Espectrofotometria

ESPECTROSCOPIA Aplicaciones analíticas Método espectrométrico Los métodos espectrométricos son métodos instrumentales

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ESPECTROSCOPIA Aplicaciones analíticas

Método espectrométrico Los métodos espectrométricos son métodos instrumentales empleados en química analítica basados en la interacción de la radiación electromagnética, u otras partículas, con un analito para identificarlo o determinar su concentración Espectrofotometría : “medida del espectro de la luz “

Espectro :

Radiación Electromagnética: •Longitud de onda : Distancia recorrida por un ciclo completo : nm •Frecuencia : numero de oscilaciones por segundo.

Fundamento Las moléculas absorben radiaciones electromagnéticas

Identificación y cuantificación Se hace incidir sobre una sustancia radiaciones electromagnéticas

Espectro de absorción

Cuantificación : Se hace por la Ley de Beer Esta ley se puede aplicar si la Absorbancia es máxima y dice que :

Absorbancia = - log (%T) = AB * concentración Indicando una relacion directa entre la Absorbancia y la concentración

Aplicaciones ley de Beer

En la practica , lo que se hace es una curva de calibración a a partir de diferentes concentraciones del analito.  Absorvancia vs Concentración 

Las mas utilizadas en Análisis de Alimentos son : •De Absorción molecular : UV-VIS, IR •De Absorción atómica : de llama o AA •De Emisión molecular : Fluorescencia •De Emisión atómica : de llama EA

ESPECTROMETRÍA ULTRAVIOLETA (15400nm) y VISIBLE (400-750nm) (UV-VIS) 



Muchos moléculas absorben la luz visible (moléculas con color) y en el UV . Esta técnica se combina la absorción visible con la de absorción ultravioleta (espectroscopia UV/VIS).

Visible : Colorimetría

Espectrofotómetro

Como se hace : •Se elije longitud de onda (máxima absorción) para cada analito (X)

•La muestra de concentracion desconocida del analito X , en estado liquido (transparente) es medida en el equipo •Se anota la absorbancia que este arroja: Abs •En forma paralela se hacen estándares del analito X de concentración conocida y a cada uno de le mide su Abs. Se hace Curva de calibración que origina la ecuación de la recta

En la ecuación de la recta se reemplaza la Abs de la muestra y se obtiene la concentración.

Aplicaciones Moléculas sin Absorbancia máxima a ninguna longitud de onda Reacción Moléculas con absorbancia , se puede aplicar la Espectrofotometría

Ejemplos en alimentos : Determinación de aditivos alimentarios ( conservantes, colorantes y otros) Determinación de pigmentos Determinación de proteínas. Otras

ESPECTROMETRÍA INFRARROJA 



La espectrometría infrarroja ofrece la posibilidad de medir tipos diferentes de vibraciones en los enlaces atómicos a frecuencias diferentes. Esto permite saber qué tipo de enlaces están presentes en la muestra.

Intervalo de frecuencia (cm-1)

Enlace

Tipo de vibración

3600-3200

O-H

Tensión

3500-3200

N-H

Tensión

3000-2800

C-H

Tensión

1600-1700

O-H

Flexión

1640-1550

N-H

Flexión

1400-1200

C-H

Flexión

1350-1000

C-N

Flexión

900-800

As-O

Tensión (simétrica)

700-750

As-O

Tensión (antisimétric a)

500-400

As-O

Flexión

Espectrofotómetro Infrarrojo

Aplicaciones :  Ácidos grasos Trans (totales )  IR cercano : todo tipo de moléculas en alimentos

ESPECTROMETRÍA DE ABSORCION ATOMICA  



Se usa para el análisis de elementos Se basa en la atomización del analito en matriz líquida (por un nebulizador y un quemador que permite la atomización de los elementos.) La niebla atómica es expuesta a una determinada longitud de onda emitida por una Lámpara de Cátodo hueco construida con el mismo analito a determinar o una Lámpara de Descarga de Electrones (EDL).

Aplicaciones

Puede utilizarse para analizar la concentración de más de 62 metales diferentes en una solución.  Se utiliza en determinación de sodio, potasio, hierro, zinc, plomo, mercurio, y otros. 