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• DiegoArmandoCastroBuitrón

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RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESÓFILOS VIABLES

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS Universidad del Perú, Decana de América FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE FARMACOLOGÍA, BROMATOLOGÍA Y TOXICOLOGÍA. Año de la Diversificación Productiva y del Fortalecimiento de la Educación

LABORATORI O DE

INOCUIDA D DE LOS ALIMENTO S

RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESÓFILOS VIABLES

RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESÓFILOS VIABLES

Semestre Académico 2015-II RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESÓFILOS VIABLES OBJETIVO 1.- Conocer Los métodos oficiales de Preparación y Dilución de las muestras de alimentos para su análisis. 2.- Determinar cuantitativamente la población de microorganismos aerobios mesófilos viables en un alimento.

PREPARACION DE LA MUESTRA MUESTRA MÉTODO DILUYENTE

Jamonada brindado por la cátedra Homogenizador Stomacher Agua peptonada

ENUMERACIÓN DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESÓFILOS VIABLES MÉTODO MEDIO DE CULTIVO TEMPERATURA TIEMPO DE

Recuento Estándar en placa o Incorporación Agar Plate Count 30º 48±3 horas

INCUBACIÓN DILUCIONES

3 diluciones (10-1, 10-2,10-3)

REALIZADAS

Dilución Dilución: 10-1 = Dilución: 10-2 = Dilución: 10-3 =

RESULTADOS Placa 1

Placa 2

>300

>300

>300

>300

>300

>300

CÁLCULOS Se dividió la placa en 4 partes iguales y se realizó el conteo en uno de los segmentos PLACA 1: Dilución 10-3 PLACA 2: Dilución 10-3 124 x 4 = 496 140 x 4 = 560

RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESÓFILOS VIABLES 496+560 Promedio: 2

= 528

Recuento promedio Estimado : Nº colonias x FD X FM Recuento Estimado : 528 x 1000 x 1 Recuento Estimado = 528000 Expresión Final de los Resultados 53x104 UFC/g (10-3) Recuento Estimado

DISCUSIÓN Para determinar cuantitativamente la población de microorganismos aerobios mesófilos viables en la muestra de Jamonada por el método de recuento estándar en placa, analizada por el grupo b4, se utilizó 3 diluciones (10 -1, 102 ,10-3) cuyos valores del número de colonias por placa en todas las diluciones fue >300; razón por la cual tal como indica la guía práctica asignada por la cátedra realizamos los cálculos como RECUENTO ESTÁNDAR ESTIMADO donde se determinó 53X104 UFC/g (10-3) recuento estimado. El valor del recuento estimado no es un valor de precisión; por lo que para determinar con mayor exactitud se debe realizar más diluciones de la muestra para poder encontrar dentro del rango el número de colonias por placa (30-300) tal como indica el método y hallar el recuento estándar en UFC/g para poder aceptar o rechazar el producto. Además durante el análisis se debe tener en cuenta las condiciones de higiene, el almacenamiento adecuado del producto para evitar interferencias y tener un resultado mucho más exacto al realizar el Recuento Estándar.

CONCLUSIONES 1.- Los métodos oficiales de preparación y dilución son: recomendado por la AOAC, recomendado por la ISO y el empleando el homogenizador Stomacher. 2.- se determinó 53 x 10 4 UFC/g (10-3) recuento estimado de población de microorganismos aerobios mesófilos viables en jamonada.

Cuestionario: 1.- ¿Que otros métodos de recuento en placa existen?

RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESÓFILOS VIABLES Contaje microscópico directo: Usando cámaras de cuenta, se coloca un volumen determinado y se recuentan las bacterias Método del número más probable: Basado en series de diluciones y cálculo estadístico del número de bacterias presentes en las diluciones más altas. Se puede hacer con 3 ó 5 tubos. El método es popular aunque poco exacto. Métodos basados en la reducción de colorantes: Usando azul de metileno o resazurina. Colorantes reducidos por las bacterias; al reducirse cambian de color y esto es medible. Usado en medios líquidos (lácteos).1

2- ¿Cuáles son las ventajas y desventajas del uso de Stomacher? Ventajas: a) no necesita reesterilizarse el instrumento entre muestras porque la muestra (alojada en una bolsa de plástico) no llega a estar en contacto con el instrumento b) las bolsas desechables permiten el análisis de un gran número de muestras eficientemente c) no se genera calor ni aerosoles d) la bolsa con la muestra puede servir como contenedor durante el tiempo del análisis. e) en comparación con la licuadora es menor el riego de la lisis del microorganismo y la velocidad del homogenizado es graduable. f) Menor riesgo de contaminación. Desventajas: a) Presenta restricciones de uso para muestras de elevado dureza porque se corre el riego de romper la bolsa durante el homogenizado. b) En caso de muestras duras una previa trituración aumenta el riesgo de contaminación debido a la manipulación de la muestra.2

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. Métodos de recuento. Fecha de publicación [enero 2013] disponible en: %20microorganismos.htm

http://www.unavarra.es/genmic/recuento

RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESÓFILOS VIABLES 2. Lía A et al. Microbiología Moderna en Alimentos. Departamento de investigación en alimentos-Facultad de Ciencias Químicas UA de C. Publicado: 12/03/2007. Disponible en. http://www2.uadec.mx/pub/pdf/CIENCIACIERTA2.pdf