ESPECTROSCOPIA Aplicaciones analíticas Método espectrométrico Los métodos espectrométricos son métodos instrumentales
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ESPECTROSCOPIA Aplicaciones analíticas
Método espectrométrico Los métodos espectrométricos son métodos instrumentales empleados en química analítica basados en la interacción de la radiación electromagnética, u otras partículas, con un analito para identificarlo o determinar su concentración Espectrofotometría : “medida del espectro de la luz “
Espectro :
Radiación Electromagnética: •Longitud de onda : Distancia recorrida por un ciclo completo : nm •Frecuencia : numero de oscilaciones por segundo.
Fundamento Las moléculas absorben radiaciones electromagnéticas
Identificación y cuantificación Se hace incidir sobre una sustancia radiaciones electromagnéticas
Espectro de absorción
Cuantificación : Se hace por la Ley de Beer Esta ley se puede aplicar si la Absorbancia es máxima y dice que :
Absorbancia = - log (%T) = AB * concentración Indicando una relacion directa entre la Absorbancia y la concentración
Aplicaciones ley de Beer
En la practica , lo que se hace es una curva de calibración a a partir de diferentes concentraciones del analito. Absorvancia vs Concentración
Las mas utilizadas en Análisis de Alimentos son : •De Absorción molecular : UV-VIS, IR •De Absorción atómica : de llama o AA •De Emisión molecular : Fluorescencia •De Emisión atómica : de llama EA
ESPECTROMETRÍA ULTRAVIOLETA (15400nm) y VISIBLE (400-750nm) (UV-VIS)
Muchos moléculas absorben la luz visible (moléculas con color) y en el UV . Esta técnica se combina la absorción visible con la de absorción ultravioleta (espectroscopia UV/VIS).
Visible : Colorimetría
Espectrofotómetro
Como se hace : •Se elije longitud de onda (máxima absorción) para cada analito (X)
•La muestra de concentracion desconocida del analito X , en estado liquido (transparente) es medida en el equipo •Se anota la absorbancia que este arroja: Abs •En forma paralela se hacen estándares del analito X de concentración conocida y a cada uno de le mide su Abs. Se hace Curva de calibración que origina la ecuación de la recta
En la ecuación de la recta se reemplaza la Abs de la muestra y se obtiene la concentración.
Aplicaciones Moléculas sin Absorbancia máxima a ninguna longitud de onda Reacción Moléculas con absorbancia , se puede aplicar la Espectrofotometría
Ejemplos en alimentos : Determinación de aditivos alimentarios ( conservantes, colorantes y otros) Determinación de pigmentos Determinación de proteínas. Otras
ESPECTROMETRÍA INFRARROJA
La espectrometría infrarroja ofrece la posibilidad de medir tipos diferentes de vibraciones en los enlaces atómicos a frecuencias diferentes. Esto permite saber qué tipo de enlaces están presentes en la muestra.
Intervalo de frecuencia (cm-1)
Enlace
Tipo de vibración
3600-3200
O-H
Tensión
3500-3200
N-H
Tensión
3000-2800
C-H
Tensión
1600-1700
O-H
Flexión
1640-1550
N-H
Flexión
1400-1200
C-H
Flexión
1350-1000
C-N
Flexión
900-800
As-O
Tensión (simétrica)
700-750
As-O
Tensión (antisimétric a)
500-400
As-O
Flexión
Espectrofotómetro Infrarrojo
Aplicaciones : Ácidos grasos Trans (totales ) IR cercano : todo tipo de moléculas en alimentos
ESPECTROMETRÍA DE ABSORCION ATOMICA
Se usa para el análisis de elementos Se basa en la atomización del analito en matriz líquida (por un nebulizador y un quemador que permite la atomización de los elementos.) La niebla atómica es expuesta a una determinada longitud de onda emitida por una Lámpara de Cátodo hueco construida con el mismo analito a determinar o una Lámpara de Descarga de Electrones (EDL).
Aplicaciones
Puede utilizarse para analizar la concentración de más de 62 metales diferentes en una solución. Se utiliza en determinación de sodio, potasio, hierro, zinc, plomo, mercurio, y otros.