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Practica III. Determinación de alcohol en sangre y orina

Habilidades Determinar la presencia de alcohol etílico en sangre y orina utilizando el método semicuantitativo de Conway.

Fundamento Esta basado en un sistema de micro-difusión, en la cual reacciona químicamente el dicromato de potasio con cualquier sustancia volátil incluyendo el alcohol etílico, si se encuentran presentes en los fluidos biológico y en material postmortem. Dicha reacción consiste en la reducción del dicromato de potasio produciendo un cambio en su coloración de amarillo a verde, en caso de que el alcohol etílico se encuentre presente en la muestra analizada el cambio de coloración será evidente. La concentración de alcohol es expresada en gramos por ciento (g%), y esta se obtiene mediante la comparación del resultado de la muestra con una curva de calibración previamente realizada y medida con un espectofotometro de ultravioleta-visible, a una longitud de onda de 600 nm; la intensidad del cambio de coloración del reactivo de amarillo a verde será directamente proporcional a la concentracion de alcohol.

Material y métodos Equipo    

Espectofotometro de ultravioleta-visible Balanza analítica Agitador magnético Parrilla eléctrica

Material         

Matraz aforado de 500 ml Vasos de precitados de 50, 250 y 500 ml Pipetas volumétricas de 1, 5 y 10 ml Probetas graduadas de 50, 100, 250 y 500 ml Camara de Conway Pipetas pasteur Varillas de vidrio Tubos de ensayo de 13X100 mm Espatula

Soluciones, biológicos y reactivos     

Acido sulfúrico Dicromato de potasio Carbonato de potasio anhidro Alcohol etílico al 95% Agua destilada