• Author / Uploaded
• Miyey Gutierrez Orduz

Citation preview

RECONOCIMIENTO CUALITATIVO Y ALGUNAS PROPIEDADES DE LAS PROTEÍNAS

1. OBJETIVO Demostrar la presencia de proteínas en una sustancia biológica por sus propiedades de coagulación, el efecto de someterlas a pruebas colorimétricas sencillas y la obtención de un filtrado libre de proteínas

2. INTRODUCCIÓN 2.1. Coagulación de Proteína Las proteínas, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de coágulos por efecto de diversos agentes tales como: calor, cuando son calentadas a temperaturas superiores a los 70°C, al ser tratadas con soluciones ácidas, básicas, salinas, disolventes orgánicos, cationes pesados, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados, que al actuar sobre la proteína la desordenan por la destrucción de sus estructuras secundaria, terciaria y cuaternaria.

Esquema representativo de la desnaturalización de una proteina

2.2. Reacción Xantoproteica Como se expresó en el laboratorio N° 7 esta reacción es debida a la formación de un compuesto aromático nitrado de color amarillo, naranja o verde, que se presenta también en las proteínas cuando son tratadas con ácido nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos

fenilos sustituidos, especialmente en presencia de tirosina. Al igual que el laboratorio N°. 7, una vez realizada la prueba se comprueban su positividad si la solución vira a un coloramarillo, naranja o verde; si se neutraliza posteriormente con un álcali vira a un color anaranjado oscuro. 2.3. Reacción de Biuret La producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptídico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminoácidos. Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada Biuret, de fórmula:

En contacto con una solución de sulfato cúprico diluida, da una coloración violeta característica. 2.4. Reacción de los aminoácidos azufrados Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reacción en la separación mediante un álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual al reaccionar con una solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo. 2.5. Solución libre de proteínas Tomando como soporte que las proteínas se desnaturalizan por efectos de coagulación (salinos, de ácidos o bases, calor, etc) es posible extraerlas de una solución y mantener los demás componentes. En el trabajo experimental se hace fundamental este aspecto porque las proteínas pueden interferir en la determinación de otros compuestos diferentes. El procedimiento utilizado para este experimento es el llamado Método de Nelson 3. PRELABORATORIO 1. Entre 10 y 15 renglones realice un escrito en donde refleje la importancia de lasproteínas, de especial interés a la necesidad de su presencia en los alimentos y efectos que causa su ausencia.

La proteína es un macronutriente esencial para el crecimiento y el mantenimiento de las estructuras corporales. Un concepto importante en nutrición proteica es la calidad de la proteína que viene, principalmente, determinada por el perfil y proporción de los aminoácidos que la componen, aunque pueden intervenir otros factores como la solubilidad y el grado glicosilación. Para evaluar la calidad de la proteína existen diversos métodos que se pueden clasificar en químicos, biológicos y microbiológicos. Tanto las proteínas funcionales como los péptidos bioactivos están cobrando gran importancia ya que, además de su papel nutricional por ser fuente de aminoácidos, son capaces de ejercer diferentes efectos biológicos específicos sobre el sistema inmune, el sistema cardiovascular o el tracto gastrointestinal. Además, se ha descrito que estos péptidos y proteínas pueden tener efectos anticancerígenos, antibacterianos o antivirales 2. Por medio de un ejemplo, explique el enlace peptídico de las proteínas. Se llama enlaces peptídicos a un tipo específico de vínculo entre un aminoácido y otro, que toma lugar a través de un grupo amino (-NH2) en el primer aminoácido y un grupo carboxilo (-COOH) en el segundo, produciendo un enlace covalente CO-NH y liberandouna molécula de agua. Ejemplo:Glucagón (NH2-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-LeuAsp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-COOH). Hormona peptídica de 29 aminoácidos, que se sintetiza en el páncreas y que interviene en el metabolismo de los azúcares 3. Cuáles son los tipos de enlaces que mantienen unidas a las proteínas en su estructuraprimaria, secundaria, terciaria y cuaternaria. Estructura primaria: La estructura primaria de las proteínas se refiere a la secuencia de aminoácidos, es decir, la combinación lineal de los aminoácidos mediante un tipo de enlace covalente, el enlace peptídico. Los aminoácidos están unidos por enlaces peptídicos siendo una de sus características más importantes la coplanaridad de los radicales constituyentes del enlace. Estructura secundaria: La estructura secundaria de las proteínas es la disposición espacial local del esqueleto proteico, gracias a la formación de puentes de hidrógeno entre los átomos que forman el enlace peptídico, es decir, un tipo de enlace covalente, sin hacer referencia a la cadena lateral. Existen diferentes tipos de estructura secundaria: - Estructura secundaria ordenada, repetitivos donde se encuentran los hélices alfa y cadenas beta, y no repetitivos donde se encuentran los giros beta y comba beta) -Estructura secundaria no ordenada -Estructura secundaria desordenad Estructura terciaria: La estructura tridimensional general de un polipéptido, generada principalmente por las interacciones entre los grupos R de los aminoácidos que conforman las proteínas, se denomina estructura terciaria. Las interacciones del grupo R que

contribuyen a la estructura terciaria incluyen puentes de hidrógeno, enlaces iónicos, interacciones dipolo-dipolo y fuerzas de dispersión de London: básicamente, conforman toda la gama de enlaces no covalentes. Por ejemplo, los grupos R con cargas similares se repelen entre sí, mientras que aquellos con cargas opuestas pueden formar un enlace iónico. Asimismo, los grupos R polares pueden formar puentes de hidrógeno y otro tipo de interacciones dipolo-dipolo. Las interacciones hidrofóbicas también son importantes para la estructura terciaria, ya que los aminoácidos con grupos R no polares hidrofóbicos se agrupan juntos en el interior de la proteína, dejando a los aminoácidos hidrofílicos en el exterior para interactuar con las moléculas de agua circundantes. Finalmente, existe un tipo especial de enlace covalente que puede contribuir a la estructura terciaria: los puentes disulfuro. Estos enlaces covalentes, formados entre los azufres de las cadenas laterales de las cisteínas, son mucho más fuertes que los otros tipos de enlaces que contribuyen a la estructura terciaria. Actúan como "pasadores de seguridad" moleculares al mantener todas las partes del polipéptido bien unidas entre sí. Estructura cuaternaria: La estructura cuaternaria deriva de la conjunción de varias cadenas peptídicas que, asociadas, conforman un ente, un multímero, que posee propiedades distintas a la de sus monómeros componentes. Dichas subunidades se asocian entre sí mediante interacciones no covalentes, como pueden ser puentes de hidrógeno, interacciones hidrofóbicas o puentes salinos. Para el caso de una proteína constituida por dos monómeros, un dímero, éste puede ser un homodímero, si los monómeros constituyentes son iguales, o un heterodímero, si no lo son. 4. Definir precipitación isoeléctrica de las proteínas El punto isoeléctrico (pI) es el pH de una solución en la que la carga primaria neta de una proteína se convierte en cero. A un pH solución que está por encima del pI de la superficie de la proteína es predominantemente cargado negativamente y por lo tanto moléculas cargadas como-exhibirá fuerzas de repulsión. Del mismo modo, a un pH de la solución que está por debajo del pI, la superficie de la proteína es predominantemente positivamente cargada y repulsión entre las proteínas se produce. Sin embargo, en el pI las cargas positivas y negativas se cancelan, las fuerzas electrostáticas repulsivas se reducen y las fuerzas de atracción predominan. La fuerza de atracción hará que la agregación y precipitación. El pI de la mayoría de proteínas está en el intervalo de pH de 4-6. Ácidos minerales, tales como clorhídrico y ácido sulfúrico se utilizan como precipitantes. La mayor desventaja de la precipitación punto isoeléctrico es el irreversible desnaturalización causada por los ácidos minerales. Por esta razón precipitación punto isoeléctrico es la más utilizada para precipitar proteínas contaminantes, en lugar de la proteína diana. La precipitación de la caseína durante la fabricación del queso, o durante la producción de caseinato de sodio, es una precipitación isoeléctrica.

5.Qué es desnaturalización de las proteínas y mencione por lo menos 3 agentesdesnaturalizantes físicos y 3 químicos. Cuando una proteína pierde su estructura de mayor orden, pero no su secuencia primaria, se dice que ha sido desnaturalizada y ya no es funcional.En algunas proteínas, la desnaturalización puede revertirse: dado que la estructura primaria del polipéptido sigue intacta (los aminoácidos no se han separado), es posible que recupere su funcionalidad si regresa a su entorno normal. No obstante, en otras ocasiones la desnaturalización es permanente. Los agentes que provocan la desnaturalización proteica se llaman agentes desnaturalizantes. Se distinguen agentes físicos (calor) y químicos (detergentes, disolventes orgánicos, pH, fuerza iónica)3. Como en algunos casos el fenómeno de la desnaturalización es reversible, es posible precipitar proteínas de manera selectiva mediante cambios en: La polaridad del disolvente, La fuerza iónica, El pH, La temperatura. 6. Averiguar en qué consiste la reacción de biuret. El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina (gracias a la presencia de NaOH). La reacción se basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu+2 y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos, esto si la reacción da positiva. Cuando la reacción de biuretdá negativa, queda de color azul.

4. FICHAS DE SEGURIDAD

NaOH

• R 35 Provoca quemaduras graves. • S 26 En caso de contacto con los ojos, lávense inmediata y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S 36/37/39 45 Úsense indumentaria y guantes adecuados y protección para los ojos/la cara S.En caso de accidente o malestar, acúdase inmediatamente al médico (si es posible, muéstresele la etiqueta).

Acido Tricloacetico (TCA)

• R 35Provoca quemaduras graves. R 50/53Muy tóxico para los organismos acuáticos, puede provocar a largo plazo efectos negativos en el medio ambiente acuático. • S 26 En caso de contacto con los ojos, lávense inmediata y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S 36/37/39Úsense indumentaria y guantes adecuados y protección para los ojos/la cara. S 45 En caso de accidente o malestar, acúdase inmediatamente al médico. 60Elimínense el producto y su recipiente como residuos peligrosos. S 61Evítese su liberación al medio ambiente. Recábense instrucciones específicas de la ficha de datos de seguridad.

Acetona

• R 11Fácilmente inflamable. R 36Irrita los ojos. R 66 La exposición repetida puede provocar sequedad o formación de grietas en la piel. R 67La inhalación de vapores puede provocar somnolencia y vértigo. • S 9-16-26-46 Consérvese el recipiente en lugar bien ventilado. S16 Conservar alejado de toda llama o fuente de chispas - No fumar. S 26 En caso de contacto con los ojos, lávense inmediata y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S 46En caso de ingestión, acúdase inmediatamente al médico y muéstresele la etiqueta o el envase.

Acetato de Plomo

• R 61Riesgo durante el embarazo de efectos adversos para el feto. R 33Peligro de efectos acumulativos. R 51/53Tóxico para los organismos acuáticos, puede provocar a largo plazo efectos negativos en el medio ambiente acuático. • S 53 Evítese la exposición recábense instrucciones especiales antes uso. S 36 Úsese indumentaria protectora adecuada. S 45En caso de accidente o malestar, acúdase inmediatamente al médico. S 62 Evítese su liberación al medio ambiente. Recábense instrucciones específicas de la ficha de datos de seguridad.

Reactivo de Biuret

• R 36/38 Irrita los ojos y la piel. R52/53Nocivo para los organismos acuáticos, puede provocar a largo plazo efectos negativos en el medio ambiente acuático. • S 61 Evítese su liberación al medio ambiente. Recábense instrucciones específicas de la ficha de datos de seguridad.

•R 8 Peligro de fuego en contacto con materias combustibles. R26 Muy tóxico por inhalación. R 35Provoca quemaduras graves.

5. MATERIALES Y REACTIVOS 5 tubos de ensayo, gradilla, pipetas de 1 y 5 mL, estufa, 1 probeta de 10 y otra de 50 mL, espátula, baño de agua calefactor, 5 pinzas para tubos de ensayo. NaOH 2,5 N, ácido Tricloroacético (TCA) 10%, NaOH al 40%, acetona, acetato de plomo 0.2 M, reactivo de Biuret: hidróxido sódico al 20%, 4 ó 5 gotas de solución de ácido nítrico concentrado, sulfato cúprico diluida al 1%. Los alumnos deben traer dos huevos por grupo 6. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL 6.1. Coagulación de proteínas Para ver la coagulación de las proteínas se puede utilizar clara de huevo, para conseguir más volumen puede prepararse para toda la clase una dilución de clara de huevo en agua, de forma que quede una mezcla aún espesa. Coloque en cinco tubos de ensayo las soluciones como se indica en la siguiente tabla y siga las especificaciones dadas para cada una de ellas. Tubos Reactivos Clara de huevo TCA 10% NaOH 2.5 N Acetona Acetato de plomo Sustancia Problema

1 mL. 1 -

2 mL. 1 1 -

3 mL. 1 1 1

4 mL. 1 1 -

5 mL 1 2 -

A. Calor: Coloque el tuboNº 1 al baño maría durante unos minutos. Observe los resultados. B. Medio ácido: Al tubo Nº 2, adiciónele el ácido Tricloroacético gota a gota. Agite. Eventualmente caliente. C. Medio básico: Añada al tubo Nº 3 el NaOH gota a gota. Agite. D. Disolventes orgánicos: Añada al tubo Nº 4, la acetona gota a gota. Agite E. Cationes pesados: Añada al tubo Nº 5, acetato de plomo gota a gota. Agite. 1. Coloree los tubos de ensayo. 2. SUPONGA: La sustancia problema precipito con coágulos de color blanco 2. Anote y comente los resultados obtenidos.

c. Por qué se presenta la coagulación? _Químicamente las proteínas están construidas por combinaciones complejas de C, H, 0, N, y otro elementos en menor proporción como son S, Cu, y P, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con agua soluciones coloidales que pueden precipitar, formándose coágulos al ser calentados a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, acidas, alcohólicas, entre otras. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización, que al actuar sobre la proteína la desorganizan, por destrucción de sus estructuras secundarias y terciarias, esto trae como consecuencia la perdida de la actividad biológica._ d. Indique otros factores físicos y químicos causantes de la precipitación. __Cualquier factor que modifique la interacción de la proteína con el disolvente disminuirá su estabilidad en disolución y provocarla precipitación, así la desaparición total o parcial de la envoltura acuosa, la neutralización de las cagas eléctricas de tipo repulsivo o la ruptura de los puentes de hidrogeno facilita la agregación intermolecular y provoca la precipitación __ e. La sustancia problema contenía proteínas? Explique. __Si, al reaccionar en dilución se observa una coagulación de color blanca y un precipitado similar a los demás tubos que contiene clara de huevo, al presentar características similares, se puede determinar que tiene proteínas. 6.2.Reacción Xantoproteica Ponga en el tubo de ensayo del dibujo de 2 a 3 mL de solución problema. Añada 1 mL de HNO3 concentrado. Caliente al baño maría a 100 °C. Enfríe en agua Añada gota a gota una disolución de sosa al 40%. a. En la figura, coloree adecuadamente los tubos. Suponga que al agregar el ácido nítrico concentrado la solución problema se tornó amarilla. Cuando se le adiciono disolución de sosa al 40%, el amarillo se tornó oscuro, anaranjado oscuro

Sln. problema

b. Da positiva la prueba? _ La prueba de la reacción Xantoproteica dio positiva para clara de huevo. La principal proteína de la clara de huevo es la ovoalbúmina, un tipo de albumina que constituye entre el 60% y el 65% del peso de la clara de huevo. Además de tener el mejor perfil proteico que se puede encontrar en alimento, la clara de huevo contiene minerales y vitaminas, aporta aproximadamente 17 calorías. Además de la ovoalbúmina, la clara de huevo tiene otras proteínas como ovomucina (2%), responsable de coagular el huevo, la conalbumina (14%) y el ovomucoide (2%)_ c. De acuerdo con su respuesta anterior, la solución problema contiene grupos fenilos sustituidos? _Si tiene la soluion problema grupos fenilos sustituidos, ya que presenta el resultado de la prueba da positiva _ d. Indique la ecuación de la reacción química general que se presenta y explíquela 2𝐻𝑁𝑂3 𝑁𝑂2 + 𝐻2 𝑂 + 𝑁𝑂3

Esta reacción se usa para detectar la presencia de proteínas solubles en una solución, se realiza mediante el uso de HNO3concentrado que en presencia de proteínas o aminoácidos con restos aromáticos torna la solución de un color amarillo oscuro. Los anillos fenilo que contienen un grupo activante, son nitrados produciendo un compuesto amarillo. La producción de un producto amarillo al añadir acido nítrico es una prueba para presencia de tirosina o triptófano en una proteína. La adición de base fuerte hace que el color se torne más oscuro anaranjado.

La reacción Xantoproteica se puede considerar como una sustitución electrofilia aromática de los residuos de tirosina de las proteínas, por el acido nítrico dando un compuesto coloreado a pH acido. e.Puede contener una proteína lasolución problema?¿Si es así que aminoácidos debe tener? La solución problema si contiene aminoácidos ya que torno de color amarillo indicando presencia de grupos fenilos sustituidos, adicional a esto al adicionarle acido nítrico torno de color amarillo oscuro indicando presencia de tirosina. 5.3. Reacción de Biuret Tome 2 tubos de ensayo y ponga en uno 3 mL. de albúmina de huevo y en el otro 3 mL de solución problema. Añada a cada uno 2 ml. de solución de Biuret. Debe aparecer una coloración violetarosácea característica.

Suponga que en ambos da coloración violeta rosácea. a. ¿Da positiva la prueba? La prueba de la reacción de Biuret, da positiva b. De acuerdo con su respuesta anterior, ¿contiene el huevo y la solución problema proteínas? El huevo tiene principalmente albumina llamada ovoalbúmina que contiene a su vez 9 aminoácidos esta proteína y son: ✓ Leucina ✓ Lisina ✓ Isoleucina ✓ Metionina ✓ Finilalanina ✓ Treonina ✓ Valina ✓ Triptófano ✓ Histidina

c. Escriba la ecuación química estructural para la formación de Biuret y explíquela

Se forma una coloración violeta al reaccionar con la muestra de huevo (clara) con el reactivo Biuret, debido a la formación de un complejo de coordinación entre sus cationes cúpricas (Cu2+) en medio alcalino con las uniones peptidicas (los pares de e- no compartidas del nitrógeno) c. Por qué se le agrega solución de hidróxido sódico y sulfato cúprico diluida a esta reacción (Biuret)? El reactivo Biuret está formado por una disolución de sulfato de cobre en medio alcalino, este se reconoce por el enlace peptidico de las proteínas mediante la formación de un complejo de coordinación entre los cationes Cu2+ y los pares de e- no compartidos del nitrógeno que forman parte de los enlaces peptidicos, produciendo una coloración rojovioleta. 5.3 Reacción de los aminoácidos azufrado Ponga en 2 tubos de ensayo de 2 a 3 mL. de albúmina de huevo (clara de huevo) en un tubo yen el otro tubo con solución problema. Añada 2 mL. de solución de hidróxido sódico al 20%. Añada 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5%. Caliente el tubo hasta ebullición. Suponga que, cuando se le agrega NaOH al 20% (Solución incolora) a los tubos que contenían: uno de ellos albumina de huevo (incolora) y el segundo tubo solución desconocida (incolora) se observó que el tubo con contenido de albumina tomo una coloración amarilla, como la observada en la figura de abajo. En el segundo tubo, no hubo cambio de coloración. Al agregar solución de acetato de plomo (incoloro) a ambos tubos, se observó que el tubo con contenido de albumina, cambio su color amarillo a color gris negruzco, con presencia de un precipitado. El tubo dos permaneció incoloro.

Figura. Colores correspondientes al tubo con contenido de albumina

a. ¿Da positiva la prueba para albumina de huevo y solución problema? La prueba de aminoácidos azufrados da positiva b. ¿Si la prueba no diera positivo en alguno de los tubos, que elemento no contiene? Si la prueba diera como resultado negativa quiere decir que en la proteína estudiada no hay presencia del aminoácido cisteína. Es decir no contiene grupos SH- elemento azufre (S) (Cisteína y Metionina) c. Escriba la ecuación o ecuaciones generales de la reacción o reacciones químicas que se presentan y explíquelas Pb(CH3COO)2 + aminoácido azufrado

PbS + x(CH3COO)2

La reacción de azufrados con acetato de plomo alcalino con la clara de huevo se torno de color oscuro a causa de la reacción entre aminoácidos azufrados (Cisteína y Metionina) principalmente de las proteínas ovoalbúmina; debido a que en estos se presenta la separación mediante álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual, al reaccionar con una solución de acetato de plomo, forma sulfato de plomo característico de un precipitado oscuro que permite su reconocimiento por su coloración. d. ¿Que aminoácidos contienen azufre (S) en su estructura y cuáles deberían dar positivos en la reacción? Explique La cisteína, se trata de un aminoácido no esencial, lo que significa que puede ser sintetizado por los humanos. Los codones que codifican la cisteína son UGU y UGC. La cisteína contiene un grupo tiol (-SH) en su cadena lateral, que hace que este aminoácido, en su totalidad, sea considerado como polar e hidrofilo. La parte tiol de la cadena suele participar en reacciones enzimáticas, actuando como nucleófilo. El tiol es susceptible a la oxidación para dar lugar a puentes disulfuros derivados de las cisteína que tienen un importante papel estructural en muchas proteínas.

6.4. Solución libre de proteínas Para observar diferencias se tomaran en esta experiencia sustancias que contienen proteínas o sustancias carentes de ellas. Prepare 4 tubos de ensayo según se muestra en la siguiente tabla:

Tubos Reactivos Caseína Solución de aminoácidos Solución de albumina de huevo Solución desconocida Hidróxido de Bario al 4.5 % Sulfato de Zinc al 5 %

1 mL. 1 4,5 4,5

2 mL. 1 4,5 4,5

3 mL. 1 4,5 4,5

4 mL. 1 4,5 4,5

Nota: Después de añadir cada uno de los reactivos a cada tubo, este debe agitarse vigorosamente. a. Qué ha sucedido en cada tubo de ensayo Dibuje cada tubo ? Suponga que, Tubo No. 1. Precipitado de color muy blanco Tubo No. 2. Solución incolora Tubo No. 3. Precipitado muy blanco, similar al del tubo No. 1 Tubo No. 4. Precipitado muy blanco, menos concentrado que el de los tubos 1 y 3.

b. Explique los resultados obtenido en cada tubo En todos los tubos se pueden observar la coagulación de color blando (precipitado blanco) c. Filtre el contenido de cada uno de los tubos de ensayo anteriores y describa el aspecto de cada uno de ellos. Agregue a cada tubo 1 mL de solución de Biuret. ¿Contiene la solución proteínas?

La solución si contiene proteínas, y al momento de añadir el reactivo de Biuret después del filtrado la caseína y la clara de huevo presentan una coloración azul clarano turbia. d. Suponga:Una vez se realiza el filtrado, se observa que todas las soluciones quedan incoloras. En el papel de filtro correspondiente a los tubos 1, 3 y 4 se observa depositado el precipitado. Los tubos no presentan rojo-violeta como daría positiva la prueba Biuret, ya que cuando se realizó el filtrado la proteína queda contenida en el papel filtro por lo tanto la prueba de Biuret da positivo solo para los tubos 1, 3 y 4. e. Cuando se le agrega solución de Biuret al filtrado de los tubos, se observa que en los tubos 1, 3 y 4 las soluciones quedan del color del Biuret (azul).

FiltradoCon solución de Biuret f. Explique lo observado ___Al filtrar cada una de las soluciones contenidas en los tubos de ensayo, en el papel filtro se van a atrapar lo correspondiente a las proteínas contenidasen los tubos 1, 3 y 4 por lo cual lo que traspasa la filtración y lo que queda no contiene proteínas o enlaces peptídicos por lo cual da negativo la prueba con el reactivo de Biuret y constatando lo que se describe en el proceso de filtración. g. ¿A qué conclusión puede llegar respecto de la solución desconocida? __En cuanto a la solución desconocida la cual se encuentra en el tubo 4 se puede determinar que contiene proteínas debido a las características que presenta, cuando se le agrega la solución de Biuret el resultado es una coloración azul, demostrando asi que el filtrado previamente realizado.

7. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA ✓ AACC. 1993. Approved methods of the American Association of Cereal Chemists (AACC). Methods 46-11 and 54-30A. AACC, St. Paul, Minnesota, USA. ✓ Juhász, A., F. Békés, Gy. Vida, L. Láng, L. Tamás, and Z. Bedö. 2000. Quantitative analyses of the storage proteins of an old Hungarian wheat population using the SEHPLC method. p. 34-37. In P.R Shewry and A.S. Tatham (Eds). Proceedings of the Gluten 2000–Structure and Function: Symposium Wheat Gluten. Bristol, UnitedKingdom ✓ https://quimicafacil.net/manual-de-laboratorio/analisis-cualitativo-de-proteinas/ ✓ https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S036528072006000400004 ✓ http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2224-54212014000100009 ✓ https://www.studocu.com/es/document/universidad-dealmeria/biologia/practica/practica-2-pruebas-cualitativas-y-cuantitativas-dereconocimiento-de-proteinas/1405074/view

Grupo de trabajo N°. 4 Integrantes Gutiérrez Yeimy, Velandia Alexandra, Quintero Betty, Rojas Alejandra. Fecha de práctica 25 de Agosto de 2020 Fecha de entrega de informe1 de Septiembre de 2020 Enlaces: https://www.youtube.com/watch?v=bi2LtNh5h50 https://www.youtube.com/watch?v=Dzqu2tNRTxQ

https://www.youtube.com/watch?v=V6TV6aeJQQA https://www.youtube.com/watch?v=R5Wp_MTJmS8 https://www.youtube.com/watch?v=3xHzSXkRslg https://www.youtube.com/watch?v=sQ6jn0lR5EM https://www.youtube.com/watch?v=cb6VXLodLq4