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Jesús López Castillo, Rigoberto Cortez granados, Marisel Sanchez Rivera Licenciatura en Biotecnología BUAP Facultad de Ciencias Biológicas, BUAP 1. Resumen En la práctica se realizó la demostración de la presencia de cuerpo cetónicos en dos diferentes muestras de orina, en dos tubos de ensayo cada uno con una muestra diferente, se agregó reactivo de Imbert, hidróxido de amonio y se observó los resultados esperando el cambio de color en las muestras y la formación de un anillo que indicaría la presencia de los cuerpos cetónicos. 2. Introducción Cuando la glucosa no está fácilmente disponible en el organismo a consecuencia de no existir un aporte simultáneo de glucosa por la alimentación, es estos casos el hígado se empobrece en glucógeno y la glucogenólisis es incapaz de compensar el desgaste periférico de glucosa. Sucede lo mismo en el ayuno prolongado; un mecanismo de adaptación al ayuno es la formación de cuerpos cetónicos sintetizados a partir de los ácidos grasos y producidos únicamente en el hígado (Molina, Vicente;, 2012); estos se utilizan como fuente de energía [1] En caso de ayuno hay cambios que requieren de la adaptación del organismo y esto trae como consecuencia modificaciones en los patrones metabólicos y por lo tanto en las moléculas utilizadas como combustibles. Durante las primeras etapas del ayuno se realizan cambios hormonales, se deja de liberar insulina y se aumenta la liberación de glucagon, lo que ocasiona un aumento en la Glucogenólisis, estimulación de la Lipólisis, inhibición de la síntesis de triacilglicéridos, aumento de la Beta oxidación y producción de cuerpos cetónicos (Cetogénesis), si el ayuno es prolongado se presenta un desequilibrio entre el metabolismo de

carbohidratos y el de lípidos lo que ocasiona que los niveles de cuerpos cetónicos se eleven en sangre y sean eliminados por orina donde son detectados fácilmente.[2] 3. Metodología 1. En dos tubos de ensaye se colocaron 2.5 ml de orina humana (En el primer tubo con orina de persona diabética y en el segundo con orina de persona no diabética) y se agregaron 10 gotas del reactivo de Imbert. 1. Se agregó 0.5 ml de Amoniaco o hidróxido de amonio para obtener una reacción zonal. 1. Cuando la reacción es positiva, en el punto de contacto aparece un anillo violeta cuya intensidad es proporcional a la cantidad de cuerpos cetónicos.

4. Discusión de resultados Al tomar dos muestras de orina de dos pacientes en circunstancias diferentes (1-Orina de paciente no diabético; 2-orina de paciente diabético), al someterlos a la prueba de Imbert se obtuvo una característica diferente, en la muestra 1 se notó una coloración amarillo claro, mientras que en la muestra 2, hubo formación de un anillo morado-lila en la parte superior de la muestra. Dado que se trata de una reacción colorimétrica se debe tomar en consideración que el ferropentacianuro con el derivado isonitado de la acetona, en presencia de nitroprusiato, la acetona da lugar a un compuesto color violeta o rojizo, colores característicos de reacciones con compuestos de Fe, a su vez al agitar se observaron precipitados violetas, sales resultado de la reacción y tal como se espera esto indica una mayor concentración de cuerpos cetónicos en la orina de la persona diabética, dicho resultado era el esperado ya que el desarreglo de su metabolismo de carbohidratos por afecciones en la producción o la calidad de insulina, tiende a depender más que una persona común del catabolismo de ácidos grasos, y como consecuencia la formación de cuerpos cetónicos .

1

2

5. Conclusiones Se demostró la presencia de los cuerpos cetónicos, como lo muestran los resultados, en la muestra de orina de una persona con diabetes (tubo numero 2), se observó la formación de un anillo, el cual se esperaba, dado las reacciones que ocurren. En el tubo número 1, aunque la muestra se obtuvo de una persona en ayunas (algo que favorece la formación de cuerpos cetónicos) solo se observó un cambio de color amarillo, esto puede deberse a la alimentación que lleva la persona no alta en proteínas y al estado de salud, ya que las comparaciones entre una persona sana y una con diabetes se observan resultados muy contrastantes. 6. Cuestionario ¿Qué nombre recibe la presencia de cuerpos cetónicos en sangre y orina? En términos generales el aumento tanto en sangre como en orina se le llama cetosis, pero también puede llamarse en sangre (cetonemia), cuando se supera la capacidad de los riñones para excretar cetonas, esta se acumula en sangre y en orina (cetonuria), cuando la capacidad de los tejidos para poder utilizar los cuerpos cetónicos es superada, el exceso se excreta en orina (Graff, 2007). ¿En qué condiciones metabólicas se acumulan cuerpos ctónicos? Este tipo de moléculas es producido en el hígado principalmente cuando fuentes como la de los carbohidratos no están disponibles, están siempre presente en sangre, pero estos aumentan su nivel cuando existe un ayuno prolongado y el ejercicio. Puede estar presente en sangre de las mujeres embarazadas y en sangre de los recién nacidos (Laffel, 1999), otra de las causas de la presencia de estos es la diabetes mellitus. ¿Cuál es el fundamento de la prueba de Imbert?

Existe una formación de ferropentacianuro con el derivado isonitado de la acetona, en presencia de nitroprusiato, la acetona da lugar a un compuesto

coloreado

(color

violeta)

llamado

ferropentacianuro.

6. Bibliografía [1] Ruíz Liard A. y Latarjet M. Páncreas. En: Adrián Pró E. Anatomía Humana Tomo 2. 4ª ed. Buenos Aires: Panamericana. 2006. p. 14101421. [2] M. J. Noriega Borge (2000): Principios de Bioquimica. Editorial: Masson Contretas, E. V. (15 de octubre de 2003). bioquímica y biología molecular en linea. Obtenido de http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/reacciones %20krebs6.html