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2013 INFORME DE PRÁCTICAS ANÁLISIS CLÍNICO I

CURSO: ANALISIS CLINICO I DOCENTE: ANA MARIA DEL SOCORRO VASQUEZ DEL CASTILLO INTEGRANTES:

INFORME DE PRÁCTICAS - ANÁLISIS CLÍNICO I

PRACTICA Nº 01 RECONOCIMIENTO DE MATERIAL DE LABORATORIO INTRODUCCION: El Laboratorio de análisis clínico es un lugar donde afirmamos nuestros conocimientos teóricos. Es decir vamos a poner en práctica, lo que adquirimos en la teoría. El Laboratorio tiene que llevar ciertas características en cuanto su ubicación y la forma de las instalaciones, etc. El laboratorio debe de tener superficies lisas y resistentes a la corrosión y al calor, su pintura debe ser de colores claros, el Laboratorio debe estar construido con materiales durables y la iluminación debe ser la adecuada. Todo Laboratorio debe de estar bien equipado, con los instrumentos y materiales de cristalería y todo lo necesario para que funcione como debe ser. Existen también técnicas adecuadas para la limpieza y conservación de los materiales de Laboratorio. Los materiales y equipos que se utilizan pueden tener funciones específicas para una determinada prueba que se realice o generales usados para más de una. Conocer cada una de las funciones de los materiales y equipos presentes en un laboratorio es de mucha importancia ya que es la base para poder realizar cada una de las pruebas. En el presente informe se detalla los materiales más empleados en un laboratorio de análisis clínico.

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OBJETIVO: El propósito de la presente práctica es la de reconocer material y equipos que conforman un Laboratorio de análisis clínico, así como su uso y acondicionamiento. DESARROLLO: I.

MATERIAL DE MEDICION 

PIPETAS: La pipeta es un instrumento volumétrico de laboratorio que permite medir la alícuota de líquido con bastante precisión. Suelen ser de vidrio. Está formada por un tubo transparente que termina en una de sus puntas de forma cónica, y tiene una graduación (una serie de marcas grabadas) indicando distintos volúmenes. Pueden ser:  Pipetas graduadas subterminales: La última graduación está muy separada de la extremidad interior al vaciarse al quedar un espacio lleno de líquido.  Pipetas graduadas terminales: La última graduación termina en la graduación inferior.

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MICROPIPETAS: es un instrumento de laboratorio empleado para succionar y transferir pequeños volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas analíticas. Los volúmenes captables por estos instrumentos varían según el modelo: los más habituales, denominados p20, p200 y p1000, admiten un máximo de 20, 200 y 1000 μl, respectivamente. Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos líquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plástico, que habitualmente son estériles. Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las amarillas para pipetear volúmenes pequeños (por ejemplo, 10 μl), y las azules para pipetear volúmenes grandes (por ejemplo, 800 μl). Existen micropipetas manuales, en las que el volumen a aspirar se fija girando un botón en su parte superior que está conectado a un sistema analógico de confirmación de volumen, y automáticas, en las cuales dicho sistema es digital.

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Hay micropipetas simples, que sólo acogen una punta cada vez, y multicanales, que permiten incorporar múltiples puntas (por ejemplo, ocho), absorbiendo el mismo volumen en todas ellas. Las micropipetas también pueden ser regulables (10-100ul) y fijas (100ul).

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PIPETA DE THOMA: pipeta graduada de cristal con incertidumbre de ± 3 diseñada para funcionar como cuenta glóbulos. Para Glóbulos Rojos Puede hacerse dos tipos de diluciones a. Dilución 1 en 100 b. Dilución 1 en 200 Para Glóbulos Blancos Puede hacerse dos tipos de diluciones a. Dilución 1 en 10 b. Dilución 1 en 20

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URODENSIMETRO: aparato utilizado para medir la densidad urinaria, sirve para medir la cantidad de solutos (substancias), que contiene la orina.

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PAPEL DE PH: Medir el pH. Conocer la acidez de una solución.

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PROBETA GRADUADA: Medir volúmenes de líquidos.

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II.

TERMÓMETRO: Medir temperaturas.

EQUIPOS 

HORNO: El horno de laboratorio es un tipo de horno comúnmente usado para deshidratar reactivos de laboratorio o secar instrumentos. El horno aumenta su temperatura gradualmente conforme pase el tiempo así como también sea su programación, cuando la temperatura sea la óptima y se estabilice, el térmico mantendrá la temperatura; si esta desciende volverá a activar las resistencias para obtener la temperatura programada; posee un tablero de control que muestra el punto de regulación y la temperatura real dentro del horno, está montada al frente para su fácil lectura, aunque algunos modelos anteriores no lo tienen, estos cuentan con una perilla graduada la cual regula temperatura del horno.

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CENTRIFUGA: Una centrífuga o centrifugadora es una máquina que pone en rotación una muestra para acelerar por fuerza centrífuga la decantación o sedimentación de sus componentes o fases (generalmente una sólida y una líquida), en función de su densidad. Existen diversos tipos de estos, comúnmente para objetivos específicos.

 Microcentrífuga: se utiliza para determinar el hematocrito mediante una toma de muestra capilar.

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ESTUFA O INCUBADORA: dispositivo que sirve para mantener y hacer crecer cultivos microbiológicos o cultivos celulares. La incubadora mantiene la temperatura, la humedad y otras condiciones en grado óptimo, tales como el contenido de dióxido de carbono (CO2) y de oxígeno en su atmósfera interior. Las incubadoras son esenciales para una gran cantidad de trabajos experimentales en biología celular, la microbiología y en biología molecular y se utilizan para cultivos celulares, tanto bacterianos como de células eucariotas.

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ESPECTOFOTOMETRO: Un espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en una muestra. También es utilizado en los laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y microorganismos.

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REFRIGERADORA: con un compartimento principal en el que se mantiene una temperatura de entre 2 y 6 °C y también, frecuentemente, un compartimento extra utilizado para congelación a 18 °C y llamado, apropiadamente, congelador.

III.

OTROS MATERIALES

1. CAMARA DE NEWBAUER: La Cámara de Neubauer es un instrumento utilizado en medicina y biología para realizar el recuento de células en un medio líquido, que puede ser un cultivo celular, sangre, orina, líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial, etc.

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2. PLACA DE VIDRIO PARA AGLUTINACION: está diseñada para realizar varias aglutinaciones al mismo tiempo, esto permite ahorrar tiempo.

3. LAMINA EXCAVADA:

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4. TUBOS DE EXTRACCION DE SANGRE: Se trata de un tubo de vidrio al vacío con un tapón de plástico blando, que permite que lo atraviese una aguja mediante una leve presión.

5. AGUJA PARA VACUTAINER:. Las agujas pueden ser amarillas (toma única) y verde y negra (son de toma múltiple, estas tienen plástico que sirve para proteger la parte que entra en el tubo vacutainer). El tubo vacutainer debe llenarse como máximo ¾ partes de este. Nota: Cuando se usa aguja amarilla debe sacarse todo el dispositivo, de lo contrario se derrama sangre. Negra - delgada. Verde - término medio. Amarilla - toma única.

6. AGITADOR PARA PIPETA DE THOMA:

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7. CONTÓMETRO DE MANO:

CONCLUSIONES  Es importante conocer al detalle cada uno de los materiales y equipos Porque es uno de los primeros pasos en el estudio y aprendizaje de los análisis de laboratorio para lo cual ante cada práctica, debes saber cuales se deben usar, y como se deben usar.  El uso correcto de los materiales y equipos permite optimizar el desarrollo de cada una de las prácticas.  Al conocer cada material e instrumento se evita su mala manipulación.

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RECOMENDACIONES        

Uso de guardapolvo para el desarrollo de las practicas dentro del laboratorio. No comer o beber dentro del laboratorio o en el desarrollo de las prácticas. Mantener la limpieza y cuidado escrupuloso con el material. Al terminar todo trabajo lavar el material en caso de ser reutilizable o descartar en caso de no serlo. Antes de retirarse del laboratorio dejar todo en orden en la mesa de trabajo y el material que utilizó. Conocer bien el material que necesita así como las técnicas en forma teórica. Estar seguro de la finalidad que persigue con la experiencia. Asesorarse del personal docente ante cualquier duda.

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PRACTICA Nº 02 EXAMEN FISICO DE ORINA. I.

OBJETIVOS:

 Reconocer la correcta obtención de las muestras para urianálisis.  Descubrir con anticipación las enfermedades renales y diabetes.  Observar las características de un resultado de examen de urianálisis. II.

INTRODUCCION.

Desde hace siglos las características visuales de la orina son utilizadas por los médicos como piedra angular del diagnóstico de muchas enfermedades. Con el progreso de la ciencia médica, estudios químicos y microscópicos permiten ahora una interpretación más detallada de la orina. El urianálisis es un conjunto de pruebas o análisis que se aplica sobre una sola muestra de orina para determinar la presencia de compuestos que no se encuentran normalmente en la orina. El objeto de cualquier trabajo analítico es proporcionar resultados de análisis con un alto nivel de exactitud reproducible y con un alto nivel de precisión, de tal manera que se puedan sacar conclusiones y tomar decisiones con base en una información que tenga niveles aceptables de error y ambigüedad. El tipo de muestra dependerá del análisis que se requiera, dependerá también de la edad y condición fisiológica del paciente. Uno de los aspectos más importantes en el urianálisis es la forma correcta de la obtención de las muestras, ya que son muestras que se contaminan fácilmente, lo que podría conducir a resultados erróneos. Dentro de los diferentes aspectos físicos de la orina debe evaluarse el volumen (orina de 24 horas), aspecto, color, olor, pH, densidad, etc. El urianálisis puede revelar enfermedades que han pasado inadvertidas debido a que ellas no producen signos o síntomas llamativos. Los ejemplos incluyen diabetes mellitus, varias formas de glomerulonefritis, y las infecciones crónicas del tracto urinario. Cada procedimiento de análisis debe describir no sólo las mediciones y observaciones implementadas en el laboratorio, sino también la verificación de las características de ejecución que pretende el autor del procedimiento o el fabricante del sistema analítico, además, los procedimientos de control que corresponden a cada medición y observación deben describirse, incluyendo los aspectos de control interno y evaluación externa de la calidad. Los procedimientos y materiales de control varían según la especialidad, y en todos los casos, en la fase analítica deben considerarse una

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medición u observación y un procedimiento control. De esta manera, el área de urianálisis no está exenta de Control de Calidad. III.

FUNDAMENTO TEÓRICO.

1. SISTEMA URINARIO. Orina, líquido excretado por los riñones a través de las vías urinarias, con el cual se eliminan sustancias innecesarias para el organismo. Desempeña un papel importante en la regulación del balance de líquidos y electrolitos y del equilibrio entre ácidos y bases. La cantidad de orina producida diariamente es de 1 a 1,5 litros, valor que aumenta si se ingieren muchos líquidos y disminuye en caso de sudoración intensa. Las muestras de orina son biopsias líquidas de los tejidos del tracto urinario, recolectadas en forma indolora que permiten tener información rápida y económica. 2. COMPOSICIÓN DE LA ORINA En los seres humanos la orina normal suele ser un líquido transparente o amarillento. Se eliminan aproximadamente 1,4 litros de orina al día. La orina normal contiene un 96% de agua y un 4% de sólidos en solución. Cerca de la mitad de los sólidos son urea, el principal producto de degradación del metabolismo de las proteínas. El resto incluye nitrógeno, cloruros, fósforo, amonio, creatinina y ácido úrico, etc. 3. RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA: La muestra se recoge normalmente por micción espontanea, tener en cuenta que se debe recoger la primera de la mañana por ser la más concentrada , el paciente debe levantarse, asearse muy bien los genitales y en un recipiente estéril recoger la micción intermedio también llamado método del chorro medio. En ocasiones cuando se quiere determinar la cantidad de orina se requiere muestra de 24 horas (8 am- 8 pm). Para la conservación de la muestra puede hacerse en refrigeración o agregándole unas gotas de formol. 4. EXAMEN FISICO. Dentro de los análisis que requieren la observación visual directa tenemos: A. Aspecto: La orina de micción reciente es limpia y transparente. Puede variar su aspecto por:  Contener gran cantidad de fosfatos (de calcio, potasio, magnesio o cadmio) que constituye un precipitado blanco que se disuelve cuando se agrega un ácido.  El urato amorfo con frecuencia posee un color rosado por los pigmentos y se disuelve al calentar la muestra.

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

   

Puede ser turbia por la presencia de leucocitos o de células epiteliales. Esto puedo confirmarse mediante el examen microscópico del sedimento. Las bacterias pueden causar turbidez, en especial si la muestra queda en el recipiente a temperatura ambiente. El moco puede dar a la orina un aspecto ahumado o turbio. La grasa y el quilo dan un color lechoso La obstrucción de vasos linfáticos y su ruptura en la vejiga (lechosa).

B. Color: La orina presenta una amplia gama de colores, que está determinado por su concentración. El color normal puede variar de un amarillo pálido a un ámbar oscuro, según la concentración de los pigmentos urocrómicos y, en menor medida, la urobilina y de la uroeritrina. Cuanto más pigmento tenga, mayor será la intensidad del color. Sin embargo, existen muchos factores que pueden alterar el color normal de la orina, incluyendo medicaciones y dietas, así como diversos productos químicos que pueden estar presentes en situaciones patológicas. Es importante aclarar que un color diferente al normal no necesariamente indica enfermedad pues esta situación puede presentarse por algunas drogas o alimentos. En el cuadro se presentan algunas de las sustancias que pueden influir en el color de la orina.

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COLOR

Rojo a castaño Rojo a purpura Castaño a negro

Azul a verde

Blanco Amarillo

Rosado a rojo

PATOLOGIAS

Porfobilina Porfobilinógeno Uroporfirina Ácido homogentísico Ácido p-hidroxipirúvico Bilirrubina Fenol Melanina Metahemoglobina Mioglobina Porfirinas Biliverdina Infección por pseudomonas

Quilo Pus (muchos leucocitos) Bilirrubina Urobilina

Eritrocitos Hemoglobina Porfobilina Porfirinas

NO PATOLOGIAS

Compuestos de hierro Cloroquina Hidroquinona Levodopa Metronidazol Nitrofurantoína Quinina Resorcinol Aciflavina Amitriptilina Azul de Evans Azul de metileno Azur A Complejo de vitamina B Cerosota Fosfatos Acriflavina Azo-Gantrisin Colorantes de alimentos Nitrofurantoína Orina concentrada Pyrium Quinacrina Riboflavina Serotonina Sulfasalazina Zanahorias Aminopiridina Antipirina Bromosulftaleína Cáscara Colorantes de alimentos Difenilhidantoína Fanacetina Fenolftaleína Metildopa

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C. Olor: El olor normal de la orina es «sui generis», se describe como urinoide, este olor puede ser más fuerte en muestras concentradas sin que esto implique infección. En la tabla se resumen algunas de las variaciones más significativas del olor de la orina. Olor Alcohol Amoniacal

Fecaloide Fruta fresca o acetona

Hedor hepático

Humedad Rancio Sudor de pies Sulfúrico Sulfuro de hidrógeno

Importancia clínica intoxicación por etanol infecciones del tracto urinario por bacterias que descomponen la urea (ureasa positivas), retención prolongada de orina fístulas vesico-intestinales en presencia de cetonuria, acidosis metabólica (frecuentemente debida a ayuno prolongado o diabetes mellitus no controlada) olor a rancio de la orina y el aliento en presencia de encefalopatías hepáticas fenilcetonuria Hipermetioninemia, tiroxinemia Exceso de ácido butírico o hexanoico, descomposición de cistatina infecciones del tracto urinario con proteinuria (debida a la putrefacción producida por bacterias)

D. Espuma: Normalmente en la orina es blanca, abundante y fugaz. Si la espuma es blanca abundante y persistente pueden sugerir presencia de proteínas. También podemos encontrar espuma de color verde, escasa y fugaz cuando hay presencia de pigmentos biliares (ictericia) E. pH: Es el reflejo de la acidez de la orina. El pH normal va de 4.5 - 8.2.con un promedio de pH 6. Influyendo el régimen dietético de cada paciente. Este se determina utilizando una cinta lectora de pH la que se sumerge en una muestra de orina por dos o tres segundos y luego se compara el color obtenido con una carta patrón de colores.

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La prueba se basa en la combinación de tres indicadores: el rojo de metilo, el azul de bromotimol y la fenolftaleína, que reaccionan con los iones de hidrógeno, presentes en la muestra de orina. Las reacciones producen cambios cromáticos, que van del naranja al verde amarillo y al azul, que el bacteriólogo mediante una tabla de comparación puede leer o el lector de tirillas detectar para determinar el pH de la orina. Antes de interpretar el pH de la orina vale la pena recordar que los riñones normales producen orina con pH de 4,5 a 8,2, usualmente éste se encuentra alrededor de 5,5 a 6,5.La orinase torna más alcalina después de las comidas; debido a la secreción de ácido por la mucosa gástrica su pH es más bajo en estados de ayuno. Las proteínas causan disminución del pH y los cítricos lo aumentan. Además, en los niños usualmente es alcalina, relacionado con el consumo de leche. Valores de referencia: de 4,8 a 7,4 a lo largo del día y 5,5 a 6,5 en la orina de la primera muestra de la mañana. Una de las principales funciones del riñón es mantener el equilibrio ácido-base del organismo, de tal manera que el pH sanguíneo se mantenga estable. En términos generales, a excepción de los pacientes con acidosis tubular renal, el pH de la orina refleja el pH sérico. La incapacidad para acidificar la orina a un pH menor de 5.5, a pesar de un ayuno prolongado y dela administración de una carga de ácido, es considerado como el sello característico de la acidosis tubular renal. En la acidosis tubular renal tipo I (distal), el pH sérico es ácido pero la orina es alcalina, esto es secundario a la incapacidad de secretar los protones en la orina. La acidosis tubular renal tipo II (proximal) se caracteriza por una inhabilidad en la absorción del bicarbonato. Esta situación produce la orina alcalina inicialmente, pero como la carga de filtración de bicarbonato disminuye, la orina se torna más ácida. Utilidad clínica: El pH de la orina es útil en la evaluación del estado ácidobásico de un determinado paciente, por ejemplo: Pacientes pH < 7 debido a una acidosis metabólica por ayuno prolongado, acidosis diabética, insuficiencia renal, acidosis tubular renal, algunas sustancias químicas y medicamentos (salicilatos, etilen-glicol, alcohol, anfotericina, espironolactona, etc.) o a una acidosis respiratoria por retención de CO2, como puede ocurrir en pacientes con enfisema. Pacientes con pH > 7 debido a alcalosis metabólica por deficiencia grave de potasio, ingestión excesiva de álcalis, diuréticos y vómito o a alcalosis respiratoria por hiperventilación. El pH de la orina también es de utilidad en el diagnóstico y manejo de las infecciones y cálculos del tracto urinario. La orina alcalina en un paciente con infección del tracto urinario sugiere la presencia de un organismo que degrada la urea, la cual puede estar asociada con cristales de fosfato de amonio y magnesio que pueden formar cálculos coraliformes. Los valores de pH reiteradamente alcalinos evidencian una infección del tracto urogenital, a pesar de la disminución de la sobrevida de los leucocitos. Los cálculos de ácido úrico están asociados con la acidificación de la orina.

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Resultados falsos positivos o negativos: Si la muestra no se procesa en el tiempo adecuado, la orina puede tornarse alcalina como consecuencia de la descomposición bacteriana de la urea y en este caso la determinación del pH carecería de valor diagnóstico.

Limitaciones de la prueba: El pH urinario puede modificarse según los hábitos nutricionales del individuo: las proteínas animales y las frutas ácidas acidifican la orina y las dietas vegetarianas y ricas en citrato la alcalizan. Cuando el pH urinario se encuentra en extremos, alto o bajo, puede haber destrucción prematura de leucocitos y eritrocitos, lo que explica la combinación de resultados negativos en el sedimento con una reacción positiva para alguna de estas células en la tirilla. F.

Densidad: La prueba, mediante reacción con un formador de complejos y detección de los protones liberados, mide las concentraciones iónicas en orina. Como resultado de las reacciones se producen cambios cromáticos, que el bacteriólogo mediante una tabla de comparación puede leer o el lector de tirillas detectar. Dependiendo de la marca de tirillas utilizadas, se determina o no los componentes no iónicos de la orina, tales como la glucosa o la urea. Valores de referencia: Varía de 1.015 a 1.025. A diferencia de la osmolaridad, que depende sólo del número de partículas en la orina, la gravedad específica depende tanto del peso como del número de ellas. Es así como sustancias de alto peso molecular pueden aumentar significativamente la gravedad específica sin mayor modificación de la osmolaridad. Desde el punto de vista de los valores de la gravedad específica de la orina, hay términos que se definen con ella: isostenuria cuando constantemente está en 1.010 e hipostenuria cuando está por debajo de este valor; en tanto que el término de hiperstenuria no se utiliza. En estado normal, la gravedad específica de la orina puede oscilar entre 1.003 y 1.030, pero en la práctica, un valor menor de 1.010 indica una relativa hidratación y un valor mayor de 1.020 sugiere una relativa deshidratación. Utilidad clínica de la prueba: Como parámetro de laboratorio, la gravedad específica ofrece al médico información importante sobre el estado de hidratación y de la capacidad de concentración de los riñones de un paciente. La gravedad específica de la orina se aumenta en presencia de glucosuria, en el síndrome de secreción inapropiada de la hormona antidiurética y puede estar disminuida por el uso de diuréticos, en la diabetes insípida, en el hiperaldosteronismo, en la insuficiencia suprarrenal y cuando hay daño de la función renal. En la mayoría de los pacientes con enfermedad renal parenquimatosa, el margen de variación de la gravedad específica se estrecha con el tiempo, hasta que finalmente el filtrado glomerular no se altera en su paso por el nefrón en donde se fija en 1.010 o

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menos. En el paciente con oliguria, la densidad específica puede ayudar a distinguir entre insuficiencia renal aguda, en la que hay isostenuria y la oliguria por deshidratación, en la cual se encuentra elevada. Ejemplos de hipostenuria persistente son la diabetes insípida, la ingestión compulsiva de agua, la hipopotasemia grave, la hipercalcemia, enfermedades renales parenquimatosas fundamentalmente del tipo de túbulo intersticial, la insuficiencia renal aguda y los defectos tubulares renales. Además, la gravedad específica puede ser de utilidad para evaluar la calidad de la muestra en estudios antidopaje y consumo de drogas de abuso ya que cuando está por debajo de 1.005 es altamente sospechosa de estar diluida. Resultados falsos positivos o negativos: La gravedad específica tiende a estar falsamente elevada en orinas con pH por debajo de 6 y falsamente disminuida en orinas con pH por encima 7. Cuando en la orina hay pequeñas cantidades de proteínas (100 a 500mg/día) o cetonuria, la gravedad específica usualmente arroja valores un poco más altos que los reales. Limitaciones de la prueba: La gravedad específica de la orina depende del estado de hidratación, la cual puede estar modificada, intencional o accidentalmente, debido a la ingesta de éstos, la transpiración ,la temperatura medioambiental y el uso de diuréticos, incluido el café. Cuando la densidad específica está por debajo de1.010 tiene significación analítica por cuanto en dicha orina, cuando hay eritrocitos y/o leucocitos, éstos se destruyen rápidamente dando como resultado un sedimento urinario negativo (falso negativo) mientras que la reacción para eritrocitos y leucocitos es positiva en la tirilla (verdadero positivo). Interferencia con medicamentos: Los medicamentos, y cualquier otro tipo de sustancias, que modifican la diuresis pueden dar resultados falsamente bajos o altos, con valores que pueden oscilar entre 1.000 y1.040, incluso en personas sanas. IV. MATERIALES:    

Probetas Cintas de pH Urodencímetro Muestra de orina.

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V.

PROCEDIMIENTO: 1. Obtención de la muestra.

2. Observación del aspecto color y espuma.

3. Determinación de la densidad. En la probeta con una cantidad suficiente de orina, colocamos el urodensimetro.

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4. Medición de pH. Colocar una tira reactiva en el frasco con orina y comparar con la tabla.

VI.

RESULTADOS.

CARACTERÍSTICA

ASPECTO

RESULTADO

Claro, limpio y transparente

COLOR

Amarillo oscuro.

OLOR

Sui generis.

ESPUMA

DENSIDAD

PH

TEMPERATURA

Blanca, escasa y fugaz.

1.025

7

24°

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VII.

CONCLUSIONES. Al finalizar la práctica podemos concluir según los resultados obtenidos que la orina del paciente muestra características físicas normales y densidad y pH dentro del rango de referencia.

VIII.

RECOMENDACIONES.  Es importante una correcta obtención de la muestra así como su manipulación, conservación y transporte.  También una buena metodología de trabajo por parte del personal encargado asegura la fiabilidad de los datos obtenidos reduciendo al mínimo errores que conllevan el rechazo de las muestras.  Tener en cuenta que un examen general de orina es una prueba útil como apoyo para el diagnóstico temprano de enfermedades renales.

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PRACTICA Nº 03. EXAMEN QUIMICO DE ORINA I.

OBJETIVOS:  Realizar el estudio cualitativo y cuantitativo de sustancias anormales de la orina.  Reconocer los valores de proteínas, hemoglobina, glucosa, cetonas, Bilirrubina y urobilinógeno que contiene la muestra de orina.

II.

INTRODUCCION:

Realizar un examen químico a una muestra de orina nos permite determinar un estudio cualitativo, semicuantitativo o cuantitativo de algunas sustancias que pueden estar presentes en una muestra de orina y cuya presencia a niveles elevados es indicador de alguna patología. Teniendo en cuenta en esta práctica que la toma de muestra es muy importante, para la determinación de ciertas sustancias que se ven directamente influenciadas por la alimentación elevando sus niveles de concentración en la sangre y por ende en orina. Para realizar los estudios químicos de la orina existen los métodos convencionales como: para la determinación cualitativa de proteínas el método de Héller, para la determinación semicualitativa de glucosa el método de Benedict y para la determinación cualitativa de acetona el método de Legal. Sin embargo actualmente existe un método más sensible y rápido que se realiza con tiras reactivas (Labstix, Multistix y otras) que contienen espacios con diferentes reactivos específicos, indicadores y buffers (pH, glucosa, hemoglobina, etc). En la presente práctica emplearemos los métodos convencionales y el método habitual para determinar sustancias anormales en la orina como: proteínas, glucosa, cuerpos cetónicos, etc.) III.

FUNDAMENTO TEORICO. La presencia de sustancias anormales en la orina nos indica la presencia de algún patología. Dentro de estas sustancias podemos encontrar.

1. PROTEINAS. El test para proteínas se hace en orina entera, pero para pruebas semicuantitativas de proteína urinaria deben realizarse en el sobrenadante de orina

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centrifugada ya que las células suspendidas en orina normal puede producir una estimación falsamente alta de proteína. Normalmente, sólo pequeñas proteínas del plasma son filtradas al glomérulo y son reabsorbidas por los túbulos renales. Sin embargo, una cantidad pequeña de proteínas del plasma filtradas y proteína secretada por el nefrón (proteína de Tamm-Horsfall) pueden encontrarse en orina normal. La excreción de la proteína total normal generalmente no excede 150 mg/24 horas o 10 mg/100 ml en cualquier muestra simple. Más de 150 mg/24 horas se define como proteinuria. Proteinuria > 3.5 g/24 horas son severas y conocidas como síndrome nefrótico. Las tiras detectan proteína por producción de color del colorante indicador, Azul de Bromofenol que es muy sensible a la albúmina pero detecta globulinas y pobremente proteína de Bence-Jones. La precipitación a través de calor es un mejor método semicuantitativo, pero no es una prueba muy sensible. El test del ácido sulfosalicílico es una prueba de precipitación más sensible. Puede detectar albúmina, globulinas, y proteína de Bence-Jones a concentraciones bajas. En términos gruesos, resultados positivos trazas (que representa una apariencia ligeramente opalescente en orina) es equivalente a 10 mg/100 ml o aproximadamente 150 mg/24 horas (el límite superior normal). 1+ corresponden a aproximadamente 200-500 mg/24 horas, un 2+ a 0.5-1.5 g/24 horas, un 3+ a 2-5 g/24 horas, y un 4+ representan 7 g/24 horas o mayor. 2. GLUCOSA. Menos de 0.1 % de glucosa normalmente es filtrado por el glomérulo y aparece en orina (< 130 mg/24 hr). Glucosuria (exceso de azúcar en orina) generalmente significa diabetes mellitus. Las tiras que emplean la reacción de glucosa oxidasa para detectarla son específicas para glucosa pero pueden perder otros azúcares reductores como galactosa y fructosa. Por esta razón, se procesan las orinas de recién nacidos e infantes rutinariamente para azúcares reductores por métodos diferentes a glucosa oxidasa (como el Clinitest, una prueba modificada de la reducción de cobre de Benedict). El valor normal de la glucosa en orina es de100 mg/dl (tira reactiva = 0). Su aparición puede deberse a dos factores: 1) Disminución de la reabsorción tubular (tubulopatía proximal) y 2) Niveles sanguíneos que superan el umbral renal, como la diabetes mellitus u otros estados hiperglucémicos. 3. CETONAS. Las cetonas aparecen en la orina cuando existe un metabolismo anormal o disminuido de carbohidratos, por lo cual es muy común hallarlas durante el ayuno, el ejercicio prolongado o cuando existen vómitos reiterados. La única patología en la cual la cetonuria tiene importancia práctica es la diabetes mellitus.

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4. SANGRE. La tira reactiva positiva indica tres posibilidades: 1) Hematuria, 2) Hemoglobinuria o 3) Mioglobinuria. La observación del sedimento en la muestra de orina centrifugada orientará el diagnóstico. Si hay eritrocitos estamos en presencia de hematuria; en caso contrario deberá realizarse el diagnóstico diferencial entre hemoglobinuria y Mioglobinuria para el cual podrá utilizarse cualquiera de los métodos que se enumeran a continuación: 1) Se centrifuga una muestra de sangre y si el plasma es rosado existe hemólisis; por lo tanto, en orina hay hemoglobina(Hb); si el plasma es claro en orina hay mioglobina; 2) Agregando sulfato de amonio(2,8 g) a 5 ml de orina centrifugada, se espera5 minutos y se filtra. La Hb precipita y queda en el papel; la mioglobina no precipita, por lo tanto pasa libremente a través del filtro. La patología asociada a Mioglobinuria es el daño muscular severo, que puede ser causado por convulsiones, ejercicio prolongado, shock eléctrico, politraumatismos severos e hipertermia maligna, en especial si existe una miopatía preexistente. La mioglobina es liberada por los músculos y es libremente filtrada por el riñón. Cuando la cantidad filtrada de Hb o mioglobina es importante, puede desarrollarse insuficiencia renal aguda por obstrucción tubular. La hemoglobinuria es secundaria a crisis hemolíticas de cualquier etiología. 5. BILIRRUBINA. La reacción positiva para la bilirrubina indica la presencia de enfermedades hepáticas. La lectura de trazas de bilirrubina es suficiente para realizar una investigación en sangre con enzimas hepáticas. 6. UROBILINOGENO. El urobilinógeno está presente en orina cuando en la sangre hay aumento de bilirrubina no conjugada, como ocurre en las anemias hemolíticas o en la hepatitis grave, aunque ya casi no se toma en cuenta porque el urobilinógeno se oxida rápidamente con el aire. 7. LEUCOCITURIA. Se detecta por la acción de la estearasa citoplasmática leucocitaria que produce la hidrólisis del reactivo de la tira y cambia el color. Puede diagnosticarse un número anormal de leucocitos con un rango de sensibilidad de 70%-80%. En orinas muy alcalina existe hemólisis de leucocitos, obteniéndose falsos positivos. 8. NITRITOS. La enzima reductasa bacteriana metaboliza los nitratos urinarios en nitritos. Si la orina contiene un número importante de bacterias, por este método se podrá detectar bacteriuria con una sensibilidad del 50%.Sin duda el examen microscópico es el mejor método para diagnosticar leucocituria y bacteriuria.

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Falsos positivos y negativos de las tiras reactivas Los factores más comunes que pueden alterar los resultados de las tiras reactivas son los siguientes: valores extremos de pH y densidad urinarios, oxidantes, antibióticos, ácido ascórbico, proteinuria, antisépticos y jabones. IV.           V.

MATERIALES: Tubos de ensayo Muestra de orina Mechero Ácido nítrico concentrado Reactivo de Benedict Nitropruciato de sodio 5% Hidróxido de sodio 50% Ácido acético glacial Lugol Tiras reactivas PROCEDIMIENTO: 1. Determinación cualitativa de proteínas:( Método de Héller). Prueba de laboratorio para la determinación de proteinuria en la que la orina se coloca en capa sobre ácido nítrico. La aparición de un anillo de precipitado proteico en la interfase de los dos líquidos es un signo positivo. Este método puede ser útil cuando sólo se dispone de una cantidad pequeña de orina, pero no es tan sensible como las demás pruebas de precipitación. También es muy difícil semicuantificar los resultados.  RESULTADOS POSITIVOS FALSOS Esta prueba resulta afectada por los fármacos que interfieren las pruebas de calor y con ácido. Concentraciones elevadas de ácido úrico y de urea pueden dar resultados positivos falsos, pero estos obstáculos pueden salvar diluyendo la orina y repitiendo la prueba.  RESULTADOS NEGATIVOS FALSOS Como esta prueba es muy sensible, las orinas diluidas pueden dar resultados negativos. El uso de rutina de ácido nítrico concentrado en esta prueba puede constituir una desventaja. El procedimiento para la reacción del anillo de Robert es idéntico al de la reacción de Heller, salvo que el reactivo para la primera está formado

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por una parte de ácido nítrico concentrado y 5 partes de sulfato de magnesio saturado.  SIGNIFICACIÓN CLÍNICA La orina de personas sanas no contiene proteínas o sólo pequeñas cantidades; normalmente el glomérulo evita el paso de estas de la sangre al filtrado glomerular. Alteraciones glomerulares causan el aumento de la permeabilidad de las proteínas plasmáticas lo que ocasiona la proteinuria, que indica presencia de proteínas en orina. La presencia persistente de proteinuria indica enfermedad renal. Concentraciones elevadas de proteínas en líquido cefalorraquídeo (LCR) pueden ser debidas a infecciones o a presión intracraneal elevada. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.  PROCEDIMIENTO:  Colocar 1 ml de ácido nítrico concentrado en el fondo de un tubo de ensayo.  Cubrir el ácido con 1 ml de orina centrifugada, pero cuidado que ésta se deslice lentamente por la pared del tubo, de este modo se forman dos capas de líquido.  La formación de un precipitado blanco en la unión de ambos líquidos al cabo de tres minutos indica la presencia de proteína.  Pude intentarse cuantificar la densidad del anillo formado. RESULTADOS:

La formación de un anillo blanco en la interfase del ácido nítrico y la orina nos demuestra una proteinuria.

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2. Determinación semicuantitativa de glucosa (Método de Benedit) El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O). El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en solución forma un anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal, su grupo aldehído puede reaccionar con el ion cúprico en solución. En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetopentosa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un intermediario enólico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cúprico). Los disacáridos como la sacarosa (enlace α (1 → 2) y la trehalosa (enlace α(1→1), no dan positivo puesto que sus OH anoméricos están siendo utilizados en el enlace glucosídico. En resumen, se habla de azúcares reductores cuando tienen su OH anomérico libre, y éstos son los que dan positivo en la prueba de Benedict.  PROCEDIMIENTO:  En un tubo de ensayo colocar 2.5 ml de reactivo de Benedict.  Agregar 4 gotas de orina.  Mezclar bien luego llevar a baño maría de agua hirviente por 5 minutos.  Dejar enfriar espontáneamente.

CC COLOR

APARIENCIA

0.0 Azul

(-)

GLUCOSA g/ 100ml 0.25 0.5 1.0 Verde Verde c/ Amarillo pp amarillo a Verde oliva (±) (+) (2+)

1.5 Marrón

2.0 Anaranjado a Roja

(3+)

(4+)

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 RESULTADOS.

La Acción reductora de la glucosa en medio alcalino de sulfato de cobre reduce el ión cúprico en cuproso el cual precipita en forma de óxido de color anaranjado. Apariencia: (4+)

3. Determinación cualitativa de acetona (Metodo de Legal) La prueba se basa en el principio de la prueba de Legal. El ácido acetoacético y la acetona reaccionan con nitroprusiato sódico y glicina en un medio alcalino para formar un complejo color violeta, que el bacteriólogo mediante una tabla de comparación puede leer o el lector de tirillas detectar para determinar la presencia de cetonas en la orina. La reacción es específica para el ácido acetoacético y la acetona. No es interferida por el ácido beta-hidroxibutírico ni por la presencia de glucosa, proteínas y ácido ascórbico en la muestra. La intensidad del color de anillo es directamente proporcional a la concentración de acetona.  INTERPRETACIÓN DE LA PRUEBA: Valores de referencia: negativo (< 5 mg/dL). Las cetonas (ácido acetoacético, beta-hidroxibutírico y acetona) aparecen en la orina cuando en el organismo se produce un aumento de la degradación de las grasas por un aporte energético insuficiente de hidratos de carbono. El predominio de la lipólisis sobre la lipogénesis produce un aumento de los niveles de ácidos grasos libres en el suero y, por su descomposición en el hígado, se forma más acetil coenzima A, que puede ser utilizada por otros procesos metabólicos como el ciclo del ácido tricarboxílico. Este exceso se convierte en ácido acetoacético, que a su vez se transforma parcialmente en ácido beta-hidroxibutírico y de la acetona.  UTILIDAD CLÍNICA: Desde el punto de vista clínico, la detección de cetonuria, sin ser exclusiva, es particularmente útil en los pacientes con diabetes mellitus. La cetonuria se encuentra muy asociada a la diabetes descompensada,

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pero también puede ocurrir durante el embarazo, debido a dietas libres de carbohidratos, a deshidratación ayuno, inflamación intestinal e hiperémesis.  PROCEDIMIENTO.     

En un tubo de ensayo colocamos 3 ml de orina. Agregamos 0.3 ml de Nitropruciato de sodio al 2 %. Agregamos luego 1ml de hidróxido de sodio al 50 %. Agregamos III gotas de ácido acético glacial por las paredes del tubo. Las pruebas son positivas cuando se forma el añillo rojo vinoso.

 RESULTADOS.

No se observa la formación de un anillo de color rojo, por tanto la prueba es negativa.

4. Utilización de tiras reactivas. La Tira Reactiva de análisis de orina es una prueba de detección rápida para la detección de: Acido Ascorbico, Glucosa, Bilirrubina, Cetona, Peso.

 Procedimiento.  Colocar orina en un tubo de ensayo.  Introducir la tira reactiva.  Retirar la tira escurriendo por las paredes del tubo.  Observar cambios de color.

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 Resultados. BILIRRUBINA URUBILINOGENO CETONA GLUCOSA PROTEÍNAS SANGRE NITRITOS PH DENSIDAD LEUCOCITOS

VI.

Normal >100 + 7 1.025 24

CONCLUSIONES.  El examen químico de orina tiene la finalidad de detectar la presencia de elementos que normalmente no están presentes en la orina.  El examen de orina por medio de las tiras reactivas es un método muy útil y practico; ya que puede usarse en la práctica diaria y obtener un diagnostico presuntivo previo que se confirmará con un examen microscópico.  En esta práctica realizada con métodos convencionales y con las tiras reactivas encontramos:  Presencia de proteínas lo que puede deberse a un daño a nivel glomerular.  Glucosa en la orina siendo la causa una elevada concentración de glucosa en la sangre (diabetes mellitus) y.

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 La presencia de leucocitos que puede deberse a una infección urinaria o inflamación de las vías urinarias. VII.

CUESTIONARIO. Importancia de los nitritos en orina. La base química de la prueba de nitrito es la capacidad de ciertas bacterias para reducir el nitrato un constituyente normal de la orina, a nitrito que normalmente no aparece en orina. Por tanto la presencia de nitrito en la orina nos ayudará a detectar la infección inicial de la vejiga (cistitis), porque los pacientes a menudo son asintomáticos o tienen síntomas vagos que podrían no inducir al médico a que solicite un urocultivo. Que como consecuencia de una cistitis no tratada se puede llegar a una pielonefritis, al daño del tejido renal, deterioro de la función renal, hipertensión e incluso septicemia. También otro aspecto de importancia clínica es la monitorización de pacientes con alto riesgo de infecciones urinarias y la evaluación de la antibioticoterapia.

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PRÁCTICA Nº 04: “EXAMEN MICRÓSCOPICO DEL SEDIMENTO URINARIO” 1. OBJETIVOS:  Relacionar los datos obtenidos a través del sedimento urinario con el cuadro clínico del paciente.  Reconocer numerosas estructuras con una forma muy diversa. Como células de la vía urinaria descendente y de los riñones, así como sangre, sales urinarias precipitadas con forma cristalina o cilindros formados en los canalículos renales. 2. FUNDAMENTO TEORICO: a. SEDIMENTO ORGANIZADO: “CELULAS Y CILINDROS” 

Eritrocitos

Los hematíes se eliminan en forma muy reducida en la orina, incluso en personas normales, con aumento 400x, se puede observar aproximadamente 0 a 2 hematíes por campo. Éstos se identifican al examen microscópico como discos redondos de color débilmente amarillo rojizo, con doble contorno.

En las orinas hipotónicas se hinchan y en las hipertónicas se arrugan. La morfología de los hematíes puede revelar el origen glomerular o postglomerular de la hematuria. Los eritrocitos que atraviesan el canal glomerular aparecen "dismórficos", es decir, se deforman, fragmentan y tienen muescas. Estas células se diferencian de los hematíes uniformes de origen postglomerular. La hematuria glomerular se sospecha cuando más del 80% de los hematíes tienen aspecto dismórfico. De todas formas, la observación de hematíes eumórficos no descarta la enfermedad glomerular. Los acantocitos, es decir los hematíes en forma de anillo y evaginaciones, son característicos de la enfermedad del glomérulo. Un 5% de ellos con relación a la totalidad de los eritrocitos sugiere fehacientemente una hematuria glomerular, probabilidad que aumenta aún más si el porcentaje aumenta a un 10%. Elementos que apoyan la sospecha de una hematuria de origen glomerular son la presencia simultánea de cilindros eritrocitarios, granulosos, hialinos.

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Sedimento Hematuria

Frecuente - Todas las formas de glomerulonefritis - Afección renal de enfermedades sistémicas - Tumores benignos y malignos del riñón y vías urinarias - Traumatismos - Malformaciones - Trombosis de los vasos renales

Menos frecuente - Infección primaria - Tuberculosis - Nefropatía diabética - Pielonefritis - Enfermedades renales hereditarias

ERITROCITOS



LEUCOCITOS

Cuando se habla de leucocitos casi siempre se habla de granulocitos, y estos indican la presencia de procesos inflamatorios del riñón y la vía urinaria. Al examinar un sedimento urinario de una persona sana, pueden detectarse hasta 5 leucocitos por campo de 400x, sin que esto tenga significado patológico. Son células de tamaño mayor a los hematíes y menor a las células epiteliales, con presencia de núcleo sementado y granulaciones.

En la mujer debe tenerse en cuenta que los leucocitos hallados pueden ser de origen vaginal, sobre todo si se acompañan de una gran cantidad de células de epitelio plano, por lo que el estudio de la orina de chorro medio puede ser de gran valor para aclarar esta cuestión.

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Si además de la leucocituria se evidenciaran cilindros leucocitarios procedentes de los túbulos, el origen sería renal y el diagnóstico pielonefritis.

En los casos de leucocituria estéril (sin desarrollo bacteriano en los urocultivos) deberá descartarse tuberculosis, micosis, clamidias, herpes simple así como también Nefritis intersticial medicamentosa Sedimento

Frecuente

Leucocituria - Pielonefritis - Todas las enfermedades inflamatorias de las vías urinarias descendentes.

Menos frecuente - Glomerulonefritis - Rechazo de transplantes - Enfermedades sistémicas con afección renal

LEUCOCITOS



CÉLULAS EPITELIALES

Los elementos epiteliales son frecuentes en el sedimento urinario y su valor diagnóstico muy reducido. Existen diversos tipos: Epitelio plano: Procede de los genitales externos o de la porción inferior de la uretra. Se trata de grandes células de aspecto irregular con un núcleo pequeño y redondo, pudiendo observarse en forma frecuente un repliegue parcial en el bordecelular.

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- Epitelio de transición: Tiene su origen desde la pelvis renal, uréter y vejiga, hasta la uretra. Su presencia acompañada de leucocituria puede indicar una inflamación de la vía urinaria descendente. En caso de apreciar anomalías nucleares deberá descartarse un proceso maligno. Estas células son más pequeñas que las del epitelio plano, son redondeadas con "cola" y su núcleo es más grande y redondo.

- Epitelio tubular o renal: Son células algo mayores que los leucocitos y presentan granulaciones. Su núcleo, de difícil visualización es grande y redondo. Las células de epitelio tubular que contienen gotas de grasa muy refringentes en el protoplasma, se conocen como células granulosas o cuerpos ovales grasos y su presencia sugiere la existencia de un Sme. Nefrótico.

epitelio plano

epitelio de transición

EPITELIO TUBULAR O RENAL



CILINDROS

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La presencia de cilindros indica casi siempre la presencia de una enfermedad renal, aunque la evidencia de alguno de ellos (hialino y granuloso) puede encontrarse en personas sanas tras grandes esfuerzos físicos. Por lo general la cilindruria cursa con proteinuria, ya que los cilindros se originan por el espesamiento de las proteínas o su precipitación sobre todo en el túbulo distal. Los cilindros son estructuras longitudinales que se corresponden con la luz de los túbulos y que pueden contener diferentes elementos. Existen diversos tipos de cilindros: a) Cilindros hialinos: Está compuestos por una proteína de alto peso molecular (mucoproteina de Tamm-Horsfall) que se produce y elimina en cantidades muy pequeñas en condiciones normales. Estos cilindros son homogéneos, incoloros, transparentes y poco refringentes, por lo que son fáciles de omitir. Pueden aparecer en forma aislada en personas sanas o tras la administración de diuréticos potentes como la furosemida. No es raro detectar cilindros hialinos con inclusiones celulares (eritrocitos, leucocitos, epitelio tubular), lo que determina la presencia de enfermedad del parénquima renal.

b). Cilindros granulosos: Ocasionalmente pueden aparecer en personas sanas, aunque su presencia se relaciona con enfermedades agudas y crónicas del riñón. Suelen ser más grandes que los hialinos y presentar inclusiones granulares. No es raro observar una mezcla de cilindros hialinos y granulosos. c) Cilindros céreos: Suelen ser más anchos que los hialinos, muestran una refringencia mucho mayor y no son fáciles de omitir. Presenta muescas o hendiduras finas en sus bordes, que se dirigen perpendicularmente al eje longitudinal del cilindro.

Su presencia indica siempre una enfermedad renal crónica grave en un paciente con insuficiencia renal crónica avanzada, pero en ocasiones puede observarse en la fase de recuperación de la diuresis luego de una período de anuria. d) Cilindros epiteliales: Están compuestos de epitelio tubular descamado. Su presencia se aprecia especialmente en la fase de recuperación de la diéresis luego de una falla renal aguda por necrosis tubular isquémica o tóxica. Son poco frecuentes. e) Cilindros con inclusiones lipídicas: Se diferencian de los epiteliales por la inclusión de gotas de grasa en las células tubulares.

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f). Cilindros eritrocitarios: Se componen de eritrocitos hinchados que se adhieren a una sustancia fundamental hialina. Indican siempre el origen renal de la hematuria y por consiguiente se trata de un hallazgo muy valioso. Aparecen fundamentalmente en la Glomerulonefritis aguda y crónica y también en la Nefropatía lúpica, panarteritis nodosa, endocarditis bacteriana asociada a Glomerulonefritis. g) Cilindro leucocitario: Se producen cuando ocurre una exudación intensa de leucocitos y al mismo tiempo se eliminan proteínas por el túbulo. Su presencia tiene fundamental importancia ya que demuestra que la inflamación es de origen renal, casi siempre, a causa de una pielonefritis.

CILINDROS HIALINOS

CILINDROS GRANULOSOS

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Cilindros céreos

CILINDROS ERITROCITARIOS

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CILINDROS LEUCOCITARIOS

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PARASITOS

Las parasitosis urinarias, muy infrecuentes hasta la fecha en nuestro medio, están siendo diagnosticadas cada vez con mayor frecuencia debido a los fenómenos migratorios. Huevo de Enterobius

vermicularis

Trichomonas vaginalis 

ESPERMATURIA

La espermaturia es la eliminación de esperma con la orina. La existencia de algunos espermatozoides en la orina recientemente emitida no tiene importancia ni tiene valor clínico. La eliminación de esperma que aparece después de un acto sexual, provoca infecundidad. En la espermaturia, la orina mezclada con el esperma aparece después de un acto sexual.

ESPERMATOZOIDES

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b.- SEDIMENRO NO ORGANIZADO “CRISTALES”

CRISTALES Se presentan normalmente en todas las orinas, lo más importante es saber diferenciar cristales normales de la orina con aquellos que están asociados con alguna patología.  Cuando la orina está sobresaturada con algún compuesto cristalino en particular o cuando las propiedades de solubilidad de esta se encuentran alterados se produce la formación de los mismos.  Se observan cristales amorfos de uratos, ácido úrico y oxalatos de calcio en orinas ácidas, mientras que los de fosfatos siempre se encuentran en orinas alcalinas.  Los cristales pueden tomar diferentes formas que dependen del compuesto químico y del pH de la orina. 

1.

Cristales de ácido úrico: Existen en diversas formas, cuadros romboidales, piedra de amolar, rosetas, pesas, barriles y bastones. Su color varía desde el rojo pardo a incoloros. Significado clínico: Su presencia en la orina no necesariamente indica un estado patológico. Están presentes en la orina en enfermedades como la gota, leucemia, metabolismo de las purinas aumentado, enfermedad febril aguda y nefritis crónica.

SOLUBLES EN: NaOH diluido. INSOLUBLES EN: alcohol, ácido acético, amoníaco

2.

Oxalatos de calcio:

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 Normalmente se los encuentra en orinas ácidas, aunque también pueden formarse en orinas con un pH ligeramente alcalino a neutro.  Son incoloros, de forma octaédrica o de sobre, simulan cuadrados pequeños cruzados por líneas diagonales que se intersectan. Significado clínico: todas las formas pueden encontrarse en un sedimento normal, dependiendo de la dieta. Su número se incrementa cuando la dieta es rica en ácido oxálico (tomates, naranjas espárragos, y manzanas). Estos cristales están relacionados con la formación de cálculos renales y se han visto en gran cantidad en pacientes con patologías como la diabetes mellitus, enfermedades del sistema nervioso, enfermedad hepática y enfermedad renal crónica

Cristales de ácido hipúrico:  Se observan con escasa frecuencia, pueden formarse en orinas ligeramente alcalinas o neutras pero siempre se los encuentra en orinas ácidas.  Son incoloros o tienen un color amarillo pálido. Se los observa como prismas o placas elongadas, pueden ser tan delgados que parecen agujas y con frecuencia están agrupados. 3.

Significado clínico: Normalmente no tienen, pero se los ha encontrado en gran cantidad en pacientes con estado febril agudo y en enfermedades hepáticas.

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4. Cristales de fosfatos triple:  También llamados fosfatos amonio magnésicos.  Aparecen en las orinas neutras y alcalinas. Se presentan como prismas incoloros de 3 a 6 caras que con frecuencia tienen extremos oblicuos.  A veces pueden precipitar formando cristales plumosos o con aspecto de helecho.

Significado clínico: aparecen en procesos patológicos como pielitis crónica, cistitis crónica, hipertrofia de próstata y en casos en que exista retención vesical de la orina. Pueden formar cálculos urinarios.

SOLUBLE: ácido acético y alcohol caliente. INSOLUBLE: HCl

5.

Cristales de cistina: Se encuentran en orinas con pH ácido y se observan como láminas delgadas, incoloras y hexagonales.

Significado clínico: la mayoría de las veces se los observa en orinas de pacientes que padecen distintos tipos de desórdenes metabólicos hereditarios.

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6.

Cristales de tirosina:

 Son muy poco frecuentes y sólo se observan en orinas ácidas. Su color varía desde incoloros a amarillo pardo.  Su forma es la de agujas muy finas y refringentes, apareciendo en grupos o acúmulos.  Frecuentemente se los encuentra junto con cristales de leucina. Son producto del metabolismo proteico. Significado clínico: aparecen en orinas de pacientes con necrosis o degeneramiento tisular como por ejemplo enfermedad hepática aguda, hepatitis, cirrosis, leucemia y fiebre tifoidea.

SOLUBLE: Hidroxido de amonio, HCl INSOLUBLE: ácido acético)

7.

Cristales de colesterol:

 Se encuentran en orinas ácidas o neutras, aparecen como láminas planas y transparentes con ángulos mellados.  Muchas veces se encuentran formando una película en la superficie de la orina en lugar de encontrarse en el sedimento. Significado clínico: no son comunes en la orina y siempre que estén se los relaciona con alguna patología.

Se los encuentra en enfermedades renales como en el síndrome nefrótico y predominan en la quiluria, que se produce como consecuencia de la obstrucción del flujo linfático del abdomen.

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SOLUBLE: cloroformo, éter, alcohol caliente. INSOLUBLE: ácido acético.

c. PROCEDIMIENTO:  Con un movimiento rápido y firme eliminamos el sobrenadante y colocamos I gota del sedimento entre porta y cubre.  Observamos en el microscopio a menor aumento y luego a mayor aumento.

Glóbulos blancos

Células epiteliales

d. CONCLUSIONES:  Estas pruebas deben ser realizadas en la primera orina de la mañana, hacer una toma adecuada de la muestra y examinar el sedimento inmediatamente después de emitida.  Cuando las muestras de orina son procesadas, la probabilidad de detectar infección del tracto urinario, usando el examen microscópico del sedimento urinario, es alta

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 Si se cumplen estas dos premisas, consideramos el análisis microscópico del sedimento urinario constituyen una alternativa razonable para iniciar el manejo del paciente, mientras se obtienen los resultados del urocultivo.

PRÁCTICA Nº 05: “TOMA DE MUESTRA Y VSE/Hto” 1. OBJETIVOS:  Aprender técnicas correctas para una buena extracción de toma de muestra.  Aprender a utilizar y a medir el hematocrito el cual nos permitirá determinar si nuestra muestra está dentro de los valores de referencia.  Calcular al valor hematocrito y la velocidad de sedimentación eritrocitica. 2. FUNDAMENTO TEORICO: MUESTRAS SANGUINEAS Es el fluido más utilizado. Se debe definir muy bien el protocolo de reparación de muestras, el tiempo de aplicación del torniquete, la postura durante la toma de sangre, la temperatura, de transporte y el almacenamiento. Los datos obtenidos de sangre venosa no pueden compararse con los obtenidos de sangre de capilares. Los valores hematológicos también dependen de la edad, sexo hábito de fumar, hora de día, posición erecta o supina del paciente durante la toma, duración de la estasis venosas producida por el torniquete y la administración de líquidos y drogas. PREPARACIÓN DEL PACIENTE Ayuno del paciente: Si exceptuamos la glucosa, los triglicéridos y el fósforo inorgánico, los demás elementos sanguíneos no se alteran significativamente después de un desayuno “normal” por lo que el paciente no precisa guardar ayuno absoluto antes de la toma de sangre. “El paciente concurrirá con 8 hs de Ayuno para efectuarse cualquier tipo de extracción sanguínea, siendo la excepción la determinación de triglicéridos y perfil lipidico para las cuales el ayuno será de 12 hs “ Momento para la obtención de los especímenes sanguíneos

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Es mejor obtener los especímenes sanguíneos de 7 a 9 hs de la mañana. Las alteraciones están asociadas a los ritmos circadianos o ritmos biológicos, que provocan cambios relacionados con el día. Por ej. La secreción de Catecolaminas es mayor durante el día que durante la noche, excepto en los veladores. “La toma de los especímenes sanguíneos se realizara entre las 7,00 a 9,00 de la mañana, con lo cual se respetan los ciclos circadianos o ritmo biológicos de todos los especímenes “ Ejercicio antes de la toma La actividad muscular tiene efectos, tanto transitorios como de larga duración, sobre diversos parámetros químicos. “El paciente no habrá realizado ejercicios previo a la extracción de la muestra sanguínea” Posición del paciente Debe tranquilizarse al paciente, el estrés provocado por la flebotomia puede afectar los resultados del laboratorio como cambios en la concentración de catecolaminas y gases en sangre. Las modificaciones posiciónales afecta: Albúmina, proteínas, diversas enzimas, calcio, bilirrubina, colesterol, triglicéridos, angiotensina, aldosterona y renina. Acostado: Existe un acomodo o distribución hemodinámica y de otros líquidos corporales Sentado: Empieza la salida de líquido intravascular al espacio intersticial y, por lo tanto, se produce hemoconcentración “La toma de la muestra se realizara si fuera posible con el paciente acostado, de no poder hacerlo la misma se hará con el paciente sentado y después de que haya descansado algunos minutos” Torniquete Este puede producir éxtasis venoso localizado, la muestra se hace hemoconcentrada, induciendo valores erróneamente altos para todos los especímenes proteicos y todas las especies ligadas a proteínas. El mismo no debe prolongarse por más de 1 minuto. Se pide al paciente que cierre el puño, lo cual distiende las venas, el ejercicio excesivo del puño debe evitarse, dado que el mismo puede producir elevación en la

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concentración de potasio, como en la de la LDH. Las muestras para determinar Lactato deben ser tomadas sin torniquete. “El uso del torniquete no debe exceder de 1 minuto y su presión no debe ser excesiva, para determinar Lactato no debe usarse el mismo”  Obtención de las muestras 1. Punción capilar La sangre capilar contiene más glucosa, más leucocitos, mas glóbulos rojos y hemoglobina. Pero las plaquetas son mas bajas. Los glóbulos rojos de la sangre de capilares son menos frágiles que los venosos.

Sitios de punción subcutánea

Técnica: 1) Seleccionar el punto para la punción. En lactantes casi siempre se elige la superficie plantar interna o externa del talón. En niños de más edad puede utilizarse la superficie palmar de la última falange del 2º,3º o 4º dedo de la mano. Otro punto es la superficie plantar del 1º dedo del pie, la cara lateral de un dedo junto a la uña y el lóbulo de la oreja. 2) Calentar la zona de la punción con una compresa húmeda a una temperatura no superior a 42ºC con esto se aumenta el flujo sanguíneo por las arteriolas y los capilares, consiguiendo una muestra con un mayor componente arterial que resulta útil en las determinaciones de pH y gases. 3) Limpiar la zona de punción con una solución acuosa de alcohol al 70%. Se deja secar la piel y no se toca la zona con ningún objeto que no haya sido previamente esterilizado.

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4) La punción se lleva a cabo con una lanceta estéril, realizando un único movimiento con el instrumento casi en paralelo con respecto a la superficie de la piel. 5) Desechar la primera gota de sangre enjuagándola con una gasa estéril. A continuación, regular el flujo de sangre mediante presión con el pulgar. No hay que realizar maniobras de ordeñe ya que se pueden hemolizar la muestra e introducir un exceso de líquido histico. 6) Recoger la muestra en un recipiente adecuado. Para volúmenes pequeños se pueden utilizar capilares desechables de vidrio de pequeño calibre y extremo abierto. El grosor puede ser uniforme o disminuir gradualmente en uno de los extremos. Vienen heparinizados o no y con agitados magnético o no. Ventajas:  Son relativamente fáciles de obtener, es la forma preferida de sangre para los frotis sanguíneos.  Es el método de elección en los pacientes pediátricos, especialmente en lactantes. Este tipo de punción también suele utilizarse en pacientes geriátricos.  La excesiva cantidad extraída por venopunción repetidas puede provocar anemia especialmente en niños prematuros.  La venopunción de venas profundas también puede condicionar, ocasionalmente: 1) paro cardiaco 2) hemorragia 3) trombosis 4) constricción venosa seguida de gangrena en las extremidades 5) lesión de órganos o tejidos puncionados accidentalmente

Desventajas:  Solo puede obtenerse una pequeña cantidad de sangre y por lo tanto no pueden hacerse repeticiones.  La sangre tiende a hemolizarse o coagularse si la obtención lleva mucho tiempo, y no es recomendada en pacientes cuya resistencia a la infección esta marcadamente disminuida 2. Punción venosa La facilidad de la obtención de la muestra venosa hace que este sea el método principal de extracción. La mayoría de las sustancias analizadas se encuentran presentes en forma soluble o dispersas en forma homogénea. Se evitara la inyección de aire en la vena, comprobando que el embolo esta hasta el fondo del barril. También

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se evitara la extracción en la extremidad en que haya una venoclisis o transfusión de sangre, soluciones glucosadas o con electrolitos. Siempre libere el torniquete antes de extraer la aguja esto evitara que aparezca un hematoma. Cuando se obtienen múltiples muestras, quitar el torniquete al término de un minuto de haber comenzado la extracción de sangre, para evitar la hemoconcentración. Sin embargo hay que considerar varias fuentes de error que se presentan durante la preparación del sujeto para la extracción. El responsable de efectuar la flebotomía debe tener los conocimientos básicos del procedimiento: Concentración sanguínea local es consecuencia de una aplicación prolongada de un torniquete. Una retracción excesiva del embolo puede contraer una vena pequeña y la sangre no entra en la jeringa, esto puede remediarse haciendo un ligero movimiento hacia atrás y adelante y reduciendo la fuerza de aspiración. También puede no llegar sangre a la jeringa si se punciona solo la capa exterior de la vena, esto se soluciona retrayendo un poco la aguja y haciéndola entrar de nuevo, esto puede provocar hematoma, si se nota indicios de este se debe retirar la aguja y aplicar una presión local de 10 minutos, no masajear. Transfusión de la vena, esto también causa de que no salga sangre por haberla atravesado, en este caso se retira la aguja un poco, se aspira suavemente para ver si entonces sale. Sincope, su mejor tratamiento es poner al paciente en decúbito, si ya esta darle atención medica. Se realiza con agujas que pueden estar conectadas a jeringas o tubos de ensayo de vidrio con un vació determinado Las agujas y jeringas descartables eliminan el riesgo de transmisión de hepatitis, siempre que se realice la extracción con la técnica adecuada y se elimine las agujas en la forma correcta en descartadores apropiados. Para evitar la punción accidental del operador no debe tratar de volver a encapuchar la aguja nuevamente. Los tubos deben contener distintos tipos de anticoagulantes según la determinación que se debe practicar. A partir de sangre sin anticoagulante se obtiene suero, si tiene anticoagulante se obtiene plasma. Existen tubos separadores de suero que se emplean para obtener el suero a partir de sangre total. Un tubo de vidrio al vació sirve como sistema cerrado. Durante el centrifugado la sangre se hace pasar por un tubo de gel de sílice localizado en la base del tubo, que modifica temporalmente su viscosidad. El peso especifico del gel es intermedio entre el de los hematíes y el del suero, de forma que el gel va subiendo y se sitúa entre los hematíes alojados en el fondo y la capa superior de suero. Finalmente se endurece y forma una barrera inerte. En estos tubos la muestra puede ser transportada sin que se altere el estado de la mezcla También hay tubos pediátricos basados en el mismo procedimiento. Las ventajas de los tubos separadores de suero son: 1) su fácil manejo. 2) Un tiempo de procesamiento más corto por la activación del coágulo. 3) La obtención de una mayor cantidad de suero. 4) La posibilidad de proceder a la centrifugación en una sola fase. 5) La

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utilización del mismo tubo en el que se ha extraído la muestra. 6) Una fácil identificación

Venas superficiales del brazo 1Cefalica; 2 Basílica; 3 Media Basílica; 4 Mediana Cefálica; 5 Radial accesoria; 6 Cubital superficial; 7 radial superficial

Pasos de la punción venosa

VSE O ERITROSEDIMENTACIÓN Es una prueba diagnóstica de laboratorio utilizada frecuentemente en medicina. Consiste en medir la velocidad con la que sedimentan (decantan, caen) los glóbulos

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rojos o eritrocitos de la sangre, provenientes de una muestra de plasma sanguíneo (Citratado o con EDTA) , en un periodo determinado de tiempo, habitualmente una hora. Esta prueba y su relación con la medicina fueron descubiertos y desarrollados en año 1897 por un doctor Polaco Edmund Biernacki. Para la prueba, la sangre no debe coagularse, motivo por el cual, la sangre extraída se le adiciona una sustancia anticoagulante (la más común es citrato sódico al 3,8 % en proporción exacta de 1 parte de citrato por 3 de sangre, es decir, al 1/4). La sangre, homogeneizada, se carga en una pipeta, se la acomoda en un soporte y a determinado tiempo (60 minutos si está la pipeta a 90 grados de la mesa donde se apoya el soporte, o menos tiempo cuanto menor sea el ángulo entre la mesa y la pipeta; hay soportes especiales que permiten inclinaciones controladas para obtener ángulos diferentes a 90 grados). Al cabo del tiempo establecido, se procede a leer cuantos milímetros han sedimentado (bajado los hematíes). La sedimentación eritrocitica se realiza en dos etapas: a) Hemaglutinación: Es la tendencia de los hematíes a formar agregados en forma de "pilas de moneda". Estos sedimentan de forma muy lenta por lo que van a determinar la velocidad de todo el proceso b) Sedimentación: Desplazamiento de los hematíes hacia el fondo de la pipeta a velocidad constante acúmulo o depósito en el fondo. El principio físico de esta prueba se basa en la Ley de Stokes considerando los hematíes como esferas suspendidas en un medio infinito.

Factores: 1. Formación de Rouleraux 2. Concentración de fibrinógeno en el plasma 3. Concentración de globulinas α y β en el plasma Valores de referencia: Varón: 0 – 15 mm/h

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Mujer: 0 – 19 mm/h

HEMATOCRITO El hematocrito es el porcentaje ocupado por glóbulos rojos del volumen total de la sangre. Los valores de referencia varían entre Hombres : 4o%- 54% Mujeres: 37%-47% Estas cifras pueden cambiar de acuerdo a diversos factores fisiológicos, como la edad y la condición física del sujeto. Es una parte integral del hemograma, junto con la medición de la hemoglobina, y el conteo de leucocitos y plaquetas.

Valores bajos de hematocrito La disminución de glóbulos rojos en la sangre es una anemia. Se puede relacionar con diferentes condiciones, como hemorragia o leucemia.

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Hay numerosos factores que pueden contribuir a desarrollar una anemia, como la baja en la ingesta de hierro, o pacientes con enfermedad renal crónica, que no generan suficiente eritropoyetina para estimular la producción de glóbulos rojos en la médula ósea Valores altos de hematocrito Se pueden asociar a deshidratación o hipoxia. Patologías como la policitemia vera consisten en una desmedida producción de glóbulos rojos. En casos de enfermedad pulmonar obstructiva crónica, la hipoxia genera un aumento en la producción de eritropoyetina por el riñón, lo que puede resultar en un hematocrito alto. Valores normales Varón: 40 – 54 % Mujer: 37 – 47% Métodos de medición  El hematocrito (PCV) se puede determinar por centrifugación heparinizada de sangre en un tubo capilar (también conocido como un tubo de microhematocrito) a 10.000 rpm durante cinco minutos.  Esto separa la sangre en capas. El volumen de concentrado de glóbulos rojos, dividido por el volumen total de la muestra de sangre da el PCV.  Debido a que un tubo se utiliza, esto puede ser calculada mediante la medición de las longitudes de las capas.  Con equipos de laboratorio modernos, el hematocrito se calcula por un analizador automático y no se mide directamente.  Se determina multiplicando el recuento de glóbulos rojos por el volumen corpuscular medio.  El hematocrito es un poco más preciso como el PCV incluye pequeñas cantidades de plasma de la sangre atrapada entre los glóbulos rojos.  Un hematocrito calcula como un porcentaje puede ser derivado al triplicar la hemoglobina concentración en g / dl y colocar las unidades.

MATERIALES: 

Agujas Nº 21

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      3.

Anticoagulantes Algodón alcohol Centrifuga Liga o torniquete Capilares PROCEDIMIENTO:

Extracción de sangre por punción venosa

Colocamos la sangre en capilares y tapamos con vaselina para evitar derramar sangre en la centrifuga

Llevamos los capilares a la centrifuga a una velocidad de 3500 rpm

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Mediante un cuadro de referencia medimos la VSE y el hematocrito.

4. RESULTADOS Para la prueba de hematocrito se encontró que las muestras estaban dentro de los valores de referencia normales y una muestra que estaba inferior al valor de referencia que puede ser por diversos factores como por ejm la manipulación al hacer los procedimientos. 5. CONCLUSIÓN 

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Antes de acceder a puncionar se debe considerar una serie de parámetros relevantes para el éxito de la punción, tales como: Las condiciones físicas y psicológicas que trae el paciente, considerar un tiempo adecuado para explicar el procedimiento. ( El VSE consiste en medir la velocidad con la que sedimentan (decantan, caen) los glóbulos rojos o eritrocitos de la sangre, provenientes de una muestra de

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plasma sanguíneo (Citratado o con EDTA), en un periodo determinado de tiempo, habitualmente una hora. El hematocrito es el porcentaje ocupado por glóbulos rojos del volumen total de la sangre.

S e puede concluir que las personas de las cuales se obtuvo la muestra no presentaban anemia ni policitemia ya que los resultados estaban dentro de los valores de referencia. La muestra que presento valores bajos puede ser indicios de anemia o si no de la manipulación al realizar los procedimientos.

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BIBLIOGRAFÍA  Lic. Ana María del Socorro Vásquez del Castillo; Lic. Martha Vergara Espinoza. ANÁLISIS CLINICO- SANGRE- MANUAL DE LABORATORIO. Laboratorio de Análisis clínico, Lambayeque. Perú. 1994  http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003646.htm  http://www.ugr.es/~jhuertas/EvaluacionFisiologica/Hematocrito/hemat.htm  http://biblioteca.duoc.cl/bdigital/Documentos_Digitales/600/610/39579.pdf  http://www.urologiacolombiana.com/revistas/abril-2007/005.pdf  http://es.scribd.com/doc/8488378/Analisis-de-Orina-Interpretacion  http://www.zubizarreta.org.ar/docs/MUESTRAS2.pdf