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Práctica

Determinación del contenido de Ciano-Cobalamina (Vitamina B12) en un inyectable Método de análisis: Espectrofotometría Ultra Violeta

FUNDAMENTO TEORICO

L

a solución inyectable de vitamina B 12 es una solución estéril de cianocobalamina en agua, la cual se isotoniza por la adición de cloruro de sodio. Posee un contenido no menor del 95% y no mayor del 115% de la cantidad rotulada de CIANOCOBALAMINA ANHIDRA C 63H80CoN14P.

IDENTIFICACIÓN El espectro de absorción se da en el rango de 300-400nm para la solución empleada, la cual exhibe un máximo de absorbancia, similar al de la cianocobalamnia U.S.P referencia estándar.

ENSAYO Diluir con agua un volumen exactamente medido de solución inyectable de cianocobalamina, equivalente a no menos de 3000 g. La dilución debe llevarse hasta obtener una concentración de 30g/ml. Para llevar una referencia, pesar exactamente una cantidad de cianocobalamnia U.S.P. Referencia Estándar y luego obtener una concentración de 30g/ml. Proceder a determinar la absorbancia de ambas soluciones, en celdas de 1cm y una longitud de onda de 361 nm. Usar como blanco agua.

Preparar la curva de calibración con las siguientes soluciones patrón (Tabla 4.1), a partir de una solución madre de 1000 microgramos de vitamina B_12. Proceder a determinar la absorbancia de soluciones patrón y muestra, en celdas de 1cm y una longitud de onda de 361 nm. Usar como blanco agua.

Tabla 4.1 Concentración del estándar (ppm) 0 10 20 30 40 50

Volumen de sln madre de 1000 ppm de vit B_12 (ml) 0 1 2 3 4 5

Volumen final de solución patrón solución hija (ml) 50 100 100 100 100 100

CÁLCULOS

1. Determinar el porcentaje de pureza de la vitamina B 12 expresión matemática (método de 1 punto) Cmx 

por la siguiente

Cst * Amx * FD Ast

Donde : Cst = concentración en ppm, del estándar Cmx = concentración en ppm de la muestra Amx = Absorbancia de la muestra Ast = Absorbancia del estándar FD = Factor de dilución 2. Determinar el porcentaje de pureza de la vitamina B 12 por el método de la curva de calibración. 3. Analizar y comparar los resultados encontrados por ambos métodos y concluya. 4. Explique las ventajas o limitaciones de cada uno de los métodos utilizados para la determinación del porcentaje de pureza de la vitamina B 12.