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• Raul Orrego Lopez

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Universidad de Córdoba Facultad de Ciencias agrícolas y desarrollo rural Ingeniería Agronómica Fitopatología INFORME PRACTICA DE LABORATORIO (VIRUS)

PRESENTADO A: NAUDITH URANGO ESQUIVEL

GRUPO: MARTES

MONTERÍA – CÓRDOBA 2019

Universidad de Córdoba Facultad de Ciencias agrícolas y desarrollo rural Ingeniería Agronómica Fitopatología 1. INTRODUCCION Los virus son patógenos infecciosos demasiado pequeños para ser vistos en el microscopio de luz, pero que a pesar de su tamaño son capaces de causar un caos. Las formas más simples de virus están compuestas por una pequeña porción de ácido nucleico rodeado de una cubierta proteica (o envoltura proteica o cápside). Como en el caso de otros organismos, los virus portan información genética en sus ácidos nucleicos, los cuales típicamente codifican tres o más proteínas. Todos los virus son parásitos obligados que dependen de la maquinaria celular de sus hospedantes para reproducirse. Los virus no son activos fuera de sus hospedantes (o huésped u hospedero), lo cual ha llevado a que muchos sugieran que no son organismos vivos. Todos los tipos de organismos vivos incluyendo animales, plantas, hongos y bacterias son hospedantes de virus, pero la mayoría de los virus infecta solo un tipo de hospedante. Los virus causan muchas e importantes enfermedades vegetales y son responsables por pérdidas en el rendimiento y la calidad de los cultivos en todas partes del mundo.

2. OBJETIVOS

2.1 OBJETIVO GENERAL  Aislamiento del virus desconocido de la planta de Ñame 2.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS  Utilizar de manera adecuada el mortero para triturar la muestra donde se encuentra el virus desconocido.  Inocular en la planta de Tabaco (Nicotiana tabacum) con el virus desconocido.  Identificación de los insectos vectores.  Observar los síntomas que presenta la planta una vez inoculado el virus.

Universidad de Córdoba Facultad de Ciencias agrícolas y desarrollo rural Ingeniería Agronómica Fitopatología 3. MARCO TEÓRICO

3.1

GENERALIDADES DE LOS VIRUS

Los virus corresponden a entidades biológicas pequeñas y simples que pueden causar enfermedad en el hospedero. Son núcleo - proteínas que se multiplican sólo en células vivas. Se pueden observar únicamente por medio de microscopio electrónico y están conformados por dos elementos básicos: un ácido nucleico (ARN o ADN) y proteínas. Los virus son agentes infecciosos que causan un gran número de enfermedades en diversos organismos, dentro de estos organismos, tenemos a las plantas, y sus síntomas pueden llegar a ser severos como las necrosis, o a solo cambios leves de color, e incluso pueden llegar a ser asintomáticos (Sepúlveda, 2019). Lo que hace que los virus afecten el metabolismo de los organismos, es que ellos son organismos obligados a vivir y a multiplicarse en un hospedante vivo, es decir propagan induciendo a la célula hospedera a que los multiplique utilizando su energía y su maquinaría biosintética. Los impactos económicos que han generado los virus a través del mundo son grandes, Cuervo (2017) en una ponencia del CIAT, afirma que los virus le han costado al mundo unos 60 billones de dólares, y se deben a destrucciones de los cultivos, alteraciones de los productos, defectos estéticos y los altos costos de manejo. Atraves de tiempo estos virus se han persivido como fuente de amenazas, aun asi, estos virus, y su interaccion con los hospedantes, y la investigación en esta rama, transforman

3.2

MODO DE INFECCIÓN DE LOS VIRUS

Los virus que afectan a los vegetales son diferentes a los demás patógenos no solamente en tamaño y forma sino también en su constitución química y estructura física, métodos de infección, multiplicación, translocación dentro del hospedero, diseminación y en los síntomas que produce en el hospedero. Un virus puede atacar diferentes especies de plantas y una especie vegetal puede ser atacada por un número de diferentes virus (Agrios, 1970) El proceso de infección en el hospedero vegetal se inicia cuando el virus encuentra una herida en la pared celular, la que puede ser provocada por insectos, por labores culturales propias de cada cultivo, provocadas por el hombre u otras de distinto origen (Sepúlveda, 2019).

Universidad de Córdoba Facultad de Ciencias agrícolas y desarrollo rural Ingeniería Agronómica Fitopatología La mayoría de los virus se transmiten por insectos vectores, tambien se puenden transmitir por injertos, semillas, restos de cosechas y otros métodos de transmisión, como el hombre, o los implementos utilizados en las labores del cultivo.

3.3

SINTOMAS GENERALES

Las enfermedades virales pueden presentar los siguientes síntomas de manera general según Sepúlveda, (2019):     



  

Disminución del tamaño de planta (enanismo). Disminución del tamaño y número de frutos. Mosaico. Amarillez. Se presenta cuando todo el follaje de la planta se torna clorótico. Anillos. Manchas anilladas completas o incompletas, producidas principalmente por virus transmitidos por nematodos. Necrosis. Corresponde a la muerte del tejido, las más comunes son las estrías en los tallos, en los peciolos y en la nervadura y hojas. Pétalos variegados. Mal formaciones en hojas. Anormalidad del crecimiento. Se trata de distorsiones en las hojas, pérdida del área foliar, inclinación hacia abajo, hojas filiformes y /o hinchamiento en Figura 1. Síntomas de plantas de tomates los tallo causados por virus en África: A y D maduración irregular; B distorsión de las hojas y foliolos; C mosaico; E Epinastia y Aborto de flores

Universidad de Córdoba Facultad de Ciencias agrícolas y desarrollo rural Ingeniería Agronómica Fitopatología 4. MATERIALES      

Beaker Guantes Gasa Mortero Muestra de la hoja con el virus Planta de tabaco

5. METODOLOGIA La práctica se realizó en el laboratorio de microbiología de la Universidad de Córdoba, Facultad de Ciencias Agrícola, consistió en el aislamiento de muestra de una hoja de Ñame, la cual presentaba síntomas de un virus desconocido. (Figura 2)

Figura 2. Muestra del virus desconocido en la hoja La sintomatología que presentaban las hojas de ñame era la siguiente: una clorosis en las hojas jóvenes, esta clorosis se presentaba en forma de mosaicos alternados entre verde normal y verde pálido a amarillo, estas mismas estaban corrugadas hacia la parte del haz y tenían un tamaño normal con respecto a hojas sanas.

La muestra que contenía el virus desconocido, se llevó a un mortero, para facilitar la trituración de la muestra, donde se encontraba el virus, con la ayuda del brazo de porcelana se ejercía presión sobre el mortero, para disgregar toda la muestra. (Figura 3).

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Figura 3. Trituración de la Muestra Posteriormente de la trituración, se procedió a diluir de forma muy cuidadosa la muestra, en un Beaker, el cual contenía una gasa que permitía filtran los restos de la hoja que no fueron totalmente disgregados. (Figura 3)

Figura 4. Filtración de la Muestra

Universidad de Córdoba Facultad de Ciencias agrícolas y desarrollo rural Ingeniería Agronómica Fitopatología Luego de la filtración, se introdujo la muestra en un frasco pequeño, que facilitaría la inoculación del virus desconocido. (Figura 5).

Figura 5. Muestra en frasco pequeño Luego de realizar cada uno de los procedimientos, se procedió a inocular la muestra del virus desconocido en la planta de tabaco. (Figura 6)

Figura 6. Inoculación del virus desconocido

Universidad de Córdoba Facultad de Ciencias agrícolas y desarrollo rural Ingeniería Agronómica Fitopatología 6. RESULTADOS

En laboratorio, se identificaron posibles insectos vectores, que se muestran en la figura 7. Estos insectos causan daño directo a la planta, y como consecuencia, transmiten el virus a las platas de ñame.

A

B C En el proceso de infección de los virus en la planta de tabaco se observo

Figura 7. A: Lorito Verde (Cicadellidae: Espoasca vitis); B: Crysomelidae; C: chinche de la familia Miridae

Universidad de Córdoba Facultad de Ciencias agrícolas y desarrollo rural Ingeniería Agronómica Fitopatología En el proceso de infección de la planta de tabaco se observaron los siguientes síntomas: Se presenta una clorosis en las nervaduras, y se presentan formas de abultamientos, esto solo se da en las hojas en las que fueron inoculadas, y no en las hojas jóvenes de las plantas, quiere decir que no prosiguió la infección del virus. En la imagen del medio se alcanza a apreciar más el síntoma, y en la imagen de la derecha se alcanzan a observar los síntomas pocos días después de inoculado

7. CONCLUSIONES Los virus son microorganismos que solo se pueden ver en microscopios electrónicos y que pueden infectar a las plantas reflejándose en enfermedades que ocasionan perdidas en los cultivos. Para las platas de tabaco los síntomas virales reflejados en las hojas infectadas, son una clorosis en el espacio de las nervaduras, la enfermedad no avanzo hacía las hojas nuevas lo que nos hace concluir que los síntomas no son iguales a los de la planta de ñame infectada, las cuales se observaban en muchas hojas en la misma planta.

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8. REFERENCIAS Agrius, G. (1997). Plant Pathology. New York, USA: Academic Press.

Cuervo, M. (23 de Abril de 2017). EL MUNDO DE LOS VIRUS. Obtenido de cgspace.cgiar.org: https://cgspace.cgiar.org/bitstream/handle/10568/89650/Presentation_Virus_vegetal es_UNIVALLE.pdf?sequence=1&isAllowed=y

Sepúlveda, G. (14 de Octubre de 2019). ASPECTOS GENERALES DE LOS VIRUS DE LAS PLANTAS. Obtenido de biblioteca.inia.cl: http://biblioteca.inia.cl/medios/biblioteca/boletines/NR38126.pdf