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FUNDAMENTO Esta prueba se basa en la reacción de precipitación de los cloruros presentes en una muestra dada con una solución de nitrato de plata, produciendo un precipitado blanco de cloruro de plata, el cual se compara visualmente contra el precipitado de una cantidad conocida de cloruros. REACCION BASE: Cl-

+

NO3- +

AgNO3

↓AgCl

Limite de identificación: 2 µg de cloruro. PROCEDIMIENTO 1. En un tubo Nessler disolver la cantidad de muestra, especificada en la monografía respectiva, con 30 o 40 mL de agua y si la sustancia es una solución, se le agrega el agua necesaria para obtener dichos volúmenes. 2. Neutralizar la solución con ácido nítrico, utilizando como indicador papel tornasol. 3. En otro tubo Nessler se prepara la solución de referencia que sirve de comparación, con la cantidad de solución 0.02 N de ácido clorhídrico especificada en la monografía respectiva y se le adiciona agua a un volumen de 30 o 40 mL. 4. Agregar 1 mL de ácido nítrico y 1 mL de SR de nitrato de plata, tanto al tubo de la muestra como al de referencia y enseguida agua hasta 50 mL. 5. Mezclar y dejar reposar durante 5 minutos, protegidos de la luz. 6. Observar y comparar que la turbidez producida por la muestras no sea mayor que la de la solución de referencia especificada en la monografía. Disolver la muestra

Neutralizar la solución

Preparar la solución de referencia

Agregar Nitrato de Plata a las dos soluciones

Comparar el precipitado de la solución de la muestra con el de la referencia

Elaborar reporte

FUNDAMENTO Esta prueba se basa en la reacción de precipitación entre los sulfatos libres, presentes en una muestra, y una solución de cloruro de bario, produciendo un precipitado blanco de sulfato de bario, que se compara visualmente contra el precipitado de una cantidad conocida de sulfatos. REACCION BASE: SO42- + Cl2Ba

2Cl- + BaSO4

PROCEDIMIENTO: 1. Disolver la cantidad de sustancia indicada en la monografía específica del producto en 30 a 40 mL de agua, para los casos en que la muestra se encuentra en solución, adicionar la suficiente cantidad de agua para hacer un volumen total de 30 a 40 mL, si es necesario neutralizar la solución al papel indicador tornasol con ácido clorhídrico. 2. Adicionar 1 mL de solución 3 N de ácido clorhídrico, 3 mL de SR de cloruro de bario y suficiente agua para hacer un volumen de 50 mL. 3. Mezclar la solución, dejarla reposar durante 10 minutos y comparar en forma visual el precipitado obtenido, con el producido por una solución de referencia que contenga el volumen de solución 0.02 N de ácido sulfúrico indicado en la monografía específica del producto, tratado de la misma manera que la muestra. El precipitado obtenido con la solución de la muestra, no es mayor que el producido en la solución de referencia. Disolver la muestra

Neutralizar la soluciòn

Preparar la solución de referencia

Agregar cloruro de bario a las dos soluciones

Comparar el precipitado de la solución de la muestra con el de la referencia

Elaborar reporte

FUNDAMENTO Se basa en la determinación espectrofotométrica del complejo colorido, obtenido al hacer reaccionar con ditizona el plomo contenido como impureza, en un producto dado, bajo condiciones establecidas. REACCION BASE: DITIZONA

+ Pb

SAL COMPLEJA INTERNA DE Pb

LIMTE DE IDENTIFICACION: 0.04 µg de plomo Preparación de la muestra Si en la monografía específica del producto no se establece otro método de preparación, preparar la muestra como se indica a continuación: 1. Transferir 1 gramo de la muestra a un matraz Kjeldahl de 100 mL, agregar 5 mL de ácido sulfúrico, unas perlas de vidrio y digerir, colocar el matraz sobre una placa caliente u otro medio de calentamiento hasta que comience la carbonización. 2. Si es necesario, agregar más ácido sulfúrico para humedecer completamente la muestra, sin que en ningún caso exceda de 10 mL. 3. PRECAUCIÓN: Cuando se ha iniciado la descomposición de la muestra por el ácido, agregar con precaución extrema (Ya que algunas substancias pueden dar reacción explosiva al digerirse) solución de peróxido de hidrógeno al 30% gota a gota, mezclar con cuidado, suprimir el calentamiento si la formación de espuma es excesiva y agitar suavemente el matraz para evitar que quede muestra sin reaccionar en las paredes del mismo. 4. En caso de que la mezcla se torne café o se oscurezca, agregar más solución de peróxido de hidrógeno gota a gota. 5. Continuar con la digestión hasta que la muestra se destruya completamente, se desprendan vapores de trióxido de azufre y la solución sea incolora, enfriar. 6. Agregar cuidadosamente 10 mL de agua y evaporar hasta desprendimiento de humos de trióxido de azufre, enfriar. 7. Repetir este procedimiento con 10 mL más de agua para eliminar cualquier traza de peróxido de hidrógeno. Diluir cuidadosamente con 10 mL de agua y enfriar. Procedimiento 1. Transferir individualmente a embudos de separación un mínimo de 5 partes alícuotas crecientes conteniendo entre 2 ppm y 10 ppm de la solución diluida de referencia de plomo, de tal forma que la concentración media corresponda a la cantidad de plomo especificada como límite en la monografía del producto correspondiente. 2. Agregar agua a cada embudo hasta completar un volumen aprox. de 10 mL. 3. A otro embudo de separación, transferir la preparación de la muestra o una parte alícuota según se especifique en la monografía.

4. A menos que se indique otra cosa en la monografía, agregar a cada embudo 6 mL de la solución de citrato de amonio y 2 mL de la solución SR de clorhidrato de hidroxilamina; para la determinación de plomo en sales de fierro, usar 10 mL de la solución SR de citrato de amonio. 5. Agregar 2 gotas de SI de rojo de fenol y alcalinizar con solución SR de hidróxido de amonio hasta obtener coloración roja, enfriar si es necesario. 6. Agregar 2 mL de SR de cianuro de potasio y extraer con porciones de 5 mL de solución de ditizona para extracción, pasar cada extracción a otro embudo de separación, hasta que la solución de ditizona conserve su color verde, agitar los extractos combinados de ditizona durante 30 seg. con 20 mL de solución 1:100 v/v de ácido nítrico y desechar la capa de cloroformo. 7. Agregar a la capa ácida 5 mL de la solución de referencia de ditizona, 4 mL de solución de cianuro de amonio, agitar por 30 segundos; dejar separar el cloroformo y filtrarlo a través de papel filtro, previamente purificado. 8. En caso necesario, centrifugar y obtener el valor de absorbancia para las soluciones de referencia y para la solución de la muestra, a 510 nm en celdas de 1 cm, ajustando el aparato con un blanco de reactivos, tratado en las mismas condiciones. 9. Hacer una curva patrón graficando las absorbancias obtenidas para cada solución de referencia contra sus respectivas concentraciones y obtener la concentración de plomo en la muestra mediante dicha curva. INTERPRETACIÓN: La cantidad de plomo encontrada en la muestra, debe estar dentro del límite establecido para la misma en la monografía correspondiente.

Preparar la muestra

Transferir las soluciones de referencia y muestra a embudos de separación

Agregar reactivos indicados y las extracciones

Obtener el valor de absorbancia para las soluciones de referencia y para muestra

Doc

Obtener la concentración de plomo en la muestra.

Elaborar reporte

Doc

FUNDAMENTO Se basa en la cuantificación del selenio en medio ácido que al reaccionar con solución de diaminonaftaleno forma un compuesto colorido que absorbe luz a una longitud de onda específica y así se compara contra una sustancia de referencia de concentración conocida. Preparación de la muestra  Si es sólida, pesar exactamente 100 mg o 200 mg de la muestra, en un papel filtro libre de haluros de 4 cm por lado, doblar para formar un pequeño paquete, insertar el extremo de una tira de papel filtro y asegurar la muestra en la malla de platino.  Si es líquida, pesar la cantidad especificada en una cápsula de acetato de celulosa previamente puesta a peso constante, o bien, si se usan cápsulas de gelatina, estas contienen cantidades significativas de haluros combinados o azufre, por lo tanto correr un blanco y hacer la corrección necesaria; Insertar el extremo de una tira de papel filtro y asegurar la muestra a la malla de platino. 1. Transferir 25 mL de ácido nítrico 1:30 como líquido absorbente a un matraz de combustión de 1000 mL, proceder como se indica en MGA 0191. 2. Ya que la combustión haya concluido agitar vigorosamente el matraz un poco y agregar unos mililitros de agua, sobre el tapón, destapar y lavar el tapón y las paredes del matraz con 10 mL de agua. 3. Transferir la solución con la ayuda de 20 mL de agua a un vaso de precipitado de 150 mL, calentar suavemente hasta ebullición y hervir por 10 minutos. 4. Dejar enfriar la solución a temperatura ambiente. Procedimiento Tratar la solución de referencia, la solución muestra y un blanco (que consiste en 50 mL de ácido nítrico 1:30), simultánea y paralelamente como sigue: 1. Agregar solución al 50% de hidróxido de amonio para ajustar el pH a 2.0  0.2 (MGA 0701), diluir con agua a 60 mL. 2. Transferir a un embudo de separación protegido de la luz, con la ayuda de 10 mL de agua. 3. Agregar 200 mg de clorhidrato de hidroxilamina. 4. Agitar hasta disolver e inmediatamente agregar 5 mL de solución de diaminonaftaleno, tapar y agitar para mezclar, dejar reposar la solución a temperatura ambiente, durante 100 minutos. 5. Agregar 5 mL de ciclohexano, agitar vigorosamente por 2 minutos y dejar separar las fases, desechar la fase acuosa y centrifugar el extracto de ciclohexano para eliminar totalmente el agua. 6. Determinar la absorbancia de cada solución en un espectrofotómetro en celdas de 1 cm a una longitud de onda de 380 nm, usando ciclohexano para ajustar el aparato. Interpretación: La absorbancia de la solución de la muestra no es mayor que la de la solución de referencia, si se han utilizado 200 mg de la muestra, o no es mayor que la mitad de la absorbancia de la solución de referencia si se usaron 100 mg de la muestra.

Preparar las soluciones de muestra, referencia y blanco

Ajustar el pH de las soluciones

Extraer las soluciones con los reactivos indicados Documentar

Determinar la absorbancia de las soluciones

Interpretar los resultados

Elaborar reporte

FUNDAMENTO Este método se basa en una reacción química entre el mercurio contenido como impureza en un medicamento dado, y una solución valorada de ditizona formando ditizonato de mercurio como producto de la reacción. REACTIVOS Purificación de la ditizona. Disolver 1 g de ditizona en 50 mL a 75 mL de cloroformo, filtrar si es

necesario, transferir a un embudo de separación y extraer con cuatro porciones de 100mL de solución de hidróxido de amonio (1:99), descartar la fase clorofórmica y filtrar la capa acuosa a través de un pedazo de algodón insertado en la espiga del embudo, recibir en otro embudo de separación; acidificar ligeramente con solución de ácido clorhídrico diluida y extraer la ditizona con dos o tres porciones de 20 mL de cloroformo. Combinar los extractos clorofórmicos en otro embudo de separación y lavarlos dos o tres veces con agua. SOLUCIÒN CONCENTRADA DE DITIZONA. Pesar exactamente 40 mg de ditizona previamente purificada, transferirlos a un matraz volumétrico de 100mL, disolver y llevar al aforo con cloroformo. SOLUCION TITULANTE DE DITIZONA. Transferir 30mL de la solución anterior a un matraz volumétrico de 100mL, llevar al aforo con cloroformo y mezclar. Esta solución contiene 12mg/mL de ditizona. SOLUCION CONCENTRADA DE MERCURIO. Transferir 135,4mg de cloruro mercúrico, exactamente pesados, a un matraz volumétrico de 100 mL, disolver y llevar al aforo con solución de ácido sulfúrico 1 N. Esta solución contiene el equivalente a 100mg de mercurio en 100mL. SOLUCION DE MERCURIO PARA VALORAR LA SOLUCION TITULANTE DE DITIZONA. Transferir 2 mL de la solución concentrada de mercurio a un matraz volumétrico de 100mL, llevar al aforo con solución de ácido sulfúrico 1 N y mezclar. Cada mililitro de esta solución contiene el equivalente a 20ug de mercurio. Las soluciones siguientes se utilizan para la determinación de la prueba limite de mercurio en Fumarato ferroso, Sulfato ferroso y Sulfato ferroso seco. SOLUCION DE CLORHIDRATO DE HIDROXILAMINA. Pesar 20g de clorhidrato de hidroxilamina y transferirlos a un embudo de separación; agregar 65mL de agua y cinco gotas de SI de azul de timol e hidróxido de amonio hasta que la solución tome color amarillo, agregar 10 mL de solución dietilditiocarbamato de sodio al 4 por ciento, mezclar y dejar reposar durante 5 min. Extraer la solución con porciones sucesivas de 10 mL a 15 mL de cloroformo, hasta que una porción de 5 mL del extracto cloroformico, no tome color amarillo al agitarlo con SR de sulfato cuprico. Agregar solución 3 N de ácido clorhídrico, hasta que la solución presente coloración rosa. Si es necesario, agregar una o dos gotas mas de SI de azul de timol; transferir la solución a un matraz volumétrico de 100mL llevar al aforo con agua y mezclar.

SOLUCION DE REFERENCIA DE MERCURIO. El día de su uso, diluir cuantitativamente 1,0 mL de la solución de mercurio concentrada con solución de ácido sulfúrico 1 N a 1000mL; cada mililitro de esta solución contiene el equivalente a 1 ug de mercurio. SOLUCION DE EXTRACCIÓN DE DITIZONA. Disolver 30 mg de ditizona en 1000 mL de cloroformo, y agregar 5 mL de alcohol; conservar esta solución en refrigeración. Antes de su uso, agitar un volumen adecuado de esta solución con aproximadamente la mitad de su volumen de solución de ácido nítrico al 1 por ciento; descartar el ácido nítrico. SOLUCION DILUIDA DE EXTRACCIÓN DE DITIZONA. Transferir 1,0 mL de la solución de mercurio para valorar la solución titulante de ditizona a un embudo de separación de 250 mL, agregar 100 mL de solución de ácido sulfúrico 1 N, 90 mL de agua, 1 mL de ácido acético glacial y 100 mL de solución de clorhidrato de hidroxilamina(1:5). Valorar la solución con SV de ditizona, la cual se adiciona desde una microbureta de 10 ml, agitar la mezcla 20 veces después de cada adición, dejar separar la capa cloroformica y descartarla. Continuar la titulación hasta que la adición final de la solución titulante de ditizona presente color verde después de la agitación. CALCULOS. Calcular la cantidad en microgramos de mercurio equivalente a cada mililitro de solución titulante de ditizona de acuerdo con la siguiente formula: 20/V Donde: V= volumen en mililitros de solución titulante de ditizona agregados. REACCION BASE: DITIZONA + Hg → SAL DE MERCURIO ANARANJADA Hg + NH2OH . HC1+C13H12N4S → C13H10HgN4S + NH4OH + HC1 Limite de identificación: 0.25 µg de Hg

INSTRUCCIONES Preparación de la muestra 1. Transferir 2 g de la muestra, exactamente pesados, a un matraz Erlenmeyer de 250 mL con tapón esmerilado. 2. Agregar 20 mL de una mezcla de volúmenes iguales de ácido nítrico y ácido sulfúrico. 3. Adaptar a un condensador adecuado y calentar a reflujo la mezcla durante 1 hora, enfriar y diluir con agua. 4. Calentar a ebulliciòn hasta que no se perciban vapores de ácido nitroso, enfriar la solución. Diluir con agua cuidadosamente y transferir a un matraz volumétrico de 200 mL, llevar al aforo con agua, mezclar y filtrar.

Procedimiento 1. Transferir 50 mL de la solución de la muestra a un embudo de separación de 250 mL y extraer sucesivamente con pequeñas porciones de cloroformo, hasta que el último extracto sea incoloro. 2. Descartar la fase orgánica y agregar a la preparación de la muestra extraída 50 mL de solución 1 N de ácido sulfúrico, 90 mL de agua, 1 mL de ácido acético glacial y 10 mL de solución 1: 5 de clorhidrato de hidroxilamina.

3. Valorar la solución con solución titulante de ditizona, la cual se adiciona desde una microbureta de 10 mL, agitar la mezcla 20 veces después de cada adición, dejar separar la capa clorofórmica y descartarla. 4. Continuar la titulación hasta que la adición final de la solución titulante de ditizona presente color verde después de la agitación. 5. Calcular la cantidad en microgramos de mercurio por gramo de muestra de acuerdo con la fórmula: 2 E V; donde, E es el equivalente de la solución titulante de ditizona en mcg / mL de mercurio; V es el volumen en mL de la solución titulante de ditizona empleados. INTERPRETACIÓN: La cantidad de mercurio encontrada en la muestra, no deberá exceder al límite indicado en la monografía específica del producto correspondiente.

Preparar la muestra Extraer la muestra preparada Agregar a la muestra extraída los reactivos indicados Valorar la solución Calcular la cantidad de mercurio presente en la muestra Documentar Interpretar los resultados

Elaborar reporte

FUNDAMENTO Esta prueba se basa en la secuencia de dos reacciones químicas cuantitativas, llevadas a cabo bajo condiciones establecidas a partir del arsénico contenido en un producto dado. En la primera reacción, el arsénico, en presencia de hidrógeno, forma arsina. As+3 + H2 → AsH3 En la segunda reacción, la arsina así formada, reacciona con una solución de dietilditiocarbamato de plata, formándose un compuesto colorido, el cual es valorado por espectrofotometría. As+3 + H2 → AsH3 Tomar medidas de seguridad extremas, ya que algunas muestras pueden reaccionar en forma violenta cuando se digieren con peróxido de hidrógeno. Para los casos de compuestos que contengan halógenos, calentar la mezcla a baja temperatura evitando que hierva al agregar el ácido sulfúrico. Agregar el peróxido de hidrógeno antes de que se inicie la carbonización para evitar alguna pérdida de arsénico trivalente. Si la sustancia problema reacciona demasiado rápido con los 5 mL de ácido sulfúrico concentrado y empieza a carbonizarse antes de calentar, adicionar en lugar de 5 mL de ácido sulfúrico concentrado, 10 mL de ácido sulfúrico diluido 1 a 2 y unas gotas de peróxido de hidrógeno antes de calentar.

MÉTODO. Preparación de la solución de referencia de arsénico. Transferir 132.0 mg de trióxido de arsénico, previamente pulverizado y secado a 105°C durante 1 hr, a un matraz volumétrico de 1000 mL, disolver en 5 mL de solución de hidróxido de sodio (1:5) (m/v); neutralizar con solución de ácido sulfúrico 2 N, agregar 10 mL más de solución de ácido sulfúrico 2 N y llevar al volumen con agua recientemente hervida y fría, mezclar. Conservar esta solución en refrigeración y usar dentro de un periodo no mayor de 30 días. Transferir 10 mL de la solución anterior a un matraz volumétrico de 1000 mL, agregar 10 mL de solución de ácido sulfúrico 2 N y llevar al aforo con agua recientemente hervida y fría, mezclar. Cada mililitro de esta solución de referencia contiene el equivalente a 1 μg de arsénico. Conservar esta solución en recipientes de vidrio con tapón esmerilado y usar dentro de un periodo no mayor a 3 días. PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE REFERENCIA. Mezclar la alícuota de la solución de referencia de arsénico, según el límite establecido en la monografía correspondiente, con 2mL de ácido sulfúrico concentrado, agregar igual cantidad de peróxido de hidrógeno al 30 por ciento usado en la oxidación de la muestra, mezclar, calentar la solución hasta formación de vapores fuertes, enfriar y agregar cuidadosamente 10mL de agua Evaporar nuevamente hasta aparición de humos abundantes, enfriar, diluir con agua a 35mL y continuar como se indica en el procedimiento general. En solución ácida los compuestos de arsénico se reducen a hidruro de arsénico mediante una mezcla de reductores compuesta de cinc, cloruro de estaño(II) y yoduro potásico. En un tubo de

absorción el hidruro de arsénico reacciona con dietilditiocarbamato de plata dando un compuesto rojo que se determina foto-métricamente. Instrucciones: Preparación de la muestra. Si no se especifica la cantidad necesaria de la muestra en la monografía correspondiente, calcularla con la fórmula: G=3.0/L; donde, G es la cantidad de muestra necesaria, en gramos, L es el límite de arsénico en ppm. Para compuestos inorgánicos.- Transferir al matraz generador un volumen de la solución preparada según la monografía del producto, agregar agua hasta obtener un volumen de 35 mL Solución de referencia: tomar de la solución de referencia de arsénico la porción equivalente al límite establecido en la monografía. Para compuestos orgánicos.- Colocar la cantidad de muestra indicada en la monografía, directamente en el matraz generador que se inicie la carbonización.. Cuando haya iniciado su descomposición por el ácido, agregar gota a gota solución al 30% de peróxido de hidrógeno, esperando cada vez a que la reacción cese antes de efectuar la siguiente adición. Suspender el calentamiento en caso de que la formación de espuma sea excesiva. Cuando ha terminado la reacción, calentar cuidadosamente rotando el matraz ocasionalmente. Si la mezcla se torna café o se oscurece se agregan pequeñas cantidades de peróxido de hidrógeno. Continuar la digestión hasta que la materia orgánica se destruya y se desprendan humos abundantes de trióxido de azufre y que la solución sea incolora o ligeramente amarilla. Enfriar y agregar 10 mL de agua, mezclar y evaporar. Enfriar y lavar las paredes con 10 mL de agua. Solución de referencia: mezclar la parte alícuota de la solución de referencia de arsénico, según el límite establecido en la monografía, con 2 mL de ácido sulfúrico concentrado, agregar igual cantidad de peróxido de hidrógeno al 30%, mezclar, calentar la solución hasta que se formen vapores fuertes, enfriar y agregar 10 mL de agua. Evaporar nuevamente, enfriar y diluir a 35 mL de agua. Procedimiento. 1. Empacar la unidad depuradora con dos porciones de algodón previamente impregnado con solución saturada de acetato de plomo y secado al vacío a temperatura ambiente, dejando un espacio pequeño entre los dos algodones. 2. Lubricar las juntas esmeriladas con una grasa adecuada para uso con disolventes orgánicos y conectar la unidad depuradora al tubo de absorción por medio de una pinza. 3. Transferir 3.0 mL de SR de dietilditiocarbamato de plata al tubo de absorción, en caso necesario, usar un volumen mayor de SR de Dietilditiocarbamato de plata exactamente medido considerando la misma cantidad para la referencia siempre y cuando el aparato el aparato lo permita. 4. Agregar 3 g de zinc granular a la mezcla del matraz e inmediatamente conectar la unidad depuradora ensamblada al matraz generador 5. A la preparación de la muestra y a de la referencia, agregar 20 mL de solución 7 N de ácido sulfúrico, 2 mL de SR de yoduro de potasio y 0.5 mL de SR de cloruro estanoso concentrado acidificado y 1 mL de alcohol isopropílico, mezclar. 6. Dejar reposar a temperatura ambiente durante 30 minutos. 7. Colocar el sistema en baño de agua manteniéndolo a una temperatura de 25  3 °C, permitir la formación y paso de hidrógeno por el sistema por 45 minutos, para desarrollar el color, agitando el sistema suavemente a intervalos de 10 minutos.

8. Desconectar el tubo de absorción y la unidad depuradora del matraz generador. 9. Transferir la solución colorida de la muestra y de la referencia a celdillas de 1 cm y leer en paralelo a una longitud de máxima absorbancia, entre 535 nm y 540 nm en un espectrofotómetro o colorímetro usando como blanco SR de dietilditiocarbamato de plata como blanco. INTERFERENCIAS QUÍMICAS. El cromo, cobalto, cobre, mercurio, molibdeno, níquel, paladio, plata y sus sales, pueden interferir con la formación de arsina. El antimonio que forma estibina produce una interferencia positiva en el desarrollo del color con la SR de dietilditiocarbamato de plata. Cuando se sospecha la presencia de antimonio, el color rojo que se produce en la segunda solución de dietilditiocarbamato de plata, puede ser comparada a la longitud de onda de máxima absorbancia entre 535 nm y 540 nm, con un espectrofotómetro o colorímetro, puesto que a esta longitud de onda la interferencia debida a la estibina es despreciable. INTERPRETACIÓN: La absorbancia de la solución colorida de la muestra, no debe ser mayor a la obtenida con la solución de referencia. El contenido de arsénico no debe ser mayor al límite indicado en la monografía del producto correspondiente. Preparar las soluciones de referencia y muestra

Agregarles los reactivos indicados

Permitir el paso de hidrógeno por el sistema

Obtener la absorbancia de las soluciones

Documentar

Interpretar los resultados

Elaborar reporte

FUNDAMENTO Esta prueba se utiliza para determinar que el contenido de impurezas metá-licas que son coloreadas por el ion sulfuro, bajo las condiciones específicas de la prueba, no excede el límite de metales pesados especificado en la monografía individual en función del porcentaje (por peso) de plomo en la sustancia bajo ensayo, determinado mediante comparación visual con un control preparado a partir de una solución estándar de plomo. Las sustancias que generalmente responden a esta prueba son: Plomo, bismuto, arsénico, estaño, cadmio, plata, cobre y molibdeno.

REACTIVOS ESPECIALES: Solución de Sulfuro de hidrógeno saturada. Burbujear ácido sulfhídrico en agua fría. Almacenar en botellas pequeñas, color ámbar, completamente llenas, en lugar obscuro y frío. Esta solución tiene fuerte olor a ácido sulfhídrico. Solución de Referencia de Nitrato de Plomo. Disolver 159.8 mg de Nitrato de Plomo en 100 ml de agua a la cual se le ha agregado 1.0 ml de ácido nítrico, luego diluir con agua a 10000 ml. Preparar y almacenar esta solución en envases de vidrio exentos de sales de plomo solubles. Cada ml de esta solución contiene 100 microgramos de plomo. REACCION BASE: IMPUREZAS METALICAS + H2S

→TURBIDEZ o PP

SUSTANCIA DE REFERENCIA: Pb(NO3)2 Pb+2 + H2S

→

PbS pp negro

MÈTODO I Preparación de referencia 1. En un tubo Nessler de 50 mL, tomar una alícuota de 2 mL de solución estándar de plomo (20 g), y diluir con agua a 25 mL. 2. Ajustar con ácido acético 1 N o hidróxido de amonio 6N a un pH entre 3.0 y 4.0, usando papel indicador de pH de rango estrecho como indicador externo, diluir con agua a 40 mL y mezclar. Preparación de la muestra 1. En un tubo Nessler de 50 mL, colocar 25 mL de la solución preparada para la prueba según la monografía individual o bien empleando el volumen de ácido designado, disolver y diluir con agua a 25 mL la cantidad en gramos, de la sustancia a probar calculada por la fórmula: 2.0/(1000L), donde L es el límite de metales pesados, en porcentaje. 2. Ajustar con ácido acético 1 N o hidróxido de amonio 6 N a un pH 3.0 y 4.0, diluir a 40 mL con agua y mezclar. Preparación del control 1. En un tercer tubo de Nessler de 50 mL colocar 25 mL de una solución preparada según se indica para la preparación de la muestra y agregar 2 mL de solución estándar de plomo. 2. Ajustar con ácido acético 1 N o hidróxido de amonio 6 N a pH entre 3.0 y 4.0, diluir a 40 mL con agua y mezclar.

PROCEDIMIENTO 1. A cada uno de los tubos agregar 10 mL de SR de sulfuro de hidrógeno. 2. Mezclar y dejar reposar por 5 minutos. 3. Hacer la comparación observando los tubos de arriba hacia abajo sobre un fondo blanco. El color de la muestra es igual o menos oscuro que el de la solución de referencia de plomo y la intensidad del color de la preparación control es igual o mayor que el color de la preparación de la referencia. Si el color del control es más claro que el color de la referencia de plomo, usar el método II en la sustancia que se va a analizar.

MÈTODO II Preparación de referencia Preparar según el método I. Preparación de la muestra Emplear una cantidad, en gramos, de la sustancia a probar, calculada por la fórmula: 2.0/(1000L), donde L es el límite de metales pesados, en porcentaje. 1. Transferir la cantidad pesada de la sustancia a un crisol apropiado, agregar ácido sulfúrico suficiente para humectar la sustancia y someter a ignición cuidadosamente a una temperatura baja hasta que la sustancia esté completamente carbonizada ( el crisol puede estar cubierto parcialmente durante la carbonización ). 2. Agregar a la masa carbonizada 2.0 mL de ácido nítrico y 5 gotas de ácido sulfúrico, calentar con cuidado hasta que no se desprendan vapores blancos. 3. Someter a ignición preferentemente, en una mufla, entre 500 y 600°C, hasta que el carbón se queme completamente. 4. Enfriar, agregar 4.0 mL de ácido clorhídrico 6.0 N, cubrir, en un baño de vapor durante 15 minutos, destapar y evaporar lentamente hasta sequedad. 5. Humectar el residuo con 1 gota de ácido clorhídrico, agregar 10 ml de agua caliente y digerir durante 2 minutos. 6. Agregar hidróxido de amonio 6.0 N gota a gota, hasta que la solución sea alcalina al papel indicador de tornasol, diluir con agua a 25 mL y ajustar con ácido acético 1.0 N a un pH entre 3.0 y 4.0, empleando papel indicador de pH de rango estrecho como indicador externo. 7. Filtrar si fuera necesario, enjuagar el crisol y el filtro con 10 mL de agua, combinar el filtrado y el enjuague en un tubo Nessler de 50 mL, diluir con agua a 40 mL y mezclar.

PROCEDIMIENTO 1. A cada uno de los tubos que contienen la preparación de la muestra y de la referencia respectivamente, adicionar 10 mL de SR de sulfuro de hidrógeno recién preparada. 2. Mezclar y dejar reposar por 5 minutos. 3. Hacer la comparación observando los tubos de arriba hacia abajo sobre una superficie blanca. El color de la preparación de la muestra no debe ser más oscuro que el color de la solución de referencia.

MÈTODO III Preparación de referencia 1. Transferir una mezcla de 8 mL de ácido sulfúrico y 10 mL de ácido nítrico a un matraz Kjeldahl de 300 mL seco y agregar un volumen de ácido nítrico igual al volumen de incremento de ácido nítrico añadido a la preparación de la muestra. 2. Calentar la solución hasta el desprendimiento de vapores densos y blancos, enfriar, agregar cuidadosamente 10 mL de agua, si se empleò peróxido de hidrógeno al tratar la preparación de la muestra, agregar un volumen de peròxido de hidrógeno al 30 % igual al usado para la preparación de la muestra, calentar a ebullición suavemente hasta que se desprendan vapores densos, blancos. 3. Enfriar, agregar cuidadosamente 5.0 mL de agua, mezclar y calentar a ebullición suavemente hasta la producción de vapores densos, blancos y obtener un volumen de 2.0 a 3.0 mL. 4. Enfriar, diluir con unos mililitros de agua, adicionar 2.0 mL de solución estándar de plomo (20 μg de plomo) y mezclar. 5. Transferir a un tubo Nessler de 50 mL, enjuagar el matraz con agua, adicionando èsta al tubo hasta un volumen de 25 mL. 6. Enfriar, diluir con precaución con unocs mililitros de agua y enjuagar pasando todo a un tubo Nessler de 50 mL, teniendo cuidado de que el volumen combinado no exceda a 25 mL.

Preparación de muestras a) Muestras lìquidas: 1. Transferir la cantidad de sustancia especificada en la monografía individual a un matraz de Kjeldahl de 300 mL seco. NOTA: puede emplearse un matraz de 500 mL si la reacción genera espuma en exceso. 2. Sujetar el matraz formando un ángulo de 45° y agregar cuidadosamente un pequeño volumen de una mezcla de 8 mL de ácido sulfúrico y 10 mL de ácido nítrico. 3. Calentar suavemente al principio, hasta que la reacción comience, dejar que la reacción disminuya y proceder según se indica para “ muestras sòlidas “, empezando desde “agregar porciones adicionales de la misma mezcla ácida” b) Muestras sòlidas: 1. Transferir la cantidad de la sustancia especificada en la monografía individual a un matraz de Kjeldahl de 300 mL NOTA: puede emplearse un matraz de 500 mL si la reacción genera espuma en exceso. 2. Sujetar el matraz formando un ángulo de 45° y agregar cuidadosamente un pequeño volumen de una mezcla de 8 mL de ácido sulfúrico y 10 mL de ácido nítrico para humedecer la sustancia completamente. 3. Calentar suavemente al principio, hasta que la reacción comience, dejar que la reacción disminuya, agregar porciones adicionales de la misma mezcla ácida calentar después de cada adición hasta llegar a 18 mL de la mezcla ácida. 4. Incrementar la temperatura y llevar a ebullición suavemente hasta que la solución se oscurezca. 5. Enfriar, agregar 2.0 mL de ácido nítrico y calentar hasta que la solución se oscurezca. Continúe el calentamiento con las adiciones de ácido hasta que ya no se produzca oscurecimiento. 6. Calentar fuertemente hasta la producción de vapores blancos y densos. 7. Enfriar, agregar 5.0 mL de agua cuidadosamente, calentar suavemente a ebullición hasta la producción de vapores blancos y densos y continuar calentando hasta reducir el volumen a unos pocos mL. 8. Enfriar, agregar cuidadosamente 5.0 mL de agua y examinar el color de la solución.

9. Si el color es amarillo, agregar 1 mL de peróxido de hidrógeno al 30% y calentar nuevamente hasta la producción de vapores blancos, densos. Evaporar a un volumen de 2.0 a 3.0 mL. 10. Si la solución sigue amarilla, repetir la adiciòn de 5.0 mL de agua y el tratamiento con peròxido . 11. Enfriar, diluir cuidadosamente con unos mililitros de agua y enjuagar pasando a un tubo Nessler de 50 mL teniendo cuidado de que el volumen total no exceda de 25 mL.

PROCEDIMIENTO 1. Tratar la preparación de la muestra y la preparación de la referencia del siguiente modo: Ajustar tanto la muestra como la referencia a un pH entre 3.0 y 4.0, con hidróxido de amonio (puede emplearse una solución de amoniaco diluido conforme se acerca el intervalo especificado ), utilizar papel indicador de rango estrecho, diluir con agua a 40 mL agua y mezclar. 2. Agregar a cada tubo 10 mL de sulfuro de hidrógeno SR, mezclar, dejar reposar por 5 minutos. Observar desde arriba sobre una superficie blanca. El color de de la preparación de la muestra no debe ser más oscuro que la preparación de la referencia.

FUNDAMENTO

Esta prueba se basa en la relación que existe, entre el peso de un volumen de una sustancia y el peso del mismo volumen de agua, a una temperatura dada. Limpieza del picnómetro 1. Llenar el interior del cuerpo con solución limpiadora de ácido crómico y dejar reposar durante varias horas. 2. Vaciar el picnómetro y enjuagar abundantemente con agua. 3. Eliminar los residuos de agua, enjuagando el picnómetro vacío con varias porciones de alcohol etílico y finalmente con éter dietìlico, dejar secar completamente, o bien enjuagar con acetona y secar por medio de succión de aire. Usar el mismo tratamiento para limpiar el termómetro y la tapa. 4. Para manipular el picnómetro usar guantes o pinzas. Calibración del picnómetro A menos que se indique otra cosa, efectuar esta calibración y todas las mediciones a 25°C. 1. Ensamblar y pesar el picnómetro vacío y seco en una balanza analítica, registrando el peso en gramos, hasta la cuarta cifra decimal. 2. Retirar la tapa del tubo capilar y el tapón esmerilado con el termómetro. 3. Llenar el picnómetro con agua destilada recientemente hervida y enfriada a 20°C. 4. Colocar el tapón esmerilado con el termómetro adaptado cuidadosamente y dejar que el exceso de agua salga por el tubo capilar. 5. Verificar que no haya burbujas en el interior del cuerpo y capilar. 6. Colocar el picnómetro lleno y ensamblado, pero sin tapa, en un baño a 25°C. El nivel del agua del baño, quedará arriba de la marca de graduación del picnómetro. 7. Al llevar a la temperatura exacta de 25°C, ajustar el volumen del tubo capilar, de tal manera que el menisco del líquido quede tangente al aforo. 8. Secar muy bien el exterior y boca del capilar. 9. Colocar la tapa ajustándola bien. 10. Sacar el picnómetro y secarlo escrupulosamente por todo el exterior con papel absorbente, hasta que no queden gotas ni rastro de humedad, tener especial cuidado con la base del ramal y en la comisura de la junta del tapón esmerilado con el cuello del cuerpo. 11. Registrar el peso hasta la cuarta cifra decimal. 12. Calcular el peso del agua contenida en el picnómetro como sigue: C= B-A; en donde: B es el peso del picnómetro lleno con agua en gramos; A es el peso del picnómetro vacío en gramos; C es el peso del agua en gramos. Procedimiento Proceder como se indica en el párrafo para calibración sustituyendo el agua por la muestra. La densidad relativa de la muestra se calcula mediante la siguiente fórmula:

DR = (D/C); en donde, DR es la densidad relativa de la muestra; D es el peso de la muestra en gramos; C es el peso del agua en gramos, medidas a 25°C.

FUNDAMENTO El método descrito a continuación se usa para determinar en una muestra, la cantidad de materia volátil de cualquier naturaleza bajo condiciones especificadas.    

PROCEDIMIENTO A menos que se indique otra cosa en la monografía, la prueba se efectúa con 1 a 2g de muestra previamente mezclada. Si la muestra esta en forma de cristales grandes, estos se reducen cerca de 2mm triturándolos rápidamente. Si la muestra son capsulas, utilizar una porción de contenido de no menos de cuatro capsulas. En el caso de tabletas utilizar una porción de no menos de cuatro tabletas finamente pulverizadas.

1. En un pesafiltros tarado de forma baja previamente desecado durante 30 min, bajo las mismas condiciones en que se efectuará la determinación, se coloca la muestra, se tapa y se pesa. 2. Posteriormente se pasa el pesafiltros en la estufa u horno de desecación a la temperatura dada con una variación de +- 2° para cada sustancia, se quita el tapón y la muestra se deseca durante el tiempo especificado en la monografía. 3. Al terminar el tiempo de desecación se tapa inmediatamente el pesafiltros y se pasa a un desecador hasta que adquiera la temperatura ambiente antes de ser pesado. 4. Se registra el peso. Pesar el pesafiltro vació y desecado

Colocar y pesar la muestra en el pesafiltro desecado

Se mete a la estufa a condiciones especificadas

Se saca el pesafiltro tapado

Se registra el peso

FUNDAMENTO Esta prueba se basa en la relación que hay entre el peso inicial de una muestra representativa y el residuo de las sales inorgánicas finales obtenidas, después de someter la muestra a un proceso de calcinación. Procedimiento: 1. Pesar exactamente de 1 a 2 g de muestra, o la cantidad que se indique en la monografía específica. 2. Transferir la muestra a un crisol previamente llevado a peso constante en la mufla. 3. Con mechero de gas calentar el crisol, primero suavemente y luego con mayor intensidad, hasta lograr la combustión total de la muestra; esto debe realizarse en una campana de gases. 4. Enfriar y humedecer el residuo con 1 mL de ácido sulfúrico concentrado. 5. Calentar suavemente hasta lograr el desprendimiento de vapores blancos, y luego con más intensidad, cuidando que no se proyecte el material al exterior; una vez que cese el desprendimiento de vapores blancos, calentar 5 minutos más. 6. Trasladar el crisol a la mufla y calcinar a 800°C  25°C, calentar hasta que el carbón sea consumido. 7. Enfriar en un desecador. 8. Pesar, calcular el porcentaje de residuo de la ignición por medio de la fórmula: %R=(Pr/Pi)100; donde, %R es el porcentaje del residuo de la ignición; Pr es el peso del residuo y Pi es el peso de la muestra inicial. 9. Si la cantidad de residuo así obtenido excede del límite especificado en la monografía respectiva, volver a humedecer el residuo con 1 mL de ácido sulfúrico concentrado, calentar con precaución e incinerar a 800°C  25°C. Repetir esta operación hasta peso constante. Preparar las soluciones de muestra, referencia y blanco

Ajustar el pH de las soluciones

Extraer las soluciones con los reactivos indicados Documentar

Determinar la absorbancia de las soluciones

Interpretar los resultados

Elaborar reporte

FUNDAMENTO Esta prueba se basa en la determinación de la actividad de iones hidrogeno empleando un instrumento potenciométrico, con sensibilidad para reproducir valores de pH, utilizando un electrodo indicador al ión hidrogeno, como el electrodo de vidrio y un electrodo de referencia como el de Calomel o el de cloruro de plata. Instrucciones: Calibración del aparato: 1.Encender al aparato y dejarlo calentar lo suficiente, siguiendo las instrucciones. 2.Seleccionar dos soluciones reguladoras, patrón de referencia certificadas para calibración, cuya diferencia en pH no exceda de 4 unidades. 3.Llenar el recipiente con una solución reguladora, tomando en cuenta la temperatura. 4.Colocar el control de temperatura a la de la solución y ajustar el control de calibración hasta que los valores de pH sean idénticos a los tabulados. 5.Enjuagar los electrodos. Al igual que la calibración, ajustar el aparato. Procedimiento: Efectuar las determinaciones a 25°C sino se especifica otra cosa en la monografía.

Calibrar el aparato

Ajustar al aparato

Efectuar las determinaciones

Obtener los resultados

Elaborar reporte

FUNDAMENTO Esta prueba se basa en la relación que existe entre la velocidad de la luz en el aire y su velocidad en la sustancia que se analiza. Se define tambièn como la relación entre el seno del ángulo incidente formado por la incidencia de un rayo de luz en una sustancia dada, entre el seno del ángulo de refracción formado por el mismo rayo refractadado dentro de esa sustancia. Procedimiento 1. Preparar la muestra como se indica en la monografía correspondiente. 2. Ajustar la temperatura del aparato y de la muestra según se requiera. 3. Depositar una gota sobre la superficie del prisma de medición, evitar que se formen burbujas, cerrar. 4. Obtener un mínimo de 3 lecturas por muestra. 5. Calcular el promedio. Dicho promedio debe estar comprendido dentro de los límites especificados en la monografía correspondiente ( la diferencia entre cada lectura no debe ser mayor de 0.0002 ).

FUNDAMENTO Esta prueba se basa en la comparación visual de la muestra en solución contra el disolvente utilizado. PROCEDIMIENTO 1. Colocar la cantidad de la sustancia especificada en la monografía correspondiente en una probeta de vidrio de 10 mL de aproximadamente 13 mm por 125 mm de tamaño, con tapón de vidrio y perfectamente limpia. 2. Utilizar el disolvente que se especifica en la monografía o en la etiqueta del producto. 3. Llenar la probeta casi hasta la constricción del cuello. 4. Agitar suavemente para obtener la solución. 5. En una probeta equivalente colocar el mismo volumen del disolvente usado. 6. Interpretar los resultados. La muestra presenta solubilidad completa cuando la solución antes preparada no es menos clara que un volumen igual del mismo disolvente contenido en una probeta similar y examinado de la misma manera.

FUNDAMENTO Se basa en la reacción química que ocurre entre las sustancias fácilmente carbonizables contenidas en un producto dado y una solución de 94.5 a 95.5 % m/m de ácido sulfúrico en agua. Procedimiento 1. Tomar una cantidad de muestra del producto, establecida en la monografía correspondiente. 2. Si se encuentra en forma sólida pulverizar finamente antes de pesar. 3. Colocar la muestra en un tubo para comparación de color, al que previamente se le ha agregado una cantidad suficiente de solución al 95% m/m de ácido sulfúrico en agua. 4. Agitar la mezcla con agitador de vidrio hasta completa disolución. 5. Preparar la solución de referencia para comparación de color correspondiente y transferirla a un tubo similar, al que contiene la solución con la muestra. 6. Efectuar la comparación de color observando ambos tubos, tanto en el plano horizontal como vertical. 7. Interpretar los resultados. La solución de la muestra no debe ser más oscura ni más intensa que la solución de la referencia.

PROCEDIMIENTO Se debe seguir el procedimiento indicado en la monografía específica correspondiente; en los casos en que no se indique, seguir el método correspondiente a la clase I A. CLASE I 1. Pulverizar la muestra finamente y, si no se indica otra cosa, si la sustancia contiene agua de hidratación, deshidratar a la temperatura requerida; si la sustancia no tiene agua de hidratación, secar la muestra en un desecador adecuado por 15 horas por lo menos. 2. Llenar un tubo capilar de vidrio, cerrado por uno de los extremos con suficiente muestra pulverizada y desecada, hasta formar en el fondo del tubo una columna de 2.5 a 3.5 mm de altura, que se empaca uniformemente, golpeando el tubo con moderación sobre una superficie sólida. 3. Calentar el baño a una temperatura aproximada de 30°C debajo de la temperatura de fusión estimada. 4. Retirar rápidamente el termómetro y adherir el tubo capilar, impregnando ambos con una gota de líquido del baño, ajustándolo de tal forma, que la altura de la sustancia contenida en el capilar quede al nivel del bulbo del termómetro. 5. Reponer el termómetro y continuar calentando con agitación constante de manera que el acenso de temperatura sea de 3°C por minuto. 6. Cuando la temperatura llegue hasta cerca de 3°C abajo del límite inferior del rango de fusión esperado, reducir la velocidad del calentamiento a 1°C o 2°C por minuto, continuando así hasta que la fusión sea completa. CLASE I A 1. Preparar la muestra y llenar el tubo capilar como se indica en la clase I. 2. Calentar el baño hasta llegar a una temperatura aproximada de 10°C debajo de la temperatura esperada para la fusión de la muestra y continuar calentando de tal manera, que la temperatura ascienda alrededor de 1°C por minuto. 3. Cuando la temperatura se encuentre 5°C abajo del límite inferior de fusión esperado, adherir el capilar al termómetro y continuar calentando hasta que la fusión sea completa.

CLASE I B Para usar este método no se debe pulverizar la muestra. 1. Colocar la muestra en un recipiente cerrado y enfriar a 10°C por 2 horas como mínimo. 2. Llenar el tubo capilar con la muestra como se indica en la clase I. 3. Inmediatamente colocar el capilar en un desecador con vacío y desecar bajo presión reducida no mayor de 20 mmHg, por 3 horas. 4. Retirar inmediatamente del desecador el tubo con la muestra y sellar a la flama el extremo abierto, determinando rápidamente la temperatura de fusión: 5. Calentar el baño hasta que la temperatura se encuentre a 10°C abajo del punto de fusión esperado. 6. El termómetro con el tubo se sumergen en el baño y calentar de tal manera que el ascenso de la temperatura sea de 3°C por minuto hasta que la fusión sea completa. 7. Si el tamaño de partícula del material es demasiado grande para introducirla en el capilar, enfriar y pulverizar, presionando lo más suavemente posible para continuar con el procedimiento.

CLASE II 1. Fundir cuidadosamente la muestra que va a ser probada a una temperatura tan baja como sea posible y vaciar la sustancia en un tubo capilar, con los extremos abiertos, tratando de cubrir una profundidad en 10 mm. 2. Enfriar el tubo capilar a 10°C o menos durante 24 horas o bien colocar el tubo en contacto con hielo por 2 horas. 3. Adherir el tubo capilar al termómetro y ponerlo en un baño de agua, de forma que el borde superior de la muestra esté 10 mm bajo el nivel del agua. 4. Calentar como se indica en clase I, excepto cuando la temperatura llegue a 5°C por debajo de la temperatura estimada para la fusión, continuar calentando de forma que el ascenso de temperatura sea 0.5°C a 1°C por minuto. CLASE III 1. Fundir lentamente una porción de la muestra agitando continuamente y hasta que la temperatura ascienda a 90 - 92°C. 2. Retirar la fuente de calor y dejar enfriar la muestra a 8 – 10°C arriba de la temperatura de fusión esperada. 3. Enfriar el bulbo del termómetro a 5°C, limpiar y secar estando aún frío, introducir el bulbo en la muestra fundida, de forma que la mitad inferior del bulbo quede sumergida, retirarlo inmediatamente. 4. Sumergir por 5 minutos dentro de un baño de agua a una temperatura no mayor de 16°C. 5. Fijar el termómetro en un tubo de ensayo de forma que el extremo inferior del bulbo quede a 15 mm de distancia del fondo del tubo. Suspender el tubo en un baño con agua a temperatura no mayor de 16°C, elevar la temperatura del baño 2°C por minuto hasta llegar a 30°C y luego 1°C por minuto.

PROCEDIMIENTO METODO I 1. Colocar en el matraz 20 mL del líquido. 2. Adicionar algunas piezas de material poroso y calentar rápidamente hasta ebullición. 3. Registrar la temperatura a la cual el líquido comienza a desprenderse del brazo lateral del matraz al refrigerante. 4. Corregir la temperatura de ebullición por alguna variación en la presión barométrica utilizando la fórmula: t1=t2+ R(a-b); donde, t1 es la temperatura corregida, t2 es la temperatura medida, a es la presión barométrica, en mmHg, durante la destilación, b es la presión barométrica al tiempo de la determinación, R es el factor de corrección.

METODO II 1. Colocar 0.5 mL del líquido, adicionar algunas piezas de material poroso. 2. Colocar el termómetro dentro del aparato mediante un hilo hasta que el bulbo de mercurio alcance el soporte inferior. 3. Calentar el líquido a ebullición sobre una flama pequeña que apenas toque la tela metálica. 4. Registrar la temperatura a la cual el líquido en reflujo alcanza la parte superior de la columna de mercurio. 5. Corregir la temperatura de ebullición utilizando la fórmula del método I.

La rotación medida en el polarímetro se llama rotación óptica observada y se representa por a. Su valor depende de numerosas variables como temperatura, longitud de onda, concentración, disolvente y tipo de sustancia. Para evitar estas dependencias se define la rotación óptica específica Si la sustancia es un líquido, ajustar su temperatura a 25°C, pasarla al tubo del polarímetro y efectuar, mínimo, 5 lecturas. Sustituir el tubo que contiene la solución de la muestra, por el que contiene el disolvente y efectuar con él, de nuevo, 5 lecturas. La prueba en blanco se verifica empleando un tubo seco.

Si es sólido, pesar una porción adecuada, depositarla en un matraz volumétrico con la ayuda de agua, o de otro disolvente especificado, reservando una porción del disolvente para la prueba en blanco. Agregar más disolvente hasta cerca de la línea de aforo y ajustar la temperatura a 25°C, sumergiendo el matraz en un BM a temperatura constante. . Agregar disolvente hasta el aforo y mezclar. La solución se pasa al tubo del polarímetro, dentro del término de 30 minutos a partir del momento de disolución total de la muestra. Mantener la temperatura a 25°C. Efectuar 5 lecturas. Sustituir el tubo que contiene la solución de la muestra, por el que contiene el disolvente y efectuar con él, de nuevo, 5 lecturas.

Calcular la rotación específica de una sustancia líquida, o de una sólida en solución, con la siguiente fórmula: Para sustancias líquidas: [] = a / l d Para sustancias sólidas en solución: [] = 100a / l m d = 100a / l c En donde, a es la rotación observada corregida, en grados, a la temperatura t, a la longitud de donde x; L es la longitud del tubo del polarímetro en dm; d es la densidad del líquido o de la solución, a la temperatura de observación; m es la concentración de la solución expresada en gramos por cada 100 g de solución y c es la concentración de la solución expresada en gr/100ml solución.

Preparación de la muestra 1. Transferir 50 ml, a menos que se indique otro volumen en la monografía específica, de la solución concentrada de la muestra a un matraz volumétrico de 100 ml y aforar con agua. 2. Diluir esta solución con agua, para obtener la concentración del ión. PROCEDIMIENTO 1. Calibrar un fotómetro de flama y ajustarlo, según el MGA 0331, para dar lectura tan cerca como sea posible al 100% de transmitancia, con la solución control a una longitud de onda característica y ancho de banda espectral para el ión en estudio. 2. Tomar la lectura de la transmitancia. 3. Con los mismos ajustes, determinar el porcentaje de transmitancia de la solución de trabajo de la muestra. 4. Interpretar los resultados. La prueba es satisfactoria si el valor de T-B S-T, en donde T es el porcentaje de transmitancoia de la solución de trabajo de la muestra a la longitud de onda característica; B el porcentaje de transmitancia de la solución de trabajo de la muestra a la longitud de onda de corrección de fondo y S es el porcentaje de transmitancia de la solución control a la longitud de onda característica.

La prueba de seguridad general permite detectar cualquier toxigenicidad inesperada e inesperada que pudiera haberse introducido durante su manufactura o que hubiese desarrollado durante el almacenamiento del producto. Esta toxigenicidad debe distinguirse de la toxigenicidad intrínseca (esta toxicidad es la que posee el producto por si mismo). Procedimiento El día de la prueba, seleccionar 5 ratones que pesen entre 18 y 25g durante la prueba, cada grupo de ratones a los que se les administró una muestra deben ser albergados en una jaula apropiada con agua y alimento balanceado. Mantener el ambiente con temperatura controlada de 20 a 24º C; la temperatura seleccionada no debe variar en ± 0.5º C. Administrar, a cada uno de los ratones la dosis de prueba apropiada por una de las vías siguientes: - Intravenosa: inyectar en una vena caudal lateral, a una velocidad de 0.1ml por segundo. - Intraperitoneal: inyectar en la cavidad peritoneal, a través de la pared abdominal. - Subcutánea: inyectar subcutáneamente en la superficie dorsal o abdominal. - Oral: por medio de una cánula u otro dispositivo apropiado (aguja calibre 18, de 2.5cm de longitud con punta roma) administrar la dosis de prueba. Observar a los animales durante 48 horas. Anotar la mortalidad a las 24 horas y 48 horas. Si al final del periodo de observación todos los animales sobreviven, la muestra pasa la prueba de seguridad. Si uno o más ratones mueren, repetir la prueba usando otros diez ratones que pesen de 19.5 a 20.5g. El antibiótico pasa la prueba de seguridad en el caso de haber sido necesaria una repetición, si el número total de ratones muertos no excede del 10 por ciento del total de ratones utilizados.