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• CristhianSmithColquiCortez

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Universidad Nacional Daniel Alcides Carrión Facultad de Ingeniería Escuela de formación profesional de Ingeniería Ambiental

I. INTRODUCCIÓN: Las técnicas de aislamiento, permiten la obtención de microorganismos a partir de muestras complejas (suelo, agua, alimentos, etc.) en las que hay una gran diversidad microbiana, así como para comprobar la pureza de los cultivos obtenidos. Para el estudio e identificación de microorganismos estos deben aislarse o separarse a partir de un cultivo mixto o de poblaciones que se encuentran en la naturaleza. Existen varias técnicas para el aislamiento de microorganismos y la obtención de cultivos puros. Para el estudio e identificación de microorganismos éstos deben aislarse o separarse a partir de un cultivo mixto o de poblaciones que se encuentran en la naturaleza. Existen varias técnicas para el aislamiento de microorganismos y la obtención de cultivos puros, dentro de las más utilizadas se encuentra: a. Siembra por estrías en caja de Petri o tubo de ensayo. b. Aislamiento de bacterias con una varilla angular de vidrio.

II. OBJETIVOS:   



Con esta práctica se pretende estudiar las diferentes técnicas de aislamiento de un microorganismo. Aprender la técnica fundamental empleada para la transferencia. Explicar el fundamento de diferentes medios de cultivo y condiciones de incubación para el aislamiento de microorganismos con características específicas. Aislar bacterias por siembra en estrías.

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III. MATERIALES: tubos de ensayo con agar macConkey.



.Asa de Kolle.

caja Petri con agar macConkey.

.

Asa

digralsky.

Mechero

. Muestra mixta de agua

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IV. MARCO TEORICO

TÉCNICA ASÉPTICA:   



Limpiar perfectamente la mesa de trabajo con alcohol. Lavarse las manos con jabón y después frotárselas con un algodón con alcohol. Colocarse las mascarillas y guantes quirúrgicos a fin de evitar contaminación al medio de cultivo. Colocar los tubos y demás material en una posición adecuada en la que se puedan alcanzar sin dificultad y si n peligro de quemarse.  Trabajar siempre junto al mechero, ya que este proporciona una zona de esterilidad de aproximadamente 20 cm. de radio.  Antes de realizar cualquier siembra, esterilizar el asa o aguja a fuego directo hasta el rojo vivo, enfriar cerca del mechero, sembrar y volver a esterilizar.  Durante la siembra, deben permanecer cerradas las puertas y ventanas y no se debe hablar.

Inoculacion de medios liquidos Inoculacion en medio inclinada Siembra por estrias en caja de petri Siembra en placa con asa digraslky

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V. PROCEDIMIENTO SIEMBRA DE MEDIO SOLIDO: 1.

Tomar una muestra de agua residual doméstica.

2.

3. Colocar la muestra en un tubo de ensayo

4. Tomar la caja Petri, reposarla sobre la palma de la mano, abrirá la tapa con el pulgar y el dedo medio.

5. Colocar el inoculo en el borde del agar y hacer una estría inicial sin despegar el asa, presionando, sin perforar el agar, hasta cubrir la cuarta parte de la caja.

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6. Bajar la tapa de la caja y esterilizar el asa.

7. Girar la caja Petri un cuarto de vuelta, levantar la tapa y con el asa hecha el agua residual doméstico.

8. Tapar la caja y repetir. Marcar con plumón .Incubar la caja de manera invertida.

METODO DISEMINADO (SOLIDOS): 1. Con la pipeta sacamos la muestra de agua residual doméstica.

2. Vaciamos 0.2ml a la caja Petri.

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3. Con el asa Digralsky dejamos que enfrié.

4. implantamos a la caja Petri gotas y esparcimos,

PROCESO FINAL Colocar las muestras inoculadas con el agua residual en la incubadora a una temperatura de 38ºC

VI.

CONCLUCIONES Microbiología-- Técnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formación Profesional de Ingeniería Ambiental

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrión Facultad de Ingeniería Escuela de formación profesional de Ingeniería Ambiental En la práctica pudimos observar formas de técnicas de aislamiento bacteriano, cada una con características específicas, siempre con las medidas de bioseguridad para el manejo de los medios de cultivo y la muestra que se tendrá contacto directo, para evitar la aparición de otros microorganismos en nuestros cultivos sembrados. Se colocó los cultivos preparados en la incubadora a una temperatura condicionada para su crecimiento, la temperatura fue de 38 °C.

VII. Bibliografía: http://www.plagasydesinfeccion.com/desinfeccion/generador-de-ozono-parahttp://es.wikipedia.org/wiki/esterilizacion http://datateca.unad.edu.co/contenidos/201504/contLinea/leccin_28_siembr a_de_microorganismos.html

VIII. CUESTIONARIO: 1. ¿A qué temperatura se encuban las muestras sembradas?

2. ¿Por q se flamea el instrumento de inoculación antes y después de cada inoculación?

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