• Author / Uploaded
• Jhon Nuñez

Citation preview

Ejercicio en clase taller Las enzimas de restricción se usan ampliamente en biología molecular. Debajo están los sitios de reconocimiento de dos de estas enzimas, BamHI y BclI. a) BamHI, se escinde después de la primera G. ¿La escisión por BamHI da como resultado un extremo saliente de 5 'o 3'? Cuál es el secuencia de este extremo resultante? 5 'G|GATCC 3' 3 'CCTAG|G 5' b) BclI escinde después de la primera T. ¿La escisión por BclI da como resultado un extremo saliente de 5 'o 3'? Cuál es el secuencia de este extremo resultante? 5 'T|GATC 3' 3 'ACTAG|T 5' c) Con la siguiente secuencia de ADN que se muestra a continuación: 5 'ATTGAGGATCCGTAATGTGTCCTGATCACGCTCCACG 3' 3 'TAACTCCTAGGCATTACACAGGACTAGTGCGAGGTGC 5' 5 'ATTGAG 3' 5'GATCCGTAATGTGTCCT 3' 5'GATCACGCTCCACG 3' 3 'TAACTCCTAG3' 5'GCATTACACAGGACTAG3' 5'TGCGAGGTGC 5'

i) Si este ADN se corta con BamHI, ¿cuántos fragmentos de ADN esperaría? Escriba la secuencia de los fragmentos resultantes en la secuencia dada. 5 'ATTGAG 3' 5'GATCCGTAATGTGTCCTGATCACGCTCCACG 3' 3 'TAACTCCTAG3' 5'GCATTACACAGGACTAGTGCGAGGTGC 5 ii) Si el ADN que se muestra arriba se corta con BclI, ¿cuántos fragmentos de ADN esperaría? Escriba la secuencia de los fragmentos resultantes en la secuencia dada con un color diferente. 5 'ATTGAGGATCCGTAATGTGTCCT 3' 5'GATCACGCTCCACG 3' 3 'TAACTCCTAGGCATTACACAGGACTAG3' 5'TGCGAGGTGC 5'

d) Puede ligar el fragmento de restricción más pequeño producido en (c, i) al fragmento de restricción más pequeño producido en (c, ii). Escriba la secuencia del fragmento recombinante resultante. 5 'ATTGAGGATCACGCTCCACG 3 3 'TAACTCCTAGTGCGAGGTGC 5 e) ¿Podría cortar el fragmento de (d) con BamHI o BclI? Justifique su respuesta. 5 'ATTGAGGATCACGCTCCACG 3 5'T|GATC3' 3 'TAACTCCTAGTGCGAGGTGC 5 3'ACTAG|T5'