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INFORME DE LABORATORIO: CARBOHIDRATOS Y LIPIDOS ASOCIADOS A ESTRUCTURAS CELULARES

ELABORADO POR: JOSUE JESUS PEREZ ESPINEL CODIGO: 19282035

EQUIPO DE TRABAJO DE LABORATORIO: JOSUE PEREZ ESPINEL CODIGO: 19282035 LEZLY MICHELLE BLANCO CODIGO: 19282021 JULIET MARCELA JAIME CODIGO: 19282036

DOCENTE: ROSA HAYDEE MEDINA IBARRA BIOLOGA QUIMICA

UNIVERSIDAD DE SANTANDER UDES CUCUTA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE ENFERMERIA BIOCIENCIAS: INFORME DE LABORATORIO DE BIOLOGIA CUCUTA, 28,09, 2019 FORMATO ELABORADO POR: ROSA HAYDEE MEDINA IBARRA –2016

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INTRODUCCION

Los lípidos son biomoléculas orgánicos formadas por carbono, hidrógeno y oxígeno. Además puede contener ocasionalmente nitrógeno, fosforo y azufre. También son un grupo de sustancias heterogéneas que son insolubles en agua y son solubles en disolventes orgánicos como éter, cloroformo y benceno. Ellos se clasifican en dos grupos dependiendo de su composición de ácidos grasos: lípidos saponificables e saponificables. Tienen diferentes funciones a nivel celular pero son el principal componente de las células y de los organelos de las membranas. Exhiben diferentes formas estructurales como lineales y otros en forma de anillos. Su estructura química puede ser flexible o rígidos. Presentan características polares y no polares que los hacen que tengan porciones hidrofílicas e hidrofóbicos. Entre sus propiedades físicas se encuentran su punto de fusión, en los lípidos saturados aumenta debido al número de carbonos, mostrando tendencias a establecer enlaces Vander Waals en las cadenas carbonadas. Los insaturados tienen menos interacciones de este tipo debido al codo de su cadena. Por su dificultad de combinarse con otros compuestos hace que sea difícil romper sus moléculas en otras más pequeñas que atraviesen las paredes de los capilares sanguíneos y las membranas celulares. Por eso en determinadas condiciones pueden acumularse y formar placas en el interior de las arterias lo que se conoce como arteriosclerosis. Los lípidos forman parte de la dieta y son imprescindibles para la alimentación sea equilibrada, completa y armónica.

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1. PROBLEMA DE INVESTIGACION Y OBJETIVOS

PREGUNTA PROBLEMA. ¿Cómo reconocer los lípidos en las muestras de laboratorio? ¿Por qué debo reconocer los tejidos de las diferentes muestras? ¿Qué tipo de tinción utilizamos y por qué?

OBJETIVOS: 

Observar y describir la presencia de carbohidratos en los organismos, así como sus principales propiedades, destacando que existen diferentes formas de acumulación de los carbohidratos en las plantas.

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Relacionar los carbohidratos y lípidos con las estructuras celulares e identificar la función de estas biomoléculas en las células vegetales y animales respectivamente

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2. MARCO TEORICO

2.1 DESARROLLO DE CONSULTA PREVIA 1.- ¿Por qué se hacen las tinciones en observación de células? Se hacen con el fin de hallar el contraste de la célula y el medio que lo rodea; así, el mejor medio para distinguir estos dos puntos es utilizar los colorantes para lograr que haya un contraste notorio. Una tinción in vivo (tinción vital) es el proceso de teñir tejidos vivos. Al provocar que determinadas células o estructuras adquieran los colores de contraste, se puede estudiar su ubicación y morfología mientras están desempeñando su función. El propósito más común es revelar detalles de la citoestructura que de otra manera no resultarían evidentes, sin embargo, la tinción vital puede revelar además donde aparece un determinado producto químico o donde se lleva a cabo una determinada reacción química dentro de las células o tejidos. A menudo estas tinciones son llamadas tinciones vitales. Se introducen en el organismo mientras las células aún se encuentran vivas. Para conseguir el efecto deseado, el colorante usualmente se utiliza en soluciones muy diluidas que van entre 1:5.000 a 1:50.000. A pesar de esto las tinciones son eventualmente tóxicas para los organismos, algunas más que otras. Una tinción in vitro o "supravital" involucra el coloreo de células o estructuras que han sido removidas de su contexto biológico. Se utiliza a menudo una combinación de varios colorantes para revelar más detalles y características de las que se obtendrían con la utilización de uno solo. Combinados con protocolos específicos de fijación y de preparación de muestras, los científicos y profesionales de la salud pueden utilizar estas técnicas estandarizadas como una herramienta diagnóstica repetible y consistente. Una contratinción es una tinción que consigue que las células o estructuras sean más visibles, cuando no se consigue que sean totalmente visibles con la tinción principal. Por ejemplo, el cristal violeta tiñe únicamente a las bacterias Gram positivas en la tinción de Gram. Se utiliza una contratinción de safranina (que colorea todas las células), para permitir también la identificación de bacterias Gram negativas. Es de notar que muchas tinciones pueden ser utilizadas tanto en células vivas como en células fijadas. 2.- ¿Qué es un plasto y como se clasifican en la célula? Son orgánulos presentes en las células de las plantas y de las algas, aunque también se pueden encontrar en algunos animales marinos; Son orgánulos con una doble membrana y un espacio intermembranoso entre ella. Interiormente poseen más compartimentos membranosos como los tilacoides de los cloroplastos o los túbulos de los cromoplastos. Tienen ADN en su interior y la maquinaria para dividirse, al igual que ocurre con las mitocondrias, aunque están sometidos al control de los genes nucleares. Los plastos no se crean de nuevo, sino que provienen de otros que ya existen. Así, deben transmitirse en los gametos durante la fecundación y, por tanto, todos los

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plastos de una planta provienen de los plastos del embrión, que se denominan proplastidios; se clasifican:

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Proplastidios: son menos complejos, incoloros y no tienen una morfología distintiva, puede variar su forma. Pueden ser a su vez germinales (se encuentran sobre todo en los embriones de las semillas y en los meristemos, da por división y diferenciación al resto de los plastos) y nódulos (se encuentran en los tallos pero no en las raíces). Leucoplastos: son plastos sin color, sin pigmentos, cuya principal misión es la de almacén. Aquí se incluyen los amiloplastos, elaioplatos (u oleoplastos) y proteinoplastos, que almacenan almidón, lípidos y proteínas, respectivamente. Cromoplastos: Son aquellos que tienen pigmentos carotenoides en su interior que dan color amarillo, rojo o naranja a la estructura donde se encuentran; tienen en su interior gotas de lípidos con carotenoides y estructuras macromoleculares denominadas fibrillas, las cuales tienen un núcleo de carotenoides. Cloroplastos: son orgánulos aún mayores y se encuentran en las células de plantas y algas, pero no en las de animales y hongos. Su estructura es aún más compleja que la mitocondrial: además de las dos membranas de la envoltura, tienen numerosos sacos internos formados por membrana que encierran el pigmento verde llamado clorofila Otros: Entre ellos están: muroplastos, Gerontoplastos, rodoplastos, cleptoplastos, etc.

3.- ¿Cómo reacciona el sudan III en una coloración de tejido adiposo? Reacciona de un color rojo intenso, por presencia de lípidos.

4.- ¿Cómo es el resultado de la coloración de Lugol con los carbohidratos y cuál es su explicación? Los carbohidratos que contengan almidón, se torna de un color purpura tono oscuro. Así mismo, dependiendo de la cantidad de almidón que contenga el carbohidrato así será la tonalidad de color.

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5.- Dibuja la piel con sus respectivos tejidos e indica donde se ubican los adipocitos.

Las células que se encuentran en el tejido subcutáneo son principalmente fibroblastos, que sintetizan colágeno y fibras proteicas de la matriz extracelular, adipocitos, que almacenan grasas, y macrófagos, células inmunitarias especializadas en la fagocitosis. 6.-Dibuja una célula vegetal y los organelos que depositan carbohidratos y grasa ORGANELOS exclusivos en CÉLULAS VEGETALES: PLASTIDIOS: Amiloplastos: Plastidos que acumulan gran cantidad de Almidón. Leucoplastos: Son Plastidos incoloros.- Licopeno: Plastidios de color rojo, característico del tomate. Carotenoides: Plastidios que poseen Carotenos. Cromoplastos: Conforman un grupo de Plastidios de colores desde amarillo hasta naranja. Proteinoplastos: Plastidios que acumulan proteínas. Elaioplastos: Plastidios que almacenan aceites y grasas. CLOROPLASTOS: Plastidios que poseen un pigmento de color verde llamado Clorofila. VACUOLAS: Organelo celular que acumula gran cantidad de agua y sales. PARED CELULAR: Organelo propio de células vegetales y cumple la función de protección de laMembrana Plasmática y por el cual ingresan las sustancias a través de sus plasmodesmos.

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7.- ¿Cuál es la diferencia estructural y fisiológica de una molécula de carbohidratos y una de lípidos? La diferencia estructural es que en una molécula de carbohidratos solo hay: C, H, O. En donde, en una molécula de lípidos hay más elementos: N, P. También la diferencia fisiológica es que unas funcionan como acumulación de energía inmediata lo que son los carbohidratos por lo que son más sencillos mientras que los lípidos se almacenan como energía para ser utilizada después. 8.- ¿Cómo puedes relacionar el concepto de energía con estas biomoléculas? Sabiendo que la energía es una fuerza capaz de generar una acción o un trabajo, estas dos biomoléculas aportan energía al organismo solo que una aporta para ser gastada de una vez en cambio la otra queda de como almacenamiento. 9. ¿Cómo se reconocen carbohidratos en el laboratorio? Explique el fundamento de las pruebas.

Los carbohidratos también llamados azúcares, osas o sacáridos, son polihidróxialdehidos o polihidroxicetonas o compuestos poliméricos que por hidrólisis producen polihidroxialdehidos y polihidroxicetonas.

Según el número de unidades de azúcares sencillos que posean se clasifican en: MONOSACÁRIDOS o azúcares sencillos, que a su vez pueden ser ALDOSAS cuando contienen el grupo aldehído o CETOSAS cuando contienen el grupo cetona. Los monosacáridos naturales pertenecen a la serie D de los azúcares y pueden tener entre tres y hasta siete átomos de carbono. DISACÁRIDOS que están formados por dos monosacáridos unidos entre sí por enlaces glucosídicos. OLIGOSACÁRIDOS que tienen entre tres y diez monosacáridos unidos también por enlaces glucosídicos. POLISACÁRIDOS que son polímeros naturales con varios miles de unidades de azúcar sencillo ligadas entre sí.

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De acuerdo con lo anterior, además de reconocer si un compuesto pertenece a la familia de los carbohidratos, es necesario diferenciar si se trata de un monosacárido tipo aldosa o cetosa, si es fácilmente oxidable o no, es decir si es un AZÚCAR REDUCTOR o no lo es, si es de cinco átomos de carbono (pentosa) o de seis átomos de carbono (hexosa), si es disacárido o polisacárido. Una secuencia que permite hacer el reconocimiento y diferenciación de carbohidratos. Ensayo de Molisch: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de carbohidratos en el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales reaccionan con α-naftol formando un color púrpura violeta. Ensayo de Benedict: El ensayo de Benedict permite el reconocimiento de carbohidratos reductores, al igual que el reactivo de Felhing, el de Benedict contiene ion cúprico en medio alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el hidroxilohemiacetálico libre. Ensayo de Barfoed: Esta prueba permite diferenciar entre monosacáridos y disacáridos reductores, también contiene ion cúprico que se reduce hasta óxido cuproso más rápidamente con los monosacáridos que con los disacáridos. Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una coloración azúlvioleta intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja. Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la conversión de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensación con resorcinol formando así complejos coloreados. Ensayo de Bial: El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma complejos de coloración sólo con las pentosas.

PROCEDIMIENTO Ensayo de Molisch: Soluciones patrón de carbohidratos: ARABINOSA, GLUCOSA, FRUCTOSA, SACAROSA Y ALMIDÓN. Coloque en un tubo de ensayo 2.0 mL de la solución del carbohidrato y agregue 0.2 mL de αnaftol al 10%, mezcle bien y luego adicione CUIDADOSAMENTE POR LAS PAREDES DEL TUBO, 1 mL de ácido sulfúrico concentrado, la formación de un anillo violeta en la interfase es prueba positiva para carbohidratos. Ensayo de Lugol: Soluciones patrón de carbohidratos: ALMIDÓN Y GLICÓGENO. Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solución del carbohidrato y agregue 0.2 ml de Lugol, mezcle y observe la formación de los colores rojo para glicógeno, azul-violeta para almidón como pruebas positivas. Ensayo de Benedict: Soluciones patrón de carbohidratos: GLUCOSA, MALTOSA Y SACAROSA. FORMATO ELABORADO POR: ROSA HAYDEE MEDINA IBARRA –2016

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Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solución del carbohidrato y agregue 0.1 ml del Reactivo de Benedict, caliente al baño maría. La formación de un precipitado amarillo o rojizo, es prueba positiva para carbohidratos reductores. Ensayo de Barfoed: Soluciones patrón de carbohidratos: GLUCOSA, MALTOSA Y SACAROSA. Coloque en un tubo de ensayo 2.0 mL de la solución del carbohidrato y agregue 2 ml del reactivo de Barfoed, caliente en baño maría a ebullición. La formación de un precipitado rojo entre 5 y 7 minutos, es prueba positiva para MONOSACÁRIDOS REDUCTORES. Si el precipitado se forma entre 10 y 12 minutos, la prueba es positiva para DISACÁRIDOS REDUCTORES. Ensayo de Seliwanoff: Soluciones patrón de carbohidratos: FRUCTUOSA Y GLUCOSA. Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solución del carbohidrato y agregue 2 ml del reactivo de Seliwanoff, caliente en baño maría a ebullición por dos minutos. La formación de una coloración roja es prueba positiva para cetosas. Ensayo de Bial: Soluciones patrón de carbohidratos: RIBOSA, ARABINOSA Y GLUCOSA. Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solución del carbohidrato y agregue 3 ml del reactivo de Bial, caliente en baño maría a ebullición y observe. La formación de una coloración verdosa es prueba positiva para pentosas

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3. PROCEDIMIENTO O METODOLOGIA 3. METODOLOGIA Laboratorio de CARBOHIDRATOS Y LIPIDOS ASOCIADOS CON ESSTRUCTURAS CELULARES Previa explicacion del tema e introduccion al trabajo a realizar

Preparacion de la Preparacion de la muestra (arroz) muestra (tejdo adiposo)

Preparacion de la muestra (maiz)

Preparacion de la muestra (papa)

Obsevacion por el Obsevacion por el microscopio microscopio

Obsevacion el Registro de por resultados microscopio

Obsevacion por el microscopio

4. RESULTADOS (DATOS Y OBSERVACIONES)

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Muestra número 1

Tejido Grasso es un tejido conjuntivo (de origen mesenquimal) formado por la agrupación de células que guardan lípido en su citoplasma, estas son llamadas células adiposas o adipocitos. Muestra numero 2 observación microscópica de granos de almidón (Amiloplastos) semillas de papa

En la figura 2 tenemos un corte de papa en donde se puede observar claramente los elementos de reserva de energía, en este caso los amiloplastos. Estos amiloplastos en su contenido tienen gránulos de almidón que almacenan amilopectinas para la polimerización de la glucosa. Su forma es ovalada y se ven de este color gracias a la tinción con lugol.

Muestra número 3

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Observación de amiloplastos en semilla de arroz

En 10X, los leucoplastos del arroz son muy pequeños e incoloros, se ven muchos puntitos negros que son las bacterias. En 40X, se observa la forma de los leucoplastos es poliédrica incoloras y muy pequeños, se observan diferentes tipos de bacterias que se mueven alrededor. Los almidones que se observan en esta muestra son muy pequeños.

Muestra número 4 Observación de amiloplastos en semilla se maíz fresco 5. CONCLUSIONES Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS

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• Al concluir la práctica se obtuvieron nuevos conocimientos acerca de la identificación de los carbohidratos, proteínas y lípidos de acuerdo con las muestras llevadas al laboratorio. Estas a su vez son sustancias orgánicas principales responsables de las características estructurales de los protozoos.

• En esta también se efectuaron algunas pruebas físicas y químicas para identificar los carbohidratos, proteínas y lípidos en forma cualitativa al agregarle el lugol o sudan III.

REFERENCIAS FORMATO ELABORADO POR: ROSA HAYDEE MEDINA IBARRA –2016

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http://www.edu.xunta.gal/centros/iesquiroga/system/files/inicio/depart/bioloxia/materialbio/lab bio2bac/lipidos.pdf

http://biomoleculas-biotec.weebly.com/liacutepidos-y-carbohidratos.html

http://iesdionisioaguado.org/joomla/index.php?option=com_content&view=article&id=1139:preg untas-resueltas-los-lipidos&Itemid=125

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