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Biología con Mención en Biotecnología

Histología: Sistema Digestivo

Introducción Las estructuras que dan origen al tubo digestivo se organizan desde la fecundación. La proliferación celular es determinada por factores como la concentración de calcio, la activación de genes básicos que inducen la migración de las células que formarán el sistema, fenómenos de muerte celular programada para moldear y transformar estructuras sólidas en tubos y la unión con otras capas embriológicas (Montenegro, 1999). El aparato digestivo está formado por un conducto largo muscular modificado (tubo digestivo) que se extiende desde la boca hasta el ano. A lo largo de este tubo se vierten diferentes secreciones, unas producidas por glándulas que se localizan en su propia pared y que forman la saliva, el jugo gástrico o el intestinal, y otras glándulas como el hígado y páncreas que están alejadas del tubo digestivo y mantienen su comunicación por medio de largos conductos, aportando su producto al intestino delgado. En los diferentes grupos de vertebrados, el aparato digestivo presenta el mismo plan estructural: Un intestino anterior formado por la boca, la faringe, esófago y estomago; un intestino medio o delgado, y un intestino posterior denominado grueso que termina en el recto y el ano. Los diversos órganos que conforman este aparato realizan funciones específicas como la transportación de los alimentos, en donde éstos sufren una fragmentación mecánica en partículas pequeñas y una digestión química (Estrada, E. 2002). El sistema digestivo está constituido por un tubo modificado, cuya organización histológica es esencialmente la misma en toda su extención: desde la luz del tubo, se observa una capa epitelial mucosa, que puede profundizarse y formar las glándulas, e inmediatamente oir debajo de aquella el plexo mucoso cuyas funciones todavía no se conocen en su totalidad, pero se sabe que controla la contracción de la capa muscular subyacente, la muscular de la mucosa. Debajo de ésta se encuentra el plexo mientérico o de Auerbach. La capa epitelial serosa y kis capilares sanguíneos que irrigan el sistema se ubican del lado externo (opuesto al de la luz). En la boca, la faringe, el tercio superior del esófago y el esfínter anal, esta organización se modificasobre todo por la presencia de abundante musculatura estriada, controlada por el sistema nervioso somático (Salomón, R. 2000). El objetivo de la práctica presente es de observar y reconocer la estructura morfológica del tejido que conforma el sistema digestivo. Material y Métodos La especie utilizada para estudiar la histología del sistema digestivo fue Cavia porcellus. Se sacrificó al animal con un golpe fuerte a la altura de la nuca. Durante el procedimiento de disección se empleó bata, guantes de látex y estuche de disección. Se colocó al especimen en posición cúbito dorsal, vista ventral, y se hizo un corte longitudinal desde el cuello, hasta antes del órgano reproductor. Se procedió cortando la membrana mesentérica de forma paralela a la línea abdominal, para evitar sangrado por las venas y arterias que por ahí pasan, de esta manera se evita estropear la visión de los órganos. Se cortó el hueso del esternón junto con el diafragma para observar los órganos por completo. Se identificaron los órganos y partes del sistema digestivo, y también las glándulas anexas. Se cortó una porción del

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esófago, estómago, intestino delgado e intestino grueso; de una longitud de 1.5cm aproximadamente con cortes transversales de tal maenra que se tenga una especia de cilindros. Se cortaron rodajas transversales muy delgadas en cada porción obtenida y fueron depositados en láminas porta objetos, rotuladas con el nombre del tejido al que corresponde cada muestra. Técnica de coloración: Las muestras en porta objetos fueron coloreadas mediante la técnica Hematoxisilina-eosina. Se agregó gotas de xilol, y se dejó actuar durante 3 minutos. Se eliminó el exceso con alcohol al 100%, y se dejó empapado del mismo, dejando actuar durante 3 minutos más. Luego se agregó alcohol al 96%, dejando actuar durante 3 minutos. Se agregó alcohol al 70%, y se dejó actuar durante 3 minutos. Se limpió con agua destilada, y se empapó con el mismo, dejando actuar 1 minuto. Se agregó hematoxisilina, y se dejó actuar durante 5 minutos. Luego se eliminó el exceso con agua de caño, y se dejó empapado con el mismo, dejando actuar 5 minutos. Se agregó agua destilada, y se dejó reposar 2 minutos, este paso se volvió a repetir. Se agregó Eosina, durante 20-30 segundos y se eliminó el reactivo de la muestra con alcohol al 100%. Finalmente se observó al microscopio y se fotografió. Resultados

Figura 2: Corte transversal de esófago de Cavia porcellus. Tinción hematoxisilina-eosina. Se observa la capa muscular, y desgarres de tejido.

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Figura 1: Corte transversal de estómago de Cavia porcellus. Tinción hematoxisilina-eosina. Aumento de 400x. Se observa capa serosa, capa muscular, y mucosa desgarrada producto del corte histológico manual.

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Figura 3: Corte transversal de Intestino delgado de Cavia porcellus. Tinción Hematoxisilinaeosina. Aumento de 400x. Se muestra coloreado de azul la capa mucosa, de rosado oscuro la capa serosa, de rosado claro la capa muscular.

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Figura 4: Corte transversal de Intestino grueso de Cavia porcellus. Tinción Hematoxisilinaeosina. Aumento de 400x. Solo se puede observar capa muscular con células sobrepuestas.

Discusión El esófago es un tubo muscular que se dirige de la faringe al estómago,conduciendo el bolo alimenticio ,tiene su propio peristaltismo. En la figura 1, se observa un corte transversal del una porción del esófago de Cavia porcella, donde apenas se puede diferenciar la capa muscular, y parte de la capa sub-muscular. Pacheco, M. 2015. Nos muestra un corte histológico hecho con micrótomo (Anexo 1) y coloración hematoxisilina-esosina, de esófago de Oryctolagus cuniculus, donde se observa mejor la diferencia morfológica de cada capa. El corte transversal muestra un lumen bastante irregular, con forma estrellada, pues sus paredes están plegadas, y al pasar alimento se distiende, quedando con un espacio casi circular. Los micrótomos son instrumentos de corte para la elaboración de preparados que se usan en la microscopía. Para cumplir con las altas exigencias de tales preparados, los microtomos permiten realizar cortes extremadamente finos (Peraza, M 2013). En la figura 2 se muestra corte transversal del estómago de Cavia porcellus donde se puede observar partes de las capas que conforman el tejido. Solis, J. 2011. Reporta que observó un corte histológico de Estomago en la región fúndica (Anexo 2). Donde se puede observar las diferentes capas del mismo, en base a estructura. Esto muestra una similitud parcial en cuanto

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a capa serosa, y capa muscular, que se pueden apreciar en ambos resultados. En la figura 2 no se observa la capa mucosa, debido al desgarre del tejido durante el corte histológico. El intestino delgado es la porción del sistema digestivo con mayor responsabilidad en la absorción de nutrientes del alimento al torrente sanguíneo. El esfínter pilórico administra el paso parcial del alimento digerido del estómago al duodeno (Subodh, K. 2016). En la figura 3 se muestra un corte transversal de tejido de Intestino delgado, perteneciente a la especie Cavia porcellus. Se observa con mayor claridad las distintas capas del tejido, resaltado por los reactivos del colorante. Este resultado presenta cierta similitud con Solano, S. 2012. Quien observo corte histológico de intestino delgado (Anexo 3), haciendo énfasis en las vellosidades intestinales, y menciona que las vellosidades están formadas solo por la capa de mucosa. La mucosa está formada por un epitelio estratificado plano, normalmente no queratinizado, aunque en algunos animales con dieta de alimentos duros, como los roedores, puede estar parcialmente queratinizado (Pacheco, M. 2015). El contenido del tubo digestivo está líquido, pero la fisiología del organismo está diseñada para expulsar desechos semisólidos, por lo que el intestino grueso absorbe gran cantidad de agua (aunque también absorbe otras sustancias útiles). Para que se pueda desplazar el contenido, le agrega mucho mucus (Arriagada, E. 1999). En la figura 4 se muestra un corte transversal de una porción del intestino grueso de C. porcellus, en la figura se muestra una porción oscura, en donde no se puede diferenciar el tipo de capa. Esto se debe a que el corte fue muy grueso como para que la luz atraviese de forma limpia el tejido, por lo que no se puede diferenciar por las células sobrepuestas. Por otro lado Chavez, R. 2010. Hizo un corte histológico con uso de micrótomo, en donde se puede diferenciar las capas del tejido, él nos hace un énfasis en la capa de la mucosa donde muestra las criptas de lieberkuhn. Las Criptas de Lieberkühn o criptas intestinales son glándulas tubulares simples encontradas entre como vellosidades de pared de intestino delgado e intestino grueso (colon). Secretan diversas enzimas , como sacarosa y maltase, yy poseen celulas especiales en producción de hormonas y enzimas de defesa (Yale 2015). Conclusión Se observó y pero no se pudo reconocer totalmente la estructura y morfología del tejido perteneciente al sistema digestivo, a través de cortes histológicos de distintas regiones, observadas al microscopio, puesto que hace falta la técnica para corte histológico manual, o la implementación de micrótomo. Referencias Arriagada, E. (1999). Histología Digestivo. 2017, de IDAP Sitio web: www.idap.com.mx/apuntes/Histologia/Digestivo.doc Chavez, R. (2010). Aparato Digestivo y sus Cortes Histologicos . 2017, de Slideshare Sitio web: https://es.slideshare.net/richardchavez22/aparato-digestivo-y-sus-cortes-histologicosdigestivo-i-i-u-v-s-de-jos-romero-profesor

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Estrada, E., Uribe, M. (2002). Atlas de histología de vertebrados. México: Editorial de Universidad Autónoma de México. Montenegro, R., Lozano, G. (1999). Nutrición clínica y gastroenterología pediátrica. Bogotá: Panamericana. Pacheco, M., Molist, P., Pombal, M. (2015). Esófago. 2017, de Atlas de histología vegetal y animal Sitio web: https://mmegias.webs.uvigo.es/2-organos-a/imagenesgrandes/digestivo-esofago.php Peraza, M. (2013). Micrótomo. 2017, de SlideShare Sitio web: https://es.slideshare.net/marleneperaza48/micrtomo Salomón, R., Salomón, M. (2000). Temas de Gastroenterología. Caracas, Venezuela: Editorial de Universidad Central de Venezuela. Solano, S. (2012). Histología. 2017, de Slideshare Sitio web: https://es.slideshare.net/syeni/histologa-del-intestino-delgado Solis, J. (2011). Histología 2011. 2017, De Universidad de Monterrey Sitio web: http://vale-ac2191.wix.com/histo2011#! Subodh, K. (2016). Intestino delgado. 2017, de MedinePlus Sitio web: https://medlineplus.gov/spanish/ency/esp_imagepages/19221.htm Yale. (2015). Criptas de Lieberkühn. 2017, de medcell Sitio web: http://medcell.med.yale.edu/histology/gi_tract_lab/crypts_of_lieberkuhn.php Anexos

Anexo 1: Órgano: esófago. Especie: conejo. (Oryctolagus cuniculus). Técnica: secciones de parafina

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Anexo 3: Estomago región fúndica. Se observan criptas cortas y glándulas largas con Epitelio cilíndrico simple mucosecretor, Glándulas fúndicas: En las que destacan: Células Parietales y Principales (Solis, J. 2011).

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Anexo 2: Se observan solamente en las bases de células intestinales, dispersasentre células indiferenciadas, y a todo lo largo del intestino delgado.Muestran características de la secreción exocrina con retículogranuloso basal extenso, en un gran complejo de Golgi supranuclear y gránulos secretorios apicales que se tiñen de rosa vivo en unapreparación de hematoxilina-eosina (Solano, S. 2012).

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Anexo 4: En este corte de intestino grueso observamos Túnica Mucosa con abundantes criptas de Lieberkuhn y entre ellas la lamina propia Muscularis mucosae (delgada) Túnica Submucosa, donde está el plexo de meissner Túnica muscular Circular interna, Longitudinal externa, en el colon la longitudinal forma 3 engrosamientos visibles que se llaman tenias del colon Túnica Serosa (Chavez, R. 2010)

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