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EXPERIMENTO No 1 DIVISIÓN CELULAR: MITOSIS Todos los seres vivos, uní- y

pluricelulares tienen como misión

fundamental

la de

reproducirse preservando sus características esenciales a través de las generaciones. Los fenómenos que tienen lugar durante la reproducción celular corresponden a una de las etapas del proceso conocido como ciclo celular Dentro de este ciclo, la mitosis es la etapa durante la cual una célula da origen a dos células hijas con igual dotación de cromosomas. OBJETIVOS: ♦ Valorar la importancia de la división celular en el desarrollo, el crecimiento y la reposición de Células en tejidos desgastados. OBJETIVOS ESPECIFICOS: ♦ Ejecutar adecuadamente la técnica de laboratorio en la preparación de placas permanentes de mitosis así como delos reactivos y colorantes empleados y conocer las diferentes fases que componen la mitosis. MATERIALES: Microscopios

Porta objetos

Cubre objetos

Bisturí o cuchilla

Tijeras

Pinzas

Raíz de cebolla

Solución de carnoy

Ácido clorhídrico al 10%

Acetocarmín

Esmalte PROCEDIMIENTO: a. Cinco o seis días antes de comenzar los experimentos, escoja un bulbo de cebolla fresca y elimine mediante un raspado con una cuchilla, las raíces secas que se hallan en la base del bulbo. En un frasco boca ancha o un vaso desechable coloque la cebolla. Vierta agua en el frasco, hasta tocar la base de la cebolla. Mantenga la base de la cebolla húmeda y cambie el agua diariamente. b. En la práctica. Cuando las raíces nuevas alcancen 3 cm. Aproximadamente de longitud, extraiga la cebolla del recipiente y corte el último centímetro de la punta. c. Deposite estas raíces en la solución fijadora Carnoy (3 metanol: 1 ácido acético) durante 20 minutos. d. Traslade las raíces a un recipiente

que contiene ácido clorhídrico al 10% durante 10

minutos. e. Coloque las raíces en un recipiente con agua y lávela por cinco minutos. f. Traslade las raíces a la luna de reloj y añada Orceina 1, caliente sin hervir, repetir esto proceso 2 veces eliminar el exceso de colorante con papel toalla. Luego poner las raicillas con un pincel al portaobjeto, añada 1 gota de orceina B y ponga una laminilla cubreobjetos Luego haga una leve presión con el dedo hasta conseguir una extensión del preparado.

g.-. Observe con el objetivo de menor aumento para localizar las figuras mitóticas, y posteriormente con el objetivo de mayor aumento para discriminar detalles.

Cuestionario de prácticas 1. ¿Cuál es la función de la solución fijadora y del HCl? 2.- ¿Por qué se encuentra mayor número de células en interfase que en división en las preparaciones de raíz de cebolla? 3. Cuantos cromosomas tiene la cebolla ¿Cuántas cromátidas recibe cada polo en anafase? 4. ¿Cuántas cromátidas tiene uno de los cromosomas de cebolla en telofase? 5. Un individuo diploide y homocigótico AA, ¿Cuántas copias del alelo A tiene en el periodo G1 de la interfase y cuántas en metafase? 6. Un individuo diploide y heterocigótico Aa, ¿Cuántas copias del alelo A tiene en el periodo G1 de la interfase y cuántas en metafase? 6. ¿Existe alguna diferencia entre endomitosis y endorreduplicación?

7.¿Por qué se bloquea la continuación de la mitosis en metafase en especies que presentan haplocromosomas?. 8.- ¿Qué diferencias existen entre la mitosis de una célula vegetal y una animal?

EXPERIMENTO 2: MEIOSIS EN CÉLULAS DE LISTONCILLO Introducción: En eucariontes la reproducción sexual está asociada a un proceso especial de división del núcleo llamado MEIOSIS. En este fenómeno de división celular existe una profase larga, durante la cual los cromosomas homólogos se aparean longitudinalmente (sinapsis) e intercambian segmentos de cromatina o material genético por un proceso llamado entrecruzamiento. La meiosis es un mecanismo que distribuye las unidades hereditarias (Genes) permitiendo también su recombinación aleatoria independiente en grado variable. Objetivo: Observar e identificar las distintas etapas de la meiosis. Material por grupo: Microscopio compuesto cubreobjetos

Pipetas Pasteur Lámpara de alcohol

Navajas de afeitar

Porta y

Agujas y pinzas de disección

Cajas de Petri Reactivos

Ácido acético al 45 %

Acetocarmín al 1 %

Etanol al 70 % Material biológico:

Inflorescencias de listoncillo

Procedimiento: 1.- Fije con anticipación inflorescencias de listoncillo en solución Farmer. 2.- El día de la práctica transfiera estas a una caja de Petri que contenga Etanol al 70 %. 3.- Utilice sus pinzas para tomar 3 florecillas. 4.- De cada florecilla separe las anteras y colóquelas en un portaobjetos limpio, cubriéndolas con gotas de acetocarmín al 1 % durante 15 minutos. 5.- Corte con su navaja las anteras transversalmente, presiónelas para exprimir su contenido. 6.- Posteriormente remueva las anteras y cubra los granos de polen con gotas de colorante y ácido acético al 45 %. 7.- Enseguida coloque el cubreobjetos sin presionar y caliente la preparación levemente utilizando su lámpara de alcohol evitando que el líquido hierva. 8.- Observe sus preparaciones al microscopio Solución

de Farmer: El fluido de Farmer es una solución fijadora anhidra que causa rápida

deshidratación y fijación. Como con el fijador de Carnoy, el rápido cambio de agua en el tejido puede causar graves alteraciones en los tejidos. Sin embargo estos dos fijadores son

excelentes para investigación citológica.( Etanol abs: 75 ml Y ácido acético glacial: 25 ml) Cuestionario: 1.- ¿Por qué puede observar la meiosis en las inflorescencias y no en otros tejidos? 2.- Durante la primera profase de la meiosis ocurre un evento de gran relevancia desde el punto de vista genético. Descríbalo. 3.- Explique en detalle las etapas de la meiosis. Esquematice 4.-Dibuje cada una de la fases de la meiosis2-¿Qué es un bivalente? ¿En qué fase o fases se observa?. 5-¿Qué diferencia existe entre una anafase I y una anafase II? 6.-La cebada tiene 2n = 14 cromosomas, ¿cuántos cromosomas tiene una célula de cebada en una metafase de una mitosis, en una metafase I y II de una meiosis? 7.-Si tiene una preparación en la que observa células anafásicas en las que se separan cromátidas ¿cómo sabrá si se trata de una anafase de una mitosis o de anafase II de una meiosis?