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Universidad Nacional Federico Villarreal Facultad de Oceanografía, Pesquería, Ciencias Alimentarias y Acuicultura Escuela Profesional de Ingeniería en Acuicultura

Tema: Cultivo de microalga: Spirulina sp.

Presentado por: Chate Benites, Zarela; Infante Garcés, Yohanna Docente: Ing. Myriam Muñoz

Miraflores, Lima – Perú, 2016

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INDICE Resumen............................................................................................................................4 Abstract..............................................................................................................................5 Introducción.......................................................................................................................6 Objetivos............................................................................................................................8 a. Objetivo general.....................................................................................................8 b. Objetivos específicos..............................................................................................8 Método...............................................................................................................................8 a. Ámbito temporal y espacial del estudio.................................................................8 b. Universo al que se refiere el estudio (marco teórico).............................................8 METABOLISMO DE INTERES................................................................................10 Carotenoides y b-caroteno.......................................................................................10 Ficobiliproteinas......................................................................................................10 Lípidos.....................................................................................................................10 Proteínas, vitaminas y minerales.............................................................................11 ASPECTOS NUTRICIONALES................................................................................11 MEDIO DE CULTIVO...............................................................................................12 SIEMBRA...................................................................................................................13 COSECHA..................................................................................................................13 IMPORTANCIA Y APLICACIÓN.............................................................................14 EMPLEO EN LA ACUICULTURA............................................................................15 c. Unidades de análisis:............................................................................................15 d. Métodos utilizados:..............................................................................................15 e. Materiales y Equipos:...........................................................................................15 f. Procedimiento:......................................................................................................16 Resultados........................................................................................................................17 Referencias bibliográficas...............................................................................................19 Anexos.............................................................................................................................20

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Resumen El trabajo detalla el proceso de cultivo de la microalga Spirulina. Teniendo como objetivo principal aprender las técnicas de preparación del medio de cultivo dela Spirulina sp. El agua de mar es un medio adecuado para el cultivo de esta microalga, sin embargo es totalmente óptimo adicionándole los macronutrientes, estos ayudan a su crecimiento y aumentan su producción de biomasa. Por ello hoy en día se han desarrollado innumerables técnicas y métodos con este propósito; nosotros utilizamos el medio de la composición Du Milleu de Culture, la preparación de este medio de cultivo fue elemental durante todo el proceso de la siembra en la botella; porque nos ayudó a adicionar los elementos químicos como soluciones de NaHCO 3, NaNO3, KCl, MgSO4 .2 H2O, CaCl2, FeSO4.7H2O, EDTA, en cuanto a los parámetros físicos como la luz y la aireación los controlamos a diario en las instalaciones respectivas. Durante todo el proceso se obtuvo como parte final la encapsulación de la Spirulina sp. , directa para el consumo humano. Pudiendo notar que a largo de los días paso por todas las fases ya sea por el aumento de la densidad poblacional o por el retardo de esta. El cultivo de esta microalga es importante porque posee un valor nutritivo muy alto por contener componentes esenciales como antioxidantes, ácidos grasos y vitaminas, por lo tanto concluimos que es un gran complemento alimenticio para los humanos, debido a la escasez de los alimentos de hoy en día.

Palabras claves: Spirulina sp. , Alimento, Vitaminas, Microslga, Consumo humano.

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Abstract The work details the cultivation process of Spirulina microalgae. With the main objective to learn the techniques of preparation of culture medium Spirulina sp. Sea water is a suitable medium for the cultivation of this microalga, however it is totally optimum added to the macronutrients, these help their growth and increase their production of biomass. That is why today countless techniques and methods have been developed for this purpose; We used the medium of the Du Milleu composition of Culture, the preparation of this culture medium was elementary throughout the process of planting in the bottle; Because it helped us to add the chemical elements as solutions of NaHCO3, NaNO3, KCl, MgSO4 .2 H2O, CaCl2, FeSO4.7H2O, EDTA, in terms of physical parameters such as light and daily regulation in the respective facilities. Throughout the process was obtained as the final part of the encapsulation of Spirulina sp. , Direct for human consumption. Being able to notice that a long of the days passes through all the phases and the sea by the increase of the population densidad or by the delay of this one. The cultivation of this microalga is important because it has a very high nutritional value for essential basic components such as antioxidants, fatty acids and vitamins, therefore concludes that it is a great nutritional supplement for humans, due to the scarcity of food today in day

Key words: Spirulina sp. , Food, Vitamins, Microslga, Human Consumption. 5

Introducción El consumo de microalgas azuladas Spirulina se inicia en el pasado en diferentes lugares del mundo. Según las crónicas de los conquistadores españoles, los antiguos aztecas las recolectaban en la superficie del lago de Tenochtitlán, luego eran secadas y comercializadas en el mercado de la ciudad. A los corredores aztecas, portadores de pescado fresco desde la costa hasta los palacios de la nobleza, se les alimentaba con Spirulina. La distancia a recorrer era superior a 300 km, por lo que el trayecto se completaba con postas donde los atletas indígenas corrían con una resistencia extraordinaria. En determinadas épocas del año eran recolectadas en canoas usando finas redes, secadas al sol y convertidas en tortillas, que sabían a queso. Complementaban la alimentación de frejoles, cebollas, ají y maíz. Durante la colonia las ordenanzas españolas hicieron olvidar estas algas. Cabe mencionar que también en el lago Chad, en África, los pobladores se alimentaban desde hacía siglos con Spirulina secada al sol y forma de galletas. Los habitantes de las riberas son sanos, atléticos, altos y buenos corredores. Esta microalga existe en el planeta desde unos tres mil quinientos millones de años antes del presente. Las variedades más conocidas son la Spirulina máxima y la Spirulina platensis. El alga se divide en dos cada 7 horas, en condiciones ideales teóricamente puede generar unos 15.000 kg/ha anuales de material seco, pero con tecnología apropiada los rendimientos mejoran. La Spirulina crece en medios adversos por lo que ha sido capaz de absorber los elementos necesarios para sobrevivir, siendo una de las primeras algas en realizar fotosíntesis, tiene una enorme capacidad de almacenar nutrientes. Su geometría es de espiral, sus células cilíndricas miden de 3 a 13 micras de diámetro y su largo puede tener entre 100 y 200 micras. En el último tercio del siglo XX, en una planta industrial de extracción de soda en México, se buscaba una solución para eliminar “la contaminación” por algas en la laguna, lo que dio origen al redescubrimiento de las excelentes propiedades del “contaminante” que condujo a su explotación y al inicio de cientos de investigaciones sobre ella. Es un cultivo ideal para zonas desérticas y más aún donde el agua salina no es adecuada para la agricultura convencional. Como crece en medios acuosos alcalinos y salobres, presenta pocas posibilidades de contaminarse. Su principal empleo es para alimentar personas y animales. La Spirulina tiene cualidades inmunológicas, antioxidantes, antiviral, protector contra el cáncer, retiene metales pesados por lo que es un antitóxico. Se ha demostrado que es un regulador contra la hiperglicemia y la hiperlipidemia (Belay, 2002). Está autorizada legalmente como complemento alimenticio en EE.UU., Europa, Japón y la Cuenca del Pacífico. En Estados Unidos la FDA (Departamento para la alimentación y medicamentos) la autorizó a partir de 1981, indicando que es una fuente proteica que contiene además vitaminas y minerales. Los complementos sintéticos de vitaminas y minerales suelen no ser reconocidos por el organismo, al faltar los agentes capaces de fijar los iones metálicos y no-metálicos. Con la Spirulina la absorción es muy eficiente por parte del sistema digestivo, entre 85 y 95% (Henrikson, 1994). Esto guarda relación con el sentido de giro de su espiral, compatible con el giro del ADN humano (efecto de chiralidad, que se empieza a usar en medicamentos de tecnología avanzada). Es rica en vitamina E (agente de antienvejecimiento celular) y vitamina B1 (tiamina), importante para producir acetilcolina (un neurotransmisor). La vitamina B12 es necesaria para un normal funcionamiento del tejido nervioso, ayudando a mantener la vaina de mielina que rodea a los axones neuronales. La microalga aporta dosis de hierro, zinc, cobre y germanio, siendo este último un semiconductor que conserva los contactos eléctricos a través del sistema neurológico. La Spirulina contiene 65% de proteínas y aminoácidos; 55 de lípidos, 7% de minerales; 20% de hidratos de carbono y 3% de humedad. Dentro de los aminoácidos esenciales esta microalga tiene: isoleucina 5,6%; leucina 8,7%; lisina 4,7%, metionina 2,3%; fenilalanina 4,5%; treonina 5,2%; triptófano 1,5% y valina 6,5%. Las vitaminas aportadas por 10 g de Spirulina en función de la dieta diaria recomendada, son: vitamina A betacaroteno 4,60 veces; vitamina B1 tiamina

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0,21; vitamina B2 riboflavina 0,21; vitamina B3 (niacina) 0,07; vitamina B6 (piridoxina) 0,04; vitamina B12 5,33 veces; vitamina E alfa-tocoferol 0,03 (Henrikson, 1994). Con respecto al consumo de agua en litros por kilogramo producido y al porcentaje de proteína aportada, la Spirulina tiene un 65% de proteínas y consume 2.499 litros; la soja tiene 34% de proteínas consumiendo 8.860 litros; el maíz tiene 9% de proteínas y consume 12.416 litros; una res en establo alimentada con grano tiene 20% de proteínas y consume 104.000 litros (Earthrise Farms 1998). Actualmente, en muchos países se extrae en forma tecnificada en grandes piscinas de cultivo. Los principales productores son EE.UU., Japón, India, China, entre otros. Estudios y producciones importantes se realizan en Rusia, Francia, Alemania, Israel, Italia y España, por mencionar algunos. En la actualidad los procesos de cultivo generalmente casi no están automatizados. Los parámetros se controlan en forma manual y según la experiencia de los operadores. En grandes instalaciones debe contarse con una automatización eficiente para controlar algunos parámetros críticos: nivel de pH, densidad de población y temperatura. La ventaja de un control radica en adicionar la cantidad correcta de nutrientes en función de las necesidades reales; realizar la cosecha cuando la densidad de algas alcanza un nivel determinado (antes de llegar a la sobrepoblación y muerte súbita del cultivo) y reducir la temperatura cuando se alcanzan valores peligrosos en verano. La metodología que se emplea consiste en la instalación de sensores para controlar mediante un microprocesador la marcha del proceso. Este envía las señales correctivas a los actuadores: dosificador de nutrientes, bomba de cultivo y mecanismos para reducir la temperatura. Los resultados han demostrado que el proceso puede controlarse sin supervisión directa, ningún cultivo se ha perdido por el control automático y los tiempos de operación se reducen considerablemente, frente a los considerados clásicos (Ponce & Ponce, 2008). Actualmente se dispone de un sistema inteligente diseñado y construido en la UTA para controlar el cultivo y la densidad poblacional (Ponce et al., 2008). Los más modernos y eficientes sistemas son de fotobiorreactores tubulares, empleados en lugares extremos como Siberia. Son compactos al ser cerrados y controlados en forma automática, necesitan poca mantención. Por su gran resistencia se piensa que deberían ser las primeras algas en servir de alimento para colonias fuera del planeta, teniendo la ventaja de generar oxígeno en grandes cantidades y absorber CO 2, tal como ocurrió en los comienzos de la vida en la Tierra.

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Objetivos a. Objetivo general  Aprender el proceso de preparación del cultivo de la Spirulina sp.

b. Objetivos específicos  Aprender y conocer el proceso de siembra hasta la cosecha para tener conocimiento hasta en el ámbito laboral en un futuro.  Realizar la encapsulación de acuerdo al peso seco obtenido para la comercialización de la Spirulina, y esta ha de ser de consumo para el humano como fuente energética o complemento alimenticio.  Conocer qué tipo de composición preparar y la secuencia ordenada para realizar el cultivo de la microalga; Spirulina.

Método a. Ámbito temporal y espacial del estudio El día 09 de setiembre y concluimos el día 02 de diciembre de 2016, a horas 9:40 – 11:20 se llevó a cabo en el laboratorio de Cultivos menores, en la Facultad de Oceanografía, Pesquería, Ciencias Alimentarias y Acuicultura, ubicado en la Calle Roma 350, Miraflores – Lima, Perú.

b. Universo al que se refiere el estudio (marco teórico) La espirulina es una cianobacteria, que estaba considerada entre las microalgas azul-verdes de la división Cyanophyceae. Se trata de una formación multicelular microscópica filamentosa colonial de aspecto helicoidal de tamaño entre 200 y 250 micras de largo (Fig. 1). Las cianobacterias son organismos desprovistos de membrana nuclear y mitocondrias; difieren de otros procariotes en la composición de sus ácidos grasos ya que frecuentemente presentan ácidos grasos no saturados con dos o más enlaces dobles. Presentan importantes particularidades que las relacionan con las algas eucariotas, como son la presencia de clorofila y el realizar fotosíntesis aeróbica con desprendimiento de oxígeno. . El principal pigmento que contiene Spirulina sp es la clorofila a y varias cobiliproteinas como pigmentos accesorios como son caroteno, cocianina, coeritrina y alo cocianina. Como sustancias de reserva, Spirulina sp. concentra gránulos de carbohidratos y de cianocina, que es un compuesto de arginina y ácido aspártico (Gallardo, 1997).Las aguas continentales son el medio principal en el que viven las cianoficeas y juegan un papel importante en los ciclos 8

biogeoquimicos de los cuerpos de agua, en donde a veces son responsables de toda la producción primaria del embalse y llegan a presentar afloraramientos de estos organismos.

Figura N° 1. Spirulina sp. Lara Andrade, R; Castro Brrera, T; Castro Mejia, Jorge; Castro Mejía, G; Malpica Sanchez y García Castillo (2005) Los filamentos de la spirulina (llamados tricomas) son multicelulares (es decir constituidos de varias células) tienen una longitud de 0,3mm de media y una anchura de 0,008mm; por lo que es necesario el uso de un microscopio para verlos. La forma en espiral caracteriza sus varias especies que han dado el nombre de espirulina (spira=espiral, lina=pequeño). Las variedades de espirulina más conocidas son la Lonar (muy espiralada) y la Paracas (muy ondulada). Filamentos en espiral

Filamentos ondulados

Variedad lonar

Variedad paracas

Fig. N°2. Tipos de filamentos y variedades Fuente: Manual práctico de cultivo de espirulina Las aguas continentales son el medio principal en el que viven las cianoficeas y juegan un papel importante en los ciclos biogeoquimicos de los cuerpos de agua, en donde a veces son responsables de toda la producción primaria del embalse y llegan a presentar afloramientos de estos organismos. En particular, Spirulina sp. tiene una amplia distribución mundial predominando en las aguas tropicales, asi el Lago Chad localizado en el centro de África, que cuenta con una superficie de 16,300 Km2 ,que presenta grandes extensiones de afloramientos. La mayoría de las especies del género Arthrospira se han encontrado habitando cuerpos de agua alcalinos, donde crecen de forma masiva; sin embargo, algunas se encuentran presentes en cuerpos de agua dulce como ríos, manantiales y estanques, y aunque no hay reportes para el ambiente marino, con un adecuado suplemento de HCO3, Na y K en conjunto con pH y salinidad adecuados, las especies 9

de Arthrospira pueden ser altamente productivas en agua de mar (Vonshak y Tomaselli, 2000). Ramírez-Moreno, Liliana, & Olvera-Ramírez, Roxana. (2006). METABOLISMO DE INTERES Carotenoides y b-caroteno Los carotenoides son un grupo de pigmentos naturales solubles en lípidos. Son los responsables de una amplia variedad de colores vistosos en la naturaleza, los más conspicuos siendo el amarillo, el naranja y el rojo (Olvera-Ramírez et al., 2003). El b-caroteno es un constituyente común de la fracción carotenoide de la Spirulina y de otras algas, estando en mayor concentración en las algas verdes. Este compuesto incrementa la respuesta inmune en animales y en los seres humanos y en los animales es convertido en retinol (vitamina A), por lo que también se le conoce como provitamina A (Spiral Spring, 2005). La protección contra el cáncer ha sido atribuida a su actividad antioxidante, siendo uno de los principales carotenoides implicados en el sistema de defensa contra los radicales libres (Chamorro et al., 2002). Ficobiliproteinas Las ficobiliproteínas son macromoléculas componentes del aparato fotosintético de las cianobacterias y consisten de proteínas unidas covalentemente a las ficobilinas. Las ficobiliproteínas se dividen en tres grupos: ficoeritrina (PE), ficocianina (PC) y aloficocianina (AP). Estas moléculas están arregladas en partículas llamadas ficobilisomas (Apt y Behrens, 1999; Fay, 1983; OlveraRamírez et al., 2003). Chamorro et al. (2002) reportan las siguientes propiedades farmacológicas para la ficocianina: actividad antioxidante, debida a la presencia de su grupo cromóforo la ficocianobilina (Hirata et al., 1999), inhibiendo la frecuencia de micronúcleos en células meióticas de Tradescantia sp.; actividad hepatoprotectora en ratas; disminución significativa de edemas en ratones y resultados positivos en el tratamiento de la colitis. Otra aplicación que se le da a las ficobiliproteínas, por su coloración y solubilidad en agua, es como colorante natural. Fue comercializada en 1980 bajo el nombre de Lina Blue-A (Dainippon, 2005), producto utilizado en la industria de alimentos para dar color a helados, gomas de mascar, bebidas y productos lácteos, y en la industria cosmética como pigmentos naturales (Sasson, 1997; Henrikson, 2005). También se emplean en inmunoensayos, ya que pueden formar conjugados estables con anticuerpos, y en microscopia de fluorescencia es útil para diagnósticos e investigación biomédica, presentando ventajas con respecto a los marcadores fluorescentes tradicionales (Kronick, 1986; Glazer, 1994; Apt y Behrens, 1999). Lípidos El contenido de lípidos presente en la Spirulina oscila entre un 6 y 13%, del cual la mitad son ácidos grasos. De los ácidos grasos presentes los que se encuentran en mayor proporción son los ácidos palmítico, g-linoleico (GLA), linoleico y oleico, pero el que más importancia tiene es el GLA, un ácido graso insaturado, 10

esencial, que rara vez está presente en la dieta diaria. Entre las fuentes que contienen GLA, Spirulina sp. es la que lo contiene en mayor concentración (Cohen, 1997). El GLA es precursor de algunas prostaglandinas y reduce en cierta medida la cantidad de colesterol en sangre (Sánchez et al., 2003) por lo que representa una alternativa en el manejo de enfermedades cardiovasculares y en el control de peso. Ha sido utilizado en el tratamiento del eczema atópico y para aliviar los síntomas del síndrome premenstrual. Se piensa que tiene efectos positivos en el Parkinson y la esclerosis múltiple (Cohen, 1997), así como en el crecimiento celular, en la síntesis de la membrana celular (Sasson, 1997). Proteínas, vitaminas y minerales El alto contenido de proteínas de Spirulina sp. hace de ésta un alimento altamente nutritivo, además de que contiene aminoácidos esenciales y su aminograma es muy similar al de la yema de huevo, que es considerado el aminograma tipo por la FAO (Mondragón, 1984). A lo anterior se puede agregar que las proteínas presentes en esta cianobacteria son de fácil digestión y metabolización, ayudando con esto al tratamiento de la desnutrición. En cuanto a vitaminas se refiere, cabe destacar que la Spirulina es una fuente rica en ellas, sobre todo en provitamina A y vitamina B12, la primera importante en la prevención de enfermedades oculares y la segunda de gran valor para el tratamiento de la anemia perniciosa (Sánchez et al., 2003). Por último, uno de los minerales al cual se le ha prestado más atención y que se encuentra en la Spirulina es el hierro, es necesario en el tratamiento de la anemia hipoférrica ya que este se absorbe 60% más que el sulfato ferroso y otros complementos (Sánchez et al., 2003). Ramírez-Moreno, Liliana, & Olvera-Ramírez, Roxana. (2006) ASPECTOS NUTRICIONALES La espirulina ha llamado la atención de investigadores y expertos en alimentación humana por su alto contenido de macro y micro-nutrimentos (Morales del León, Babinsky, Bourges, Camacho 2000). “Los análisis realizados sobre la composición bioquímica del género Arthrospira revelan un alto contenido de proteínas, vitaminas, ácidos grasos, minerales, carbohidratos, ácidos nucleicos y pigmentos” (Cohen, 1997, p. 176), tal como se puede observar en la Tabla N° 1 y 2.

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Tabla N° 1. Composición química de la Spirulina

Tabla N° 2.Composicion por cada 10g de Spirulina

MEDIO DE CULTIVO El agua utilizada para hacer el medio de cultivo debe estar limpia, o filtrada para eliminar las algas contaminantes. El agua potable es conveniente. Si contiene demasiado cloro, se debe airear. Si el agua es muy dura, provocará la formación de depósitos desagradables pero no peligrosos. La utilización de agua salobre puede ser interesante pero es necesario analizarla antes de utilizarla. Algunas 12

aguas contienen bastante o demasiado magnesio y/o hierro. El agua de mar, muy rica en magnesio, puede ser utilizada pero con precauciones o tratamientos que no están incluidos en este documento. El medio de cultivo puede obtenerse disolviendo los productos químicos siguientes en el agua: g/litro Bicarbonato de sodio 8 Sal 5 Nitrato potásico (o salitre) 2 Sulfato dipotásico 1 Fosfato monoamónico 0,1 Sulfato de magnesio (MgSO4,7H2O) 0,2 Solución de hierro (10 g de Fe/l) 0,1 Cal (si el agua es muy poco dura) 0,02 Si se utiliza sal no refinada, no se necesita el sulfato de magnesio.  Bicarbonato de sodio  Sal; sulfato de amonio  Fosfato monoamónico 0,1  Nitrato potásico (o salitre)  Sulfato de magnesio (MgSO4,7H2O) 0,2  Solución de hierro (10 g de Fe/l) 0,1 SIEMBRA La siembra consiste simplemente en mezclar la simiente con el medio de cultivo. Es recomendable mantener el nuevo cultivo inicialmente y en curso de crecimiento (dilución progresiva con medio de cultivo nuevo) con una concentración de espirulina alrededor de 0,3 g/l (bien verde). Se puede esperar una tasa de crecimiento de 30 % por día si: - la temperatura es correcta, - el medio de cultivo es a base de bicarbonato, - si se aumenta la superficie del estanque ( diluciones progresivas) manteniendo la profundidad del cultivo a bajo nivel (no superando 10 cm) y la concentración de espirulina alrededor de 0,3 g/l. Cuando la superficie final del estanque es la deseada, aumentar el nivel y la concentración del cultivo al nivel deseado hasta la concentración óptima de 0,4 g/l antes de iniciar la cosecha. COSECHA El mejor momento para la cosecha es por la mañana, porque:  La baja temperatura hace el trabajo más agradable  Habrá más horas de sol para secar el producto,  El porcentaje de proteínas tiene su máximo por la mañana,  La filtración es más rápida La cosecha está dividida esencialmente en dos etapas:  La filtración, para obtener una biomasa con un 10 % de materia seca (1 litro = 100 g de peso seco).  El exprimido, para eliminar el medio de cultivo residual y obtener la "espirulina fresca", lista para ser consumida o secada, conteniendo alrededor de 20 a 25 % de materia seca según las cepas y la salinidad del medio. La filtración se efectúa simplemente por gravedad a través de una malla sintética (poliéster o poliamida) de aproximadamente 40 µ (0,04 mm) de poro o malla. El filtro puede ser un saco colocado encima del estanque para reciclar directamente lo filtrado. Antes de ser filtrado, el cultivo debe ser pasado por un colador o un 13

tamiz con malla de 0,3 mm para eliminar los cuerpos extraños como insectos, trozos de vegetales, etc. Se puede hacer uso de un recipiente con bordes rectos, evitando mover el fondo donde se encuentran los depósitos. La filtración se puede acelerar moviendo o raspando suavemente la malla. Una vez que la mayor parte del agua ha sido eliminada, la espirulina (la biomasa) se junta formando como una "bola" gracias al movimiento de la malla. A veces, la bola no puede formarse bien o se pega. El prensado final se hace simplemente por presión: la biomasa se extiende en forma de torta de unos centímetros de espesor, en una malla (puede ser la misma utilizada para la filtración, preferiblemente redoblada por una tela sólida de algodón) entre dos placas ranuradas con pesos encima (piedras, ladrillos, bloquetas, etc.), o en una prensa o un lagar. Una presión de 0,2 kg/cm2 durante un cuarto de hora es suficiente para eliminar el agua intersticial, aunque a veces la presión y/o el tiempo deben ser más largos para obtener una torta prensada suficientemente consistente. Detener la presión cuando el "jugo" se vuelve demasiado verde. Este sistema es más adecuado que el lavado con agua para eliminar los restos del medio de cultivo sin destruir la espirulina, salvo que el exprimido sea muy difícil o imposible debido a una biomasa de calidad inferior (100 % de filamentos rectos por ejemplo). En este último caso el lavado debe hacerse de preferencia con agua potable ligeramente salada y acidificada. Jourdan, G (2000)

IMPORTANCIA Y APLICACIÓN El valor de Spirulina sp. (Arthrospira sp.) radica precisamente en la gran variedad de macronutrientes y micronutrientes que contiene, algunos de los cuales no pueden ser sintetizados por el organismo humano, así como en algunas de sus propiedades, tales como incrementar los niveles de energía, reducir el estrés premenstrual, incrementar el rendimiento de atletas, mejorar el apetito y ofrecer protección antioxidante. Esta cianobacteria es fuente rica en proteínas, aminoácidos, vitaminas, minerales y otros nutrientes, por lo que uno de sus principales usos es como suplemento alimenticio, ya sea en polvo, encapsulado, en tabletas, como sustituto de harina (en diferentes sabores), en pastas para sopa, botanas, salsas, barras de granola, golosinas o bebidas instantáneas de frutas o vegetales (Sasson, 1997; Laboratorios Almar, 2004; Henrikson, 2005). Se han hecho efectos tiene sobre algunos roedores y en el humano. Algunos de estos efectos son la inmuno-regulación, efectos antioxidantes, anticancerígenos, antivirales, antitóxicos y contra la hiperlipidemia y la hiperglicemia (Belay, 2002). Se ha comprobado a nivel experimental, in vivo e in vitro, su efectividad en el tratamiento de algunos tipos de alergias, anemia y leucemia (Liu et al., 2000), en otros tipos de cáncer, en reducción de hepatotoxicidad, en enfermedades virales y cardiovasculares, diabetes, obesidad, inmunodeficiencia y procesos inflamatorios, entre otros (Chamorro et al., 2002). Por lo anterior es considerada como un promotor de la salud o nutracéutico (Alvídez-Morales et al., 2002; AlanisGuzmán, 2003; Fábregas, 2003; Salvador y Cruz-Guillén, 2005).

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EMPLEO EN LA ACUICULTURA El uso de este organismo como alimento en la acuicultura ha sido limitado debido a su alto costo en el mercado, sin embargo por experiencias de acuicultores japoneses, quienes han señalado los beneficios que se obtienen utilizando Spirulina sp. en las dietas para peces de ornato principalmente, se ve la conveniencia de aplicarla. Los beneficios que Spirulina sp. ha demostrado en peces son:  Incrementa la tasa de crecimiento  Mejora la calidad y coloración a la carne del pez  Aumenta la sobrevivencia  Reduce los requerimientos de medicamentos  Disminuye los desechos en los drenajes de los estanques (Henson,1990). Se ha reportado que Spirulina sp. hace más eficiente la conversión del alimento; al mejorar la flora intestinal, la cual desintegra compuestos no digeribles o de difícil digestión que contengan los alimentos; la misma flora bacteriana produce vitaminas y desplaza a bacterias daninas o peligrosas dentro del intestino del organismo. Spirulina sp. estimula la producción de enzimas que transportan a las grasas por el cuerpo, así el animal puede utilizar la grasa como energía para el crecimiento en lugar de que se acumule y se vuelva acido (Iwata, 1990)

c. Unidades de análisis: Cultivo de microalga: Spirulina sp.

d. Métodos utilizados: - Composición DU MILLEU DE CULTURE

e. Materiales y Equipos: -

Pipetas (1ml,2ml) Beaker (80 ml) Propipetas Vasos de precipitado(1000ml) Balanza analítica Alcohol 96° Mortero Placa Petri Botella de plástico con agua (7 L)

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f. Procedimiento: Procedimiento para limpieza y desinfección 1. Nos lavamos las manos con jabón antibacterial líquido y abundante agua. 2. Echamos detergente a la mesa del laboratorio, un poco de agua y frotamos con la esponja para eliminar todo residuo. 3. Enjuagamos la mesa del laboratorio con abundante agua y con la ayuda de un paño yess, repetir este proceso hasta que sea necesario. 4. Echamos un poco lejía sobre toda la mesa del laboratorio y esparcimos con paño yess en toda la superficie de la mesa del laboratorio. 5. Enjuagar la mesa del laboratorio con abundante agua y con el paño yess, repetimos este paso. 6. Secamos la mesa del laboratorio con el papel toalla. 7. Finalmente echamos y esparcimos el alcohol de 96º con algodón en toda la mesa del laboratorio. Procedimiento para el cultivo 1. 2. 3. 4.

Ante todo nos lavamos las manos con jabón líquido antibacterial. Se limpió la base de la botella con alcohol al 96° y se colocó en la mesa. Se rotuló la botella y se sacó dos litros de agua de la botella de 7 litros. Luego se pesó los compuestos químicos en la balanza analítica, en papel aluminio y se rotuló. 5. Después a los 5 litros restantes, añadimos los 110 g de NaHCO3, 15 g de NaNO3, 5g de KCl, 2.5 g de MgSO4.2H2O, 0.2 g de CaCl2 y 0.025 g de FeSO4.7H2O, mezclando cada vez que agreguemos un compuesto. 6. Añadimos con la ayuda de pipetas los 3.5 ml de H2SO4 (96%) y 1 ml de H3PO4 (85%). 7. Luego agitamos la botella para mezclar y añadió los 0.35 g de EDTA 8. A la vez colocamos en la fuente el paliglobo y se le agregó el agua hervida. 9. Preparamos el tapón para la botella y colocamos el paliglobo ya desinfectado. 10. Conectamos la conexión de aire y dejamos por 3 días la botella. Procedimiento de la siembra de Spirulina. 1. Después de los tres días aproximadamente de la preparación del medio, se filtra la cepa de Spirulina, con la malla y la ayuda del embudo se realizo el proceso de siembra. 2. Seguidamente retirando el tapón de la botella, le agregamos la cepa ya filtrada. 3. Finalmente colocamos el tapón a la botella y colocamos la conexión de aire.

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Procedimiento de la cosecha de Spirulina. 1. Colocamos la malla, en el colador, y procedemos a filtrar la Spirulina. 2. Luego vertemos la botella de la Spirulina, tener mucho cuidado que no se remueva la parte precipitada del fondo. 3. Se exprimió la malla con la Spirulina. 4. Se colocó la malla en la mesa y se esparció la Spirulina con la ayuda de la espátula. 5. Luego se enchufo la secadora de cabello para secar la Spirulina. 6. También se secó el mortero, pilón y placa petri, con la ayuda de la secadora de cabello. 7. Cuando ya estuvo secó el mortero, se agregó la Spirulina, para moler la muestra. 8. Se pesó la placa petri, se taró la balanza, por lo tanto se agregó la Spirulina para pesar 9. Después de pesar se procesó la capsular la Spirulina.

Resultados En la tabla N°3, presenta los pesos del cultivo de Spirulina de dos botellas y por cada uno de ellos se indica el número de capsulas que contiene el peso seco total de la Spirulina. Tabla N°3 Resultados del cultivo de Spirulina Pesos seco Spirulina (g) 1,9 3

# de cápsulas 17 15

Grafico N°1. De esta manera podemos representarla gráficamente para poder obtener el peso referencial o promedio de por cada peso seco en total de Spirulina, cuanto es el número de capsulas producidas durante todo el proceso de cultivo.

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Referencias bibliográficas 

Belay, A. 2002 The potential application of Spirulina as a nutricional and therapeutic supplement in health management. JANA, 5: 27-48.

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Anexos Figura N° 3. Cultivo de Spirulina en las botellas de siete litros

Figura N° 4. Agua sobrante del filtrado de Spirulina sp.

Figura N° 5. Filtrado de Spirulina sp.

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Figura N° 6. Muestra obtenida del filtrado

Figura N° 7. Extendemos el filtrado

Figura N° 8. Secamos el filtrado hasta tenerlo totalmente seco

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Figura N° 9. Trituramos la muestra hasta que sea polvo

Figura N° 11. Encapsulamos la muestra

Figura N° 12. Observamos la muestra en el microscopio

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Figura N° 13. Muestra de Spirulina en el microscopio

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