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• Danny Daniela Ramos

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METODOS GENERALES DE ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AGUA NUMERO MÁS PROBABLE Angelly Garrido, Jesús Díaz, Danny Ramos, Darluvin Hernández Universidad de Córdoba (Colombia), Facultad de Ciencias de la Salud, Bacteriología Análisis microbiológico de aguas

Introducción La determinación de microorganismos coliformes totales por el método del Número más Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo microbiano de fermentar la lactosa con producción de ácido y gas al incubarlos a 35°C durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales biliares. Esta determinación consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase confirmativa. En la fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de sodio el cual permite la recuperación de los microorganismos dañados que se encuentren presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa como fuente de carbono. Durante la fase confirmativa se emplea como medio de cultivo caldo lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo permite el desarrollo de aquellos microorganismos capaces de tolerar tanto las sales biliares como el verde brillante. La determinación del número más probable de microorganismos coliformes fecales se realiza a partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva y se fundamenta en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir gas cuando son incubados a una temperatura de 44.5°C por un periodo de 24 a 48 h. Finalmente, la búsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de los tubos positivos de caldo EC, los cuales se siembran por agotamiento en medios selectivos y diferenciales y posteriormente realizando las pruebas bioquímicas básicas a las colonias típicas.

Objetivos   

Adquirir los conocimientos relacionados con la determinación de coliformes totales y fecales por el método número más probable. Evaluar la calidad de muestras de agua mediante la búsqueda de microorganismos coliformes totales y coliformes fecales. Diferenciar los organismos coliformes totales de los microorganismos coliformes fecales.

Equipo y Materiales Incubadora a 35 0C+/- 2 OC Pipetas bacteriológicas de 1 mL estériles Gradillas Tubos tapa rosca de 18 x 150 y 20 x 180mm Caldo Lauril Sulfato Doble concentración Caldo Lauril Sulfato simple concentración Caldo Brilla Agua destilada estéril

Resultados 1. Se observó la presencia de turbidez y producción de gas en un solo tubo de la primera serie en Caldo Lauril sulfato doble concentración, dando un resultado positivo presuntivo e indicando la presencia de microorganismos coliformes totales en la muestra de agua de río. Se procedió a realizar la re-siembra en los medios EMB para confirmar coliformes totales y en los medios SIM y Caldo BRILLA para confirmar coliformes fecales.

2. Luego esperar el tiempo el tiempo establecido de incubación para cada medio de cultivo, se observó crecimiento en el Medio EMB con colonias verde brillante fermentadoras de lactosa confirmando la presencia de coliformes totales. En el Medio SIM mostró resultado positivo para la prueba de indol luego de agregar el reactivo de kovacs, en el Caldo BRILLA se evidenció la presencia de gas y turbidez. Estos resultados nos confirman la presencia de Coliformes fecales en la muestra de agua de rió. Según la tabla de NMP el crecimiento en un solo tubo de la primera serie nos da un algoritmo igual a 1-0-0 y el cual nos da un índice de 2, que al ser multiplicado por nuestro factor de dilución 1:1000, el resultado es igual a 2.000 NMP de Coliformes Totales en 100 mL

Conclusión Podemos concluir que la muestra de agua río no cumple con las características sanitarias para consumo humano según los resultados obtenidos iguales a 2.000 NMP de Coliformes Totales en 100 mL y presencia de coliformes fecales que me indican que el agua ha sido expuesta contaminación fecal. A pesar de ser agua de río que nunca ha sido tratada y se encuentra expuesta a múltiples factores que podrían ser tomados como contaminantes, no presenta una exagerada carga microbiana teniendo en cuenta que solo hubo crecimiento en un tubo y por los resultados obtenidos en NMP.

Bibliografía INVIMA. Manual de Técnicas de Análisis, para Control de Calidad Microbiológico de alimentos para Consumo Humano. 1998. ESCOBAR BEATRIZ. Manual de técnicas de Análisis Microbiológico de Alimentos. 1993 Técnicas para la enumeración de microorganismos: analisis microbologico del agua y de otras diversas muestras. (02 de 2012). Obtenido de http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/P7_EnumeracionMicroorganismos_19616.pd f