Informe Practico de Laboratorio

UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA Facultad de Medicina Alberto Hurtado Escuela Profesional de Tecnología Médica DOCE

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UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA Facultad de Medicina Alberto Hurtado Escuela Profesional de Tecnología Médica

DOCENTE Rosa Elizabeth Carrera Palao ALUMNO Kevin obando ballardo CARRERA TM. Laboratorio clínico Curso Laboratorio clínico y toxicología

2020

Peritos Dosaje de alcohol etílico

Objeto de la pericia Determinar el grado de ebriedad

Que solicitar La concentración de alcohol etílico

Requisitos Muestra de sangre DNI Solicitud de análisis

Dosaje de alcochol metilico

Determinar la concentración de alcohol metílico

La concentración de alcohol metílico

Muestra de sangre DNI Solicitud de análisis

Determinación de metales pesados

Determinación de metales pesado

Metales pesados

Muestra biológica, ambientales u otras DNI Solicitud de análisis

Análisis de drogas de abuso en cadáveres y personas vivas

Determinación de derivados de cocaína, de marihuana, de opio y de anfetaminas

Análisis de carboxihemoglobina en cadáveres y personas vivas

Determinación de Saturación de Muestra de sangre, orina carboxihemoglobina carboxihemoglobina y cabellos en cadáveres y personas vivas DNI Solicitud de análisis

Examen químico toxicológico en cadáveres y personas vivas

Determinación de: - Plaguicidas - Drogas de abuso

Cocaína - Marihuana - Opio - Anfetaminas

Tóxicos orgánicos

Muestra de sangre, orina y cabellos - DNI - Solicitud de análisis





Muestras biológicas convenientemente refrigeradas - DNI Solicitud de análisis

Dosaje de misoprostol y ácido misoprostólico

Determinación de: - Misoprostol - Ácido misoprostólico (posible aborto)

Determinación de misoprostol y ácido misoprostólico

Muestras de suero, orina, tabletas DNI Solicitud de análisis

Tipos de métodos para extracción de toxicos A) Determinación de toxicos por ccf La cromatografía se define como la separació n de una mezcla de dos o má s compuestos por distribució n entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y la otra una fase mó vil. Varios tipos de cromatografía son posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: só lidoJiquido (capa fina, papel o columna), liquidoJiquido y gases-liquido ( fase vapor ). Todas las té cnicas cromatográ ficas dependen de la distribució n de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase mó vil, llamada tambié n activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa en relació n con la otra, denominada fase estacionaria. La fase mó vil puede ser un líquido o un gas y la estacionaria puede ser un só lido o un líquido. En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeñ o espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascenderá , por tap¡taridao, por la placa y arrastrará los componentes a lo largo de é sta produciendo "manchas" de los comPonentes. Concepto de Rf Rf es el registro, es una relació n de distancias, y se define como: p1 = (a) distancia que recorre la muestra desde el punto de aplicació n /(b) distancia que recorre el disolvente hasta el frente del eluyente.

En la cromatografía en capa fina (ccf), el grado de elució n de las sustanc¡as depende tanto de su profia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporte rígido, quá pueoen ser placas de vidrio, aluminio o polié ster. Los tamañ os de la placa para ccf convencional son: 20 x 20; 10 x20 y 5x2 cm.

A.1 PREPARACIÓ N DE CROMATOPLACAS Y CAPILARES Se pueden util¡zar cromatofolios ya preparados (comerciales), o bien, preparar las cromatoplacas en el laboratorio. Para preparar las cromatoplacas, se introducen dos portaobjetos juntos, limpios y secos, en una suspensió n de gel de sílice al 35% en acetato de etilo, se dejan secar al aire y se separan con cuidado. Se preparan 6 cromatoplacas y se ordenan sobre una hoja de papel. Para aplicar las soluciones a las cromatoplacas ulilice capilares, que previamente deber ser estirados en la flama del mechero (flama pequeñ a), con el fin de que tengan el diá metro adecuado Para mayor claridad de los resultados, incluya en su informe los dibujos de las cromatoplacas a tamañ o natural de todos los experimentos de esta sesió n. B) Extracción liquido-liquido Es la separación de un componente de una mezcla por medio de un disolvente, este procedmineto es muy utilizado para separar compuestos disueltos o suspendidos en fases acuosas se aplica en control de dopaje para aislar los compuestos de interé s o analitos de la muestra urinaria. Existe dos fases en este procedimiento de extracción: • •

Fase acuosa: agua o alguna disolució n acuosa Fase líquida: disolvente orgá nico inmiscible o parcialmente miscible con el agua

B.1 Procedimiento B.1.1 Preparación del material La extracción se realiza en un embudo de decantación que debe estar con un tapon y una llave que logren ajustar y girar sin causar perdidas. Colocar el embudo de decantación sobre un aro metalico unido a un soporte Para facilitar la adición se utiliza un embudo cónico y siempre es conveniente colocar un vaso de precipitados grande debajo el embudo, por si éste se rompiera o la llave perdiese. A medida que las fases se van extrayendo del embudo, se recogen en erlenmeyers.

B.1.2 Adicion de las fases Utilizando un embudo cónico, verter al embudo de decantación la disolución que se va a extraer y seguidamente el disolvente extractor. No llenar el embudo más de tres cuartas partes de su volumen ni introducir disoluciones calientes.

B.1.3 Agitación de la mezcla Se agita bien, cerrando convenientemente con el tapó n. Se lo sujeta con una mano, agitando con fuerza e invirtiendo el embudo. Con la otra mano se sujeta la llave, que se abrirá de vez en cuando para favorecer la expulsió n de gases. Tras repetidas agitaciones se coloca el embudo sobre el aro en su posició n normal y se deja que se separen las capas. Para separar las capas se quita el tapó n y al abrir la llave, fluirá la capa má s densa, cerrá ndose al llegar a la interfase.

B.1.4 Secado de la fase organica Si esto sucede, en lugar de añadir el desecante, se debe introducir de nuevo la mezcla en el embudo y separar el agua existente. Sólo debe añadirse el desecante si no se observan gotas de disolución acuosa en la fase orgánica. Se añade a la fase orgánica una cantidad de desecante proporcional a la cantidad de disolvente, suficiente para cubrir el fondo del erlenmeyer.

B.1.5 Filtración y eliminación del disolvente El agente desecante hidratado se filtra por gravedad sobre un matraz utilizando un embudo cónico y un filtro de pliegues o una placa filtrante

C) Extracción de fase solida Definición es una técnica preparativa que el analista utiliza para "limpiar" la muestra previa la cuantificación y/o para futura concentración del analito que está presente en la muestra. El término «extracción en fase sólida» es debido a que el material de soporte utilizado es un sólido, a través del cual pasa un líquido o un gas. La cual tiene varias etapas 1) Etapa de acondicionamiento La activación del adsorbente y de los grupos funcionales se consigue al pasar un volumen de solvente o mezcla de solventes apropiado a través de la columna. Para activar adsorbentes hidrofóbicos se usa generalmente metanol o acetonitrilo,mientras que para los hidrofílicos se usa hexano o cloruro de metileno.

2) Etapa de carga muestra Aplicar la muestra en la parte superior del lecho de adsorbente.Para obtener la máxima eficacia se debe controlar el caudal de la muestra. La capacidad de intercambio y la selectividad no se ven afectadas.

3) Etapa de lavado En esta fase permite la eliminación de cualquier componente que interfiera o pueda interferir nateniendo los analitos

4) Etapa de secado Las trazas de solvente se eliminan haciendo circular aire a través de la columna durante 2 a 10 minutos. Esta etapa mejora el rendimiento de extracción.

5) Etapa de elución Se pasa un solvente adecuado por la columna para eliminar la interacción analito-solvente y eluir el 100% de los compuestos de interés. El solvente adecuado ha de tener la máxima interacción con el analito y una interacción mínima con las demás impurezas, dejándolas en el lecho de adsorbente. El volumen de elución ha de ser el menor posible para mantener alto el factor de concentración.

6) Etapa de concentración Los compuestos de interés se concentran evaporando una parte del solvente. Es necesario secar el eluato con sulfato de sodio para eliminar posibles trazas de agua. La muestra concentrada ya está lista para el análisis.

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