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• Karen Guevara

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ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO FACULTAD: CIENCIAS ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA CARRERA: BIOQUÍMICA Y FARMACIA TRABAJO ESCRITO DE INMUNOLOGÍA Y SEROLOGÍA

TEMA: PRUEBA hCG (GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA)

1. DATOS GENERALES: NOMBRES:

CÓDIGOS:

Chacha Tania

2863

Chimbo Mario

2568

Guaranga Fátima

2588

Guerrero Katherine

2953

Latorre Marilyn

2960

López Verónica

2919

GRUPO No.: 4 DOCENTE: Bqf. Aida Miranda PARALELO: “A”

NIVEL: Séptimo RIOBAMBA – ECUADOR

hCG (GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA) 1. FUNDAMENTO DE PRUEBA hCG Es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa de la Gonadotropina Coriónica Humana en orina o suero, para el diagnóstico precoz del embarazo. La prueba utiliza dos líneas para indicar el resultado. La línea de la prueba utiliza una combinación de anticuerpos que incluyen un anticuerpo monoclonal hCG para detectar selectivamente niveles elevados de hCG. La línea de control está compuesta por anticuerpos policlonales de cabra y partículas coloidales de oro (Miranda, 2015).

Fig. N°1: Fundamento de prueba Hcg (Bautista, 2014)

La tira reactiva contiene tres tipos de anticuerpos en tres zonas diferentes de la tira: la zona de reacción, zona de test, y la zona de control. La tira reactiva se pone en contacto con la orina que se moverá a través de las zonas de la tira (Bautista, 2014).  



En la zona de reacción existe un anticuerpo monoclonal para hCG. Si existe hCG en la orina, se unirá al anticuerpo (Castro, 2016). En la zona de test existe un anticuerpo policlonal para hCG y un colorante. Si existe hCG en la orina, vendrá unido de la anterior zona con el anticuerpo monoclonal y reaccionará con el anticuerpo policlonal de esta zona, generando un cambio de color (Castro, 2016). En la zona de control se valida que el test se ha llevado a cabo correctamente. En esta zona se encuentra un tercer anticuerpo (con colorante) que reaccionará con los anticuerpos monoclonales libres que provienen de la zona de reacción, produciendo un cambio de color si el test funcionó (Castro, 2016).

2. PROCEDIMIENTO hCG TIRA Las tiras y las muestras deben alcanzar la temperatura ambiente antes de realizar la prueba (15-30ºC). No abrir el envase hasta el momento de realizar el ensayo. 1) Abrir el envase y extraer la tira de hCG suero y orina y utilizarlo tan pronto como sea posible. Utilizar una tira diferente para cada muestra. 2) Sumergir la tira en la muestra, sin sobrepasar la línea marcada como de inmersión, dejar en contacto con el suero/orina durante tres segundos, colocándola a continuación en una superficie limpia y seca. 3) Dependiendo de la concentración de hCG en la muestra, los resultados positivos pueden ser observados al cabo de 1 minuto. Para dar el resultado final debe esperarse a los 10 minutos. No leer los resultados transcurridos 10 minutos.

Fig. N°2: Interpretación de resultados de la tirilla (Diagnostic, 2016).

POSITIVO: Dos líneas rosas o rojas aparecerán en la zona central, una línea de control y una línea de test (marcada con la letra T). NEGATIVO: Una única línea rosa o roja aparece en la zona de control marcada con la letra C (línea de control). INVALIDO: Ausencia de la línea de control a pesar de que aparezca o no la línea del test. Nota: Las causas más comunes por las que puede aparecer un resultado inválido son: una forma de proceder incorrecta o un deterioro de los reactivos. Si ocurriera esto, debe revisarse el procedimiento y repetir la prueba con un nuevo test. Si persistiese el problema, debe contactar con su proveedor y dejar de utilizar la prueba.

Atemperar, a temperatura ambiente (20-30°C) el dispositivo, la muestra y/o controles antes de su uso (Diagnostic, 2016). Β-hCG CASSETTE 1) Sacar el cassette de la bolsa sellada y usarla lo antes posible. 2) Coloque el cassette en una superficie plana y limpia. Sostenga el gotero verticalmente y vierta 3 gotas de orina o suero (aprox. 120μL) en el hoyo (S) evitando atrapar burbujas de aire y empiece a medir el tiempo. 3) Espere a que la línea(s) de color rojo aparezca. Lea los resultados a los 3-5 minutos de iniciar la prueba Nota: Después de 15 minutos la sensibilidad de la prueba se incrementa a 10 mIU/mL. Este incremento tiene el riesgo de dar falsos resultados positivos debido al riesgo de abortos naturales, niveles fisiológicos elevados de hCG en mujeres no embarazadas o toma de medicamentos que contienen hCG. Por lo que se recomienda interpretar el resultado a los 5 minutos de la adición de la muestra para pruebas de rutina.

Fig. N°3: Interpretación de resultados en cassette (Linear chemical, 2017).

POSITIVO: Embarazo. Dos líneas rojas distintivas aparecen en la cassette. Una línea en el área de control (C) y la otra en el área de prueba (T). NEGATIVO: No embarazo. Una línea roja aparece en el área de control (C). No aparece una línea roja o rosada en el área de prueba (T) (Linear chemical, 2017).

3. EQUIPOS UTILIZADOS PARA LA DETERMINACIÓN PRUEBAS CUALITATIVAS 

Cualitativo: Presencia de la hormona beta-GCH (si/no)

Existen exámenes cualitativos muy sensibles que detectan la presencia de la hormona cuando esta se encuentra por encima de los 25mUl/ml, mientras que otros menos sensibles solo la pueden detectar cuando se encuentra por encima de los 50mUl/ml (Menjivar, 2015).

Marcas comerciales: 

Meditest  Clearblue  Predictor Early  HCG cassete  Strip PRUEBAS CUANTITATIVAS Cuantitativo: Cantidad de hormona presente. El examen de sangre es cualitativo y cuantitativo, ya que además ofrece un valor del nivel de la hormona beta-cGH presente en la sangre. Son más específicos y sensibles, permitiendo detectar niveles muy bajos de la hormona, hasta los 10mUl/ml. En pocas palabras los test de embarazo de sangre son más exactos y pueden confirmar un embarazo a solo 6 días de la gestación (Castillo, et al., 2013). Equipo para pruebas hormonales HCG:

OTROS: 1. 2. 3. 4. 5.

RIA Quimioluminiscencia MEIA ELISA IRMA

4. UTILIDAD DE LAS PRUEBA DE HCG 1.- El diagnóstico temprano del embarazo: La detección de HCG en la orina es un indicador directo de embarazo, el cual puede ser detectado a partir del noveno día después de la concepción, antes de la fecha esperada de la próxima menstruación. Para este fin se utiliza un nivel de corte de 0,05 UI/mL. Las concentraciones de HCG en caso de embarazo ectópico aumentan más lentamente que en un embarazo normal. Normalmente, durante las primeras cuatro semanas del embarazo, los niveles de HCG se duplican cada dos días, y posteriormente disminuyen gradualmente. Cuando una gestación queda interrumpida o no progresa adecuadamente, el tiempo de duplicación de los niveles de HCG se prolonga o incluso pueden existir concentraciones decrecientes de HCG (Norman, 2016). 2.- La evaluación de trastornos del embarazo: En los trastornos a principios del embarazo, como embarazo ectópico y la amenaza de aborto espontáneo, la concentración de HCG en un determinado período de gestación y su ritmo de ascenso, es anormalmente baja, aunque los valores oscilan en un rango muy amplio. Las concentraciones de HCG caen rápidamente una vez se ha producido un aborto; si no se alcanzaran concentraciones indetectables de HCG, podría ser que todavía existiera tejido productor de HCG, siendo necesaria su extirpación (Norman, 2016). 3.- Como marcador tumoral: La gonadotropina coriónica es considerada como un marcador tumoral asociado a enfermedades malignas trofoblásticas y a tumores de células germinativas por lo cual se ha utilizado este marcador no sólo para el diagnóstico, sino para vigilar el tratamiento en pacientes con tumores secretores de HCG (Vorvick, 2015).

4.- Marcador de riesgo para el Síndrome de Down: Desde 1987 y 1988, varios investigadores reportaron niveles significativamente elevados de HCG en el suero de embarazadas portadoras de un feto con el Síndrome de Down. Teniendo en consideración la relación existente entre los niveles bajos de Alfa-fetoproteína y el Síndrome de Down, así como la incidencia de la edad materna en esta aberración genética , diferentes autores han comprobado la utilidad clínica para calcular el riesgo de Síndrome de Down entre las 15 y 19 semanas de gestación, con niveles de detección que oscilan entre 55 y 65 % llegando en algunos casos hasta un 80 % para un 5 a 7 % de falsos positivos (Vorvick, 2015). 5. BIBLIOGRAFÍA:  Bautista M. Prueba inmunológica de embarazo. Laboratorio clínicoInmunología. Málaga; 2014  Castro P. Prueba de embarazo. Pruebas de screening para detección de enfermedades. Inmunología y serología. Cali; 2016  Castillo Garcia, Rafael, Maria L. Garcia Gomez, Maria Vergara Hidalgo, Ada Fe Marante Hernandez, Irene Rodriguez Santos. 2013. "Coriocarcinoma cerebral en el hombre: estudio clinicomorfologico de 1 caso". Revista Cubana De Cirugía. 29, no. 1: 159-63  Diagnostic C. hCG TIRA. [Online].; 2006 [cited 2018 Junio 16. Available from: http://fsoria.es/Inform_soria/Pruebas%20Rapidas%20Fichas%20tecnicas/HCG %20TIRA.pdf  Linear Chemical¨s S L. Β-hCG cassette. [Online]. [cited 2018 Junio 16. Available from: http://www.linear.es/ficheros/archivos/363_4130040hCGcassette40t(orin ayplasma)cas.pdf  Menjívar M, M Cárdenas, A Ulloa-Aguirre, R Recio, C Rocha, N Bedolla, G Pérez-Palacios, J Garza-Flores. 2015. "Análisis de datos y control de calidad en el radioinmunoanálisis. IIhttps://www.reproduccionasistida.org/hcg/#funcion-de-la-hormona-hcg  Miranda J. Test de embarazo. Prueba de gonadotropina corionica humana. Inmunoensayos. Serología. Madrid; 2015  Norman R. (2016) Centro de inmunoensayo. HCG interés clínico. Disponible en: https://www.paho.org/cub/index.php?option=com_docman&view=downlo ad&category_slug=centro-de-inmunoensayo&alias=363-bio-cie-umelisahcg&Itemid=226 (Último acceso 19 de junio del 2018)  Vorvick, L. (2015) Prueba de HCG en sangre. MedlinePlus Medical Encyclopedia. Disponible en: https://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003509.htm (Último acceso 19 de junio del 2018)