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LABORATORIO DE BIOLOGIA FUNDAMENTAL: MICROSCOPIA Y SU UTILIZACION EN EL ESTUDIO DE LA BIOLGIA

MARIA FERNANDA IBARRA CHICAIZA INGRID TATIANA ZUÑIGA MUÑOZ

LUZ ESTELLA HOYOS

UNIVERSIDAD DEL CAUCA FACULTAD DE INGENIERIA CIVIL PROGRAMA INGENIERIA AMBIENTAL POPAYÁN 2019

INTRODUCCION En la realización de esta práctica se hizo utilización del microscopio y el estereoscopio, con el fin de conocer detalladamente las partes que los conforman y las funciones que desarrollan cada uno de estos. Por otro lado, el microscopio se define como un objeto de importancia para las diferentes ciencias relacionadas con la biología, ya que es un elemento óptico y mecánico que permite ver lo que el ojo humano es incapaz de ver. Por otra parte, el estereoscopio se utiliza para observar objetos realmente grandes, este posee una profundidad en sus lentes mucho mayor que el microscopio. Estos dos sistemas guardan una gran diferencia en cuanto a su observación en las muestras, ya que el microscopio ofrece una visión bidimensional y el estereoscopio una visión tridimensional. Dichas diferencias son notorias en el momento de observar una muestra a estudiar. El microscopio ha venido evolucionando en la actualidad de la mano de la tecnología y la computación, con el fin de perfeccionar los resultados en el análisis de muestras, siendo hoy en día indispensables para la enseñanza de las ciencias. Esta práctica tiene como finalidad adquirir destreza en cuanto al manejo e identificación de las partes que componen estos sistemas, evidenciar las diferencias entre ambos microscopios, desarrollar habilidades en cuanto al montaje de las muestras y aprender a manejar un buen enfoque en los diferentes objetivos (4X, 10X, 40X, 100X) que presentan dichos microscopios. METODOLOGIA El procedimiento hecho en la práctica consistió principalmente en la observación de diferentes tipos de muestras en ambos microscopios. Para comenzar el procedimiento relacionando con la utilización del microscopio se contó con unas debidas precauciones y explicaciones con respecto al manejo de este, posteriormente se procedió a observar diferentes muestras, las cuales eran: La letra “e”, hilos de diferentes colores, papel milimetrado y por ultimo un cabello. Todas estas muestras fueron colocadas en un portaobjetos y sobre ellas fue colocado un cubreobjetos (en el caso de la letra “e” se le añadió una gota de agua y luego fue cubierta), cada una de estas muestras fue visualizada en diferentes objetivos para analizar cómo se alteran visualmente las muestras al pasar por los distintos enfoques. Respecto al estereoscopio se utilizaron especímenes como insectos y flores, ya que este microscopio al tener una profundidad de foco mucho mayor que la del microscopio compuesto permiten visualizar detalladamente y en tres dimensiones las características físicas propias de cada espécimen. Consecuentemente al utilizar el estereoscopio se permitió tener una mejor visualización de la anatomía tanto de los insectos, como de las flores.

RESULTADOS Al observar las respectivas muestras en el microscopio se observaron:

1. Muestra letra “e”.

2. Muestra de hilos.

3. Muestras de (imagen3).

papel

(imagen1)

(imagen2)

En la práctica se le agrego a la letra e una gota de agua para que se adhiera al portaobjetos con el fin de que esta no se moviera, inicialmente la letra e estaba centrada y al momento de observarla con el objeto 4X, esta letra se invierte esto es causado por el tipo de lente del microscopio. También observamos que la tinta de la letra no se veía totalmente negra. En el momento de observar que le sucedía a la letra si se desplazaba hacia la izquierda en el microscopio se miraba hacia al lado contrario y viceversa. Al mover la platina hacia arriba con ayuda del tornillo micrométrico se lograba un mejor enfoque. Al poner los hilos en el objetivo 4X estos también se invirtieron como inicialmente estaban, se lograron ver las 4 hebras de hilo que inicialmente estaban, gracias al microscopio se pudo observar las pequeñas estructuras que conforman el hilo, las cuales son difícil de ver para el ojo humano. Al enfocar con el tornillo micrométrico se tuvo una visión aún mejor que la que anteriormente estaba (imagen2). Al enfocar el microscopio en el objeto 10X se distinguen tan solo 2 hebras de hilo y al enfocar en 40X no se logra distinguir ninguna hebra de hilo. Con respecto a la resolución esta aumenta al aumentar el objetivo haciendo más claras las partes de estos hilos.

milimetrado. El propósito de observar en el papel milimetrado es que a la hora de hacer mediciones es muy útil para calcular el tamaño de cualquier organismo o estructura que se observe este es utilizado en el caso de que no esté presente el micrómetro. Un cuadro en el papel milimetrado cuenta como un milímetro

Al observar las respectivas muestras en el estereoscopio se observó que: Espécimen 1 (hormiga) (imagen 4)

Al observar a la hormiga en el estereoscopio se pudo identificar con mucha resolución cada una de sus partes anatómicas como su cabeza su cola sus patas que en total son 6, una gran característica de este insecto es que en todo su cuerpo estaba completamente lleno de vellos que sobresalía en cada parte de su anatomía física su cuerpo tenía un color negro en gran mayoría y sus patas eran de color café sus ojos tenían forma ovalada. Espécimen 2 (chinche) (imagen 6)

En la observación del chinche se pudo mirar que su cuerpo tiene forma de caparazón tipo escama el cual tiene una diversidad de colores presentando unos puntos rojos con negro y unas divisiones o líneas negras en los exteriores de su caparazón, además muchas manchas incluidas en el color natural de su cuerpo su cabeza es ovalada con dos ojos negros y se encuentran en las partes exteriores de la misma por último se observó que tiene unas antenas muy largas que variaban en color negro y rojo.

Espécimen 3 (saltamontes) (imagen7) En la observación del saltamontes se evidencio que su cuerpo está completamente compuesto de hojas y su color natural es verde tiene un dos ojos de color rojo su cabeza es de tamaño pequeña y en la parte de la boca está conformada por dos tipo pinzas largas, en cuanto a sus patas son totalmente largas y delgadas en forma de ramas cubiertas de diminutos vellos además sus alas son largas y grandes en forma de hojas.

Espécimen 4 (estambres de una flor). (imagen 8) En la observación de los estambres de la flor se logró identificar los estambres de la flor que se asemejaban a una ramificación de tubos delgados y finos de color rosado, en sus puntos cargaban unos tipos de bolsitas que estaban completamente llena de polen amarillo, al hacer un aumento en los tipos de enfoque fue muy clara la imagen ya que se identificaban de una manera muy precisa y detallada.

Espécimen 5(estambres de flor con polen) (imagen9)

En la observación de este espécimen se observó el polen de color Amarillo y como se encontraba sujeto a los diferentes estambres al llevar a una mejor vista, se identificó las texturas y formas que tienen cada uno de estos elementos en cuanto a su composición física por medio del estereoscopio.

Espécimen 6(Centro de una flor con granos de polen) (imagen10) La observación en este espécimen se le hizo a una flor amarilla en su centro y se podo notar como cristales de azúcar y esto resulta ser el polen, en la estructura interna de esta flor se observa muchos gorritos en forma de estrellas que se abren y cierran al estar en contacto con el polen, por último, se enfoca en un aumento mayor y la visualización claramente es mucho más detalla en su forma física e interna, al aumentar más la luz de la imagen se hace un poco más nítida.

DISCUSION DE RESULTADOS Al observar muestras por primera vez en el microscopio compuesto, se notó que las imágenes de estas se invirtieron (ver imagen1, imagen2, imagen3 e imagen 4), lo sucedido ocurre debido a que las lentes de este microscopio son lentes convexas. El lente convexo o convergente permite que la luz pasa por la lente, se desvía hacia dentro, es decir, converge formando una imagen del objeto en una pantalla que está situada al otro lado. La imagen del objeto estará enfocada siempre y cuando la distancia entre el objeto y el foco de la lente sea la adecuada. Cabe resaltar que una lente convergente forma una imagen real e invertida esto es gracias a los rayos de luz. [1] (imagen 11)

El aumento total obtenido mediante un microscopio compuesto es el resultado de combinar el aumento obtenido por el objetivo con el aumento obtenido por el ocular. Habitualmente, la mayor parte del aumento se produce en el objetivo. [2] Es por esto que cuando las muestras utilizadas en la práctica se pudo ver más detalladamente sus características y composiciones. El fin de observar el papel milimetrado fue conocer la medición del diámetro del campo visual del microscopio. El campo visual es el área circular que se observa al mirar a través del microscopio y varía según las lentes utilizadas. [2] El área del campo visual (A), se calcula con base en el área del círculo, en donde A= л r2, siendo r el radio, que es la mitad del diámetro del campo visual. (ver imagen12)

Hay que tener en cuenta que existe una relación entre el poder de aumento y la medición del diámetro del campo visual, el poder de aumento es la capacidad que posee un instrumento óptimo, para dar una imagen aumentada de un objeto y depende, entre otros factores, del tipo y calidad de las lentes utilizadas en tal instrumento. No obstante, tanto el poder de aumento del microscopio como del objeto. [2] Por tal motivo existe esta relación, entre mayor sea el poder de aumento, diámetro del campo visual será menor (tendrá menos mm). En cuanto el poder aumento sea menor y diámetro del campo visual será mayor (tendrá más mm). En cuanto a los especímenes observados en el estereoscopio, estos pudieron verse en una imagen tridimensional y no se invirtieron al verlos con el estereoscopio. Esto ocurre gracias a que este tipo de microscopio hace posible observar la muestra a través de dos lentes distintas. Esto permite que la imagen que llega a cada ojo sea ligeramente distinta. La combinación de estas dos imágenes mediante nuestros ojos produce el efecto tridimensional. [3] El estereoscopio es utilizado para mirar muestras y/o especímenes grandes. A diferencia del microscopio compuesto, el estereoscopio da una imagen aumentada que permite reconocer las partes del espécimen observado, mientras que el microscopio compuesto nos da una imagen microscopia para ver, por ejemplo, las células de algún ser vivo. Es necesario recalcar, que en el microscopio compuesto existen tanto tornillo macro métrico y tornillo micrométrico, el macro métrico permite subir la platina (objeto donde se encuentra muestra) y el micrométrico permite ajustar la platina micrométricamente, a simple vista no se ve si se mueve, pero al observar en el microscopio este tornillo nos permite mover milimétricamente y enfocar mucho mejor la muestra esto con el fin de observarla mucho mejor y ver mucho más sus características. Por otra parte, en el estereoscopio no hay ni platina ni tornillo micrométrico, esto se debe a que este como se ha dicho antes, este es solo para observar muestras y/o especímenes relativamente grandes y solo con el tornillo macro métrico de este se puede enfocar la muestra. También hay que decir que los estereoscopios son en general microscopios de luz reflejada. Es decir, un foco ilumina la muestra y la luz reflejada por la muestra es observada a través de los objetivos y oculares. De este modo se pueden observar muestras sin necesidad de laminarlas como por ejemplo los microscopios oculares, donde en estos la luz atraviesa la muestra antes de llegar al objetivo, ya que el diafragma (el encargado de controlar el diámetro de luz que llega a la laminilla) está debajo de la platina haciendo así que la luz primero atraviese la muestra. Este es el motivo por el cual generalmente los microscopios estereoscópicos tampoco tienen ni condensador ni diafragma. Al observar los diferentes tipos de flores en el estereoscopio, se notó que en los especímenes 4 y 5 había restos de polen, esto se debe a que los insectos que se paran en la flor traen consigo polen en sus patas o en otro caso las abejas esparcen este polen para que así la flor germine. CONCLUSIONES  Se concluye que el estereoscopio y el microscopio se enfocan totalmente diferente. Hay que conocer cada parte de cada uno de estos para tener un buen enfoque.  En esta práctica se logró y se aprendió la correcta utilización tanto del microscopio como del estereoscopio y también se aprendió sobre el cuidado de estos.

 El microscopio maneja una mejor resolución que el estereoscopio es por esto que se nos hace tan fácil ver cosas tan pequeñas como las células, espermatozoides etc.  En el uso del microscopio se deben preparar muestras que se quieran estudiar y observar y estas no pueden moverse si no se dañaría el enfoque, en el caso del estereoscopio la muestra se puede manipular de una manera directa  Al observar en el estereoscopio se notó como en este, la estructura del espécimen puede verse con claridad permitiendo ver su estructura anatomía y los colores que componen a este espécimen. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS. MICROSCOPIO: 1. ¿Identifique las partes del microscopio?

2. ¿Maneja adecuadamente el microscopio con pequeño y mediano aumento? Rta: para hacer una adecuada utilización del microscopio se debe tener en cuenta el manejo de los objetos que siempre se hace de menor objeto a mayor objeto para poder lograr un enfoque adecuado, se debe preparar la muestra con la que se va a trabajar colocándola en el porta objetos y posteriormente taparla con un cubre objeto, se debe enfocar la muestra mirando por medio de los oculares y se maneja el macro metro y micrómetro conjuntamente para lograr tener una imagen nítida del sitio donde se quiera observar , además se debe manejar la cantidad de luz que sea apropiada para tener un mejor resultado de lo observado por medio del condensador. Es importante siempre manejar de menor a mayor aumento y con mucho cuidado para lograr un mejor enfoque 3. ¿Cuáles son los cuidados que se debe tener con el microscopio óptico? Rta: se debe llevar el microscopio con ambas manos sostenerlo de la columna y con la otra mano en la base del microscopio. No tocar los lentes con las manos sucias o grasosas Evitar arrastrar en la mesa el microscopio debido a que se producen vibraciones en los lentes

Evitar poner el portaobjetos mojado Después de cada observación eliminar el aceite de inmersión No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macro metro, micrómetro, platina, condensador, revolver) El cambio de los objetivos se hace siempre girando el revólver, prevenir el roce del lente con la muestra Cuando se guarde el microscopio se debe cubrir con una funda, doblar el cordón eléctrico alrededor de la base del aparato. 4. ¿Qué procedimiento seguiría usted para el uso de objetivo de mayor aumento? Rta: El procedimiento seria bajar la platina, para hacer uso del objeto de 100x es necesario dejar la muestra despejada y colocar una gota de aceite de inmersión posteriormente girar el revólver de manera ascendiente 4x,10x,40x,100x continuamente se debe levantar la platina. 5. ¿Cómo se ajustaría la luz para obtener una buena imagen? Rta: primeramente, se debe encender el microscopio se debe observar la iluminación que haya y se debe ir ajustando hasta que el campo este totalmente iluminado el diafragma debe estar abierto y el condensador cerca a la platina. [4] 6. ¿Cómo se determina el grado de aumento con que se observa un objeto al microscopio? En el caso del microscopio óptico compuesto, el aumento de la muestra se produce en dos etapas, primero en las lentes del objetivo y a continuación en las lentes del ocular. De este modo, es necesario conocer el aumento de estas dos partes del microscopio para conocer el aumento total que se obtiene. El aumento total del microscopio se puede calcular fácilmente multiplicando el aumento del objetivo por el aumento del ocular: [5] Aumento microscopio = Aumento objetivo × Aumento ocular 7. ¿cuál es la diferencia entre aumento y resolución? Rta: La diferencia es que el aumento de un instrumento óptico permite conocer hasta cuantas veces más grande se puede observar un objeto dado, mientras que el poder de resolución hace referencia a la capacidad del instrumento óptico para diferenciar dos puntos entre sí. [6] 8. ¿cuáles son los datos que aparecen en un objetivo? Rta: Los datos que aparecen en un objetivo la magnificación lateral, el fabricante del objetivo, apertura numérica medio de inmersión, corrección de aberraciones, distancia focal, propiedades ópticas especiales, longitud del tubo, y espesor del cubre objetos. 9. ¿cómo se determina el límite de resolución? Rta: como la distancia mínima que debe existir entre dos puntos para que sean distinguidos por separado, comprenderemos fácilmente la relación inversa que se establece entre poder resolutivo

y límite de resolución: cuanto menor sea la distancia que debe separar a dos puntos para que se distingan por separado, mayor será el poder resolutivo necesario para observarlos Su fórmula es: LR= λC/NA λ = longitud de onda de la luz (en µm) C = constante de proporcionalidad NA=abertura numérica 10. Si una célula tiene diámetro de 1.2µ ¿cuál será su diámetro en Å? 1.2 µ=1200 mµ 12000 µ=120000 Å Rta: una célula con diámetro 1.2µ tendrá un diámetro de 120000 Å 11. Si el microrganismo A mide 120µ y el microrganismo B mide 1200Å ¿cuál de los dos tiene mayor tamaño? El microrganismo A mide 120 µ El microorganismo B mide 1200 Å 10 Å=1 mµ 1200 Å=X X=1200Å*1 mµ 10 Å entonces X= 120 mµ B 1µ=1000 mµ X=120 mµ X=120mµ*1µ/1000mµ X=0.12µ Entonces el microrganismo de mayor tamaño es el microrganismo A 12. En la siguiente lista se dan varias estructuras y sus respectivos tamaños promedio analice teniendo en cuenta los poderes de la resolución del ojo humano, del microscopio compuesto y del microscopio electrónico, ¿con cuál de ellos son visibles? ESTRUCTURA PROMEDIO

TAMAÑO

Membrana celular

50-120 Å

Una mitocondria

0.2-120

Un ovulo

0.15mm

El poder de resolución del ojo humano es de (100m) el del microscopio compuesto es de (0.2µ) Y el del microscopio electrónico es de (0.001µ)

 Membrana celular. Ojo humano: no visible debido a que el tamaño es de 0,005-0012µ y a la capacidad del ojo no alcanza Microscopio compuesto: no visible debido a la capacidad es0.2µ Microscopio electrónico: visible si cuenta con la capacidad  Mitocondria Ojo humano: no visible Microscopio compuesto: visible Microscopio electrónico: visible  Ovulo Ojo humano: visible tamaño promedio15000 µ Microscopio compuesto: visible Microscopio electrónico: visible 13. suponga que usted mira un objeto utilizando para ello un microscopio con ocular de 10x ¿cuantas veces más o menos se vería aumentado ese objeto si lo mira a través de un ocular de 10x y un objetivo de 40x? Rta: un objeto que se observe a través de un ocular de 10x y un objetivo de 40x se vería aumentado en 400 veces su tamaño normal mientras que se utiliza un ocular de 10x y un objetivo de 10 x este objeto se vería 100 veces más grande su tamaño. 14. Se tiene dos microorganismos A y B cuyas longitudes respectivas son 50 y 100µ ¿cuál de los dos se verá aumentado mayor número de veces al observar a través de un microscopio si se observa con un objeto de 40 x y el mismo ocular? Rta: Objetivo 10x* ocular 10x=100x

Microorganismo A

Microrganismo B

1mm=100µ

1mm=100µ

X=50 µ

X=100 µ

X=50 µ*1mm/1000µ=0.05mm

X=100 µ*1mm/1000µ=0.1mm

Ambos microorganismos se observarán aumentados igual número de veces debido a que se utilice un objetivo de igual características, pero el organismo B se verá más grande en el campo visual debido a su tamaño que el del microrganismo A. 15. el diámetro del campo visual de un microscopio es de 1500l´cuando se observa con un ocular de 10x y un objetivo de 10X ¿cuál será el diámetro del campo visual de ese microscopio si se observa con un objetivo de 40X y el mismo ocular Rta: El diámetro del campo visual del microscopio que tiene el objetivo de 40x y su ocular de 10x es de 37,5 y esto se debe a que se aumentado su tamaño en 4 veces. 16. un estudiante observe una célula al microscopio utilizando un objetivo de 10x y un ocular de 10 x y se dio cuenta de que su tamaño aproximado era de una cuarta parte del diámetro de ese campo visual, si tal diámetro mide 1600µ ¿cuánto mide la célula? Rta: Tamaño del campo visual=1600 µ1.6mm Tamaño de la célula =1.6mm/4=0.4mm la célula mide =0.4mm 17. defina la profundidad de foco y poder de resolución La profundidad de foco: La profundidad de foco se refiere al rango sobre el cual el plano de imagen se puede mover mientras que se mantiene una cantidad aceptable de nitidez sin necesidad de ajustar el enfoque. [7] El poder de resolución: Es la capacidad característica que posee un instrumento óptico para diferenciar do puntos que a simple vista parecen uno solo debido a la pequeña distancia que hay entre ellos.

ESTEREOSCOPIO PREGUNTAS 1. ¿El estereoscopio es un microscopio parafocal? Rta: el estereoscopio no es un microscopio parafocal, la diferencia entre un microscopio parafocal, uno tiene que ajustar la distancia entre la laminilla y el lente objetivo para que no choquen simplemente se mueve el revólver y pone el lente objetivo que se desee ya la imagen estará enfocada, al no ser parafocal tendría que ajustarse la distancia entre la laminilla y el lente objetivo girar el revólver y luego colocar el lente objetivo en posición y poder enfocar. [8] 2. ¿Qué diferencias entre el microscopio y el microscopio compuesto?

 En el microscopio compuesto hay más variedad de objetivos  Al utilizar el microscopio compuesto es más difícil situar las muestras  En el microscopio se observan las estructuras en dos dimensiones, mientras en el estereoscopio puede verse de forma tridimensional  La finalidad del estereoscopio es distinta ya que nos permite la manipulación de la muestra si no que nos permite evidenciar detalles que no son posibles evidenciar en un microscopio compuesto común  La diferencia principal que existe entre el microscopio y el estereoscopio radica en la configuración y la resolución de la imagen de la estructura  En el microscopio compuesto hay que tener cuidado al momento de utilizar los objetivos de mayor potencia 3. ¿cuál de los dos tiene mayor resolución? Rta: el microscopio compuesto tiene mayor resolución debido a su complejidad y a que ofrece mejores mecanismos y formas de enfoque. 4. ¿para qué sirve el estereoscopio? Rta: El estereoscopio es usado en la fotogrametría y también para la producción de estereogramas. El estereoscopio es útil en la inspección de imágenes dadas de juegos de datos grandes multidimensionales como son producidos por datos experimentales. Además, la combinación de pares estereoscópicos de fotografías aéreas y estereoscopio es indispensable en la cartografía geológica. Este método permite la visualización de estructuras como pliegues y fallas que de otro modo exigirían un complicado trabajo sobre el terreno. 5 ¿diferencias entre el microscopio y el estereoscopio? MICROSCOPIO ESTEREOSCOPIO  Microscopio  Posee una visión tridimensional  Posee una visión bidimensional  Tienen dos objetivos uno de 2x y otro  Puede ser monocular o binocular de 40x que es su aumento total  Es usado en laboratorios  Permite observar cosas muy grandes  Posee objetivos de 4x,10x,40x,100x  muestra el objeto desde el punto  Tiene una mejor iluminación que frontal del observador. permite una mejor apreciación  posee buen poder, pues fueron  Se utiliza para la observación de fácilmente evidenciables las objetos transparentes laminas finas segmentaciones en el tórax del insecto  Permite observar cosas muy pequeñas observado.  proporciona una visión invertida sobre el objeto que se va a analizar.  poseen un gran poder, permitiendo al observador identificar puntos muy próximos entre sí, por ejemplo, los fragmentos muy unidos de la tinta y las estrías de las diatomeas vistas.

TABLA: COMPARACION DE LOS CUATRO TIPOS DE MICROSCOPIO Tipo de Lente Magnificación

Resolución

Preparación de muestras

Usos

Estereoscopio Lente, objetivo común Va desde cerca de 5x hasta más de 60x resolución única de 1050 lp / mm permite visualizar estructuras inferiores a 476 nm Colocar la muestra en una caje de Petri, luego colocar esta sobre la platina Se utiliza para ver objetos relativamente grandes

Compuesto Lentes convexos

Tem Lentes magnéticos Su magnificación Baja de 50x va desde 1000a 1000x alta 1500 aumentado de200x a 1200000x Límite de 5nm resolución: 0.2 utilizando nm vidrio de aumento

Sem Lentes electromagnéticos Magnificación máxima 20000x

Preparar fijación

La muestra debe estar seca

Permite observar cosas que a simple vista el ojo humano no puede

fijación química, la muestra debe cortarse en una capa muy fina Sirve para observar imágenes plana de organelos

Límite de resolución de cerca de 2 nm

En este se observan imágenes tridimensionales de las superficies de las estructuras [9],[10],[11].

REFERENCIAS (1) https://fisica.laguia2000.com/general/tipos-de-lentes (2) http://files.ariel-biologia.webnode.es/2000001371163a125de/1%20Microscop%C3%ADa.pdf (3) https://www.mundomicroscopio.com/microscopio-estereoscopico/ (4) http://www.eumed.net/libros-gratis/ciencia/2013/22/microscopio-optico.html (5) https://www.mundomicroscopio.com/aumento-del-microscopio/ (6) https://ramirogutie.wordpress.com/2011/02/05/practica-de-biologia/ (7) http://www.tecnicaenlaboratorios.com/Nikon/Info_profundidad_de_foco.htm (8) https://www.coursehero.com/file/piucmj/Microscopio-estereoscopio-tiene-dos-lentesobjetivos-posee-una-profundidad-de/ (9) https://www.bio-optic.com/prod_crim_estereo_linea_m.html (10) http://www.upv.es/entidades/SME/info/753331normalc.html (11) Manual de laboratorio de Biología Fundamental