CAPITULO 7 Y 8

[Escribir el título del documento] PREGUNTAS CAPÍTULO 7 y 8    Capitulo 7 1. ¿Por qué difiere el término desarrollo

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[Escribir el título del documento] PREGUNTAS CAPÍTULO 7 y 8

   Capitulo 7 1. ¿Por qué difiere el término desarrollo que se usa en bacteriología del mismo término cuando se aplica a las plantas o animales superiores? En la mayoría de los organismos unicelulares, la reproducción es consecuencia del crecimiento y lleva al incremento en el número de individuos de la población, mientras que en los pluricelulares el crecimiento conduce al aumento del tamaño del organismo. 2. Mencione y describa tres métodos de reproducción que pueden ocurrir en las bacterias. Reproducción asexual: Consideramos éste un sistema asexual pues, a partir de una sola célula original se originan dos individuos genéticamente idénticos entre sí, es decir clones. La ventaja del primer sistema, reproducción asexual es su rapidez: si una bacteria está viviendo en un ambiente adecuado puede dividirse en unos veinte minutos y generar grandes poblaciones. El método más habitual es la bipartición o fisión binaria en la que, a partir de una célula original, resultan dos células hijas aproximadamente iguales en tamaño y con la misma dotación genética Reproducción Sexual: Las bacterias, en sentido estricto, no poseen mecanismos de reproducción sexual. No se forman gametos, ni estos se fusionan en un zigoto. Sin embargo sí que tienen mecanismos de intercambio de genes que conllevan la aparición de bacterias “hijas” con características diferentes a las originales, lo que es una de las principales consecuencias de los procesos sexuales. Existen en las procariotas tres mecanismos principales de intercambio de genes: Conjugación, Transducción y Transformación. Por gemación: Otras bacterias son capaces de reproducirse por gemación. Del tallo de la célula madre surge un crecimiento autónomo o yema y después de un periodo de alargamiento se separa de la célula progenitora como una nueva célula. 3. ¿Un medio de cultivo fresco se inocula con bacterias. Describa la secuencia de fenómenos que suceden? La fase de retardo: La siembra en un medio nuevo no va seguida de la duplicación de la población de acuerdo de acuerdo con el tiempo de la reproducción. En lugar de esto la población permanece temporalmente inalterada, pero esto no quiere decir que las células permanezcan inactivas o latentes, al contrario durante ese estadio cada una de las células incrementa su tamaño más allá de las dimensiones normales. Al final de esta fase de retardo, cada organismo se divide, y si bien, no 1

[Escribir el título del documento] todos los organismos completan de manera simultánea esta fase hay un incremento gradual en la población hasta el final de este periodo, cuando todas las células son capaces de dividirse a intervalos regulares.  Fase logarítmica o exponencial : Durante este periodo las células se multiplican regularmente a ritmo constante, en condiciones apropiadas durante esta fase, el grado de desarrollo es máximo. Fase Estacionaria: La fase logarítmica de desarrollo empieza a disminuir después de varias horas, nuevamente y de manera gradual representada por la forma transicional de una línea recta a una curva y otra recta. Fase de declinación o muerte: Después de periodo estacionario las bacterias pueden morir más rápidamente que la producción de células nuevas, si acaso se están produciendo algunas. 4. ¿En un cultivo de bacterias que se está multiplicando activamente, hay algunas células viejas explicar la causa? Las bacterias mueren a diferentes periodos de igual manera que lo hacen a desarrollarse, hay algunas especies que mueren rápidamente y otras especies mueren tan lentamente que pueden persistir células viables durante meses o años. 5. Si un métodos es inoculado con cultivos de bacterias que contenga 1000 células por mililitro en el momento cero. ¿Cuántas generaciones se han formado después de 10 horas de desarrollo si el cultivo contiene entonces 1 millón de células por mililitro? El número de generaciones lo obtenemos con la formula siguiente: n=3.3logb/B n=3.3log(1000000/1000)= 9.9 generaciones Y el tiempo de generación G lo encantamos: G=t/n

G=10 horas/9.9 generaciones G= 1.01horas/generación

6. ¿Cabe esperar que el tiempo de generación sea una característica constante de las especies bacterianas explicar por qué? El tiempo de generación no es una característica constante de las especies bacterianas, ya que unas se pueden dividir sus células en minutos y otras en cambio pueden ser hasta en horas. Y esto se debe en gran medida a los nutrientes presentes en el medio de cultivo y de las condiciones físicas imperantes.

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[Escribir el título del documento] 7. Dibuje la curva típica de desarrollo y marque las diversas fases. Explique los factores que determinan en principio y final de casa fase El crecimiento bacteriano sigue tres fases. Cuando una población bacteriana se encuentra en un nuevo ambiente con elevada concentración de nutrientes que le permiten crecer necesita un período de adaptación a dicho ambiente. Esta primera fase se denomina fase de adaptación y conlleva un lento crecimiento, donde las células se preparan para comenzar un rápido crecimiento, y una elevada tasa de biosíntesis de las proteínas necesarias para ello, como ribosomas, proteínas de membrana, etc. La segunda fase de crecimiento se denomina fase exponencial, ya que se caracteriza por el crecimiento exponencial de las células. La velocidad de crecimiento durante esta fase se conoce como la tasa de crecimiento k y el tiempo que tarda cada célula en dividirse como el tiempo de generación g. Durante esta fase, los nutrientes son metabolizados a la máxima velocidad posible, hasta que dichos nutrientes se agoten, dando paso a la siguiente fase. La última fase de crecimiento se denomina fase estacionaria y se produce como consecuencia del agotamiento de los nutrientes en el medio. En esta fase las células reducen drásticamente su actividad metabólica y comienzan a utilizar como fuente energética aquellas proteínas celulares no esenciales. La fase estacionaria es un período de transición desde el rápido crecimiento a un estado de respuesta a estrés, en el cual se activa la expresión de genes involucrados en la reparación del ADN, en el metabolismo antioxidante y en el transporte de nutrientes. 8. ¿En qué estadio de la curva de desarrollo bacteriano las células incrementan notablemente su tamaño? Explique el proceso Es en la fase de retardo, durante este estadio cada una de las células incrementa su tamaño más allá de las dimensiones normales, en términos fisiológicos, se encuentran muy activas y están sintetizando protoplasma nuevo. 9. ¿Cuándo los datos apropiados se representan gráficamente para obtener la curva de desarrollo bacteriano? ¿Por qué se obtiene una línea curva en lugar de una abrupta recta? Porque en la fase de retardo que es el principio de la curva de crecimiento la población permanece temporalmente inalterada en esta etapa las células solo incrementan su tamaño, al final de esta etapa, ya existe una división de los organismos y es aquí donde comienza a crecer aceleradamente la grafica, debido a la multiplicación celular, esta multiplicación es regular y constante, esta etapa se conoce como fase logarítmica y luego debido al agotamiento de nutrientes ya no existe reproducción cayendo en un tiempo de latencia que se representa por una línea recta o también esta línea recta nos dice que no hay crecimiento el cual este permanece constante, después de esto existe una fase de declinación ya sea por la muerte de esta o porque unas se comen a otras y el numero de estas va decreciendo constantemente.

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[Escribir el título del documento] 10. ¿Qué es estado constante de desarrollo? Haga una descripción del aparato que se usa para mantenerlo. Es cuando mantenemos la población bacteriana en la fase exponencial o fase logarítmica de desarrollo. El turbidostat y el quimiostat son dos aparatos disponibles para lograr en constante desarrollo. El turbidostat es regulado por un ojo fotoeléctrico que señala la turbiedad del cultivo y disminuye o aumenta el intercambio del medio de cultivo de tal manera que se mantenga constante la turbiedad 11. ¿Cómo se puede obtener desarrollo sincronizado de un cultivo bacteriano? ¿Para qué clase de experimentos sirven estos tipos de cultivo? Una población puede ser sincronizada por el control de las condiciones físicas y de la composición química del medio, y estos tipos de cultivos sirven en actividades bioquímicas de la célula, y concretamente de la síntesis de sustancias macromoleculares que precede al proceso de división celular. 12. ¿Compárese los métodos directos e indirectos para estimar la población bacteriana de acuerdo con a) aplicaciones prácticas b) ventajas y c) limitaciones en uso?

MÉTODOS DIRECTOS

MÉTODOS INDIRECTOS

Aplicaciones Practicas Las células se pueden contar en un frote teñido(como método de Breed)

Se usa rutinariamente y con resultados satisfactorios en la estimación de la población bacteriana, de la leche, agua, alimentos, etc.

Ventajas Son rápidos y Sencillos

Son muy precisos

Requieren mínimo equipo

Es fácil de practicar

Se observa la morfología de bacterias mientras se encuentran

las

Limitaciones en uso Falta de uniformidad al hacer el frote

Si una muestra tiene pocas bacterias , se deberá desarrollar dependiendo del

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[Escribir el título del documento] tamaño No hay manera de saber si las células que se cuentan son viables

13. El desarrollo en dos cultivos diferentes de bacterias se determina por medio del turbidimetro y se observa que es igual en los dos casos. A partir de este resultado. Se puede concluir que los dos cultivos contienen el mismo número de células viables, explique esto? Claro que no se puede concluir esto, ya que la turbiedad en cultivos se puede dar por el tamaño de las células, unas pueden ser grandes y otras pueden ser pequeñas, conteniendo más células las que tienen tamaño más pequeño que las de gran tamaño.

   Capítulo 8: 1. Diferencia de significado de los términos cultivo puro, cultivo axénico y cultivo mixto. Un cultivo puro está formado de poblaciones de células derivadas de una sola célula creados artificialmente, mientras que un cultivo mixto está formado por varias especies de microorganismo como se encuentra en la naturaleza. El cultivo axénico es igual al puro. 2. Compare varias de las diferencias técnicas para aislar microorganismos en cultivo puro.  La Técnica de siembra por estrías en placas y técnica de siembra por difusión en placa consiste en pasar una porción de la muestra a la superficie de un medio de cultivo hecho a base de agar y se siembra en el medio ya sea por estrías o por difusión. Permite dejar una capa delgada para dejar las células separadas.  En la técnica de la placa Vertida, se utiliza agar líquido y permite eliminar microorganismo que no se requieren en el cultivo  En la técnica del enriquecimiento del Cultivo se utiliza cuando el tipo de bacteria que queremos aislar se encuentra en muy pequeñas cantidades y se desarrolla con mayor lentitud que muchas de las otras especies presentes en el inóculo.  En la Técnica de las diluciones en Serie se utiliza si el microorganismo que se busca en un cultivo mixto se encuentra en mayor cantidad que cualquiera de los otros microorganismos, es posible obtenerlo en cultivo puro mediante una serie de diluciones en tubo. 5

[Escribir el título del documento] 

En la Técnica de Aislamiento de una sola Célula se utiliza poder obtener un solo microorganismos de una preparación en gota suspendida.

3. Supóngase que en un “cultivo puro” se aisló con una técnica aceptable. ¿Qué se tendrá que hacer para determinar que lo que se aisló es verdaderamente un cultivo puro? Después de una incubación apropiada, el desarrollo de cada cultivo se observa al microscopio o mediante cultivo para verificar que es puro. 4. ¿Por qué se han establecido organizaciones para mantener microorganismos en cultivo puro? Porque todas las colecciones de microorganismos son indispensables para los microbiólogos ya que ponen a su disposición gran variedad de especies y cepas para trabajo experimental o por enseñanza. 5. Mencione varias razones de por qué algunas compañías de productos biológicos industriales conservan grandes colecciones de cultivos. Algunas las conservan para el proceso de fermentación; otras para realizar actividades concernientes con el deterioro; y otras para tener registro de todas las especies existentes. 6. ¿Qué técnicas se usan para preservar microorganismos en cultivo puro?¿Cuáles son las ventajas de cada método?  Resiembra Periódica a Medios Físicos: Los cultivos de bacterias se pueden mantener en tubos de medio en los que han sido cultivados mediante pasos periódicos a medios frescos.  Preservación de Cultivos con una Capa de Aceite Mineral: Este método tiene la ventaja particular de que se puede tomar algo del desarrollo bacteriano que está debajo del aceite con asa de siembra, inocular medios frescos y aun preservar el cultivo original.  Preservación de Cultivos por Secado Rápido en Congelación (Liofilización): Las ventajas más significativas de este procedimiento son la gran longevidad, las menores oportunidades de cambio en las características del cultivo y lo pequeño de los frascos donde se almacenan los cultivos.  Almacenamiento a Temperaturas muy bajas: Con este procedimiento de congelación por nitrógeno líquido se mantienen muchos especímenes que no se conservan con la liofilización. 7. ¿Cuál será el aspecto del desarrollo en un tubo de caldo nutritivo que se sembró con microorganismos a) aerobios estrictos; b)anaerobios facultativos; c)anaerobios estrictos? 1. Cantidad de Desarrollo: Podría ser escaso, moderado o abundante.

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[Escribir el título del documento] 2. Distribución del desarrollo en el caldo: Podría ser Uniformemente Distribuido, confinado a la superficie del caldo como nata o pelusa, o desarrollo como sedimento, que es granulado o viscos. 3. Olor: Pútrido, a frutas o aromático, o imperceptible. 8. ¿Qué aspectos distintivos se deben observar para establecer las características coloniales de una especie?  Tamaño  Margen o Borde: Elevación  Cromogenésis o pigmentación  Características ópticas 9. ¿Cómo se puede adquirir un cultivo reconocidamente puro de Streptococcus lactis? Por medio del desarrollo de la siembra en agar inclinado, agar en caldo y en gelatina por picadura, así como el tipo de colonia en el agar. 10. ¿Todas las bacterias que producen pigmento pueden colorear el medio en el cual se desarrollan? Explique su respuesta y cite ejemplos específicos. No todas, pues hay quienes son bacterias que producen y retienen el pigmento intracelular, tiñéndose ellas y no el medio, por ejemplo el Staphylococcus Aureus; mientras que hay otras que excretan al medio el pigmento y lo colorean, como por ejemplo la P. aeruginosa. 11. Describa el diseño de un procedimiento de laboratorio para aislar bacterias capaces de digerir celulosa. Por medio de cultivos selectivos el agar celulosa se usa para aislar bacterias que digieren la celulosa. Los cultivo en agar inclinado se preparan haciendo la inoculación por estrías con un asa de siembras y más o menos de la mitad para arriba de la zona inclinada del agar. 12. Mencione varios géneros de bacterias que tengan una o más características de cultivo distintivas. Identifique las características.  Staphylococcus Aureus: Se pigmentan Amarillo dorado  P. fluorescnes: Pigmentan el medio de verde o café oliva.  Pseudomonas: Se desarrollan sobre la superficie del agar.  Bacillus anthracis: células en forma de rodillos

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