Manual de Practicas de Laboratorio

MANUEL DE PRACTICAS DE LABORATORIO AFBL PROFESORA: QBP. VIRGINIA GOMEZ RUIZ Centro de Bachillerato Técnico Industrial Y

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MANUEL DE PRACTICAS DE LABORATORIO AFBL PROFESORA: QBP. VIRGINIA GOMEZ RUIZ Centro de Bachillerato Técnico Industrial Y de Servicios No. 134 2 “B” Laboratorista Clínico

Equipo 5

Introducción En este manual se darán a conocer las distintas prácticas que se llevaron a cabo en este semestre. El objetivo que persigue es conocer los distintos métodos por los cuales se llevaron a cabo, aplicando las diferentes normas, y aplicando la normatividad que se establece en cada una de ellas así como el procedimiento adecuado y el trato justo y digno al paciente. De igual forma nos ayudara al correcto manejo del material y la realización de distintas prácticas observando el resultado de cada una de ellas asi como errores que se pueden producir al realizarla. Durante el semestre todas estas prácticas fueron complementadas por información y datos externos obtenidos de libros y páginas de internet con el fin de proporcionar un amplio entendimiento del proceso de todas estas prácticas de laboratorios. Nuestro objetivos como alumnos fue el de haber aprovechado cada material y cada proceso practico para así adquirir la habilidad de poder realizarlo en la vida real o vida cotidiana principalmente en nuestro futuro y así dar a toda la sociedad una gran eficiencia como Laboratorista Clínico. Otro fin muy importante de este manual fue el de que alumnos en un futro puedan usar este manual con el fin de ampliar sus conclusiones o saber la secuencia de cada una de las practicas

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INDICE • Objetivos - General - Específicos •

Introducción General



Practica 1: Extracción Sanguínea con Vacutainer………….........3-14



Practica 2: grupos sanguíneos……………………………………15-23



Practica:3 separación y envasado de los RPBI…………….…..24-33



Practica 4: Clasificación y Manejo de reactivos…………………34-46



Practica 5: Preparar reactivos y almacenar……........................47-54



Practica 6: frotis sanguineo……………………………………..…55-64



Practica 7: Frotis de Exudado Faríngeo…………………………65-73



Practica 8: examen general de orina……………………...…......74-87



Practica 9: examen coproparasitoscopico……………………….88-94 3



Practica 10: cuantificación de emoglobina……………………95-100



Conclusión General

PRACTICA 1 “EXTRACCION SANGUINEA CON VACUTAINER”

OBJETIVO GENERAL

-Aplicar la técnica correcta en la toma de muestra con tubo vacio nos dará mayor confianza en el resultado y nos ayudara a realizar varios exámenes en una sola venopunción.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

-Conocer el material a utilizar en la toma de muestra con Vacutainer. -Aplicar la técnica correcta para la venopunción con el tubo vacio. -Tener habilidad para utilizar el material que se necesita. 4

INTRODUCCIÓN Los diferentes análisis de laboratorio nos dan información muy valiosa acerca de las personas enfermas ayudándonos en el diagnostico y en la administración. En la sangre venosa se pueden hacer distintos estudios analíticos, ya sea desde el punto de vista bioquímico, hematológico o microbiológico. La persona tiene en promedio unos 5 litros de sangre que se pueden separar en 3 litros de plasma y 2 de células. El sitio de punción varía dependiendo de la edad del paciente y accesibilidad de la vena. En niños mayores puede utilizarse de forma similar a la de un adulto, pero no así en niños pequeños.

El Vacutainer es un Sistema utilizado para la extracción de sangre intravenosa al vacio, específicamente a la región del brazo. La ventaja del Vacutainer es que la persona que toma la muestra no entra en contacto con la aguja, evitando así algún riesgo de contagio.

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Existen cuatro tipos diferentes de tubos al vacio para la extracción de sangre que se identifican con colores; tapón lila, azul, verde, naranja, rojo, amarillo.

El Tubo de EDTA o de tapa lila, está disponible para varios análisis de glóbulo. Es utilizado para determinaciones de Hematología. De capacidades 3 a 10 ml. Es el anticoagulante que mejor conserva las células y de mayor uso en todos los casos que se requieren exámenes HEMÁTICOS y de HEMOPARÁSITOS.

El Tubo de PT o de tapa azul, es llenado de la solución de Citrato de Tri-Sodio de buffered. Tiene las ventajas de la certeza alta a mezclar proporción de sangre y anticoagulante. Es utilizado para probar rutinario de coagulación. El Tubo de la heparina es utilizado extensamente en la colección de sangre y anticoagulación y para la bioquímica clínica, la bioquímica de la emergencia prueba y también para alguna hemorragia. Es rápido para la operación y puede ser utilizado en una gran variedad de la temperatura. No llevará a la fuera-separación secundaria de la proteína de fibra. Es también compatible con el parámetro del suero. Es utilizado para determinaciones de plasma en la química. El Tubo de la profesional-coagulación es aplicable en la colección de sangre para bioquímico y las pruebas de la inmunidad. El mérito es que es conveniente para una gran variedad de operaciones, rápido en la coagulación y libre de la separación secundaria de la proteína de fibra. Es utilizado para determinaciones de suero en la química, la serología e inmunología. Este tubo contiene un polyer de la barrera - gel que asiste al fondo, que forma una barrera que separa el suero de la fibrina y células durante la centrifugación. Puede prevenir el cambio de sustancia entre la célula y el suero. El suero puede ser aspirado directamente del tubo de colección, eliminando la necesidad para la transferencia a otro contenedor. Es utilizado para determinaciones de suero en la química. 6

Para la obtención de sangre el paciente debe de estar en una posición cómoda. Al seleccionar el sitio de de punción debemos tener presente que existe varias venas en el brazo que pueden utilizarse; sin embargo, la mediana cubital y la media cefálica son las que se usan con mayor frecuencia. El sitio de punción debe escogerse cuidadosamente evitando hematomas. Una muestra tomada del costado que se haya realizado una mastectomía recientemente. Las venas se distinguen al bajar el brazo y frotar el antebrazo suavemente en dirección hacia el hombro esto hará que las venas sean visibles. También se hacen más provenientes si se abre o cierra el puño.

Se debe evitar el ejercicio vigoroso ya que modifica el nivel de algunos componentes sanguíneos. Al aplicar el torniquete debe aflojarse por 2 min. Y solo dejar por espacio de 1 y retirar inmediatamente cuando la sangre comience a fluir. La toma de la sangre puede lograrse por medio del método convencional de agua y de jeringa seguida de la transferencia de sangre a un tubo o con sistema de tubo al vacio. Los tubos al vacio se fabrican para extraer volúmenes predeterminados de sangre en un sistema cerrado.

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MATERIAL Y REACTIVOS:

Material:  Bata Blanca.  Tubo para Vacutainer de 4ml con anticoagulante EDIA.  Holder.  Aguja de colecta múltiple.  Torniquete.  Torundas de Algodón.  Alcohol. Reactivos. 8

 Alcohol.  Anticoagulante ADTA  Sangre

Procedimiento

Se le da confianza al paciente para que este tranquilo.

A . M. V. Edad: 36 años sexo: F Extracción sanguínea

Colocar la aguja en el soporte para Vacutainer.

Se etiqueta el tubo EDTA con los datos del paciente.

9

Localizar la vena que se desea puncionar.

Se coloca el torniquete y se le indica al paciente que abra y cierre el puño.

Se desinfecta el área donde se va a tomar la muestra.

Se mete la aguja con el soporte en la vena.

Se introduce el tubo al soporte de Vacutainer y el tubo se llena solo.

Ya que se obtuvo la muestra, se saca el tubo. Luego se le retira el torniquete para poder sacar el soporte con la aguja.

El tubo se homogeniza invirtiéndolo varias veces y se coloca en una gradilla

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El soporte con la aguja se retira por debajo de un algodón. La aguja se tapa inmediatamente después de utilizarla para no picar a alguien que se encuentre cerca. En el lugar donde se extrajo sangre se coloca un parche redondo.

OBSERVACIONES

-se limpia la mesa de trabajo

-se emprime una torunda con alcohol

-se prepara el vacutainer

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-se pulsa la zona donde se encuentra la vena y se limpia con la torunda

-se coloca el torniquete

-se destapa la aguja y la colocamos a uso 45°

-se inserta la aguja en la vena, se le coloca el tubo EDTA en la base del vacutainer

-al quitar la guja se le coloca una torunda exprimida con alcohol

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Resultados Muestra de sangre, de cada uno de los integrantes del equipo, mediante el método del sistema vacutainer.

DISCUSION

En la práctica llegue a los resultados ya que seguí la técnica de extracción sanguínea correctamente manteniendo las medidas para evitar contaminación al paciente, una infección, siguiendo las normas que conozco y el procedimiento de extracción sanguínea llegue satisfactoria mente al final de la practica

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Conclusión

Para concluir este sistema es muy fácil de utilizar, y tomando las medidas necesarias puede llegar hacer muy seguro y exacto, ya que al paciente se le da la confianza porque no puede regresar aire, se pueden llenar varios tubos con tan solo irlos cambiando, porque el tubo al estar al vacio succiona la sangre y de esta manera es muy fácil utilizar el método de vacutainer.

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CUESTIONARIO

1.-¿QUÉ ES LA LANCETA? R= es un material para poder obtener una pequeña muestra de sangre. 2.- ¿PARA QUE SE UTILIZA EL PORTA OBJETO? R= para poder observar las muestras. 3.- ¿SE PUEDE REUTILIZAR UNA LANCETA? R= no porque puede llegar a tener bacterias que pueden ser contagiosas. 4.- ¿SE TIENE QUE LIMPIAR EL ÁREA DE TRABAJO? R= si, para no tener infecciones 5.- ¿CUANTOS REACTIVOS SE UTILIZARON? R= 3 6.- ¿cuáles son las que se utilizaron? R= reactivo Anti-A, Anti-B, y Anti-D 7.- ¿QUE TIPO DE SANGRE ES MAS COMUN? R= O+ 15

8.- ¿QUE TIPO DE SANGRE ES LA MENOS COMUN? R= A9.- ¿QUE ENFERMEDADES PUEDE CONTAJIARSE? R= sida, cáncer, etc. 10.- ¿se utilizo la norma 087 en esta práctica? R= si en los residuos y el cuidado de la limpieza.

PRACTICA 2 “Grupos sanguíneos” OBJETIVO GENERAL -conocer nuestro tipo de grupo sanguíneo por nosotros mismos

OBJETIVOS PARTICULARES -conocer el material de laboratorio -conocer los diferentes tipos de grupos sanguíneos -aprender a extraer una muestra sanguínea, con lanceta -determinar el tipo de grupo sanguíneo más destacado

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INTRODUCCION

Es un método para decirle cuál es el tipo específico de sangre que usted tiene. El tipo de sangre que usted tenga depende de si hay o no ciertas proteínas, llamadas antígenos, en sus glóbulos rojos. La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO se efectúa enfrentando los hematíes problema con antisueros de especificidad conocida: anti-A, anti-B y anti-AB (grupo 0). La presencia del antígeno D se determina enfrentando los hematíes problema, en un medio proteico alto, con suero anti-D (RHo). La aglutinación o no aglutinación de los hematíes ensayados, son indicativos de la presencia o ausencia del correspondiente antígeno en los mismos. La variante Du, forma débil del antígeno D, puede detectarse mejor incubando la suspensión de hematíes con suero anti-D, efectuando la prueba de la antiglobulina. un grupo sanguíneo es una clasificación de la sangre de acuerdo con las características presentes o no en la superficie de los glóbulos rojos 17

y en el suero de la sangre las dos clasificaciones mas importantes para describir grupos sanguíneos en los humanos son los antígenos y el factor RH. Cada individuo posee un conjunto diferente de antígenos eritrocitados y por su número existen de 27 sistemas antígenos conocidos. En esta práctica aprenderemos a identificar en los otros compañeros diversos tipos de grupos sanguíneos atreves de una muestra sanguínea obtenida con una lanceta. La mayor parte población cuenta o tiene, es el grupo sanguíneos más común. Mientras que el más escaso. Conocer tu grupo sanguíneo es de suma importancia para recibir donaciones ya que para realizar estos procedimientos se necesita que los dos o mas pacientes sean compatibles en los grupos sanguíneos. Los sistemas antigénicos considerados más importantes son el sistema ABO y el Sistema Rh. Estos son los sistemas comúnmente relacionados a las temidas reacciones de transfusiones hemolíticas. Reacciones contra antígenos eritrocitarios también pueden causar la dolencia Hemolítica del recién nacido, causada por el factor Rh+ del padre y del bebé y el Rh - de la madre] - (DHRN o Eritroblastosis Fetal), cuya causa generalmente (no siempre) se asocia a diferencias antigénicas relacionadas al Sistema Rh.

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MATERIAL Y REACTIVOS

Material:  Lanceta.  Aplicadores de Madera.  Gasas Esterilizadas.  Portaobjetos.  Guantes.  Masking.  Cubreobjetos.  Torundas con alcohol. 19

 Maquitel. Agua y cloro.



Reactivos:  Anti A+B  Anti – A  Anti –B  Anti – D

Procedimiento •

• Se selecciona el dedo que se va a punzar y se desinfecta con una torunda.







• Con la lanceta se pica con un movimiento rápido en la yema del dedo.







• La primera gota se limpia con





una gasa.



• Se colocan 4 muestras para 20

ponerle los 4 antígenos. •





• Colocar

los

antígenos

según

tengan la etiqueta.



• Se aglutina o mezcla la sangre con el antígeno con





ayuda del aplicador. • Cuando se esta •

en

movimiento se observa su aglutinación y ese es el tipo de sangre.

RESULTADOS Nombre: Jorge Chávez Domínguez Edad: 15 años Sexo: masculino Fecha: 14 de marzo del 2011 Tipificación sanguínea y factor RH: Grupo sanguíneo:”O” Factor RH: positivo

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OBSERVACIONES -se limpia el área de trabajo

-tener en orden todo el material y esterilizado

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-se pincha el dedo con la lanceta

-se clasifican los grupos sanguíneos

-tirar el material desechable o poner el material inservible en bolsa negra o roja

DISCUSIÓN

En esta práctica se llevo a cabo el reconocimiento de los diferentes grupos sanguíneos y sus distintas funciones, como también son las distintas características de cada uno de ellos. Y cuál es el problema que puede causar si esto se toma a la ligera. Sin pensar que pueda causar daño a futuro, pero con esto nos dimos cuenta de cómo se clasifican y sus características.

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CONCLUSIÓN Llevamos a cabo nuestros objetivos, mediante el procedimiento. Obtuvimos 3 muestras sanguíneas con ayuda de una lanceta, después diagnosticamos la muestra tipificación sanguínea y nuestro factor R+1. Desechamos los residuos con base a la norma nom-087-eco-ssa2002. Finalmente determinamos el grupo sanguíneo más destacado en el grupo.

Cuestionario 1-¿Qué es un grupo sanguíneo? R= es una clasificación de la sangre de acuerdo a las características en la superficie de glóbulos rojos y el suero de la sangre 2-¿Qué son los antígenos y el factor RH? R=son dos clasificaciones importantes para cubrir los grupos sanguíneos 3-¿Qué posee cada fluido? 24

R=un conjunto diferente de antígenos eritrocitos 4¿Cuántos sistemas antígenos existen? R=existen cerca de 27 sistemas antígenos conocidos 5-¿Cuál es el grupo sanguíneo más común en la población? R=el grupo sanguíneo O+ 6-¿Qué contienen los tubos de color lila o morado? R=EDTA o anticoagulante 7-¿es importante saber a qué tipo de grupo sanguíneo eres? R=si es fácil con tan solo unos análisis 8-¿puedes llegarlo a saber en tan solo una práctica escolar? R= si llevando el procedimiento adecuado 9-¿con que reactivos sabes a qué grupo sanguíneo perteneces? R=Anti-A, Anti-B y Anti-D 10-¿Cuánta sangre necesitas para llevar a cabo estos análisis? R=con tan solo una gota de sangre

PRACTICA 3 “SEPARACION Y ENVASADO DE RPBI” OBJETIVO GENERAL -Que el alumno aprenda cómo se clasifican los desechos que produce un lugar que da servicio médico a las personas y en un futuro tener una idea sobre esto

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OBJETIVOS PARTICULARES -aprender que son los RPBI -poner que el mismo alumno tire los materiales que se utilizan en la practica -tener información sobre esto en un futuro

INTRODUCCION Los efectos adversos que pueden llegar a derivarse del manejo de las sustancias químicas peligrosas comprenden, entre otros: - Contaminación y deterioro de la calidad de agua, aire, suelo y alimentos. - Intoxicaciones y enfermedades que ocurren tanto en humanos como en animales.

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- Accidentes que envolverán explosiones, incendios, fugas o derrames. El llenado de los recipientes que contengan sustancias químicas peligros en su estado líquido a presión atmosférica, debe hacerse máximo hasta el 90% de su capacidad, para la cual se debe contar con un dispositivo de lectura del nivel de llenado.

Los recipientes portátiles sujetos a presión que contengan sustancias químicas peligrosas, deben: - Contar con válvulas y manómetros. - Tener indicada la presión máxima del trabajo. Para el manejo de las sustancias químicas peligrosas se prohíbe el uso de herramientas, ropa, zapatos y objetos personales que puedan generales una chispa, flama o temperaturas que puedan provocar ignición. Con base en el conocimiento científico se realizaron las modificaciones a los criterios para la clasificación de los RPBI, asentados en la NOM-087-ECOL-SSA1-2002. Así, residuos que en el pasado fueron considerados peligrosos, ahora dejan de ser considerados como tales y pueden ser manejados como basura común. Esto trae consigo la disminución del gasto por el manejo de RPBI. Por lo anterior consideramos necesario y conveniente que el personal involucrado con el manejo de los RPBI, conozca estos cambios a fin de que realice el manejo adecuado de los mismos y proteja su salud.

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MATERIAL Y REACTIVOS Reactivos:  Giemsa.  Hidróxido de sodio.  Difco Phenol Red Manitol Agar.  Medio de cultivo Bioxon. 28

 Acido acético.  Buffer de fosfato.  Resina sintética.  Safranina.  Azul de Metileno.  Calcio Cloruro.  Fenol.  Etilendininitrilote.  Cloroformo.  Alcohol metálico.  Azul de cresil brillante.

Procedimiento

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• Colocar los reactivos en medio de la mesa. Para evitar se caigan. •

• Se separan los reactivos de acuerdo con su clasificación de peligrosidad. •

• Elaborar una tabla que contenga los datos del reactivo. •

• Ya que se utilizaron los reactivos, se guardan en su respectivo lugar de almacenamiento. •

• La mesa se desinfecta con agua y cloro por si se llego a derramar alguna sustancia.

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RESULTADO

Las lancetas ya que son objetivos punzo cortantes los colocamos en el recipiente rígidos polipropileno color rojo. Los portaobjetos los reutilizamos limpiándolos con cloro, algodones y gasas en la bolsa negra.

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OBSERVACIONES -Primero se exprime las torundas

-se desinfecta el área la cual se va a picar con la lanceta

-se pica una parte del dedo con lanceta

-se limpia las primeras gotas de sangre

-se coloca una gota de sangre en los porta objetos

-se le coloca una gota de cada reactivo que son anti-A, anti-B y anti-C

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-se reconoce con que reactivo reacciona la muestra de sangre

-se limpian y se lava los portaobjetos, se tiran en bolsas negras del material desechable y se limpian la masa de trabajo

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DISCUSION

En la práctica se llego a la finalidad de lo deseado o cumplimos con los objetivos que se deseaban cumplir, llevando a cabo la clasificación de RPBI. Cada uno de nosotros cumplimos utilizar una lanceta y colocar los reactivos correctamente para tener el tipo de sangre que es cada uno. Para cualquier registro y emergencia que pueda surgir.

Conclusión Como conclusión determinamos que los residuos peligrosos biológicos infecciosos. Mejor conocidos como RPBI son aquellos que se generan durante las actividades consistencia les a la salud de humanos o animales en los centros de enseñanza e investigación todo aquel material que se considere RPBI deberá estar de acuerdo a su tipo en una bolsa o recipiente de color especifico según la indique la norma para identificarlos fácil mente.

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Cuestionario 1-¿Qué es la lanceta? R=es un material para poder obtener una pequeña muestra de sangre 2-¿para que se utiliza el portaobjeto? R=para poder observar las muestras 3-¿se puede reutilizar una lanceta? R=no porque puede llegar a tener bacterias que pueden ser contagiosos 4-¿se tiene que limpiar el área de trabajo? R=si, para no tener infecciones 5-¿Cuántos reactivos se utilizan? R= tres 6-¿Cuáles son los que se utilizan? R=reactivos anti-A, anti-B y anti-D 7-¿Qué tipo de sangre es mas común? R=O+ 8-¿Qué tipo de sangre es la menos común? R= A9-¿Qué enfermedades pueden contagiarse? R=sida, cáncer, etc. 10-¿se utilizo la norma 087 en esta práctica? R=si en los residuos y el cuidado de la limpieza

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PRACTICA 4 “CLASIFICACION DE REACTIVOS”

OBJETIVO GENERAL: -Conocer y aprender a clasificar cada uno de los reactivos que se encuentran en el laboratorio.

OBJETIVOS ESPECIFICOS: • Conocer los diversos reactivos que se encuentran en un laboratorio. • Aprender a diferenciar los reactivos • Conocer el grado de peligro que tiene cada uno de los reactivos. •

Identificar la relación de esta práctica con la NOM-005-STPS-1998.

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INTRODUCCIÓN: Los efectos adversos que pueden llegar a derivarse del manejo de las sustancias químicas peligrosas comprenden, entre otros: -Contaminación y deterioro de la calidad de agua, aire, suelo y alimentos. -Intoxicaciones y enfermedades que ocurren tanto en humanos como en animales. -Accidentes que envolverán explosiones, incendios, fugas o derrames. El llenado de los recipientes que contengan sustancias químicas peligros en su estado líquido a presión atmosférica, debe hacerse máximo hasta el 90% de su capacidad, para la cual se debe contar con un dispositivo de lectura del nivel de llenado. Los recipientes portátiles sujetos a presión que contengan sustancias químicas peligrosas, deben: -Contar con válvulas y manómetros. -Tener indicada la presión máxima del trabajo. Para el manejo de las sustancias químicas peligrosas se prohíbe el uso de herramientas, ropa, zapatos y objetos personales que puedan generales una chispa, flama o temperaturas que puedan provocar ignición.

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MATERIAL Y REACTIVOS Material:  Bata  Guantes  Colores Reactivos:  Giemsa.  Hidróxido de sodio.  Difco Phenol Red Manitol Agar.  Medio de cultivo Bioxon.  Acido acético.  Buffer de fosfato.  Resina sintética.  Safranina.  Azul de Metileno.  Calcio Cloruro.  Fenol. 38

 Etilendininitrilote.  Cloroformo.  Alcohol metálico.  Azul de cresil brillante.

PROCEDIMIENTO: • Colocar los reactivos en medio de la mesa. Para evitar se caigan. •

• Se separan los reactivos de acuerdo con su clasificación de peligrosidad. •

• Elaborar una tabla que contenga los datos del reactivo. •

• Ya que se utilizaron los reactivos, se guardan en su respectivo lugar de almacenamiento. •

• La mesa se desinfecta con agua y cloro por si se llego a derramar alguna sustancia.

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RESULTADO:

CORROSI VAS

DAÑO

MEDIDAS DE SEGURID AD

FORMALD EIDO 37%

IRRITANTE PARA LA PIEL, ASI COMO PARA VIAS RESPIRATOIAS Y GASTROINTESTI NALES

CONSERV ESE ENTRE 15=30 C

HIDROXID O DE SODIO GRICEROL

ACIDO ACETICO

ACIDO SULFURIC O

PUEDE DETONAR CAMBIO QUIMICO VIOLENTO VIAS RESPIRATORIAS DAÑINO EN LOS OJOSY PIEL QUEMADURAS GRAVES

CAUSA GRAVES QUEMADURAS, PUEDE SE R MORTAL SI SE

PROTECCION

• • • •

PICTOGRAMA

BATA CUBREBOCA S GUANTES GAFAS DE SEGURIDAD



BOTAS, LENTES Y GUANTES

• • •

BATA LENTES GUANTES

NO SE EXPONGA AL CALOR

• • •

NO SE EXPONGA AL CALOR

• •

GUANTES BATA GAFAS DE DSEGURIDAD GUANTES BATA Y MANDIL

40

INGIERE

INFLAMABL ES

DAÑO

MEDIDAS DE SEGURID AD

XILOL

INFLAMAB LE NARCOTIC O CAUSA IRRITACIO N

GLICERINA

DAÑO A LA SALUD, SOLO INFLAMAB LE

WRIGHT

DAÑOS FATALES A CAUSAR CEGUERA

ETER ETILICO

ALTAMENT E INFLAMAB LE Y VOLTATIL

MANTENE R ALEJADO DEL CALOR, CHISPAS O FLAMAS MANTENE R ALEJADO DEL CALOR, CHISPAS O FLAMAS MANTENE R ALEJADO DEL CALOR, CHISPAS O FLAMAS ALMACEN AR EN ALGUN LUGAR FRESCO Y SECO ALEJADO DE CHISRAS,

PROTECCION

• • •

GUANTES BATA ANTEOJOS DE SEGURIDAD

• •

GUANTES BATA ANTEOJOS DE SEGURIDAD

• •

GUANTES BATA ANTEOJOS DE SEGURIDAD



ANTEOJOS DE SEGURIDAD GUANTES BATA EXTRACTOR

• • •

PICTOGRAMA

41

ACETONA

INFLAMAB LE, INGESTION

FLAMA, LUZ SOLAR, MATERIAL ES OXIDANTE SY ACIDOS FUERTES MANTENE R ALEJADO DEL CALOR, CHISPAS O FLAMA Y BIEN CERRADO

• • •

GUNTES BATA EXTRACTOR

VENENOS AS

DAÑO

MEDIDAS DE SEGURIDA D

ALCOHOL METILICO ABSOLUTO

CEGUERA O MUERTE

• •

BATA GUANTES

FORMALDE IDO 37%

IRRITACION

• •

BATA GUANTES

LIQUIDO DE HAYEN

CEGUERA O MUERTE

QUITAR ROPA CONTAMINA DA, LAVAR CON ABUNDANT E AGUA QUITAR ROPA CONTAMINA DA, LAVAR CON ABUNDANT E AGUA LAVAR CON ABUNDANT E AGUA

• •

BATA GUANTES

WRIGHT

MUERTE O CEGUERA

• •

BATA GUANTES

ACIDO CLORHIDRI CO ACIDO ACETICO

IRRITACION

LAVAR CON ABUNDANT E AGUA, QUITAR ROPA CONTAMINA DA LAVAR CON ABUNDANT E AGUA TOMAR ABUNDANT

• •

BATA GUANTES

• •

BATA GUANTES

IRRITACION

PROTECCION

PICTOGRAMA

42

AZUL DE METILENO

INTOXICACI ON, IRRITACION

FENOL CRISTALES

IRRITACION

XINOL

IRRITACION

E AGUA EN CESO DE INGERIRLO, DAR OXIGENO QIUTAR LA ROPA CONTAMINA DA QITAR LA ROPA CONTAMINA DA, LAVAR CON ABUNDANT E AGUA LAVAR agua

• •

BATA GUANTES

• •

BATA GUANTES



BATa

OBSERVACIONES:

DEFINICIONES Explosivos: Las sustancias y preparados sólidos, líquidos, pastosos o gelatinosos que, incluso en ausencia de oxígeno del aire, puedan reaccionar de forma exotérmica con rápida formación de gases y que, en determinadas condiciones de ensayo, detonan, deflagran rápidamente o, bajo el efecto del calor, en caso de confinamiento parcial, explotan.

IDENTIFICACIÓN E

Explosivo 43

Comburentes: Las sustancias y preparados que, en contacto con otras sustancias, en especial con sustancias inflamables, produzcan una reacción fuertemente exotérmica.

O

Comburentes Extremadamente inflamables: Las sustancias y preparados líquidos que tengan un punto de ignición extremadamente bajo y un punto de ebullición bajo, y las sustancias y preparados gaseosos que, a temperatura y presión normales, sean inflamables con el aire.

Fácilmente inflamable: Las sustancias y preparados: • Que puedan calentarse e inflamarse en el aire a temperatura ambiente sin aporte de energía. o • Los sólidos que puedan inflamarse fácilmente tras un breve contacto con una fuente de inflamación y que sigan quemándose o consumiéndose una vez retirada dicha fuente, o • Los líquidos cuyo punto de ignición sea muy bajo, o • Que, en contacto con agua o con aire húmedo, desprendan gases extremadamente inflamables en cantidades peligrosas

F+

Extremadamente inflamable F

Fácilmente inflamables

Inflamables: Las sustancias y preparados líquidos 44

cuyo punto de ignición sea bajo

Muy tóxicos: Las sustancias y preparados que, por inhalación, ingestión o penetración cutánea en muy pequeña cantidad puedan provocar efectos agudos o crónicos e incluso la muerte

Tóxicos: Las sustancias y preparados que, por inhalación' ingestión o penetración cutánea en pequeñas cantidades puedan provocar efectos agudos o crónicos e incluso la muerte

Nocivos: Las sustancias y preparados que, por inhalación, ingestión o penetración cutánea puedan provocar efectos agudos o crónicos e incluso la muerte

Inflamables T+

Muy tóxicos T

Tóxicos Xn

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Nocivos C

Corrosivos: Las sustancias y preparados que, en contacto con tejidos vivos puedan ejercer una acción destructiva de los mismos

Irritantes: Las sustancias y preparados no corrosivos que. en contacto breve, prolongado o repetido con la piel O las mucosas puedan provocar una reacción inflamatoria

Corrosivos Xi

Irritante Sensibilizantes: Las sustancias y preparados que, por inhalación o penetración cutánea, puedan ocasionar una reacción de hipersensibilidad, de forma que una exposición posterior a esa sustancia o

Por inhalación

Xn

R42

46

preparado dé lugar a efectos negativos característicos

Por contacto cutáneo

Xi

R43

DISCUSION: Opinamos que es muy importante y fundamental mantener la pureza de los reactivos y almacenarlos por separado en sus frascos correspondientes para evitar que se mezclen con otros reactivos y tener exactitud en cualquier análisis, así mismo es importante leer antes los riesgos , primeros auxilios, métodos de seguridad, frases R y S que aparecen en la etiqueta antes de utilizar el reactivo y en caso de que ocurra un accidente, seguir las indicaciones, de primeros auxilios contenidas en la etiqueta del frasco. También es importante la clasificación de estos para determinar los riesgos y lo que no debemos hacer para así evitar accidentes.

47

Cuestionario

1. ¿Qué es un reactivo? Un reactivo es, en química, toda sustancia que interactúa con otra en una reacción química que da lugar a otras sustancias de propiedades, características y conformación distinta, denominadas productos de reacción o simplemente productos. 2. ¿Cuáles son las variables por las que se pueden clasificar los reactivos? Propiedades físico-químicas, reactividad en reacciones químicas, características del uso del reactivo. 3. ¿Que son los Reactivos para análisis (PA)? Son aquellos cuyo contenido en impurezas no rebasa el número mínimo de sustancias determinables por el método que se utilice. 4. ¿Qué son los reactivos purísimos? Son reactivos con un mayor grado de pureza que los reactivos “para análisis”.

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5. ¿Qué son los reactivos especiales? Son reactivos con calidades específicas para algunas técnicas analíticas, como cromatografía líquida (HPLC), espectrofotometría (UV)… 6. ¿Qué es un pictograma? Un pictograma es un signo que representa esquemáticamente un símbolo, objeto real o figura. 7. ¿Qué son las sustancias químicas peligrosas? Son aquellos elementos químicos y sus compuestos, tal y como se presentan en su estado natural o como se producen por la industria que puedan dañar directa o indirectamente a personas, bienes y/ o medio ambiente. 8. ¿Qué son las sustancias corrosivas? Se denominan en general, sustancias corrosivas, a aquellas que son capaces de causar graves lesiones en los tejidos vivos (humanos) y de atacar a otras sustancias (metales, maderas,...). 9. ¿Que son las sustancias inflamables? Son aquellas capaces de formar una mezcla, con el aire, en concentraciones tales que las haga formar una flama espontáneamente.

10. ¿cuales son algunos ejemplos de sustancias irritantes? Ácido benzoico, el ácido sórbico, el benzoato sódico y el aldehído cinámico13-15

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PRACTICA 5 “PREPARACION DE REACTIVOS Y ALMACENAR”

OBJETIVO GENERAL  Familiarizarse con la preparación de soluciones de la concentración requerida

OBJETIVOS ESPECIFICOS  Obtener la preparación de solución llamada lugol  Obtener una preparación de la solución llamada hipoclorito de sodio  Obtener una solución llamada alcohol-acetona

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INTRODUCCION Un reactivo es, en química toda sustancia que interactúa con otra en una reacción química que da lugar a otras sustancias de propiedades, características y conformación distinta, denominadas productos de reacción o simplemente productos. Por tratarse de compuestos quimicos, los reactivos se pueden clasificar según muchas variables: propiedades físico-químicas, reactividad en reacciones químicas, características del uso del reactivo. Sin embargo, por tratarse del concepto de reactivo la clasificación más adecuada en este caso sería la de características de su uso, según la cual se clasifican en el uso al que están destinados los reactivos. Esta clasificación viene dada en el envase del reactivo y depende del tratamiento que se le haya dado, de su riqueza, de su pureza que determina el uso químico que se le va a poder dar, teniendo en cuenta la precisión, exactitud y error absoluto que se ha de tener en la operación química a realizar. Así los reactivos se pueden clasificar en: • • • •

PB: Destinado a bioquímica. PA: Destinados a aplicaciones analíticas. QP: Químicamente puro, destinado a uso general en laboratorio. DC: Destinados a las aplicaciones del análisis clínico. 51

Que produce reacción. Substancia que se emplea en química para reconocer la naturaleza de ciertos cuerpos por medio de la acción que produce sobre ellos (es casi lo mismo que sustancia reactante). En materia de evaluaciones académicas es una instrucción de parte del creador de la prueba, que tiene que ver con la aplicación y resultados, se evalúa su reacción o consecuencia en razón a la veracidad de su resultado y en algunos casos también a la metodología de su ejecución, y con ello se obtiene un porcentaje acumulativo y la calificación de la evaluación.

MATERIAL Y REACTIVOS

MATERIAL: -Probeta -Tubo de ensaye -Vaso de precipitado -Frasco gotero

REACTIVOS: -Cloro -Buffer -Wiemsa -Agua

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PROCEDIMIENTO LUGOL

1-La disolución de lugol consiste en 5 g. de I2 y de 10 g. de Ki con 85 ml. De agua destilada obteniéndose una disolución marrón con una concentración total de yodo de 150mg/ml 2-El Ki y el potasio hacen yodo dratomico soluble en agua debido a la formación de iones trigodines I3 NOTA: No debe confundirse con la titura del yodo, que consiste en yodo dratomico I2 y sales debidos con agua y alcohol etílico (etanol) La solución de lugol no contiene alcohol.

 ALCOHOL ACETONA El alcohol-acetona actúa en forma excedente que no haya fijado a las paredes celulares. Si es para tinción de Gram 70% de etanol absoluto y 30% acetona, para 100 ml. Solamente mezclas 30 ml de acetona y 70 ml de etanol absoluto.

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 HIPOCLORITO DE SODIO Conocido como cloró, blanqueador, agua de jabón. Cabe destacar que el hipoclorito de sodio es cloro común por lo tanto es mas conveniente que se compre.

RESULTADO

En esta práctica obtuvimos dos reactivos: hipoclorito de sodio y un colorante para tinción. El primero lo ocupamos para limpiar la mesa con un atomizador y el segundo para la tinción de frotis en el cual dejamos secar con el diluido y el concentrado

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DISCUSIÓN En la práctica llegue al resultado deseado, ya que por medio del procedimiento obtuvimos dos reactivos: El hipoclorito de sodio, el cual ocupamos para limpiar la mesa de trabajo. El lugol para agregar al frotis seco.

CONCLUSION Como conclusión determinamos que el manejo de reactivos es un tarea de alto riesgo; a pesar de ello y de sus graves consecuencias que evidenciamos en los accidentes, se necesita seguir trabajando para comprender los beneficios y entender este lenguaje.

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Cuestionario ¿Cuál es la finalidad de la práctica? R= aprender a clasificar los distintos reactivos utilizados en el laboratorio, de acuerdo a su contenido ¿Qué es la preparación de soluciones? R=es un proceso que requiere todos los cuidados básicos posibles, ya que en la preparación ese está expuesto a sus. Desconocidas. ¿Qué puede pasar si nos exponemos a esas sustancias? R=nos puede ocasionar daños tanto ecológicos, como personales. ¿Qué se debe tomar en cuenta para evitar esto? R=tener los cuidados básicos, y tomar en cuenta las normas de bioseguridad , y normas de laboratorio. ¿Cómo debe mantenerse el lugar donde se pesen las sustancias? R=debe estar firme, nivelado, y totalmente limpio ¿En dónde deben almacenarse algunas soluciones? R=para evitar procesos de oxidación por acción de la luz

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Menciona algunas precauciones: Evitar su exposición a la luz, mantenerlas a temperatura ambiente, tenerlas en un lugar firme, etc. ¿Cuáles son los materiales utilizados para la práctica? R= cubre bocas, guantes, y materiales de seguridad ¿Cuáles son los diferentes tipos de sustancias que se manejan? R=corrosivas, tóxicas, inflamables, cancerígenas, etc. ¿Cómo se llama la practica? R= Preparar reactivos y almacenar.

PRACTICA 6 “FROTIS SANGUÍNEO” OBJETIVO GENERAL  Aprender el procedimiento a llevar para el correcto Frotis sanguíneo tomando en cuenta las medidas de seguridad estándares que se presentan en dicha practica.

OBJETIVOS PARTICULARES  Aprender a utilizar y manipular la muestra y el material necesario para la realización de la práctica.

 Aprender a realizar una extensión sanguínea de manera adecuada. 57

 Conocer las diferentes células que se pueden encontrar en la muestra sanguínea.

INTRODUCCION Una extensión o frotis sanguíneo consiste en recubrir parcialmente un porta con una gota de sangre, de tal manera que las células de ésta se dispongan formando una sola capa de ellas. Esto puede hacerse manual o automáticamente. Lo último se realiza mediante un aparato (spinner) que centrifuga rápidamente el porta con la sangre depositada en su centro. Con este aparato se obtienen unos frotis que presentan una distribución celular muy homogénea. PARTES DE UNA EXTENSIÓN. CABEZA. Es la zona inicial de la extensión. Es la región más gruesa. En ella se encuentra una mayor proporción de linfocitos, y los hematíes forman aglomerados (pilas de monedas). CUERPO. Es la zona media del frotis. 58

Su espesor es el apropiado. En ella existe una adecuada proporción entre los distintos tipos de leucocitos. Contiene la "zona ideal" de observación, que corresponde a la porción que limita con la cola. COLA. Es la zona final de la extensión. Suele tener un aspecto redondeado. Es la región más fina. En ella se encuentra una mayor proporción de leucocitos grandes (granulocitos y monocitos), y además. los hematíes están deformados y presentan una tonalidad uniforme. En su porción terminal suelen ser más abundantes las plaquetas, sobre todo si son grandes. BORDES. Contienen una mayor proporción de leucocitos grandes. Si están deshilachados, en ellos las células son difíciles de reconocer por estar deformadas o destruidas La tinción de Giemsa es un método habitual para el examen de frotis sanguíneos, cortes histológicos y otro tipo de muestras biológicas. Este método tiene utilidad sobre todo para poner de manifiesto las ricketsias localizadas dentro de la célula huéspedes. La coloración de giemsa se emplea también para teñir frotis de sangre en el examen para protozoos. Estos organismos adquieren una coloración diferencial y se ven dentro del citoplasma de la célula huésped. La técnica de Giemsa está formada por varios colorantes: los tintes neutros utilizados combinan el azul de metileno como tinte básico y la eosina como tinte ácido, lo que da una amplia gama de colores. El azul de metileno es un colorante metacromático, de ahí que muchas estructuras se tiñan de púrpura y no de azul. El pH de la solución de coloración es crítico y se debe ajustar idealmente según diversos fijadores. La gama del pH debe estar entre 6.4 y 6.9.

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MATERIALES Y REACTIVOS Materiales:

 Portaobjetos.  Guantes.  Una jeringa o un tubo capilar.  Microscopio.

Reactivos:

 Wright.  Sol. Buffer.  Aceite de inmersión. 60

Muestra biológica:

 Sangre.

PROCEDIMIENTO 1.

El lugar donde se hará el Frotis deberá ser en un lugar plano.

2.

Colocar una gota de sangre en una orilla de un portaobjetos, este se le llama base.

3.

Colocar el portaobjetos extensor, en un ángulo de 45°.

4.

Dejar que se extienda la sangre.

5.

Con un movimiento rápido deslizar el portaobjetos extensor.

6.

Se deja secar la extensión.

7.

Etiquetar el portaobjetos base.

8.

Una vez seca la extensión se agregara una gota del reactivo Wright. Se dejara 5 minutos y se enjuaga. 61

9.

Posteriormente, agregarle 2 gotas de solución Buffer. Se dejara 8 minutos y después se enjuaga.

10.

Dejar secarse para agregarle el aceite de inmersión.

11.

Observar en el microscopio si hay alguna célula sanguínea.

RESULTADOS Al introducir mi frotis sanguíneo

al

microscopio, con

una

gota de aceite de inmersión y ajustar los tornillos micrométrico y macrométrico; se puede observar alguna células especificas que son llamadas células eusinofilos neutrofilo y monocito.

Frotis con

solución y

colorante.

62

Frotis con un solo colorante

OBSERVACION:

63

Errores que no se deben de cometer al hacer el barrido del frotis.

64

DISCUSIÓN En esta practica se llego al resultado deseado siguiendo un orden de acuerdo al procedimiento, para asi poder realizar satisfactoriamente el frotis saguineo, siguiendo cada una de las normas vistas hasta la fecha. Para asi tener un eficiente trabajo.

CONCLUSION El frotis sanguíneo o barrido sanguíneo es una manera muy simple para hacer el estudio de la sangre. el frotis es una técnica esencial para el análisis morfológico de las células hemáticas. tiene varias partes: cabeza: En ella se encuentra una mayor proporción de linfocitos, y los hematíes forman aglomerados cuerpo: En ella existe una adecuada proporción entre los distintos tipos de leucocitos. cola: En ella se encuentra una mayor proporción de leucocitos grandes (granulocitos y monocitos), y además. los hematíes están deformados y

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presentan una tonalidad uniforme. Bordes: Contienen una mayor proporción de leucocitos grandes.

CUESTIONARIO En que consiste el frotis sanguíneo? En recubrir parcialmente un portaobjetos con una gota de sangre, de tal manera que la celula se disponga formando una sola capa de ella. Cuales son las partes de una extencion? Cabeza, cuerpo y borde. Que es la cabeza? Es la zona inicial de la extencion. Que podemos encontrar en la cabeza? Una mayor cantidad de linfocitos A que se le llama cuerpo? A la zona media del frotis Que podemos encontrar en su porción terminal? Plaquetas Que contienen los bordes? Mayor proporción de leucocitos grandes Menciona 3 caracteristicas de una buena extencion -El borde de la cola tiene que estar finamente deshilachado

66

-Los bordes laterales de la extencion deben estar separados de3 los bordes del porta por un milímetro aproximadamente. -Toda la extencion a de ser fina y homogénea.

PRACTICA 7 FROTIS DE EXUDADO FARINGEO

OBJETIVO GENERAL Que el alumno obtenga el conocimiento y la habilidad de realizar un frotis de un exudado faríngeo, obteniendo la muestra necesaria, igualmente podrá analizarla en microscopio.

OBJETIVOS ESPECIFICOS *Conocer las propiedades de la tinción utilizada en la práctica para la observación microscópica

*Poder identificar correctamente las células observadas bajo el microscopio con tinción de Gram.

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*Que el alumno obtenga la capacidad de aplicar correctamente el método adecuado sobre la realización de un exudado faríngeo.

INTRODUCCION El Frotis faríngeo es un importante test para diagnosticar y tratar con una gran precisión las infecciones que causan los dolores de garganta, además puede prevenir la transmisión de estas enfermedades de un niño a otro, como por ejemplo en las guarderías. Generalmente el médico siempre pide la colaboración de los papás para realizar esta prueba, la ayuda consiste en coger en brazos al niño para que se sienta más seguro y a la vez también para sujetarle los brazos y la cabeza.

Hay una gran cantidad de virus y bacterias que nos acechan en todo momento y evitarlas resulta bastante difícil, pero gracias a las medidas de prevención y protección podemos estar cada día un poco más tranquilos con respecto al bienestar de nuestro pequeño. . La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente 68

(cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleídos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo. Otro grupo de colorantes son sustancias liposolubles; los colorantes de este grupo se combinan con los materiales lipídico de la célula, usándose a menudo para revelar la localización de las gotículas o depósitos de grasa. Un ejemplo de colorante liposoluble es el negro Sudán.

Algunos colorantes teñirán mejor sólo después de que la célula haya sido tratada con otra sustancia química, que no es un colorante por sí mismo. Esta sustancia se denomina mordiente; un mordiente habitual es el ácido tánico. El mordiente se combina con un constituyente celular y lo altera de tal modo que ahora sí podrá atacar el colorante. Si se desea simplemente incrementar el contraste de las células para la microscopía, son suficientes los procedimientos simples de tinción. El azul de metileno es un buen colorante simple que actúa sobre todas las células bacterianas rápidamente y que no produce un color tan intenso que oscurezca los detalles celulares. Es especialmente útil para detectar la presencia de bacterias en muestras naturales, puesto que la mayor parte del material no celular no se tiñe. Los métodos de tinción son de gran utilidad, pero deben usarse siempre con precaución, ya que pueden conducir a errores. Las moléculas de colorante forman en ocasiones precipitados o agregados que parecen estructuras celulares auténticas, pero que son formaciones completamente artificiales inducidas por el mismo colorante. Tales estructuras se denominan artefactos, y deben tomarse muchas precauciones para tener la seguridad de que no nos estamos equivocando al creer que un artefacto es una estructura realmente existente.

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MATERIAL Y REACTIVOS Material:

        

Portaobjetos. Masking. Hisopos estériles. Guantes. Gasas esterilizadas. Cubreboca. Abatelenguas. Microscopio. Mechero de Bunsen

Reactivos:

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    

Cristal Violeta. Yodo de Gram. Etanol o Alcohol Acetona. Safranina. Aceite de Inmersión.

Procedimiento 

Desinfectar el portaobjetos y etiquetar con el nombre del paciente.



Se extrae la secreción de las



amígdalas utilizando el Abatelenguas y los hisopos; la secreción se extrae con el hisopo y se coloca en el portaobjetos extendiéndola.

71





Con el mechero Bunsen se le pasa tres veces por el mechero tocando la otra mano con el portaobjetos del lado donde esta la muestra, para así fijarla.



Después se aplica la técnica de tinción de Gram.



Agregar una gota de cristal violeta. Esperar 1 minuto y luego enjuagar.



Agregar una gota de yodo de Gram. Esperar 1 minuto y luego enjuagar.



Agregar una gota de etanol o alcohol acetona. Dejar 1 minuto y luego enjuagar.



Agregar a la muestra una gota de safranina. Dejar 10 segundos y luego enjuagar.



Ya una vez seco, el portaobjetos se le agrega 1 gota de aceite de inmersión.

El portaobjetos se coloca en el microscopio para observar que tipo

de bact

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Resultado Nombre del paciente: Edad: estudio: Exudado faríngeo

Tipo de

Sexo:

Bacteria encontrada: Estafilococos: Bacterias causantes de que el paciente tenga dolor de garganta. ESTAFILOCOCOS

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Observacion



Desinfectar el portaobjetos y etiquetar con el nombre del paciente.



Se extrae la secreción de las amígdalas utilizando el Abatelenguas y los hisopos; la secreción se extrae con el hisopo y se coloca en el portaobjetos extendiéndola.



Con el mechero Bunsen se le pasa tres veces por el mechero tocando la otra mano con el portaobjetos del lado donde esta la muestra, para así fijarla.



Después se aplica la técnica de tinción de Gram. Agregar una gota de cristal violeta. Esperar 1 minuto y luego enjuagar.



Agregar una gota de yodo de Gram. Esperar 1 minuto y luego enjuagar.



Agregar una gota de etanol o alcohol acetona. Dejar 1 minuto y luego enjuagar.



Agregar a la muestra una gota de safranina. Dejar 10 segundos y luego enjuagar.



Ya una vez seco, el portaobjetos se le agrega 1 gota de aceite de inmersión.



El portaobjetos se coloca en el microscopio

para observar que tipo de bact

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Discusión: En esta práctica aprendimos como se realiza un exudado faríngeo y su tinción Siguiendo el procedimiento adecuado tanto para la toma de muestra Como para la realización de la tinción de Gram. Así como los diferentes tipos de bacterias que se pueden encontrar en el paciente Al realizar el exudado faríngeo además de saber que padecimientos que estas le Pueden provocar al paciente.

Conclusión: En esta práctica concluimos que los objetivos planteados anteriormente fueron cumplidos Satisfactoriamente ya que el alumno aprendió como realizar un exudado faríngeo

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Y la tinción de Gram con el respectivo procedimiento para poder observar la muestra En el microscopio y posteriormente identificar las bacterias observadas en la muestra Para saber que padecimientos pueden ocasionar estas bacterias en el paciente.

Cuestionario: 1.- ¿Qué es el exudado faríngeo? R= Es la toma de muestra que se realiza en el fondo de la garganta mediante el uso de un hisopo estéril. 2.- ¿Para qué sirve el exudado faríngeo? R= Sirve de herramienta de diagnóstico de padecimientos de origen bacteriano. 3.- ¿Cómo se consigue la muestra? R= Se introduce el hisopo y se dan vueltas sobre la muestra a fin de que todo este quede impregnado. 4.- ¿Qué se hace ya que la muestra se impregna en el hisopo? R= Se prosigue a sembrar en medios de cultivo. 5.- ¿A cuántos grados se incuba el cultivo? R= A 37° C y se observan los resultados en 48 hrs. 6.- ¿Qué se busca en el exudado faríngeo? R= Especies bacterianas asociadas a enfermedades relacionadas con el tracto respiratorio. 7.- ¿Principalmente que bacterias se buscan en el exudado faríngeo? R= Estrepto cocos beta hemolíticos, ya que son los de mayor importancia. 76

8.- ¿A que puede ayudar el exudado faríngeo? R= A determinar las causas del dolor de garganta y otros padecimientos. 9.- Con frecuencia, ¿A qué se debe el dolor de garganta? R= A un virus. 10.- ¿Qué nos permite determinar el cultivo? R= Si se debe a una bacteria estreptocócica para que los médicos puedan brindar el tratamiento correcto.

PRACTICA 8 EXAMEN GENERAL DE ORINA OBJETIVO GENERAL  Adquirir el conocimiento específico y la técnica necesaria para aplicar un examen general de orina. OBJETIVOS PARTICULARES Proporcionar una información útil de la salud por medio del estudio general de orina. Aprender a realizar el examen sin mayor problema y obtener así un buen resultado.

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Aplicar correctamente la técnica y el procedimiento para este examen. INTRODUCCION Los análisis de orina realizados en el laboratorio clínico, puede proporcionar una información amplia, variada y útil del riñón de un individuo y de las enfermedades sistémicas que pueden afectar este órgano excretor. Por medio de este análisis, es posible elucidar tanto desórdenes estructurales (anatómicos) como desórdenes funcionales (fisiológicos) del riñón y del tracto urinario inferior, sus causas, y su pronóstico. La realización cuidadosa del examen de orina, por parte del laboratorio, ayuda al diagnóstico diferencial de numerosas enfermedades del sistema urinario. Usualmente, los datos de laboratorio obtenidos por medio de este análisis, se logran sin dolor, daño o tensión para el paciente. Esta es la razón por la cual, la realización e interpretación correcta del análisis de orina, por parte del laboratorio permanecerá siempre como una herramienta esencial de la práctica clínica. En la actualidad, se practican tres tipos de exámenes de orina: análisis de orina por tira húmeda, empleado generalmente por los médicos en sus consultorios y por los pacientes en sus casas; tamizaje de análisis húmedo de la orina, comúnmente llamado análisis básico o rutinario de orina; y citodiagnóstico de la orina, que es una evaluación

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Citológica especializada del sedimento urinario que correlaciona con los análisis realizados por medio de la tira reactiva. El análisis de orina realizado con la tira húmeda es un ensayo de primera etapa para la detección y monitoreo de pacientes con anormalidades químicas. Los pacientes diabéticos a menudo monitorean permanentemente su propia enfermedad, buscando signos de glucosuria, proteinuria, e infecciones del tracto urinario, mediante pruebas realizadas en casa.

MATERIAL Y REACTIVOS Material:  Portaobjetos.  Cubreobjetos. 

2 tubos de ensaye de 13x100mm.



Pipeta Pasteur.



Bulbo.



Masking.



Cubreboca.



Gasas.

 Guantes.  Centrifuga.  Microscopio. 79

 Gradilla. Muestra biológica:  Orina. Reactivos:  Combur test.

PROCEDIMIENTO

1.- Etiquetar el frasco con el nombre del paciente. 2.- Llenar los tubos de ensaye tres cuartas partes con orina colocándola en las gradillas. 3.- Después introducir una tira reactiva a un tubo para leer el resultado.

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4.- Comparar el resultado de la tira con el bote de las tiras reactivas para conocer el resultado. 5.- Introducir los tubos a una centrifuga por cinco minutos a dos mil quinientas revoluciones por minuto. 6 .- Con la pipeta obtener lo que en el tubo. 7.- Colocar tres gotas en el portaobjetos 8.- Colocar los cubreobjetos de manera que no forme burbujas. 9.- Colocar los portaobjetos en el microscopio para observar los mismas.

RESULTADOS Paciente: Samuel Carlo Bautista Sexo: Masculino

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Edad: 16 años Fecha: 2 de Junio de 2011 EXAMEN FISICO Color: Amarillo oscuro Claridad-Oscuro No tiene solidos

EXAMEN QUIMICO Densidad 1.015

EXAMEN MICROSCOPICO En el examen microscópico se

Valor Ph 7 Leucocitos-

encontró como

resultado los cilindro Negativo Olor- Vitamina A Nitrito -Negativo Espuma- Si presenta Proteina Normal 1+ granuloso . Glucosa Normal No cuerpos ceticos Urobilingeo Normal Bilirubina-Normal HemonglobinaNegativo

Cilíndrico Granuloso Paciente: Samuel Carlo Bautista

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Paciente: Jorge Chávez Domínguez Sexo: Masculino Edad: 15 años

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Fecha: 2 de Junio de 2011 EXAMEN FISICO

EXAMEN

EXAMEN

QUIMICO Color: Amarillo Claro Densidad 1 Claridad- Claro Valor Ph 6 No tiene solidos Leucocitos-

MICROSCOPICO En el examen

Negativo Olor- Vitamina A Nitrito -Negativo Espuma- Si presenta Proteina Normal 1+ Glucosa Normal No cuerpos ceticos Urobilingeo Normal Bilirubina-Normal

encontró como

microscópico se

resultado los incoloras que presentan una forma muy importante ya que es soluble en acido clorhídrico.

HemonglobinaNegativo Oxalato de calcio Paciente: Jorge Chávez Domínguez

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OBSERVACIONES

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1.-

Etiquetar el frasco con el

nombre del paciente. 2.- Llenar los tubos de ensaye tres cuartas

partes

con

orina

colocándola en las gradillas. 3.- Después introducir una tira reactiva a un tubo para leer el resultado. 4.- Comparar el resultado de la tira con el bote de las tiras reactivas para conocer el resultado.

5.- Introducir los tubos a una centrifuga por cinco minutos a dos mil

quinientas

revoluciones

por

minuto.

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6 .- Con la pipeta obtener lo que quedo en el tubo. 7.-

Colocar

tres

gotas

en

el

portaobjetos 8.- Colocar los cubreobjetos de manera que no forme burbujas. 9.- Colocar los portaobjetos en el microscopio

para

observar

los

mismas.

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DISCUSIÓN En esta práctica la principal principio fue dar a conocer los resultados al paciente eficazmente, todo estos métodos realizados en la práctica se llevaron a cabo siguiendo las normas que nos dan a conocer para poder llegar a un buen resultado y eficiencia en los resultados.

CONCLUSION Para finalizar esta práctica se tuvo que volver a hacer el aseo del laboratorio basando en las normas del laboratorio, como conclusión se llegó a que el examen de general de orina es un examen que nos da a conocer muchos resultados como ph, densidad, glucosa , etc.

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CUESTIONARIO ¿Por qué hacer el análisis? Para detectar trastornos renales o metabólicos, y para la detección de infecciones del tracto rutinario. ¿Cuándo hacer el análisis? En el curso de un examen rutinario o cuando se padecen síntomas de infección del tracto urinario, como dolor abdominal, dolor lumbar, emisiones de orina frecuentes o dolorosas, o cuando aparece sangre en la orina; también formando parte de una revisión durante un embarazo, o de un ingreso hospitalario, o del estudio preoperatorio antes de una intervención quirúrgica. ¿Qué muestra se requiere? Unos 20 mL de orina son suficientes; de preferencia, la primera micción (emisión de orina) de la mañana. ¿Qué es lo que se analiza? Un urianálisis está constituido por un conjunto de pruebas que detectan y miden de manera semicuantitativa distintos componentes eliminados por la orina, incluyendo productos intermediarios del metabolismo así como también células, bacterias, y fragmentos celulares. La orina es producida por los riñones, localizados a ambos lados de la columna vertebral por debajo de la caja

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torácica. Los riñones filtran productos de desecho y productos metabólicos intermediarios eliminándolos de la sangre, a la vez que ayudan a regular la cantidad de agua del organismo; todo ello, conservando proteínas, electrolitos y otros compuestos que el organismo puede reutilizar. Todo lo que no es necesario se elimina por la orina, siendo trasnportada la orina desde los riñones hasta la vejiga urinaria, y excretándose al exterior a través de la uretra. La orina suele ser amarillenta y de color claro, pero cada vez que se orina, el color, la cantidad, la concentración y el contenido de la orina pueden variar ligeramente debido a la variedad de constituyentes que en ella se encuentran. Son muchos los trastornos de salud que pueden detectarse de manera precoz a través del hallazgo de anomalías en la orina. Entre estos hallazgos se incluyen la presencia de concentraciones elevadas de ciertos constituyentes que no se encuentran normalmente en orina en cantidades significativas como: glucosa, proteínas, bilirrubina, células sanguíneas (hematíes y leucocitos), cristales y bacterias. Es posible que estas sustancias se hallen en orina porque se encuentran a concentraciones elevadas en la sangre y el organismo intenta disminuir los niveles sanguíneos eliminándolos por la orina, o bien porque en la enfermedad renal la capacidad de filtración de los riñones sea menos efectiva, o porque existe una infección bacteriana. ¿Cómo se obtiene la muestra para el análisis? La muestra de orina para un urianálisis puede recogerse en cualquier momento 90

del día. La mejor muestra es la primera de la mañana porque es la más concentrada y es la que con más probabilidades detectará anomalías. Debido a la posibilidad de contaminar la orina con bacterias y células del tejido cutáneo circundante durante el proceso de recogida de la orina (particularmente en las mujeres), es importante limpiar previamente la zona genital. Las mujeres deberían asearse de adelante hacia atrás, abriendo los labios vaginales; los hombres deberían limpiarse la punta del pene. Al empezar a orinar, debe dejarse caer un poco de orina en el sanitario y entonces proceder a recoger la orina en el contenedor que se le haya suministrado, eliminando el resto de la orina directamente al sanitario. Este tipo de recogida de orina se conoce como recogida limpia de orina. ¿Cómo se utiliza? El urianálisis se utiliza como una herramienta de cribado y/o de diagnóstico puesto que ayuda a detectar en orina sustancias o material celular asociados a distintas enfermedades metabólicas y renales

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PRACTICA 10 “CUANTIFICACION DE HEMOGLOBINA”

OBJETIVO GANERAL  Aplicar los procedimientos adecuados para la realización de esta practica OBJETIVOS ESPECIFICOS  Saber que es hemoglobina  Aprender a utilizar el espectrofotómetro  Aprender a pipetear

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INTRODUCCION

La hemoglobina es oxidada por la acción del ferrocianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cionmetahemoglobina. La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es encargada del transporte de oxigeno por la sangre desde los pulmones hasta los tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias. Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatías, deshidratación o estancia en lugares de gran altitud. El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio. Cada laboratorio debe disponer con su propio control de calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias. Hombres 14-18 g/dL=8,7-11,2 mmol/L Mujeres

12-16 g/dL=7,5-9,9 mmol/L

Estos valores son orientativos.

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MATERIAL Y REACTIVOS MATERIAL: -Bata -Guantes -Pipeta de shali -Pipeta automática -Tubos de ensaye con EDTA -Sistema vacutainer o jeringa -Torniquete -Torundas -Alcohol -Cubetas

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REACTIVOS: Hemoglobin

ferrocianuro de potasio 0.60mmol/L

50x

cianuro de potasio 77mmlo/L di hidrogeno fosfato de potasio 2mmol/L

Hemoglobin CAL

Patrón de hemoglobina 15g/dL Origen animal

PROCEDIMIENTO 1-Condicines de ensayo: Longitud de onda…………..54nm Cubeta………………………1cm pasó de luz Temperatura………………...15-25º C

2-Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada 3-Pipetear A) METODO MACRO 95

RT (ml) Calibrar (ml) Muestra

BLANCO 5,0 ---------

PATRON 5,0 2,0 -----

MUESTRA 5,0 ----2,0

4- Mezclar e incubar 3 min. A temperatura ambiente 5- Leer la absorbencia (A) del calibrador y la muestra, frente al blanco de reactivo

RESULTADO Nombre: Jorge Chávez Domínguez Edad: 15 años

Sexo: Masculino

Fecha: 23 de mayo del 2011 Tipo de examen: cuantificación de hemoglobina

Pipeta de shali: 0.27 Pipeta automática: 0.29

A X15 (CONC. PATRON) g/dl

absorbencia de patrón: 0.24

P

Pipeta

0.27

De shali

0.24

x 15(conc. Del patrón) g/dl=16.875 g/dl de hemoglobina

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Pipeta

0.29

Automática

0.24

x15 (conc. Del patrón)g/dl=18.125g/dl de hemoglobina

DISCUSION

Con esta practica se llego a los resultados deseados, ya que aprendimos a utiliza el espectrofotómetro, las distintas pipetas (pipeta de shali y pipeta automática) y a leer la absorbencia (A) del calibrador y de la muestra.

CONCLUSION

Como conclusión determinamos que la hemoglobina es una proteína que le da el color rojo ala sangre además de que contiene hierro. Por medio de esta se puede determinar algunas enfermedades como la anemia, cáncer, embarazo, por mencionar algunas, cuando los niveles de hemoglobina son bajos. Si el nivel es alto puede ser cardiopatías, deshidratación, etc.

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Cuestionario ¿Cómo se llama la practica? R=cuantificación de hemoglobina ¿Cuál es su objetivo principal? R=que el alumno comprenda los métodos de análisis de una prueba de cuantificación de hemoglobina, ya que se conocerán diferentes resultados ¿Qué es la hemoglobina? R=es una proteína que contiene hierro, y otorga el color rojo a la sangre. ¿En donde se encuentra? R=en los glóbulos rojos ¿De qué se encarga? R=de transportar oxigeno por la sangre desde los pulmones hasta los tejidos ¿Cuándo se indica anemia? R=cuando los niveles de glóbulos están por debajo del 20% ¿Cómo se le llama al exceso de glóbulos rojos? R=Polisemia ¿Cuáles son los materiales usados en esta práctica? 98

R=pipeta de shalli, pipeta automática, tubo de látex con gomilla, tubo con anticoagulante, cubre bocas, guantes, etc. ¿Que equipo se utiliza? R=microscopio, refactofotómetro. ¿Cuándo se indica polisemia? R=cuando los niveles de glóbulos rojos son mayores del 40%.

Conclusión Para concluir en este manual de practica nos hemos dado cuenta las distintas formas de llevar a cabo las prácticas de laboratorio, con responsabilidad, ética y respeto. Nos fuimos guiando de las normas 087, 005, 003, 166, norma iso, el código de biótica y norma conocer. Con esto nos fuimos dando cuenta y formándonos como elaborar prácticas en un laboratorio. Gracias a eso nos hemos dado cuenta la importancia de tener todo en orden, estéril, con limpieza y cuidado. También ya sabemos clasificar los diferentes reactivos, asi como también saber identificar las sustancias peligrosas que pueden causar daños irreversibles.

99

100

GLOSARIO EXTRACION: Accion y efecto de extraer SANGRE: Liquido rojo, que contiene componentes sanguíneos como globulos rojos y blancos que corren por el torrente sanguíneo (venas) COPRO: Muestra biológica de efeces fecales MICCION: Accion y efecto de orinar SEDIMENTACION: Parte que después de someter a centrifugación queda en la parte baja del tubo ESPUTO: O gargajo, también conocidos vulgarmente como gallos, es la muestra biológica extraída de la boca atreves de una expulsión de los pulmones. TINCION: De verbo teñir, para realizar una tinción existen diferentes métodos. REACTIVO: escificas.

Sustancia reactiva, con características

101

VACUTAINER: sanguinea

Sistema

para

realizar

extracción

EDTA: Anticoagulante FROTIS: Accion de frotar CENTRIFUGAR: Procesar muestras para delimitar el sedimentado DECANTAR: Retirar el sobrante RPBI: Residuos peligrosos biológico infecciosos ANALISIS: Analizar, observar, comparar. BIOETICA: Proteger la vida y trabajar con etica COMPETENCIA: Mejorar, competir positivamente CALIDAD: Régimen de satisfacción. ACREDITACION: Certificación mediante un proceso

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