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INFORME OBSERVACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS EN COLORACIÓN SIMPLE Y DE GRAM

PRESENTADO POR: KELLYS JOHANNA CARRASCAL GARCIA MARÍA ALEJANDRA MERCADO TOVAR LUIS ERNESTO SOLANO PATERNINA ANGÉLICA DAYANA LOPÉZ ARANGO DAYANA MARCELA FERIA MEJIA

DOCENTE: CLAUDIA LORENA VARGAS MONTERO

ASIGNATURA: MICROBIOLOGÍA

UNIVERSIDAD DE SUCRE FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA: TECNOLOGIA DE REGENCIA EN FARMACIA

III SEMESTRE SINCELEJO – 2018

INTRODUCCIÓN. La tinción es el proceso por el cual las moléculas de un colorante se adsorben a una superficie. El uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico. Dado que las bacterias son casi incoloras, no presentan contraste con el medio en el cual se encuentran suspendidas y no pueden observarse claramente sin algún tratamiento previo. De acuerdo a la reacción que ocurre, existen diferentes tipos de tinción: Tinción diferencial de Gram Esta tinción se denominada así por el bacteriólogo danés Christian Gram, quien la desarrolló en 1844. Sobre la base de su reacción a la tinción de Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos, Gram-positivas y Gram-negativas (en este caso, los términos positivo y negativo no tiene nada que ver con carga eléctrico, sino simplemente designan dos grupos morfológicos distintos de bacterias). Las bacterias Gram-positivas y Gram-negativas tiñen de forma distinta debido a las diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes celulares. La pared de la célula bacteriana sirve para dar su tamaño y forma al organismo, así como para prevenir la lisis osmótica. El material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el peptidoglicano. La pared de la célula Gram-positiva es gruesa y consiste en varias capas interconectadas de peptidoglicano, así como algo de ácido teicoico. Generalmente, 80% 90% de la pared de la célula Grampositiva es peptidoglicano. La pared de la célula Gram-negativa, por otro lado, contiene una capa mucho más delgada, únicamente de peptidoglicano y está rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolípidos, lipopolisacáridos, y lipoproteínas. Sólo 10% - 20% de la pared de la célula Gram-negativa es peptidoglicano.

RESULTADOS. Falta esto ANÁLISIS DE RESULTADOS. Tinción simple. Tinción de Gram.

FALTA ESTO SEGÚN MI INFORME DE BIOLOGIA SAQUE UN 3.3 JAJAJA

Aquí se pudo observar que la muestra se encuentra en racimos, pares y cadenas cortas con forma redonda (coco). Estas bacterias se observaron de color violeta ya que en el proceso de tinción donde se le agrego los diferentes colorantes como el cristal de violeta y fucsia, tomando este color característico que se le denomina gran positivo. Estas bacterias presentan este color ya que la envoltura de las bacterias gran positiva cubre la membrana citoplasmática y una pared celular compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano, que rodea a la anterior. En esta tinción es posible observar las bacterias en forma de bacilos (forma de barra o vara) y de color rosado, lo que indica que son bacterias de gran negativa. Esta coloración se debe a las características que posee las bacterias gran negativas en su pared celular con una capa delgada de peptidoglicano (mureina) unidad a una membrana externa formadas por proteínas, fosfolípidos y polisacáridos. Esta tinción de gran permite conocer la morfología celular, el tamaño, la forma y su clasificación taxonómica (gram positivo o gram negativo). CONCLUCIÓN. En esta práctica de laboratorio realizamos las diferentes tinciones que nos ayudan a evidenciar ciertas características o estructuras de los microorganismos, de acuerdo a la necesidad que se tenga es la tinción que deberá utilizarse, es de suma importancia conocer cada una de ellas, así como su correcta preparación ya que de esta manera se logrará el objetivo de la tinción que es observar la estructura o característica de las bacterias. Es sustancial tener cuidado en los puntos críticos que en el caso de las tinciones diferenciales es realizar una buena o mala decoloración nos dará el éxito o el fracaso en la preparación de la muestra que vamos a observar.

CUESTIONARIO. 2, ¿Cuál es el fundamento de la técnica de Gram? Los fundamentos de la técnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativas. La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglucano, además de dos clases de ácidos teicoicos: Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido lipoteicoico, y más en la superficie, el ácido teicoico que está anclado solamente en el peptidoglucano (también conocido como mureína)Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (de composición distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana exterior por lipoproteínas. La membrana exterior está hecha de proteína, fosfolípido y lipopolisacárido. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen diferencialmente debido a estas diferencias constitutivas de su pared. La clave es el peptidoglicano, ya que es el material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Grampositivas lo poseen en mucha mayor proporción que las Gram negativas. La diferencia que se observa en la resistencia a la de coloración, se debe a que la membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgánicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de peptidoglicano que posee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de cristal violeta/yodo que se formó previamente, y por lo tanto este complejo se escapa, perdiéndose la coloración azul-violácea. Pero, por el contrario, las Grampositivas, al poseer una pared celular más resistente y con mayor proporción de peptidoglicanos, no son susceptibles a la acción del solvente orgánico, si no que este actúa deshidratando los poros cerrándolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-violácea

2. ¿Qué tipo de microorganismo se pueden observar en la preparación en fresco? Las preparaciones en fresco se utilizan para observar microorganismos vivos. Por ejemplo, para la búsqueda de Trichomonas vaginalis en secreciones vaginales. Este protozoo de gran movilidad causa inflamación de la vagina y la uretra. Si en la preparación se observan células en forma de huso que se mueven mediante contracciones o sacudidas cruzando el campo, probablemente se tratará de T. vaginalis, pudiéndose efectuar el diagnóstico.

Sin embargo, el inconveniente de la observación en fresco es que no permite aumentar el contraste de la preparación. Por tanto, su uso, con un microscopio óptico de campo claro, está bastante limitado. Normalmente, para observar microorganismos vivos se utiliza alguno de los otros microscopios ópticos que hemos mencionado anteriormente.

3. Investigue ¿Qué coloración se debe utilizar para observar las endoporas o esporas bacterianas? Las endosporas poseen unas cubiertas exclusivas que las hacen resistentes a los factores ambientales adversos. Además, estas cubiertas hacen que las esporas aparezcan en el microscopio óptico como estructuras refringentes y de difícil tinción. La tinción específica de esporas requiere dos colorantes: 1.Verde malaquita: capaz de teñir las esporas en caliente. 2.Safranina: colorante de contraste que tiñe las formas vegetativas. Las endosporas, tras la primera tinción, no perderán el colorante en el lavado con agua, y sí lo harán las formas vegetativas, que quedarán teñidas con el segundo colorante.

BIBLIOGRAFÍA: 

Bernadette F. Rodak, (2005). Hematología: fundamentos y aplicaciones clínicas. Segunda Edición. Página 38, Editorial Medica Panamericana.

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htt/p://www.danival.org/notasmicro/tinción/ madre tinción.html



Elmer W. Koneman, Stephen Allen, (2008). Koneman, Diagnostico Microbiológico. Sexta Edición, Buenos Aires, Editorial Médica Panamericana.

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Roger Y. Stanier, Julio R. Villanueva, (1996). Microbiología, Estructuras superficiales de la célula procariótica, Editorial Reverte, Segunda Edición, Página 155.