1er Informe de Microbiologia

“Año del Diálogo y la Reconciliación Nacional” UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL ESCU

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“Año del Diálogo y la Reconciliación Nacional”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA DE HIGIENE Y SEGURIDAD INDUSTRIAL

NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO. MATERIAL DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL. LIMPIEZA, DESINFECCIÓN Y ESTERILIZACIÓN DE MATERIAL

PRIMER LABORATORIO DEL CURSO MICROBIOLOGIA AMBIENTAL- BO-112

ESPINOZA CALSINA FRANCO NERI

20171388H

S2

OBREGÓN OBREGÓN MIGUEL ÁNGEL

20171605I

S2

INGA ESPINOZA JESUS ANGELO

20172119K

S3

DOCENTE: MSc. Blgo. ALVARO MARTÍN MARTÍNEZ VILA

Lima, Perú 25 de Abril del 2018

INDICE

I. RESUMEN

3

II. INTRODUCCION

3

III. OBJETIVOS

4

IV. MARCO TEÓRICO

4

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

7

a) materiales

7

b) metodología

8

VI. CONCLUSIONES

9

VII. RECOMENDACIONES

10

VIII. FUENTES DE INFORMACIÓN

10

IX. ANEXOS

11

X. APENDICE

12

a) Diagrama de flujo

12

RESUMEN

El presente trabajo tiene como fin, conocer correctamente los materiales de laboratorio, el funcionamiento de cada uno de ellos y el mantenimiento de cada uno de ellos mediante procesos de desinfección y esterilización, así evitamos contraer enfermedades ya que trabajamos con microorganismos que pueden originar enfermedades que atenten con nuestra salud, los cuales ; por otra parte, conocer las normas de seguridad, para que de esta manera se puedan evitar accidentes dentro del laboratorio de microbiología, el cual pertenece a la facultad de ingeniería ambiental. Tener en cuenta estos puntos muy importantes, nos permitirá poder desarrollarnos mejor dentro del campo de trabajo y así obtendremos un mejor aprendizaje

INTRODUCCIÓN El trabajo debe realizarse de acuerdo con los estándares técnicos y de seguridad propios de un laboratorio de Microbiología. Es importante recordar que la finalidad es determinar los microorganismos presentes en la muestra por lo que es preciso extremar las precauciones para evitar contaminaciones que den lugar a resultados erróneos. Todas las muestras que existan en este laboratorio deben ser manejadas con precaución debido a su potencial patogenicidad. Debido al tipo de elementos que se manejan en este lugar, es necesario recordar que nunca se debe tirar nada contaminado por el fregadero o directamente al cubo de la basura sin haber realizado el proceso de esterilización correspondiente. Por ello, existen unas recomendaciones generales de limpieza y en caso de vertidos. Además, debe existir un procedimiento en lo que a control de calidad se refiere en el laboratorio de microbiología, el cual implica una monitorización de los distintos medios e instrumentos con el fin de que se realizan de forma correcta los diferentes aislamientos, identificación, así como caracterización de los patógenos y realización de pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos como referencia terapéutica.

OBJETIVOS -

Conocer las reglas y aspectos generales, para un adecuado funcionamiento dentro del laboratorio de microbiología.

-

Reconocer y aprender los procedimientos necesarios para la limpieza y desinfección de los materiales pertenecientes al laboratorio de microbiología.

MARCO TEÓRICO Reglamentos y normas del laboratorio de microbiología -

Entrar al laboratorio en forma ordenada, dejar las carteras, libros y otros objetos personales en el lugar que se les indique para tal fin.

-

Llevar puesta la bata de laboratorio en todo momento. La misma debe permanecer completamente cerrada.

-

Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al finalizar la sesión práctica.

-

Lavar las manos con agua y jabón antes de realizar las actividades programadas, antes de salir del laboratorio y siempre después de manejar materiales que se sabe o se sospecha que son contaminantes.

-

Trabajar cerca del mesón, adoptando una buena postura y estando físicamente cómodo.

-

Llevar un calzado apropiado, preferiblemente cerrado y de suela antideslizante en las áreas de laboratorio.

-

Evitar llevar en el laboratorio accesorios que podrían ser fuente de contaminación (por ejemplo, joyas).

-

Recoger el cabello largo

-

Evitar desplazamientos innecesarios, movimientos bruscos. Hablar sólo lo indispensable.

-

-

No comer, beber, fumar, almacenar comida, objetos personales o utensilios, aplicarse cosméticos ni ponerse o quitarse lentes de contacto en ningún área del laboratorio. Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de iniciar las actividades indicadas en la práctica. Si usted tiene alguna duda, diríjase al profesor.

-

Mantener el área de trabajo ordenada, libre de libros, cuadernos u objetos personales, exceptuando aquellos equipos y materiales necesarios para la realización del trabajo práctico.

-

Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero. Nunca debe dejar éste desatendido.

-

Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero, etc.), limpios y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada la actividad. Reporte cualquier daño de los mismos al profesor.

-

Colocar los materiales de vidrio contaminados en los recipientes dispuestos para tal fin, por ejemplo: las pipetas en los pipeteros, tubos y placas de Petri en las ollas de desecho, etc.

Desinfección de materiales

a) Esterilización: Proceso que destruye toda forma de vida microbiana. Un objeto estéril (en sentido microbiológico) está libre de microorganismos vivos. b) Desinfección: Es la destrucción, inactivación o remoción de aquellos microorganismos que pueden causar infección u ocasionar otros efectos indeseables; la desinfección no implica necesariamente esterilización. c) Desinfectante: Agente usualmente químico, que mata las formas en crecimiento de los microorganismos, pero no necesariamente las esporas. El término se refiere a sustancias utilizadas sobre objetos inanimados. d) Antiséptico: Sustancia que impide el crecimiento o la acción de los microorganismos, ya sea destruyéndolos o inhibiendo su crecimiento y actividad. Se aplica sobre superficies corporales. e) Sanitarizante: Agente que reduce la población microbiana a niveles seguros, según los requerimientos de salud pública. Se aplica en objetos inanimados de uso diario, por ejemplo, utensilios y equipos para manipular alimentos, vasos, platos y otros objetos de uso similar. f) Germicida: Agente que mata a los microorganismos, pero no necesariamente a sus esporas. g) Bactericida: Agente que mata a las bacterias.

h) Bacteriostático: Agente que inhibe el crecimiento de las bacterias, mientras permanece en contacto con ellas. i) Fungicida: Agente que mata los hongos. j) Fungistático: Agente que inhibe el crecimiento de los hongos, mientras permanece en contacto con ellos. k) Virucida: Agente que destruye los virus.

Factores que influyen en la destrucción de los microorganismos

a) Temperatura: Las temperaturas elevadas tienen efectos dañinos sobre los microorganismos y se debe tener en cuenta que cuando, además de la temperatura, también se utiliza un agente antimicrobiano, los incrementos en la temperatura aceleran la destrucción de los microorganismos. Por ejemplo, la muerte de una suspensión bacteriana por fenol es mucho más rápida a 42ºC que a 30ºC.

b) Tipo de microorganismos: Las especies de microorganismos difieren en su susceptibilidad a los agentes físicos y químicos. En las especies formadoras de esporas, las células vegetativas son mucho más susceptibles que las formas esporuladas.

c) Estado fisiológico de las células: El estado fisiológico de los microorganismos puede influenciar la susceptibilidad a un agente antimicrobiano. Las células jóvenes, metabólicamente activas, son más fácilmente destruidas que las células viejas cuando el agente actúa interfiriendo con el metabolismo.

d) Ambiente: Las propiedades físicas y químicas del medio o sustancia donde se encuentran los microorganismos, también tienen una profunda influencia sobre la eficacia de la destrucción microbiana, por ejemplo, el calor es mucho más eficaz en materiales ácidos que en materiales alcalinos. La consistencia del material influye notablemente en la penetración del agente. La presencia de material orgánico puede reducir significativamente la eficacia de un agente químico, ya sea inactivándolo o protegiendo de él a los microorganismos si están presentes.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

° Materiales de Laboratorio 1. Matraz de Erlenmeyer

° Materiales de limpieza 1. Iodo

2. Probeta. 3. Vaso de precipitados.

2. Fenol y compuestos fenólicos al 5%

4. Pipeta. 5. Tubos de ensayo. 6. Placas Petri. 7. Balanza digital. 8. Baño María. 9. Incubadora. 10. Laminas portaobjetos. 11. Cámara de neubauer 12. Autoclave. 13. Esterilizador. 14. Centrífuga. 15. Microscopio óptico. 16. Frigorífico o cámaras. 17. Refrigeradas. 18. Contador de colonias. 19. Asas de siembra. 20. PH-metros. 21. Cucharas y espátulas. 22. Mechero.

3. Alcoholes Isopropílico al 70%

° Metodología En este laboratorio se tiene como te centro a la esterilización y estos son sus siguientes métodos:

Esterilización por Medios Físicos

1. Vapor saturado a presión: Autoclave Es el método más efectivo y de menor costo para esterilizar la mayoría de los objetos de uso hospitalario. El autoclave tiene la ventaja de producir un elevamiento de la temperatura en forma rápida, con cortos tiempos de esterilización y no dejar residuos tóxicos en el material, el principio de la esterilización a vapor está dado por la relación del tiempo de exposición, temperatura y presión. 2. Calor seco: Pupinel Este sistema elimina microorganismos por coagulación de las proteínas de éstos. Su efectividad depende de la difusión del calor, la cantidad de calor disponible, y los niveles de pérdida de calor. La buena acción microbicida del calor seco depende de que los elementos a esterilizar estén limpios, en presencia de materia orgánica, por ejemplo: aceite o grasa, el microorganismo es protegido de la acción del calor. 3. La incineración Es la combustión completa de la materia orgánica hasta su conversión en cenizas, usada en el tratamiento de basuras: residuos sólidos urbanos, industriales peligrosos y hospitalarios, entre otros. Tanto la incineración como otros procesos de tratamiento de basuras a alta temperaturas son descritos como "tratamiento térmico". 4. Pasteurización Es un proceso térmico que es realizado en líquidos (generalmente alimentos) con la intención de reducir la presencia de agentes patógenos (como por ejemplo ciertas bacterias, protozoos, mohos, levaduras, etc.) que puedan contener, debido a las altas temperaturas muchos de los agentes bacterianos mueren 5. Tindalización Consiste en someter la sustancia a esterilizar a un proceso seriado de elevación y disminución de la temperatura, de tal modo que en cada una de esas etapas se eliminen paulatinamente las esporas presentes a medida que se transforman en gérmenes activos. Se requiere un mínimo de tres sesiones de elevación y disminución de la temperatura.

Esterilización por Medios Químicos

1. Aldehídos Se obtienen de la deshidratación de un alcohol primario con permanganato de potasio, la reacción tiene que ser débil, las cetonas también se obtienen de la deshidratación de un alcohol, pero estas se obtienen de un alcohol secundario e igualmente son deshidratados con permanganato de potasio y se obtienen con una reacción débil, si la reacción del alcohol es fuerte el resultado será un ácido carboxílico respectivamente 2. Fenol El fenol se usa principalmente en la producción de resinas fenólicas. También se usa en la manufactura de nylon y otras fibras sintéticas. 3. Alcoholes Forman una amplia clase de diversos compuestos: son muy comunes en la naturaleza y a menudo tienen funciones importantes en los organismos. Los alcoholes son compuestos que pueden llegar a jugar un papel importante en la síntesis orgánica, al tener una serie de propiedades químicas únicas.

CONCLUSIONES

-

Es importante y necesario conocer las funciones, características y la forma de uso de los materiales de laboratorio, para un mejor desarrollo de aprendizaje.

-

Los materiales que son usados en laboratorio anteriormente tienen que ser esterilizados, para que de esta manera no a contaminar de microorganismos las muestras que se piensan utilizar, de esta podremos hacer uso de los materiales de laboratorio en reiteradas ocasiones.

-

Antes de cada sesión de laboratorio es necesario venir con los equipos de seguridad (mandil, guantes, lentes de seguridad, etc.), para evitar algún accidente durante la práctica

RECOMENDACIONES

- Es conveniente y útil, venir preparados para cada práctica de laboratorio, conociendo anticipadamente el tema que se realizará en dicha práctica y por otro lado venir con nuestro equipo de protección para evitar cualquier inconveniente. - Aquellos embaces como botellas, frascos, etc., que contienen sustancias que son utilizadas para la práctica de laboratorio; después de su uso, deben cerrarse con sus tapas originales. - Antes del uso de algún producto desinfectante o antiséptico, se debe corroborar que dicho producto no este vencido, para evitar inconvenientes durante el desarrollo de la práctica - Las diluciones empleadas durante la práctica de laboratorio deben estar a la temperatura que le pertenece y haciendo caso a su modo de uso. - Después de hacer uso del desinfectante o del antiséptico, es incorrecto que dicha sustancia sea regresada al envase original, porque contaminaría lo que aún queda en el envase - Nunca debe haber una mezcla de productos desinfectante o antisépticos que tengan composiciones químicas distintas, las mezclas deben ser perteneciente a mismas composiciones. FUENTES DE INFORMACIÓN http://revistareduca.es/index.php/biologia/article/view/818/833 Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de Métodos Generales (2da edición). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela. J. A. García Rodríguez y otros. "Microbiología Clínica". Ed. Haurcourt Brace. Barcelona. 1999. Royer Stanier y otros. "Microbiología" Ed. Reverté. Barcelona. 1996.

ANEXOS Materiales de laboratorio

APÉNDICE

Proceso de limpieza de esterilización y desinfección

LIMPIEZA Y DESCONTAMINACIÓN

INSPECCIÓN Y ARMADO

ALMACENAMIENT O DISTRIBUCIÓN DOCUMENTACIÓN

ASEGURAR LA ESTERILIDAD

DEL ARTÍCULO

EMPAQUES

PROCESO DE ESTERILIZACIÓN

CARGA A LOS ESTERILIZADORES