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LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL

Practica 6: Mitosis. Laura Sofía Suarez Polania: Wendy Vanessa Rojas Cortes:

Código: 14 Código: 13

Mitosis Resumen El objetivo de la siguiente práctica es aprender técnicas para la observación de células vegetales en división y conocer las diferentes etapas de la mitosis en las células meristemáticas de la raíz Allium cepa. Se utilizaron tejidos vegetales acompañado con una gota de acetoorceína, el cual se empleó para teñir y ver las diferentes fases de los cromosomas en división celular. Además, este colorante reblandece la membrana, fijando y deteniendo el proceso de partición para así observar cada una de las fases necesarias para dar origen a dos células hijas. Palabras clave: división celular, fijación, células meristemáticas, tejidos.

Introducción “Todas las células provienen de células” Rudolf Virchow. Expresa la importancia crucial de la reproducción celular para todos los organismos vivos. Las células se reproducen por división celular, en la que una célula madre da lugar a dos células hijas. En la división celular común, cada célula hija recibe un juego completo de la información hereditaria, idéntica a la información hereditaria de la célula madre, y aproximadamente la mitad del citoplasma. La mitosis es la forma más común de la división celular en las células eucariotas. Una célula que ha adquirido determinados parámetros o condiciones de tamaño, volumen, almacenamiento de energía, factores medioambientales, puede replicar totalmente su dotación de ADN y dividirse en dos células hijas, normalmente iguales. Ambas células serán diploides o haploides, dependiendo de la célula madre. Cada mitosis está precedida por una interfase, donde se produce la duplicación del material genético, cuyas bases moleculares se encuentra en la replicación de las moléculas de ADN. Actúa como un mecanismo que asegura que cada célula hija reciba la misma información genética.

Se divide en cuatro fases: profase, metafase, anafase y telofase. Durante la profase se condensa el material genético (ADN) para formar estructuras altamente organizadas, los cromosomas. Se identifican porque los núcleos toman una apariencia granulosa. En la segunda fase (metafase) los pares de cromátidas se mueven hacia el centro de la célula, se disponen en una fila formando ángulos rectos con las fibras del huso mitótico. Seguidamente, durante la Anafase los cromosomas se dividen hacia cada uno de los polos de la célula y sus extremos están orientados hacia el centro de ella. Y finalmente, en la telofase los cromosomas toman la forma de hilos, alargados y se forma el núcleo de cada célula hija. En el presente informe entonces se pretende exponer, observar y diferenciar las fases y procesos de mitosis.

Materiales y equipo       

Porta y cubre objetos Raíces de cebolla Tubos de ensayo Pinzas de madera Cuchillas Acetoorceína Termómetro

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Discusión y resultados. 1. Técnica para obtener cebolla en división.

células

de

En la realización de esta práctica se efectuó el procedimiento de mitosis celular mediante la raíz de una cebolla. Para obtener la raíz de Allium cepa (cebolla) se tomaron bulbos de esta, se corta la raíz incluyendo parte del bulbo y se quita la epidermis más externa. Se sumergen en recipientes apropiados (Beaker de 50 ml) con agua de tal manera que ésta cubra una porción de la parte inferior del bulbo. Se ponen en la oscuridad durante 72h, tiempo en el cual las nuevas raíces alcanzan unos tres centímetros de longitud. Esto se debe a que durante este tiempo y a un promedio de temperatura de 22°C se obtiene un índice mitótico grande, ya que muchas de las células están en mitosis.

2. Preparación de las placas de células de cebolla. a. En este primer tubo de ensayo se añadió una raíz de Allium cepa, junto con ácido clorhídrico (HCl); después se calentó al baño maría en un Beaker de 1000 mililitros a una temperatura entre los 56°C y 58°C.

Figura 2. Calentamiento a baño maría de la solución de HCl 1M y las raíces de cebolla.

Figura 1. Manera de poner a crecer las raíces de bulbos de cebolla.

La función específica del ácido Clorhídrico es degradar la pared celular con el fin de poder observar las diferentes fases de mitosis en el microscopio. Los enlaces que unen las células de cebolla son muy débiles y al calentarlos con la solución de ácido clorhídrico se rompen fácilmente. b. Se tomó la raíz y se le realizó un corte transversal tomando el extremo más blanco como muestra, luego de esto se le añadió una gota de acetoorceína y se maceró el tejido. El tejido fue macerado con el fin de observar en el microscopio mayor número de células, haciendo más fácil su observación al obtener mayor área de exposición. 3. Observación en el microscopio.

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Como se había mencionado anteriormente, la mitosis es un proceso de división celular compuesta de distintas fases que ocurren consecutivamente hasta dar como resultado dos células hijas; el material genético que posee la célula madre es duplicado y posteriormente distribuido en partes iguales a las células resultantes. En esta práctica se pudo observar las diferentes fases en la mitosis, como son: Profase: Los cromosomas se hacen visibles como hilos muy delgados, la membrana nuclear no ha desaparecido y el núcleo toma una apariencia granulosa.

Anafase: Los cromosomas se encuentran migrando hacia los polos de la célula en igual número con sus extremos hacia el centro de ella.

Figura 5. Célula en Anafase.

Telofase: Se observa la aparición de una placa ecuatorial que divide la célula en dos partes aproximadamente iguales.

Figura 3. Célula en Profase.

Metafase: Los cromosomas se encuentran organizados de manera ecuatorial y la membrana celular ha desaparecido, estos se encuentran formados en diadas.

Figura 6. Célula en telofase.

Interfase: No se ven los cromosomas y los núcleos están bien definidos.

Figura 7. Célula en Interfase.

Figura 4. Célula en Metafase.

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Cuestionario: a) ¿Cuál es la acción de la solución fijadora sobre las estructuras celulares? La formación de una delgada malla que mantiene la estructura interna celular y la cohesión tisular. La solución fijadora lo que hace es evitar el deterioro de la estructura de la célula. b) ¿Qué acción sobre el mecanismo de la mitosis ejercen los agentes antimitóticos, como la 8-hidroxiquilonina? Consulte que otros agentes antimitóticos pueden utilizarse en este procedimiento para obtener un alto número de metafases. Los agentes antimitóticos (colchicina, colcemida, hidroxiquinoleina, etc.) Actúan como inhibidores del uso mitótico. De esta manera o forma se incrementan el número de metafases significativas. c) ¿Por qué se utiliza el meristema de la raíz y no de otra parte de ella? El meristema de la raíz es un tejido de crecimiento activo. Para crecer se deben generar nuevas células, es decir es un tejido en que en cualquier momento dado se va a encontrar procesos de mitosis. Por ende, no solo los alcances de encontrar células en mitosis son muy altas, sino que también es sencillo encontrar células en diferentes pases de mitosis. Por lo tanto, se maximiza el esfuerzo, ya que en un solo corte se puede ver un ciclo completo de mitosis.

duplicado, aunque se encuentra aún disperso en hebras (cromatina) en la G1 la célula acaba de terminar su división y el ADN aún no empieza su duplicación por lo tanto el tamaño es menor. e) ¿Cuál es la importancia biológica de la mitosis? Explique con varios ejemplos. La importancia de la mitosis es simple y vital, sin mitosis no hay división celular, por lo tanto, no permite que los seres vivos crezcan y se desarrollen. Es fundamental para la vida. Sin la mitosis no habría una perpetuación de la especie, no habría alimentos para las personas y no habría siquiera vegetación u oxígeno. Otro proceso biológico fundamental, es el desarrollo embrionario o embarazo, en el cual un grupo de células van sucesivamente dividiéndose y replicándose hasta conformar el embrión con células que seguirán evolucionando para formar por medio de la mitosis los diversos órganos o tejidos especializados. F) Haga un paralelo entre mitosis y meiosis.

d) A qué se debe que unas células en interfase tiene un núcleo mayor que otras que también están en interfase. Porque dentro de la interfase hay varios periodos o subfase G1, S y G2. Así, una célula en fase G2 tienen un núcleo de mayor tamaño que otra célula que se encuentra en fase GT o S la interfase es un periodo muy largo, en el que la célula aparecerá en reposo pero no es así, esta fase se divide en tres: G1, S y G2, en las cuales se realizan diferentes actividades celulares, tal vez esto se deba a que en la fase G2 el ADN ya está

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LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL e) ¿Cuál o cuáles de las siguientes células utilizaría usted para estudiar los cromosomas humanos? Explique 1. Glóbulos rojos 2. Glóbulos blancos 3. Neuronas 4. Epiteliales, como la piel y la mucosa intestinal Elegiría las células epiteliales porque están en continua división y las demás son células diferenciadas, de otras células que no se pueden dividir. Los cromosomas de las células de epitelio de la mucosa bucal, una muestra fácil que se pueden obtener y clasificar para diagnóstico genético

Conclusiones  Quedó totalmente claro el proceso que se lleva a cabo en la célula para cumplir su ciclo de división.  Gracias a ésta práctica fue posible conocer las diferentes fases de división celular que ocurren en las células meristemáticas.  Esta práctica nos ayudó a entender mejor el proceso de mitosis de manera experimental. Bibliografía: 1. Uribe F, Moreno J, Aldana D, Pineda N. Manual de Laboratorio de Biología General. Ed 1. Colombia: Reimpresos; 2003. 2. Atlas de histología vegetal y animal. Departamento de biología funcional y ciencias de la salud. Facultad de biología. Universidad de Virgo. España.[Internet].Disponible en: https://mmegias.webs.uvigo.es/6tecnicas/protocolos/s-fijador-FAA.php 3. Antimitótico cargado por Jaime F. Erira el Mar 21, 2012.[Internet].Disponible en: https://es.scribd.com/docAntimitotico/86154 791/ 4. Cesar. Mitosis en células meristemáticas primarias de raíz de cebolla [Internet][Consultado el 23 de septiembre , 2018] Disponible en: https://espaciodecesar.com/2010/03/07/mitos is-en-celulas-meristematicas-primarias-deraiz-de-cebolla/

Figuras:  Figura 1. Fuente: María V, (2013) Mitosis en las células de raíz de cebolla. [Figura] Recuperado de http://laboratorio2bach.blogspot.com/2013/0 3/mitosis-en-celulas-de-raiz-de-cebolla.html   Figura 2. Fuente: Seitenanfang Z, (2010) Drosophila-Mutanten. [Figura] Recuperado de: http://www.biologie.unihalle.de/entwicklungsgenetik/lehre/studenten /drosophila/mutanten/ 

Figura 3. Fuente: Prud'homme B, Institut de Biología du Développement de MarseilleLuminy. Parc Scientifique de Luminy. Marseille. [Figura] Recuperado de: http://www.ibdml.univmrs.fr/equipes/BP_NG/index.html

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Figura 4. Fuente: Guerrero M, Las moscas de la fruta, obtención, mantenimiento y cría. [Figura] Recuperado de: http://www.lamarabunta.org/videos/cria%20d e%20drosophila%20por%20miguel%20guerre ro(seca).pdf

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Figura 5. Fuente: Servicio agrícola y ganadero SAG, Drosophila, [Figura] Recuperado de: http://www.sag.gob.cl/ambitos-deaccion/drosophila-suzukii

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