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• Guadalupe Mirelia

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FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Y CIENCIAS DE SALUD ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA MÉDICA LABORATORIO CLÍNICO Y ANATOMÍA PATOLÓGICA

CURSO: HISTOTECNOLOGIA

DOCENTE: MAG. MANOLO ALBERTO LEON VELASQUEZ

TEMA: FIJADORES HISTOLÓGICOS SIMPLES Y COMPUESTOS INTEGRANTES:     

AGUIRRE PALACIOS, SHIRLEY ASTETE UMPIRI, ANA LIZ ARAPA AGUILAR, KAROL MARITZA 2012139929 BARROGA CASILLA, MIRIAN TATIANA 2018105389 CRUCES URRUNAGA, ERICK GIANFRANCO 2018106017

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INDICE

INTRODUCCION…………………………………………………….. 3

1. Fijadores Histológicos…………………………………………....4 2. Fijación Histológica………………………………………….…….4

3. Los Objetivos de la Fijación. …………………………………...4 4. Características de un Fijador Ideal…………………………….4 5. Diferencias entre fijadores simples y compuestos………….5 5.1 Fijadores Simples: …………………………………………....5 5.2 Fijadores Compuestos: ……………………………………….6

6. Fijadores Coagulantes y no Coagulantes……………………...8 7. Fijador más utilizado en el campo de Histotecnologia………8

INTRODUCCION 2

En los campos de la histología patología y biología celular, la fijación es la preservación de los tejidos biológicos de la descomposición debido a la autolisis o la putrefacción. Termina cualquier reacción bioquímica en curso y también puede aumentar la resistencia mecánica o la estabilidad de los tejidos tratados. La fijación de tejido es un paso crítico en la preparación de cortes histológicos, su amplio objetivo es preservar las células y los componentes del tejido y hacerlo de tal manera que permita la preparación de cortes finos teñidos. Esto permite la investigación de la estructura de los tejidos, que está determinada por las formas y tamaños de macromoléculas (dentro y alrededor de las células) como proteínas y ácidos nucleicos Fijación (histología) Los fijadores químicos son los más frecuentemente empleados, bien compuestos por un solo tipo de sustancia fijadora o con mezclas de varias de ellas. Los fijadores se pueden clasificar en coagulantes y en aquellos que establecen enlaces cruzados. Los primeros, al extraer agua de los tejidos producen coagulación y desnaturalización de las proteínas, mientras que los segundos establecen enlaces químicos entre moléculas del tejido. Los fijadores que tienen como base al alcohol son coagulantes, tales como el Bouin o el Carnoy, mientras que el formaldehído o el glutaraldehído establecen enlaces cruzados. También se preparan soluciones mixtas de ambos tipos de fijadores. Existen multitud de fijadores en los manuales de técnicas histológicas. Aquí sólo trataremos aquellos que consideramos de uso más común para la observación de tejidos al microscopio, es decir, aquellos que mejor preserven la estructura celular. Los fijadores líquidos químicos son los más frecuentemente empleados, bien con un solo tipo de sustancia fijadora o con mezclas de varias de ellas.

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1. FIJADORES HISTOLÓGICOS En anatomía patológica el primer objetivo consiste en observar la estructura histológica lo más parecido posible a como se encuentra en el organismo, por lo tanto el órgano debe ser fijado después de su extirpación con el fin de que se conserve lo más veraz posible sus estructuras celulares, Para de esta manera observar tanto el buen funcionamiento y estructuras que componen del órgano así como la patología de mismo. Para ello se debe mantener toda su estructura química lo más inalterada posible, de tal forma que sus componentes celulares mantengan las mismas características que cuando dicho ser o tejido estaban vivos.

2. FIJACIÓN HISTOLÓGICA Podemos definir como un proceso que consiste en alcanzar condiciones estables de los constituyentes tisulares, proteínas principalmente, debido a la interrupción de las reacciones enzimáticas

3. LOS OBJETIVOS DE LA FIJACIÓN SON:   

Mantener las estructuras en el estado más parecido al que poseían en vivo. Evitar la lisis celular y la proliferación bacteriana. Dar cierta solidez o dureza al tejido o material. La fijación detiene los procesos vitales pero en ciertas condiciones mantiene las actividades de algunos componentes moleculares, por ejemplo la actividad de algunas enzimas

4. CARACTERÍSTICAS DE UN FIJADOR IDEAL Las características que debe tener un buen fijador son las siguientes.    

Debe tener la capacidad de bloquear la autolisis inmediatamente (Destrucción celular). Debe poseer efecto microbicida, impidiendo la acción bacteriana, la cual provoca la degradación del tejido. No debe provocar retracciones o distorsiones las cuales pueden alterar su arquitectura Debe cuidar la textura y composición tisular que favorezca la inclusión, el corte y la coloración del material histológico.

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5. DIFERENCIAS ENTRE FIJADORES SIMPLES Y FIJADORES COMPUESTOS: FIJADORES SIMPLES

FIJADORES COMPUESTOS

Son sustancias químicas puras con Son la mezcla de dos o más fijadores utilidades definidas para el estudio de simples cuya finalidad es combinar las una estructura tisular propiedades de cada fijador en la identificación de más de una estructura tisular

5.1 FIJADORES SIMPLES: Constituidos por una sola sustancia química. a) Formol al 10% (fijador universal).  Está considerado como la sustancia fijadora de mayor uso en los laboratorios que realizan técnica histológica. El formol comercial consiste en una solución acuosa del gas formaldehido al 39 - 40%.  Se presenta como un líquido claro, incoloro, que emite vapores sumamente irritantes para la conjuntiva y la mucosa respiratoria.  Su acción fijadora se ejerce coagulando las proteínas.  Es un fijador que posee un buen poder de penetración y difusión.  Mantiene de manera adecuada la estructura y facilita la coloración posterior de los componentes celulares y tisulares.  Endurece bien las muestras.  Conserva bastante bien a las grasas.  Se le emplea en una solución al 10% (10 del formol comercial y 90 partes de agua). b) Alcohol Etílico Absoluto al 95%.  Usado en estudios histoquímicos, preserva glucógeno y la actividad de ciertas enzimas (fosfatasa, alcalina y acidas) c) Alcohol Metílico 5

 Usados para frotis. Se emplea para fijar extendidos de sangre y de líquidos de punción. d) Tetroxido de Osmio y glutaraldehído (microscopia electrónica)  Muy buenos fijadores, utilizados en microscopía electrónica, preservan las estructuras finas y algunos sistemas enzimáticos. Tiene poca penetración en los bloques de tejido, entre 0.5 y 1 mm, y se puede usar tanto en solución como en vapor. No produce artefactos pero hace a las muestras de tejido frágiles. e) Bicloruro de Mercurio  Es un excelente fijador de los caracteres morfológicos celulares por lo que es el de elección para patologías hematopoyéticas y renales, donde el diagnostico se apoya normalmente en la observación de finos detalles nucleares y citoplasmáticos. Permite que la anilina coloree fibras colágenas. f) Bicromato de Potasio al 3 a 5%.  Fija las proteínas por lo que las mitocondrias quedan perfectamente conservadas Ácido acético, conserva ácidos nucleicos y nucleoproteínas g) Acido pícrico  Es un buen fijador para citoplasmas, coagula proteínas, fija ácidos nucleicos. Preserva bien glucógeno y lípidos.  Las sales del tipo picrato coagulan las proteínas de los tejidos. Preserva bien la estructura celular, no produce retracciones cuando el tiempo de fijación es óptimo, preserva bien glucógeno y lípidos. Es un buen fijador para tinciones generales puesto que tiene efecto mordiente y favorece la unión de los colorantes. Se suele usar combinado con otros fijadores. (Bouin).

5.2 FIJADORES COMPUESTOS: Una sola sustancia fijadora difícilmente reúne todas las condiciones para ejercer una buena fijación, por lo tanto es aconsejable usar mezclas fijadoras a través de las cuales se acrecientan las cualidades de un fijador y se atenúan sus defectos y desventajas.

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a). Líquido de Flemming (Cromo-Osmio-Ac. Acético) 

Es un buen fijador citológico.

b).Líquido de Zenker(Bicromato sublimado- Ac. Acético) 

Proporciona una excelente fijación de la cromatina nuclear, las fibras del tejido conectivo y algunas características citoplasmáticas, pero no conserva los delicados orgánulos citoplasmáticos como las mitocondrias.

c).Líquido de Helly( Zenker-formol) 

Precipitan las proteínas. Permiten conservar detalles estructurales finos.

d). Líquido de Bouin (Picro-Formol-Ac. Acético) 

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Está especialmente indicado para la fijación de tejidos blandos, normalmente se usa para fijar glándulas y órganos reproductores. Está formado por ácido pícrico, formaldehído y ácido acético glacial. Es una solución muy utilizada para el procesamiento de tejidos que se incluirán en parafina y a cuyas secciones se le pueden aplicar un amplio espectro de tinciones. Es muy útil para tejidos blandos y embriones, y preserva bien el núcleo y el glucógeno. Hay que tener cuidado con el tiempo de fijación, que no debe exceder de 48 h en el caso de fijaciones por inmersión. Tras la fijación las muestras de tejido se pueden conservar en alcohol de 70°. No está recomendado para el riñón ni para el estudio de mitocondrias. Antes de la inclusión en parafina es conveniente eliminar el ácido pícrico mediante lavados en alcohol de 70° porque impide una buena inclusión y que las tinciones no sean óptimas. 7

e) Líquido de Duboscq- Brasil o Bouin alcohólico  

Fijación específica de sustancias hidrosolubles como el glucógeno ya que evita su disolución. Es una alternativa de líquido de Bouin cuando la pieza que se debe fijar es relativamente voluminosa porque posee una velocidad de penetración mucho más elevada.

f) Liquido de Baker (Formol-cloruro de calcio) 

Preserva lípidos (fosfolípidos)

g).Liquido de Carnoy (alcohol etílico-cloroformo-ácido acético) 

Es un buen fijador para el glucógeno, para los hidratos de carbono simples y para las proteínas fibrosas. Es bueno para observar los ácidos nucleicos, aunque no la morfología nuclear, y para los grumos de Nissl del sistema nervioso.

6. FIJADORES COAGULANTES Y NO COAGULANTES.

FIJADORES

FIJADORES NO

COAGULANTES

COAGULANTES

ETANOL

FORMALDEHIDO

MATANOL

GLUTALDEHIDO

ACETONA

Glioxal

Acido picrico

HIDRATO DE CLORAL

ACIDO TRICLOROACETICO

SALES DE MERCURIO O ZINC

PROPANOL

TETROXIDO DE OSMIO

7. FIJADOR MÁS UTILIZADO EN EL CAMPO DE HISTOTECNOLOGIA

Mezclas con formaldehído. 

El formaldehído es quizá el fijador más usado hoy en día. Lo más frecuente es utilizarlo en solución al 4 % junto con otros fijadores. Se suele disolver 8

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en soluciones tamponadas que tienen una osmolaridad similar a la del tejido que se pretende fijar. Para fijaciones de tejidos destinados a microscopía electrónica se suelen utilizar soluciones fijadoras que contienen formaldehído y glutaraldehído. La función del formaldehído es iniciar una fijación rápida, por su mayor capacidad de penetración, Mientras que el glutaraldehído realizará una fijación más poderosa, pero más lenta, que no afectará a la estructura tisular puesto que el formaldehído ya ha realizado una fijación previa. Ejemplos: formaldehído tamponado

BIBLIOGRAFIA

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TOMASI Víctor . (s.f.). BLOGS. Obtenido de Fijadores Químicos: http://educacionhistotecnologiafijaciondos.blogspot.com/ SPUNIC. (s.f.)

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Montero, C. (2008). Manual de tecnicas Hitologias. Bogota: Editorial Omeg

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