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Laboratorio de Bioquímica Reporte de la práctica 4 “Curvas de Titulación de Aminoácidos (Titulaciones Potenciométricas)

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Laboratorio de Bioquímica Reporte de la práctica 4 “Curvas de Titulación de Aminoácidos (Titulaciones Potenciométricas) Alumnos: Valencia Torres Miguel Alejandro & Velázquez Granados Alejandra Sección 2 Grupo: 2OV1 Introducción La representación gráfica de la variación del pH de una solución debida al agregado de una base o un ácido se denomina curva de titulación. La curva de titulación surge entonces, de la relación entre la cantidad de ácido o base agregada a una solución y la variación del pH de la misma. A pH ácido, por ej. pH 1, podemos considerar que el aminoácido se encuentran como ión positivo porque están como molécula diprótica (tienen protonado el grupo carboxilo y el amino). Si el pH aumenta, habrá un valor para el cual el 50% de estará como ión positivo y el 50% como negativo, ese valor corresponde al pKa. El valor de pH en el cual el 100% del aminoácido se encuentra en estado neutro, ya no en forma iónica, a esto se le denomina punto isoeléctrico (PI). Por encima del PI la forma predominante del aminoácido será la de ión negativo, hasta llegar a un pH en el que el 50% se encontrará como dipolo y el 50% como ión negativo.

Resultados

Curva de titulación con ácido clorhídrico

pH 10

En esta gráfica se puede apreciar con claridad la disociación completa del ácido fuerte (HCl) comportándose de una manera equilibrada al principio y disparándose casí al final. + Disociándose en H formando agua e NaCl

8 6

HCl

4 2

V NaOH (mL)

0 0

2

3

5

5

1

1

1

1 0.2 0.3 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1

Curva de titulación para el ácido acético

pH En esta gráfica se aprecia la disociación parcial de un ácido débil, con capacidad de + aportar iones H (desprotonarse) pero también de aceptarlos. Eso lo hace tener un efecto buffer o regulador.

10 8 6

CH3COOH

4 2 0

2

3

5

5

1

1

1

1

0.5 0.5

V NaOH (mL)

Titulando con 20 mL de NaOH a Glicina y Glicina con Formol

pH 12 10 8 6

Glicina + Formol

4

Glicina 0.1

2 0 0

2

3

5

5

1

1

1

1

0.5 0.5

V NaOH (mL)

En esta ilustración se graficó la glicina a 0.1 N junto con la glicina con formol neutro. Ésta empezó a partir de un pH menor porque la combinación del grupo amino de la glicina con el formol, dio lugar a una mina terciaria, lo cual le confiere un carácter más ácido.

Titulando con 20 mL de HCl a Glicina y Glicina con Formol pH 7 6 5 4

Glicina + Formol

3

Glicina 0.1

2

Aquí, el carácter entre la glicina a o.1 N y la glicina con formol neutro titulado con HCl fue muy parecido porque éste ácido al disociarse completamente protonó al grupo amino del aminoácido, confiriéndole un pH más bajo al igual que la glicina con formol.

1 0 0

2

3

5

5

1

1

1

1

0.5 0.5

V NaOH (mL)

Conclusión Se logró demostrar el comportamiento anfótero de los aminoácidos y los cambios que presenta en su pH al agregarle una base o un ácido, también como cambia su pH al reaccionar con otros compuestos como fue el formol. Gráficamente determinamos las zonas de amortiguamiento y el tipo de curva que presentaron. Para las dos primeras muestras solo se pudo ver el comportamiento acido-base en el cual la base al interactuar con el ácido presenta curva sigmoidea cosa que no ocurre con el ácido Bibliografía Lehninger, Albert., Nelson, David L., Cox, Michael M.,(1993) ³Principios de Bioquímica´. Segunda Edición, Ediciones Omega, Barcelona, España