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• Josue Silva

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DETERMINACION DE COLESTEROL EN SANGRE

Marco teórico.

El colesterol es el esteroide más abundante en el organismo humano. Es un componente habitual de la dieta (carne, leche, huevos), pero fundamentalmente el, organismo lo sintetiza en el hígado. Es importante mencionar que una de sus principales funciones biológicas es la de regular la fluidez de las membranas celulares y la de constituirse como uno de los precursores de hormonas esteroideas, gestágenos y corticoides, andrógenos, estrógenos, vitaminas y otros compuestos biológicos Se desplaza por la sangre en partículas denominadas lipoproteínas, que contienen tanto lípidos como proteínas. El organismo cuenta con tres tipos de lipoproteínas: Lipoproteínas de baja densidad (LDL): Contienen cerca del 70 por ciento del colesterol del suero y favorecen los trastornos cardiovasculares Lipoproteínas de baja densidad (HDL): Acumulan el 20 por ciento del colesterol total y tienen un efecto protector Lipoproteínas de muy baja intensidad (VLDL): Contienen en torno al 10 por ciento del colesterol total del suero y la mayor parte de los triglicéridos La principal consecuencia del exceso de colesterol en sangre es el desarrollo de enfermedades coronarias (EC). Que son frecuentes en las poblaciones cuya alimentación es rica en grasas saturadas La hipercolesterolemia está estrechamente ligada a la arterosclerosis, una alteración degenerativa que ataca a las arterias en las que se forman placas de ateroma. Que obstruyen total o parcialmente los vasos de las arterias ocasionando una falta de riego. Si la falta de riego se localiza en las arterias coronarias que irrigan el corazón se puede originar una angina de pecho o un infarto de miocardio. Si se produce en las arterias cerebrales son frecuentes las hemorragias y trombosis cerebrales. Cuando la obstrucción se localiza en las extremidades puede favorecer la gangrena de un miembro y, en el peor de los casos, su amputación.

COMPETENCIA. Determina colesterol en el suero sanguíneo. Concientiza el riesgo que genera concentraciones elevadas de colesterol (ateroma) o bajas (afección hepática o tiroidea).

MATERIALES Y EQUIPOS         

Espectrofotómetro. Centrifuga. Baño María regulado a 37ºC. Jeringas descartables x 5ml. con aguja hipodérmica estéril. Algodón, ligadura. Tubos de prueba de 13 x 100mm. Pipetas de 10 mL. Micropipetas de 0 a 50 uL. Punteras amarillas, gradillas y baguetas.

REACTIVOS.   

Set de reactivos para colesterol (enzimático). Muestra biológica. Alcohol medicinal.

PROCEDIMIENTO. a. En una gradilla disponer tres tubos de prueba de 13 x 100mm, rotularlos con P (problema), S (Standard) y B (blanco) luego proceder como sigue b. Reposo x 20 minutos. REACTIVOS

P

S

B

Suero del paciente

10 ul

-

-

Standard de colesterol 200mg/dl

-

10ul

-

Agua destilada

-

-

10 ul

Reactivo enzimático

1mL

1mL

1mL

d. Leer a 650 nn, llevando el espectrofotómetro a cero en absorbancia con el blanco de reactivos. e. Para obtener la concentración de colesterol de la muestra problema, se aplica la siguiente fórmula.

RESULTADOS.

Concentraciones de colesterol, en mg/dL, obtenidos muestras analizadas.   

por los alumnos en las

Absorbancia del blanco: 0.000 nm Absorbancia de la muestra: 1.221 nm Absorbancia del estándar: 1.359 nm

Calculando

mg de colesterol/ dL =

absorbancia del problema

X 200

Absorbancia del estándar

= 179.69 mg/dL

La persona que se hizo la prueba se encuentra entre los valores normales, ya que se encuentra entre 140 y 200 mg/dL

CUESTIONARIO. a.

Describa como se realiza la biosíntesis del colesterol.

b.

¿Qué ocurre cuando el LDL-colesterol no es fagocitado?

El colesterol LDL es el que más fácilmente se “mete” dentro de la pared arterial iniciando la aterosclerosis, por ello se le conoce como el colesterol malo.

c. Mencione cuatro métodos para la determinación de colesterol en sangre, indicando ¿cuál? de ellos es el más exacto y porque. y ¿Por qué? d. Mencione lo requisitos indispensables que debe persona, para que su determinación de colesterol sea real.

observar una

1.- Deja de utilizar cualquier medicamento que pueda resultar en una interferencia con los resultados de la prueba. Tu médico debe ser capaz de decirte qué medicamentos necesitas interrumpir y con cuánto tiempo de anticipación.

2.- No debes ayunar ni hacer nada fuera de lo normal si estás recibiendo una lectura parcial, que incluye sólo el nivel de colesterol total y de lipoproteínas de alta densidad (HDL). 3.- Abstente de la comida, y bebe sólo agua, durante 12 horas previas al examen, si necesitas un vistazo a tu perfil de colesterol total, que incluye HDL, lipoproteínas de baja densidad y triglicéridos. El consumo de alcohol debe detenerse 48 horas antes del examen. 4.- Vuelve a tus hábitos alimenticios normales tan pronto como la prueba haya terminado. e. Explicite la biosíntesis de colesterol a partir de la ingesta de carbohidratos.