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UNIVERSIDAD DE SANTANDER –UDESFACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS, FÍSICAS Y NATURALES BIOLOGÍA CELULAR -16142

Laboratorio 2: MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

Objetivos  

Identificar las partes y funcionamiento del microscopio óptico compuesto. Identificar las diferencias estructurales en diversas formas eucariotas.

Materiales     

Microscopio compuesto Portaobjetos Cubreobjetos Elementos de bioseguridad Cada estudiante debe traer: o Agua estancada o Fruta en descomposición (guayabas, maracuyá, limones, naranjas o mandarinas)

Introducción El estudio de la biología celular es inseparable del desarrollo del microscopio. En la segunda mitad del siglo XV, Da Vinci insistió en la importancia del empleo de las lentes para observar objetos pequeños. Durante el siglo XVII, los progresos de la microscopía de luz permitieron adelantos paralelos de la biología celular. Estos nuevos descubrimientos fueron obra principalmente de Antoni Van Leeuwenhoek, el cual construía sus propios microscopios y cortaba y pulía sus lentes. En las notas que publicó Van Leeuwenhoek se encuentran descripciones de protozoarios, bacterias y espermatozoides. También había observaciones sobre células musculares, descripciones histológicas de músculo, nervio, piel y dientes. Robert Hooke utilizó un microscopio semejante al de Van Leeuwenhoek para estudiar las células de la superficie de una hoja, y las paredes celulares de las células del corcho. En el siglo XVIII hubo poco avance en el microscopio de luz. En el siglo XIX, se empleó el microscopio de luz intensamente, para el estudio de la estructura celular, tanto animales como vegetales. Los detalles microscópicos de la célula se hicieron más evidentes al mejorar la construcción y el diseño del microscopio. Las lentes acromáticas se remontan a 1830; alrededor de 1870, existían lentes de inmersión para mayores aumentos. En 1878, Abbé construía el primer microscopio moderno, con la adición ulterior de un condensador debajo de la platina, como última mejora importante del microscopio ordinario de laboratorio. Los microscopios son aparatos importantes para el estudio de las células, pues tienen las características del aumento y del poder de resolución. El microscopio permite resolver, o sea distinguir, dos objetos muy vecinos uno de otro. Mientras menor sea la distancia que puede reconocerse o medirse entre dos puntos en un campo microscópico, mayor es el poder de resolución. La capacidad del microscopio, de aumento y resolución, depende del tipo de luz que se emplea. En la actualidad existen varios tipos de microscopios, el más sencillo conocido como microscopio simple, consta de una sola lente convergente también conocida como lupa de capacidad amplificadora muy reducida. El aparato más utilizado es el microscopio compuesto u óptico, éste consta de dos sistemas de lentes, uno de ellos amplía la imagen del objeto observado, que es captada y nuevamente ampliada por el segundo sistema, consiguiendo con esto un mayor poder de resolución. El poder de resolución es la capacidad para distinguir dos puntos muy próximos, de modo que puedan verse

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Laboratorio 2: MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO separados. El microscopio óptico consta de tres sistemas: el mecánico, el óptico y el de iluminación, cada uno de los cuales presentan una función y cuidados específicos. Al ser el microscopio un aparato de precisión, requiere que se maneje y cuide de manera muy especial y rigurosa. PRESABERES: responda las siguientes preguntas.          

¿Cuáles son los sistemas que conforman a un microscopio? Explique la función de cada parte que conforma cada sistema. ¿A qué se llama poder de resolución? ¿Cómo se determina el número de veces que se aumenta una imagen del objeto que observamos? Explique cómo se puede tener una buena iluminación en una observación. Resuma los cuidados fundamentales que se deben tener al manejar un microscopio. Qué función tiene el aceite de inmersión cuando se observa con el objetivo de l00x? Explique cómo se debe enfocar una preparación a menor y mayor aumento. ¿Cuál es la importancia de la diferenciación celular? ¿Cuál es la importancia de los organismos estudiados desde el punto de vista de la Bacteriología y Laboratorio Clínico y la Microbiología Industrial? Cite ejemplos (mínimo dos de cada uno.

RECUERDE QUE EL PREINFORME ES UN MAPA MENTAL

Recomendaciones de trabajo 1. Lea cuidadosamente el texto de cada práctica antes de realizar el laboratorio 2. Debe revisar el microscopio antes de empezar la práctica. Sí detecta alguna anormalidad avise inmediatamente al docente para registrar el desperfecto. 3. Cuide el microscopio, evite que los colorantes manchen los lentes de los objetivos, limpie estos con papel especial antes y después de cada práctica. 4. Racionalice el uso de los reactivos, debido a que ellos son costosos 5. Percátese de la limpieza del material que va a utilizar en la práctica. Vigile que esté limpio. 6. Atienda las normas de precaución universal para reactivos cáusticos y/ o corrosivos. Solicite ayuda al docente, sí tiene dudas en la manipulación de los mismos.

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Microscopio y sus partes Para ampliar sus conocimientos sobre el microscopio y sus partes visite los siguientes link, estudie y analice detenidamente: http://recursos.cnice.mec. es/biosfera/alumno/1ESO/ clasica/microsco.htm

a) Zona mecánica: Revolver: contiene los sistemas de lentes Platina: lugar donde se deposita la preparación Soporte: mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo Brazo: soporte vertical mecánico Base: base metálica del microscopio Tornillos: macrométrico y micrométrico Macrométrico: movimiento rápido, mueve la platina hacia arriba y abajo Micrométrico: movimiento lento, para un enfoque fino y nítido

b) Zona óptica: Ocular: situado cerca al ojo del observador y amplía la imagen del objetivo Objetivo: situado cerca a la preparación pueden estar atornillados o roscados al revolver (4x, 10x, 40x 100x) y se emplean de acuerdo a la preparación observada Condensador: su función es concentrar los rayos luminosos sobre la preparación Diafragma: regula la cantidad de luz que llega a la muestra Fuente luminosa: dirige los rayos luminosos hacia el condensador

Manejo del microscopio óptico a. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente. b. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas. c. Comenzar la observación con el objetivo de menor aumento 4x (ya está en posición) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparación es de bacterias.

Para realizar el enfoque: a. Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, esto evita incrustar el objetivo en la preparación así como el riesgo de dañar el montaje o las partes del microscopio.

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Laboratorio 2: MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO b. Observar a través de los oculares, separando lentamente el objetivo de la preparación con el macrométrico y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino.

Pasar al siguiente objetivo de aumento. La imagen debe estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior o de menor aumento y repetir la operación desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil que se rompa la preparación rayando la lente.

Desarrollo experimental Para iniciar identifique en el microscopio compuesto, las partes que se mencionaron anteriormente y revise las funciones de cada una de ellas y realice el montaje de cada una de las preparaciones. 1. En un portaobjetos limpio y seco coloca una gota de agua estancada (para las preparaciones secas ubicar agua NaCl 0,85% o azul de lactofenol), cubra con el cubreobjetos y observa al microscopio, retira el exceso de agua con el papel filtro. 2. Observa primero con el objetivo de menor aumento (4X ó 10X) y por último con el objetivo de (40X). 3. Para observar correctamente, debes tener la muestra a una distancia de aproximadamente de 1 cm. o 1.5 cm. del objetivo, enciende la fuente de luz del microscopio procurando que la muestra quede centrada en el rayo de luz que pasa por la platina. Posteriormente ve acercando lentamente la platina hacia el objetivo con el tornillo macrométrico, siempre observando a través de los oculares hasta que la imagen sea clara, y finalmente con el tornillo micrométrico se enfoca más finamente y aclarando mejor la imagen de lo observado. En caso de no poder enfocar pida ayuda de su profesor. 4. En los espacios de abajo, dibuja como se observa su preparación en los diferentes objetivos.  4X, 10X , 40X 5. Repite las operaciones con las demás muestras, cuando realices el cambio de objetivo no cambies la iluminación en forma inmediata, hasta que primero observes con la iluminación inicial. 6. En esta práctica no vamos a emplear el objetivo 100 x.

Imágenes obtenidas en la práctica

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Laboratorio 2: MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO Muestra 1: 4X

Muestra 1: 10X

Muestra 1: 40X

Muestra 2: 4X

}

Muestra 2: 10X

Muestra 3: 4X

Muestra 3:40X

Muestra 2: 40X

Muestra 3: 10X

Realizar lo mismo para n muestras

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Resultados y conclusiones:  

Presente en el informe las imágenes realizadas durante la práctica de laboratorio, Describa lo que observo e investigue al respecto en textos de biología Celular. Es importante citar la fuente bibliográfica de acuerdo a las normas Vancouver

Referencias Bibliográficas 

KARP, Gerald. Biología celular y molecular: conceptos y experimentos. McGraw Hill interamericana; 2014. ISBN 978-607-15-1137-9.

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COOPER, G. M., HAUSMAN R. E,. La Célula. Capítulo 1. Visión global de las células en investigación celular. Marbán. 6 Ed. España. 2014. Pag. 3 – 13.

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PANIAGUA GOMEZ-ALVAREZ, Ricardo. BIOLOGIA CELULAR (3ª ED.) (EN PAPEL). S.A. MCGRAW-HILL / INTERAMERICANA DE ESPAÑA, 1999. ISBN 9788448155926

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