfiere a un medio de cultivo para el desarrollo de colonias.

METODO POR FILTRACION

Método estadístico basado en series de diluciones y calculo estadístico del numero de bacterias presentes en las diluciones mas altas

Tabla NUMERO MAS PROBABLE

METODOS INDIRECTOS TURBIDIMETRIA

Mediciones del crecimiento microbiano Medición de la densidad o masa celular: - por turbidez, mediante un espectrofotómetro.

Este método requiere la preparación de un estándard que relacione el número de células con la turbidez. Es problemático para muestras de organismos que forman agregaciones o biofilms. Se suele realizar agitación.

SISTEMA NEFELOMÉTRICO DE MAC FARLAND