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• Hector Tantalean Altamirano

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INFORME

PROF: EDWIN F. PAREDES LOZANO. ESPECIALIDAD: FARMACIA/VI. INTEGRANTES: Manay Quispe Carmen. Menor castro Magali.

AÑO:

2012

DETERMINACION DE GLUCOSA EN SANGRE I.- INTRODUCCION . La Glucosa es un azúcar que es utilizado por los tejidos como forma de energía al combinarlo con el oxígeno de la respiración. Cuando comemos el azúcar en la sangre se eleva, lo que se consume desaparece de la sangre, para ello hay una hormona reguladora que es la insulina producida por el páncreas (islotes pancreáticos). Esta hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los tejidos y sea utilizada en forma de glucógeno, aminoácidos, y ácidos grasos. Cuando la glucosa en sangre está muy baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagón que hace lo contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre.

Los valores normales son entre 60 y 110mg por decilitro. En los niños pequeños se aceptan valores de 40 a 100 mg/dl. Los valores más bajos de 40-50 mg/dl se consideran bajos (hipoglucemia). Los valores más altos de 128 mg/dl se consideran altos (hiperglucemia). INSULINA: Hormona secretada por las células beta del páncreas endocrino (islotes de Langerhans). Se le considera hipoglucemiante, ya que cuando los niveles de glucosa en sangre se incrementan también se incrementa la insulina, esto se conoce como repuesta directa a la hiperglicemia. GLUCAGON: es producida por las células alfa de los islotes de Langerhans en el páncreas endocrino. Es una hormona hiperglicemial ya que se incrementa en la sangre al disminuir el nivel de glucosa, cuando llega al hígado por la vena porta causa (degradación de glucógeno para obtener glucosa). Cuando la necesidad de glucosa es muy grande en nuestro organismo y no se dispone de la suficiente cantidad en la dieta, se puede tomar glucosa mediante la gluconeogénesis (obtención de glucosa a partir de las vías alternativas como: lactato aminoácidos glicerol, ácidos grasos, cuerpos cetonicos, etc.). Este proceso tiene lugar en las células hepáticas, células renales, células adiposas, y en el tejido muscular. También es importante diferenciar el concepto de gluconeogénesis que es la formación de glucosa, en general.

II.- FUNDAMENTO.

La glucosa es la principal fuente de energía en los seres vivos. Por tal razón es un metabolito fundamental en los procesos biológicos. La determinación cuantitativa de este bio compuesto, ha sido objeto de muchos estudios y la literatura ofrece diversas técnicas de análisis que varían de acuerdo con diferentes factores como la naturaleza de la muestra, los contenidos de glucosa y la viabilidad experimental. Uno de los métodos, utilizado actualmente a nivel clínico y de investigación, para valorar glucosa en el plasma y/o suero sanguíneo es el enzimático calorimétrico desarrollado por Bayer, conocido SERA - PAK PLUS para glucosa, en el que la glucosa presente en el suero o plasma sanguíneo, es transformada por la glucosa oxidasa (GOD) en ácido glucónico y peróxido de hidrógeno (H2O2), el cual en presencia de peroxidasa (POD) oxidada el cromógeno 4-aminoantipirina / fenol convirtiéndolo en un compuesto de color rojo que absorbe entre 492 y 550 nm, con un pico de máxima absorbancia a 500nm.

III.- OBJETIVOS. 

Aprender a medir la glucosa en sangre utilizando el espectrofotómetro.



Que el alumno determine las concentraciones de glucosa en suero en condiciones de ayuno y postprandial con el método de la glucosa oxidasa, para explicar los resultados obtenidos con los valores normales de referencia de la técnica para poder sugerir una posibilidad diagnostica.

IV.- MATERIALES. Dos tubos de ensayo por cada grupo. Gradilla. Jeringa de 3ml. Aguja nº 21. Liga. 3ml de sangre. Centrifugadora. Micropipeta. Puntas. Equipo de baño maría. Estufa. Cubetas. Espectrofotómetro.

V.- PROCEDIMIENTO. Alistar todos los materiales y equipos correspondientes o necesarios para dicha practica. Marcar el tubo de ensayo con el nombre del alumno que se va extraer la muestra. Extraer 3ml de sangre con una jeringa de 3ml y una aguja nº 21 y poner en el tubo de ensayo que corresponde y dejar en al gradilla por 10 minutos para coagular y este en un modo de resonancia. Una ves coagulada la nuestra se lleva a la centrifuga y lo centrifugamos por 10 minutos a 3500 Rpm y si no se ha separado el plasma lo empujamos con una caña y nuevamente centrifugamos. Luego se extrae 5ul de suero con el que vamos a trabajar a otro tubo, el cual añadimos 0.05ml de reactivo, lo agitamos brevemente, y colocamos a baño maría por tres minutos. Pasado los tres minutos sacamos de baño maría a las muestras y observamos, la intensidad del color indica la cantidad de glucosa. Medir el estándar y el blanco (agua destilada). Blanco : 0.072. Estándar: 0.626. Robert : 0.585. Yhimi : 0.584. Cintia : 0.560. Charo : 0.582. Mardeli : 0.556. Jeiner : 0.551. Magali : 0.510. Vanessa : 0.531. Maricela : 0.562.

ESTÁNDAR VVE= 0.626-0.072 VVE= 0.0554 F=

VI.- RESULTADOS.

100 0.554

= 180.51

ALUMNO

ABSORVANCIA RESTA

ROBERT JHIMI JEINER ENA

CONSUELO HECTOR INES MAGALI VANESSA MARICELA

RESULTADO

A:0.585 – B:0.072 A:0.584B:0.072 A:0.544B: 0.072 A:0.506B: 0.072 A:0.608B: 0.072 A:0.536B: 0.072 A:0.551B: 0.072 A:0.510B: 0.072 A:0.531 B:0.072 A:0.562 B:0.072

FACTOR VERDADERO STANDAR 180.51

GLUCOSA TOAL EN CADA ALUMNO. 92.6mg/dl

180.51

92.4 mg/dl

180.51

85.2 mg/dl

180.51

78.3 mg/dl

180.51

96.8 mg/dl

180.51

83.8 mg/dl

180.51

86.5 mg/dl

180.51

79.1 mg/dl

180.51

82.8 mg/dl

180.51

88.4 mg/dl

0.513 0.512 0.472 0.434 0.536 0.464 0.479 0.438 0.459 0.490

VII.- DISCUSION.  Los alumnos que colaboraron en esta práctica no presentaban síntomas ni señal de diabetes o de alteraciones en la glucosa como por ejemplo: poliuria, polifagia, polidipsia, etc.  Así como también por la elevación de la glucosa o los bajos niveles de la misma. Los resultados obtenidos en las pruebas fueron normales y están dentro de normal(60-110mg/dl).

VIII.- CONCLUSIONES.

 Es muy importante conocer como obtenemos nuestra fuente de energía, ya que es base para nuestra vida, y como médicos es de suma importancia no mas conocer esto, síntomas afondo para así poder tratar con patologías diferentes a estas vías como lo son la diabetes mellitus, que hoy en día son muy frecuentes y que se esperan que sigan siendo pronunciadas en un futuro.  Con respecto a las pruebas realizadas en el laboratorio es necesario conocer el procedimiento de ellas axial como su valor normal es para poder detectar una anomalía en ellas y solucionarla.

IX.- BIBLOGRAFIA Murray, Mayes, Granner, Rodwell. Bioquímica de Harper, Editorial Manual Moderno, 15ava. Edición, 2001.Páginas consultadas: 243 a 254, 700 a 715. Laguna José, Piña Enrique. Bioquímica, JGH Editores, 4ta. Edición, 1990. Páginas Consultadas: 218 a 223. Guyton A.C., Fisiología Médica, Editorial Interamericana, 5ta Edición, 1977. Páginas Consultadas: 8980 a 902. Edmundo Sterling

ANEXOS. LA ESPECTROFOTOMETRÍA: es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones químicas y bioquímicas. El espectrofotómetro: es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. ABSORVANCIA. En espectrofotometría, la absorbancia1 (a veces, absorbencia) ( ) es definida como:

, donde: :es la intensidad de la luz con una longitud de onda específica pasada por una muestra (intensidad de la luz transmitida)

y que es

:es la intensidad de la luz antes de que entre a la muestra (intensidad de la luz incidente) El término es frecuentemente intercambiable con densidad óptica, si bien este último se refiere a la absorbancia por unidad de longitud. Las medidas de absorbancia son frecuentemente usadas en química analítica, ya que la absorbancia es proporcional al grosor de una muestra y la concentración de la sustancia en ésta, en contraste a la transmitancia I / I0, la cual varía exponencialmente con el grosor y la concentración. El glucagón: es una hormona peptídica de 29 aminoácidos que actúa en el metabolismo del glucógeno. Tiene un peso molecular de 3.485 dalton. Esta hormona es sintetizada por las células α del páncreas (en lugares denominados islotes de Langerhans). Su estructura primaria es: Una de las consecuencias de la secreción de glucagón es la disminución de la fructosa-2,6-bisfosfato y el aumento de la gluconeogénesis A veces se usa glucagón inyectable en los casos de choque insulínico. La inyección de glucagón ayuda a elevar el nivel de glucosa en la sangre. Las células reaccionan usando la insulina adicional para producir más energía de la cantidad de glucosa en la sangre. El glucagón también se utiliza como antídoto para las intoxicaciones por betabloqueantes

.