Microbiología General En la práctica realizada en el laboratorio nuestro objetivo principal fue el reconocimiento de la
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Microbiología General
En la práctica realizada en el laboratorio nuestro objetivo principal fue el reconocimiento de las características morfológicas de los hongos, como objetivos secundarios se tomaron: El adiestramiento y práctica para enfocar los hongos en el microscopio para así poder identificarlos y discutir nuestros resultados; para ello es necesario saber que son los hongos y para que nos sirven estos. Los hongos constituyen un grupo de organismos de gran interés práctico para los microbiólogos, sus manifestaciones se dan a simple vista al dejar un alimento en deterioro y que se encuentre en un ambiente no apto para su conservación, como se pudo observar en la practica realizada, como ejemplos claros se puede ver un crecimiento de hongos en naranjas, limones, quesos y otros alimentos no obstante algunas especies venenosas crecen en el bosque. Los hongos no solamente causan enfermedades, sino que también son utilizados en procesos industriales por ejemplo: del hongo Penicillium notatum, algunos hongos como Penicillium roquefort son utilizados en la elaboración de queso Roquefort. El estudio de los hongos (mohos y levaduras), denominada micología, comprende tanto
el
examen
de
los
componentes
morfológicos
específicos
como
la
determinación de sus funciones respectivas. Los hongos en general se caracterizan por tener estructuras vegetativas que se alargan formando filamentos ramificados llamados hifas. Estas estructuras se originan de células reproductoras especializadas conocidas como esporas y pueden o no dividirse en secciones por medio de pares transversales (septos, tabiques). Las hifas que contienen los tabiques se califican de tabicadas
o aceptadas
mientras las que carecen de ellas se denominan no septadas.
ING. VILMA REYES DE LA CRUZ
Microbiología General
Los hongos, son organismos que pertenecen al reino de los protistas superiores, son microorganismos eucarióticos. Carecen de clorofila, son aerobios obligados o facultativos. Son heterótrofos, es decir que requieren de compuestos orgánicos preformados como fuente de carbono. Habitan en medios con alta concentración de protones, pH 6,5 a 3,5. La mayoría de los hongos son saprofitos, sólo algunas especies
son
patógenas
para
el
hombre
y
los
animales.
Los hongos pueden cultivarse en el laboratorio. Comparándolos con las bacterias, sus requerimientos nutricionales son más simples.
MORFOLOGÍA DE LOS HONGOS
Existen
dos
tipos
de
hongos:
las
levaduras
y
los
mohos.
Las levaduras son hongos unicelulares, que se reproducen por gemación. Las levaduras son generalmente, células mayores que las bacterias, aunque este parámetro puede variar dependiendo de la bacteria y la levadura. Su tamaño es muy variable, este se encuentra entre 1 y 5 micras de ancho y 5 a 30 de largo. Son ovoides, en general, aún cuando no se descarta la posibilidad de hallarlas esféricas. Los mohos son hongos pluricelulares. Estos crecen formando un filamento llamado hifa, que puede alcanzar varios cm. de largo. Las hifas pueden ser tabicadas o continuas. Las tabicadas se dividen en una cadena de células mediante la formación de paredes transversas o tabiques. Las continuas carecen de dichos tabiques. Las hifas crecen por elongación de la punta ó ápice. Durante el crecimiento las hifas se entrelazan densamente constituyendo el micelio. Existe un micelio tabicado y uno continuo. Los tabiques presentan orificios que permiten el libre movimiento de citoplasma y sus núcleos. El organismo completo (micelio) es
ING. VILMA REYES DE LA CRUZ
Microbiología General una estructura cenocítica, esto significa que es una masa citoplasmática continua multinucleada. Hay dos tipos de micelio, de acuerdo a su función: Micelio vegetativo: formado por hifas que penetran en el medio de cultivo o difunden en la superficie absorbiendo nutrientes. Micelio aéreo: formado por hifas que se proyectan por encima de la superficie del medio hacia el aire y que presenta la estructura reproductora del hongo, que son las esporas, es el micelio de reproducción. Ciertos hongos, entre ellos varios patógenos para el hombre, presentan dimorfismo, es decir que pueden crecer como levaduras o como mohos, de acuerdo
a las condiciones ambientales.
MOHOS Microscópicamente, los mohos son organismos multicelulares, forman túbulos cilíndricos y ramificados denominados hifas, poseen un diámetro de 2 a 10 µm y crecen por extensión en longitud desde el extremo de un filamento, así se forma
ING. VILMA REYES DE LA CRUZ
Microbiología General una masa de hifas entrelazadas denominada micelio. En algunas especies de hongos las hifas están divididas en células por tabiques o septos que se forman con intervalos regulares durante el crecimiento filamentoso; cada tabique posee un poro septal que permite la continuidad citoplasmática entre una célula y otra del filamento. Otros especies carecen de tabiques septales por lo que se denominan hongos cenocíticos. En estas condiciones las hifas que penetran en el sustrato cumplen funciones de sostén y de absorción de nutrientes por lo que se denominan hifas vegetativas o de sustrato. Los filamentos del micelio que se proyectan por encima de la superficie del sustrato hacia el aire, constituyen hifas aéreas o reproductoras ya que contienen las estructuras reproductoras del hongo llamadas conidias o esporas.
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Microbiología General Macroscópicamente, los mohos se desarrollan en el laboratorio sobre la superficie de sustratos o medios de cultivo, formando colonias aéreas, de aspecto algodonoso, vellosas o pulvurulentas y de color variable.
LEVADURAS Microscópicamente las levaduras son organismos unicelulares, de forma esférica o elipsoidal, y tamaño variable de 3 a 15 µm de diámetro. La mayoría de las levaduras se reproducen por gemación o brotación, aunque unas pocas lo hacen por fisión binaria. El proceso de brotación o gemación se inicia por autolísis en un punto de la pared celular, lo cual produce un reblandecimiento localizado de la pared. Como consecuencia, se ejerce una presión interna en esta área haciendo que la membrana citoplasmática subyacente sea excretada a través de la pared reblandecida y se forme un pequeño brote o gema que progresivamente comienza a agrandarse. El núcleo de la célula madre se divide en dos y una copia es segregada hacia el brote. Se sintetiza nueva pared celular alrededor de la gemación y ésta se separa de la célula madre como blastoconidia, el ciclo se completa y puede repetirse. En el sitio de unión con la levadura madre, la célula hija presenta una cicatriz de nacimiento convexa, y la célula madre una cicatriz de formación de brote cóncava. La célula madre puede brotar, sucesivamente, desde varios puntos de su membrana; este
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Microbiología General fenómeno se llama multibrotación y es característico de pocos hongos patógenos. De este modo, cada levadura adulta tiene una sola cicatriz de nacimiento, pero puede poseer diversas cicatrices de formación de brote. Algunas especies de levaduras producen brotes que característicamente no se separan y se hacen alongadas; así la continuación del proceso de brotación forma una cadena de células unidas unas a otras por una constricción que semejan hifas, estas falsas hifas se denominan seudohifas.
Macroscópicamente las levaduras crecen en los medios de cultivo sólidos formando colonias opacas, de aspecto pastoso, color cremoso aunque algunas especies son característicamente pigmentadas.
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(Atlas de Micología Médica)
REPRODUCCIÓN
Los hongos pueden llevar a cabo dos mecanismos de reproducción: asexual y sexual.
Reproducción asexual: incluye la gemación, la fragmentación y la formación de esporas asexuales. La gemación es el mecanismo de reproducción de las levaduras y algunos hongos acuáticos. Aparece en la célula madre un brote o protuberancia a la cual pasa un núcleo. Ambas células que dan separadas por un tabique, y el brote es separado por ruptura. La espora pequeña que se genera se llama blastospora. Estas esporas se presentan
en
La fragmentación consiste
el en
que
las
género Candida hifas
se
segmentan
spp. dando
células
rectangulares de paredes gruesas, la espora que se genera se llama artrospora, característica del género Coccidioides spp, donde las artrosporas producen pequeños
apéndices
que
favorecen
la
dispersión.
Las esporas asexuales pueden ser clamidosporas, conidiosporas o conidios y esporangiosporas, son características para cada especie. Por ejemplo el género Penicillum spp presenta conidiosporas.
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Microbiología General Reproducción sexual: se lleva a cabo cuando faltan nutrientes en el medio o cuando las condiciones de crecimiento se vuelven adversas, en cambio si en el medio existen nutrientes y las condiciones son óptimas el hongo lleva a cabo la reproducción asexual. La reproducción sexual supone la unión de dos núcleos, proceso por el cual se forman las esporas sexuales, de las que existen tres tipos: zigosporas, ascosporas y basidiosporas. Las esporas de los hongos son en general mas sensibles a los agentes físicos y químicos que las esporas bacterianas, y entre las esporas de los hongos, las sexuales
son
más
resistentes
que
las
asexuales.
Existen hongos que sólo llevan a cabo la reproducción asexual, son los hongos imperfectos o fungi imperfecti.
ESTUCTURAS MICROSCÓPICAS
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Figura N° 1: Partes de un hongo (1) Hifa, (2) Conidióforo, (3) Fiálide, (4) Conidia, y (5) Septos La mayoría de los hongos crecen como hifas, estructuras cilíndricas y filiformes de 2 a 10 micrómetros de diámetro y hasta varios centímetros de longitud. Las hifas crecen en sus ápices; las hifas nuevas se forman típicamente por la aparición de nuevos ápices a lo largo de hifas preexistentes por un proceso llamado de ramificación, o —en ocasiones— el extremo apical de las hifas se bifurca, dando lugar a dos hifas con crecimiento paralelo.
HONGOS MÁS COMUNES EN FRUTOS ABSIDIAS: Tipo de hongos con colonia de crecimiento rápido, de micelio lanoso con la superficie gris y el reverso balnquesino, son hifas aceptadas parecidas a las de rhizopus, se diferencian de este porque los esporangioforos se encuentran sobre los estolones, entre los rizoides. En su fase sexual absidia forma cigosporangios.
ASPERGILLUS:
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Microbiología General El aspergillus es un género de alrededor de 200 hongos (mohos), y es ubicuo. Los hongos se pueden clasificar en dos formas morfológicas básicas: las levaduras y las hifas. El aspergillus es un hongo filamentoso (compuesto de cadenas de células, llamadas hifas), el tipo de hongos opuesto a las levaduras, éstas últimas compuestas de una sola célularedondeada. El hábitat natural del aspergillus son el heno y
el compostaje.
FUSARIUM:
Es un extenso género de hongos filamentosos ampliamente distribuido en el suelo y en asociación con plantas. La mayoría de las especies son saprofitas y son unos miembros relativamente abundantes de la microbiota del suelo. Las esporas del hongo son fácilmente reconocibles al microscopio por su forma de media luna o de canoa. Algunas especies producen micotoxinas en los cereales y que pueden afectar a la salud de personas y animales si estas entran en la cadena alimentaria.
PENICILLIUM:
Las especies de Penicillium son reconocidas por su denso cepillar como las estructuras de las espora-cojinetes. Los conidióforos son simples o ramificados y son terminados por los racimos de fialides en forma de botella. Las esporas (conidios) se producen en cadenas secas de las extremidades de los fialides, con la espora más joven en la base de la cadena, y son casi siempre verdes. La ramificación es una característica importante para identificar especie del Penicillium. Algunos no son ramificados y llevan simplemente un racimo de fialides en la tapa del estípite. Otros pueden tener un racimo de ramas, cada cojinete un racimo de fialides.
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Asa de col
Muestra infectada (cocona)
Algodón
Porta y cubre objeto
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Placas con agar sabouroad
Mechero
Estufa
METODOS:
Para captar hongos de un medio ambiente:
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AISLAMIENTO DE HONGOS DEL MEDIO AMBIENTE
Fijamos un lugar determinado del ambiente que queríamos analizar.
por ultimos llevamos al microscopio para ver que tipo de microorganismos se formo
colocamos en un ambiente de 5 a 10 minutos para captar bacterias y luego meter a la estufa
luego del tiempo incubado observamos los resultados
la temperatura de la estufa sera de 25°a 30°
luego se cubre con papel craf y lo incubamos en la estufa durante una semana
Para sembrar hongos de el agar preparado:
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cultivar en una camara humeda y esterilizada
separamos un trozo de agar rectangular para juntar con nuestra muestra
Colocamos la muestra en una lamina de porta objeto
Depositamos con el asa de Kolle la muestra del hongo a estudiar
Luego agregamos un poco de agua destilada en la placa.
Envonvemos con papel craf luego llevamos a la estufa por una semana
Observamos la muestra al microscopio para ver que tipo de microorganismo es .
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MUESTRA
OBESERVACI
GENER
OBSERVACI
ON DIRECTA
O
ON CON EL
GENERO
GRAFICO
MICRICO CULTIVO DURAZNO
NARANJA
Hifas no
MUCOR
Hifa no
septadas,
septada,
esporangio
completas
completo, color
color marrón
marrón oscuro
oscuro
Hifas septadas
-
incompleta
Se pudieron
MUCOR
PENICILIUM
observar solo hifas
TOMATE
COCONA
esporas
Hifas
ASPERIGUILU
septadas
S
Hifas no
ALTERNARÍA
septadas
septadas
SP
Completas
completas
color naranja
color naranja
Hifas no
-
-
oscuro, con esporas MANZANA
esporas
-
Hifas
ALTERNARIA
septadas completas color naranja
ING. VILMA REYES DE LA CRUZ
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Discusiones: Según
el USDA (servicio de inocuidad e inspección de los alimentos –
departamento de agricultura de los estados unidos) los hongos comúnmente encontrados
en
las
frutas
son:
Alternaria,
Aspergillus,
Botrytis,
Cladosporium, Fusarium, Geotrichum, Monilia, Manoscus, Mortierella, Mucor, Neurospora, Oidium, Oosproa, Penicillium, Rhizopus y Thamnidium. Lo cual en práctica realizada pudimos encontrar a estos hongos como: MUCOR, PENICILIUM, ASPERIGUILUS y ALTERNARÍA, que se muestran en los resultados.
Con respecto a los resultados obtenidos a los hongos incubados en la según la revista científica BIOCIENCIAS Enero 2011 Vol. 1 Núm. 2 Año 2 Páginas 42 a 53 la temperatura para que el MUCOR, PENICILIUM, ASPERIGUILUS y ALTERNARÍA crezcan es la de esta entre 25-28.5°C por lo cual estamos de acuerdo porque las muestras crecieron a 25 ºC.
RESULTADOS DEL SEGUNDO CUADRO
ING. VILMA REYES DE LA CRUZ
Microbiología General DISCUSIONES: Los hongos pueden crecer en las áreas menos pensadas, los únicos requisitos para ellas son: ambiente condiciones cálido, mojado y húmedo, además que éste presente sustratos. Cada uno de los cuales presenta características determinadas desde ausencia o presencia de hifas, septos en ellas; cuerpos fructíferos o ausencia de ellos; esporas; etc. Todas estas incapaces de ser apreciadas a simple vista, que, sin embargo; son posibles de observar a través del microscopio y con ello diferenciar un tipo de hongo de otro. Según el cuadro anterior podemos decir que en el ambiente del fundo y del bus de Jauja se encuentran colonias de hongos de la Beauveria, lo cual es un claro indicador de lo vertido por el autor en el aspecto de que los hongos pueden crecer en áreas menos pesadas pero que cumplan con los requisitos de ambiente; condición cálido, mojado y húmedo, además que éste presente sustratos.
Entre las décadas de los años 70 y 80 hubo un incremento de los trabajos relacionados con los hongos entomopatógenos y sus potencialidades en la lucha biológica. Como ejemplos pueden citarse los de Fassiatiovaet al. (1978), Montes (1978), Montes & Broche (1978), Alayo&Blahutiak (1982), Alayo& Mercado-Sierra (1885), Mercado-Sierra &Alayo (1986) y
Mercado-Sierra
et al. (1988) donde se registran especies de
Acremonium, Aschersonia, Aspergillus, Beauveria, Cordyceps, Metarhizium, Hirsutella y Verticillium, además de describirse en el último trabajo una nueva especie de Clathroconiumsobre un opilión colectado en una cueva en la provincia de Sancti Spíritus(Cuba).
ING. VILMA REYES DE LA CRUZ
Microbiología General Según
(Hoog&
Guarro,
1995)
La
beauveriaes
un
hongo
entomopatogenosque se encuentra de manera natural como pueden ser en lugares oscuros, húmedos formando colonias que a simple vista tienen copitos de algodón. La temperatura es uno de los factores abióticos importantes para los hongos entomopatógenos, ya que puede afectar la germinación de las esporas,
el desenvolvimiento
y
penetración
del
tubo germinativo. La
temperatura óptima de Beauveria es de 25ºC. Por otra parte otro factor ambiental importante son los valores de humedad, que en el proceso de producción de Beauveriabassiana oscilan entre los 30 y 80%, lo cual no afecta la germinación y patogenicidad de los hongos. Comprobando lo vertido por este autor podemos constatar que a la temperatura de 25ºC en la incubadora de hongos, estos crecieron favorablemente, por otro lado la humedad como bien se explica no afecta, pues bien al poner en la incubadora se agrego un poco de agua en la placa para que estos puedan desarrolarse y si efectivamente no importa la cantidad de humedad pues esto fue totalmente comprobado.
ING. VILMA REYES DE LA CRUZ
Microbiología General
EN HONGOS DE FRUTAS
EN DURASNO SE ENCONTRO EL HONGO MUCOR
EN
LANARANJA
SE
DETERMINO
QUE
SE
ENCUENTRA
EL
HONGOPENICILIUM
EL TOMATE SE ENCONTRO EL HONGO ASPERIGUILUS
EN LA MUESTRA DE COCONA ALTERNARÍA SP
EN LA MUESTRA DE MANZANA SE ENCONTRO ALTERNARIA
EN LOS HONGOS DEL AMBIENTE
EN LA MUESTRA DEL AMBIENTE DEL BUS DE JAUJA SE LOGRO ENCONTRAR BEAUVERIA
EN
LA
MUESTRA
EN
AMBIENTE
DEL
FUNDO
ENCONTRAMOS
ABSIDIAS, ACREMONIUM Y TAMBIÉN BEAUVERIA.
EN LA MUESTRA DEL AMBIENTE DEL INTERNET SE ENCONTRO ALTERNARIA
Y
HUBO
OTRAS
COLONIAS
QUE
NO
FUERON
RECONOCIDAS.
El estudio de los hongos, tiene una gran importancia; ya que desempeñan un papel en la descomposición de materia vegetal de origen terrestre que cae al agua, influyendo de manera decisiva en el transporte de materiales entre el medio terrestre y el acuático.
El estudio de los hongos en el ambiente ha sido muy importante para la industria debido al papel que desempeñan.
ING. VILMA REYES DE LA CRUZ
Microbiología General
http://www.saberdeciencias.com/index.php/apuntes-de-micologia/160micologia-hongos-morfologia-reproduccion
Laura Rosio Castañón Olivares. Unidad de Micología. Yolanda García Yáñez. Laboratorio de Desarrollo Docente. Manuel Gutiérrez Quiroz. Laboratorio de Inmunoparasitología. Departamento de Microbiología y Parasitología Facultad de Medicina, UNAM.
ATLAS DE MICOLOGÍA MÉDICA
ING. VILMA REYES DE LA CRUZ