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GUÍA DE PRACTICAS ZOOLOGÍA DE INVERTEBRADOS E. LÓPEZ T., A. MORALES H., E. BOCARDO D., Y. MEDINA V., C. MEDINA P.

2019

SESION PRACTICA Nº 8 TEMA:

ANELIDOS: ESTUDIO DIFERENCIAL DE GRUPOS. DISECCION DE OLIGOQUETOS.

INTRODUCCION El phylum Annelida agrupa a los denominados "gusanos segmentados” o “gusanos anillados", es decir a todos aquellos que presentan metamerismo. Los anélidos constituyen un vasto grupo zoológico de gran interés filogenético por afinidades con otros grupos de Protostomados; la larva Trocófora es considerada afín con otros grupos y se les considera con un origen común con Nemertinos y Moluscos. El cuerpo es generalmente alargado, cilíndrico o aplanado dorsoventralmente y se caracteriza principalmente por su metamerización, que no sólo afecta externamente sino a toda su organización. La metamerización de los anélidos es típica homónoma con excepción del primero y último segmento que siempre está diferenciado. Algunos presentan ventosas terminales. Presentan simetría bilateral y tienen apéndices en forma de diminutas quetas pudiendo ser muchas o pocas por somite; unos tienen tentáculos carnosos en la cabeza y las quetas situadas sobre parápodos carnosos laterales; algunos no poseen quetas, y el cuerpo está cubierto por una fina cutícula húmeda y delgada sobre un epitelio de células glandulares y sensitivas. La pared del cuerpo está compuesta por músculos longitudinales y circulares; el celoma, con excepciones es bien desarrollado. Sistema digestivo completo, sistema circulatorio cerrado con vasos longitudinales y ramas laterales. La respiración es cutánea o por branquias. El sistema excretor está formado por nefridios, un par por somite. El sistema nervioso con un par de ganglios cerebroides y conectivos y un cordón grueso longitudinal a lo largo del cuerpo; poseen órganos para el tacto, el gusto y percepción de la luz, tienen además células sensitivas. Los sexos están en un mismo individuo con desarrollo directo o sexos separados con fase larvaria trocófora; algunos se dividen asexualmente por gemación. Habitan en la tierra húmeda, en agua dulce y salada y pocos son ectoparásitos de vertebrados, muchos habitan en galerías o tubos, la mayoría de especies son de vida nocturna.

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El phylum contiene más de 12000 especies descritas y ubicadas taxonómicamente en tres Clases.

DIVISION SISTEMATICA Phylum Annelida Clase Polychaeta Subclase Errantia Familia Nereidae Género Nereis + 10 Familias... Superfamilia Eunicacea 3 Familias... Subclase Sedentaria Familia Arenicolidae Género Arenicola + 16 Familias Clase Oligochaeta Orden Lumbriculida Familia Lumbriculidae Orden Tubificida Suborden Tubificina Familia Tubificidae Género Tubifex + 3 Familias Suborden Enchytraeina Orden Haplotaxida Suborden Haplotaxina Suborden Alluroidina Suborden Moniligastrina Suborden Lumbricina Familia Lumbricidae Género Lumbricus Género Eisenia + 13 Familias... Clase Hirudinea Orden Acanthobdellida Orden Rhynchobdellida Familia Glossiphoniidae Familia Piscicolidae Orden Gnatobdellida Familia Hirudinidae Género Hirudo

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Familia Haemadipsidae Orden Pharyngobdellida Familia Erpobdellidae + 4 Familias...

COLECTA MEDIOS DE COLECTA Se colectan en el ambiente marino donde vive la mayor cantidad de especies, por lo general, de la clase de los Poliquetos. Estos gusanos, que incluyen el extenso grupo de los tubícolas, abundan en la zona de las mareas, ocupando todo tipo de playas. Se encuentran debajo de las rocas, adheridos a las algas marinas, objetos flotantes y a muchos de ellos como comensales, fabricando sus tubos o “casas” sobre las conchas de muchos moluscos. También ocupan profundidades medias y grandes, enterrados en los fangos de los océanos. Las especies muestran marcadas diferencias según el tipo de suelo, substrato y profundidad, por lo que es interesante efectuar colectas variadas. En muchas playas, largos tubos de tipo córneo ponen de manifiesto la abundancia y el tamaño de los grandes tubícolas marinos, pero entre las arenas numerosos anélidos pequeños forman parte de su fauna. Por ello es necesario efectuar colectas que abarquen desde la observación de la superficie de las rocas y las algas, levantando piedras, hasta el dragado de los fondos medios y profundos y el tamizado o colado de las arenas de las playas. La colecta de los poliquetos arenícolas puede hacerse con un matiz construido de madera de pino o cedro, haciendo primero un cajón rectangular de 40 a 60cm de largo y un fondo de 10cm más o menos. Sobre este marco se clava apropiadamente un tamiz o una red de alambre inoxidable (latón o bronce) de unas doce o más mallas por pulgada cuadrada. Utilizando tamices para colar arena con redes de mallas cada vez más cerradas, se puede obtener una colecta más completa. Se necesita usar pequeñas palas para colectar. El tamiz que usan los albañiles es parecido a éste. Otra clase de anélidos representativa, no tanto por su cantidad de especies, como por el tamaño de sus poblaciones, es la clase de los oligoquetos, cuyos representantes más comunes son las "lombrices de tierra". Estas se obtienen cavando en las capas superficiales del suelo, de preferencia húmedas y ricas en materia orgánica, donde las plantas se conservan verdes; bajo los depósitos de

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abono, etc., se encontrarán especies de lombrices de todo tamaño, muchas casi microscópicas. Después de las lloviznas prolongadas o de aguaceros violentos, salen de sus madrigueras. Las corrientes eléctricas, según Knudsen (1966), pueden hacerlas salir de sus madrigueras. Para esto se entierran hasta la mitad, separadas por medio metro, dos varillas metálicas de unos 40 cm. de largo. Por separado, se unen a un alambre largo de conducción eléctrica, de modo que al conectarlos mediante un enchufe común se obtenga un circuito de corriente alterna. A los pocos minutos los gusanos comenzarán a salir. Se debe proteger con madera la parte superior de las verillas para poder manipularlas. Otros oligoquetos se pueden obtener en abundancia en el fondo fangoso de los charcos de agua dulce, orillas de los lagos, arroyos, etc.; en la vegetación en proceso de putrefacción, debajo de los papeles sumergidos, etc. También se pueden colectar dragando con botes o a mano en los medios acuáticos. En las aguas dulces de corriente lenta como canales, lagos, lagunas, pueden existir también numerosas sanguijuelas (Anélidos de la clase Hirudinea). Estos gusanos tienen una ventosa en cada extremo de su cuerpo, adhiriéndose con ella a las plantas, rocas o estructuras sumergidas. Un pedazo de hígado fresco, amarrado a un cordón y sumergido por algunos minutos, puede dar buen resultado para atraerlos. Se encuentran a veces, como ectoparásitos en sapos, peces y tortugas, que viven en estos medios. Las sanguijuelas marinas y de lugares húmedos terrestres es difícil encontrarlas. NARCOTICOS Y FIJACIÓN. Las sanguijuelas se pueden fijar con F.A.A. o Bouin. Las de tamaño pequeño se pueden colocar entre un portaobjetos y un cubreobjetos. Una vez extendidas, F.A.A. o el Bouin se agregan por un lado sin inundar el vidrio superior y se extrae el exceso con papel filtro por el lado opuesto al que se coloca el fijador. Después de 20 a 30 minutos se pueden colocar en F.A.A. puro o formol al 5% o en alcohol de 70%.

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Para las sanguijuelas grandes, se pueden usar como narcóticos la cloretona, hidrato de cloral y otros, para después colocarlas directamente en el fijador o aplanarlas entre portaobjetos. Los oligoquetos se pueden fijar en formol al 5% y conservarse ahí o lavarlos y conservarlos en alcohol de 70%. El alcohol isopropílico de 50 a 70% también da buenos resultados. Con poliquetos pequeños se pueden hacer preparaciones totales: a) Se anestesian. b) Se fijan en F.A.A. o Bouin durante 8 a 12 horas. c) Se lavan en alcohol de 50%, tres cambios de quince minutos cada uno. d) Se pasan a alcohol de 70 % durante varios minutos. e) Se tiñen con carmínbórax durante una hora o más. f) Se decoloran con alcohol acidulado al 70%. g) Se continúa deshidratándolos hasta el alcohol de 96%. h) Se ponen en esencia de euparal y se montan en euparal puro. Se pasan a dos cambios de alcohol absoluto, se aclaran en xilol y se montan en bálsamo. Para evitar que la lombriz de tierra u otros oligoquetos se contraigan, se les debe anestesiar antes de fijarlos o bien, matarlos en forma adecuada. Estos animales son extremadamente sensibles al calor y a la asfixia, por lo que pueden mantenerse con facilidad colocándolos en un recipiente con agua y poniéndola a calentar. Al entibiarse (por arriba de los 40C), las lombrices morirán. Este método da excelentes resultados para efectuar disecciones a la lombriz de tierra en la práctica de laboratorio. Anestesiarlas con cloroformo puede ocasionar que el cuerpo se contraiga y se endurezca. Un proceso lento, pero adecuado, para las disecciones formales, se basa en el endurecimiento de los órganos internos con ácido crómico:

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a) Inyecte los especímenes a uno o dos centímetros por detrás del clitelo, con una solución de ácido crómico al 1%. b) Enderece los especímenes y envueltos en gasa sumérjalos en una solución de ácido crómico durante 4 horas. c) Lávelos con agua corriente durante 12 a 16 horas para desplazar el ácido crómico. d) Deshidrate pasándolos por varias soluciones de alcohol, desde el 30% hasta el de 85%, donde los puede bajar. También da buenos resultados, pero es más tardado, colocar las lombrices en agua y agregar gota a gota suficiente alcohol hasta hacer una solución al 10%. Si desea narcotizar antes de matar, puede usar sales de sulfato de magnesio o cloretona. Puede matar a los oligoquetos pequeños con F.A.A. o Bouin caliente. Cualquier oligoqueto se puede conservar indefinidamente en formol al 5% o en alcohol de 70% u 85%, previa deshidratación.

LOGROS DE APRENDIZAJE Al término de la Práctica el estudiante reconoce e identifica las estructuras de la morfología externa de "nereis", "sanguijuela" y "lombriz de tierra"; reconoce las diversas estructuras de la anatomía interna de "lombriz de tierra" y "sanguijuela", como ejemplos tipo de los Anélidos; establece las diferencias de la morfología externa y de la anatomía interna entre los anélidos estudiados.

MATERIAL De Laboratorio: - Microscopios - Estereoscopios - Placas Petri - Láminas portaobjetos - Tablero de disección - Alfileres - Jeringa y aguja hipodérmica - Cocinilla eléctrica - Equipo de disección

Biológico: Fresco: - Lombriz de tierra - Sanguijuelas Preservado: - Nereis - Sanguijuelas Láminas con permanentes:

Reactivos: - Azul de metileno o verde de metilo

-

preparaciones

Sanguijuela Cortes histológicos

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METODOLOGIA 1. CLASE POLICHAETA: Estudio morfológico de "nereis". - Caracterice el extremo cefálico de "nereis":

ESQUEMA DEL EXTERMO CEFALICO DE Nereis.

- Caracterice y grafique dos somites de "nereis".

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Ubique sistemáticamente a "nereis"

2. CLASE HIRUDINEA: Estudio de "sanguijuela". - Describa las características más importantes de la morfología externa:

ESQUEMA DE LA MORFOLOGIA EXTERNA DE "sanguijuela"

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- Ubique sistemáticamente a su espécimen de estudio

Con la ayuda de los esquemas correspondientes proceda a realizar el identificación de las principales estructuras de la anatomía interna.

estudio y la

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- Caracterice y esquematice sus observaciones realizadas de la anatomía de "sanguijuela".

3. CLASE OLIGOCHAETA: Estudio de la morfología y de la anatomía interna de la "lombriz de tierra": 3.1. Estudio de la Morfología Externa: - Observe y describa como se produce el desplazamiento o reptación de la lombriz:

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Coloque una lombriz en una placa Petri y/o en un porta objetos preparado adecuadamente, y observe lo siguiente: - Forma y tamaño del cuerpo:

- Superficie dorsal y ventral:

- Extremo anterior: Boca: posición y ubicación:

Gonoporo masculino: ubicación y forma:

Gonoporo femenino: ubicación y forma:

- Extremo posterior: Forma del extremo posterior:

Ano: forma, posición y ubicación:

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- En cada somite o segmento observe las cerdas y determine su posición y su número:

- En la línea medio dorsal del cuerpo se presentan los poros dorsales, determine su posición, su número y función:

- En individuos sexualmente maduros se presenta un engrosamiento, denominado clitelo, observa y describa: su ubicación, forma y función:

En base a las observaciones y descripciones realizadas, proceda a rotular los esquemas correspondientes.

ESQUEMA DE LA MORFOLOGIA EXTERNA DE "lombriz de tierra"

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ESQUEMA DE LA SUPERFICIE ANTERO-VENTRAL DE "lombriz de tierra"

3.2. Estudio de la Anatomía Interna: Para obtener especímenes adecuados y que estos no se contraigan, colóquelos en un recipiente con agua a más o menos 40ºC hasta que mueran, con este procedimiento las lombrices quedarán en un óptimo estado para realizar la disección.

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A un espécimen vivo proceda a inyectarle azul de metileno a la cavidad celomática y déjela en una placa Petri para su posterior observación. En la tabla de disección fije a dos especímenes uno en posición ventral y otro en posición dorsal y luego proceda a cortar la pared del cuerpo a lo largo de la línea media dorsal y ventral, disecte cuidadosamente, los bordes fíjelos con alfileres de manera que permitan apreciar la estructura interna. - Describa brevemente el celoma:

- Caracterice las partes principales del sistema digestivo:

- Cual es la posición del sistema circulatorio en relación con el digestivo, que elementos lo integran y cuál es su función:

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ESQUEMA DE LOS SISTEMAS CIRCULATORIO Y DIGESTIVO

- Describa como está constituido el sistema nervioso y cuál es su posición respecto al sistema digestivo:

ESQUEMA DEL SISTEMA NERVIOSO

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- Sistema excretor: en especímenes preparados (a los que dos horas antes se les ha inyectado 1 doc. de azul de metileno al 1/1000), realice la disección y ubique los nefridios, cuál es su disposición, cuántos son por segmento, cuáles son sus partes.

- Describa y esquematice sus observaciones en forma detallada.

En base a las observaciones realizadas en la disección de su especimen determine: - En que somites están concentrados los aparatos reproductores masculino y femenino:

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- Caracterice y esquematice el aparato reproductor masculino y femenino de su espécimen de estudio:

Con los esquemas adicionales complemente sus observaciones y establezca las diferencias y/o similitudes de los tres especímenes en estudio correspondientes a cada una de las clases.

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CUESTIONARIO 1. Qué avance presentan los anélidos en comparación con los nematodos 2. Describa los tipos de nutrición en Poliquetos. 3. Como se establece el intercambio de gases en Anélidos 4. Cuál es la importancia económica de los Oligoquetos 5. El comensalismo y el parasitismo en Anélidos 6. Diversidad adaptativa en los Poliquetos 7. Cómo está constituido el sistema nervioso de los Anélidos 8. Qué órganos de los sentidos presentan los Anélidos y cuáles están presentes en los demás grupos. 9. Indique cómo varía el grado de desarrollo y cuál es la función del clitelo 10. Cuál es la función que cumplen el clitelo y los surcos seminales en la reproducción.

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BIBLIOGRAFIA BARNES, R. D. 1982 Zoología de los Invertebrados. Ed. Interamericana. D" ANCONA, H. 1982. Zoología General Tomo II. Ed. Labor S.A. GAVIÑO DE LA TORRE; JUAREZ LOPEZ Y FIGUEROA TAPIA. 1985. Técnicas Selectas de Laboratorio y de Campo. Ed. Limusa. LINCOLN, R. Y SHEALS, G. 1989. Guía de Captura y Conservación Invertebrados. Ed. Interamericana McGraw - Hill. COCKRUM, L. Y MC. CAULEY,W. 1982. Zoología. Ed. Interamericana. STORRE; STEBBINS; USINGER Y NYBAKKENS. 1982. Zoología . Ed. Omega. VILLANUEVE, F. Y DESIRE, CH. 1972. Zoología. Ed. Montaner y Simon, S.A.

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