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• Maria Laura Calizaya Benegas

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EQUIPOS Y REACTIVOS UTILIZADOS EN BIOQUIMICA Microscopio se utilizan típicamente para Centrifuga óptico examinar una muestra de transferencia, una preparación, o una muestra fina seccionada de un cierto material. . Phmetro

Balanzas electrónicas

Nevera o congeladora

Estufa y hornos

se utiliza la balanza para Espectrofometro efectuar actividades de control de calidad –con dispositivos como las pipetas–, para preparar mezclas de componentes en proporciones predefinidas y para determinar densidades o pesos específicos consiste en mantener, en un Fotómetro ambiente controlado (espacio refrigerado) diversos fluidos y sustancias, para que los mismos se conserven en buenas condiciones (mientras mas baja sea la temperatura, menor actividad química y biológica es un instrumento de medición de temperatura. la aplicación de calor en varios Lupa de sus procesos, para cocer, secar, fundir, dilatar, desgasificar, realizar diversos tratamientos de envejecimiento, térmicos, etc.

acelerar la decantación o la sedimentación de sus componentes o fases (generalmente una sólida y una líquida), según su densidad. es utilizado para medir el PH de una disolución.

Es el más pequeño y más específico. No utiliza filtro, pero se debe pedir la longitud de onda en el panel de control.

Con los fotómetros podemos medir la luz incidente, es decir, podemos medir la Iluminación, la densidad del flujo luminoso. También se puede hacer la de la luz reflejada, en este caso lo que medimos es la luminancia. Utiliza filtros de longitud de ondas de rango Espectro Visible y Espectro Ultravioleta visible. es un instrumento óptico que consta de una lente convergente de corta distancia focal, que desvía la luz incidente de modo que se forma una imagen virtual ampliada del objeto

Autoclaves

sirve para esterilizar material Termómetros de laboratorio

es un instrumento de medición de temperatura.

Placas calefactoras

. se utilizan generalmente para Mechero calentar el material de vidrio o su contenido.

utilizado en laboratorios para calentar muestras y sustancias química

Rotavapores

Usado principalmente en Baño maria laboratorios de síntesis químicas, investigaciones en Bioquímica y análisis químico cualitativo y cuantitativo de extractos de naturaleza orgánica e inorgánica. Se utiliza principalmente para separar por medio de evaporación a presión reducida y suave, el solvente que acompaña al soluto de interés; o bien, para realizar destilaciones fraccionadas Es el más antiguo y se requiere la participación de una fuente de MICROPIPETA luz, funciona con una lámpara. Sirve para emitir rayos de luz que atraviesan el reactivo y la sustancia. Este lee en longitudes de onda del rango Espectro Visible. Demora entre 30 a 40 minutos.

alizar pruebas serológicas y procedimientos de incubación, aglutinación, inactivación, biomédicos, farmacéuticos y hasta industriales. Por lo general, se utilizan con agua, pero también permiten trabajar con aceite. Los rangos de temperatura en los cuales normalmente son utilizados están entre la temperatura ambiente y los 60 °C.

Fotocolorímetr o

empleado para succionar y transferir pequeños volumenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas analíticas.

REACTIVOS 1. VA-044 En biología molecular se utiliza para la separación de las proteínas la electroforesis en gel de poliacrilamida. Esta técnica conocida como PAGE por sus siglas en inglés, polyacrylamide gel electrophoresis, se basa en que las diferentes proteínas migrarán a una velocidad distinta en un medio cargado eléctricamente. ÉlVA-044 (2,2' - Azobis [2(2-imidazolin-2-il) propano]dihidrocloruro) es un iniciador de la polimerización de la acrilamida, soluble en agua. Las condiciones en que se produce la polimerización usando este iniciador son suaves, a una baja temperatura y usando agua como disolvente. Entre las aplicaciones del VA-044 están la polimerización de la acrilamida y de otros monómeros. Cuando se compara con otros iniciadores hidrosolubles en la polimerización de la acrilamida se observa que es un producto recomendado para llevar a cabo esta reacción. Este reactivo puede ser usado para el método de análisis cerebral desarrollado por Chung y colaboradores que permite realizar una exploración estructural y molecular de los sistemas biológicos intactos. 2. TAPS: Otro buffer comercializado por Wako es el ácido N-[tris(hidroximetil)metil]-3aminopropanosulfónico (TAPS). El TAPS tiene capacidad reguladora entre pH 7.7 y 9.1. Puede ser usado para electroforesis capilar de ADN, como fase móvil para cromatografía y en otras técnicas de biología molecular. 3. HEPES: El HEPES (4-(2-hidroxietil)-1-piperazínetanosulfónico) es uno de los tampones zwitteriónicos más usados en experimentos biológicos. Tiene capacidad reguladora entre los valores de pH de 6.8 y 8.2 y su pKa varía con la temperatura, disminuyendo la disociación a temperaturas más bajas, característica que no tienen otros tampones con grupos funcionales como el fosfato y el carbonato y por esto se usa para mantener las enzimas a bajas temperaturas, se comporta igual que el agua en este aspecto. Por su baja toxicidad y no interacción con sustratos metálicos es el buffer de elección para muchos cultivos de órganos y tejidos (donde además mantiene el cultivo sin cambios de pH debidos a la liberación de dióxido de carbono que se produce), para técnicas de deposición de proteínas en microscopía electrónica y cuando son usadas disoluciones de Hanks y Earle 4. .BIS-TRIS:.Bis-Tris es la forma abreviada de llamar al bis(2-hidroxietil)aminotris(hidroximetil)metano usado en biología molecular para gran cantidad de ensayos. En su estructura química se encuentra una amina terciaria que es la encargada de mantener el equilibrio ácido base que le confiere capacidad reguladora a esta sustancia en el rango de pH de 5.8 a 7.3. Puede ser usado en el ensayo de la creatina quinasa, como medio protector de biomoléculas refrigeradas y en la biosíntesis de muchas otras moléculas de interés en la investigación biomédica.

5.

TARGET MRNA CLONING KIT WAKO

Este reactivo de laboratorio es útil para la amplificación del ARN mensajero cuando se cuenta con pocas moléculas de este. Está especialmente diseñado para utilizar con los anticuerpos monoclonales anti Ago2comercializados por Wako. Puede ser usado para cuantificar la cantidad de ARN etiquetado que está presente en un cultivo. Además se ha visto que es una herramienta muy útil para clonar ADN complementario obtenido a partir de ARN mensajero asociado al complejo RISC (complejo silenciador inducido por el ARN, en inglés: RNAinducedsilencingcomplex). 6. PIPES: El nombre común del PIPES es ácido piperazín-N,N′-bis(2-etanosulfónico) y se usa también como tampón en ensayos biológicos. Es uno de los buffers estudiados por Good y colaboradores en la década de los 60. Este tampón ácido tiene una constante de equilibrio cercana al pH fisiológico por lo que es muy útil en experimentos que precisan del cultivo de células, resiste el paso por la autoclave, lo que le confiere una ventaja adicional para ser seleccionado como tampón ácido en estudios que requieren la fijación de células. 7. ACES: ACES o ácido N-(2-acetamido)-2-aminoetanosulfónico es un tampón zwiteriónico con capacidad reguladora en el rango de pH entre 6.4 y 7.4. Es útil para la separación de proteínas por electroforesis de enfoque isoeléctrico (IEF) en dos dimensiones. 8. ADA: El ácido N-(Carbamoilmetil)iminodiacético o ADA es un tampón biológico útil en el rango de pH entre 6.4 y 7.4, usado para la preparación de gradientes de pH con sustratos inmovilizados, por ejemplo en una columna capilar monolítica. 9. BES: El tampón conocido como BES es el ácido N,N-Bis(2-hidroxietil)-2aminoetanosulfónico, este buffer biológico tiene utilidad en mucho procesos dependientes del pH, entre los que se encuentra la separación por electroforesis capilar. 10. GoldMAN™: es una solución de nanopartículas magnéticas de hierro con coloides de oro. Estas nanopartículas pueden utilizarse para transferir biomoléculas como ADN, ARN y oligonucleótidos a las células. Permite lograr la sensibilización directa de los vectores víricos en la región de oro de la nanopartícula, una alta eficiencia en la transferencia de genes a las células sin que contengan el receptor del virus y pueden

utilizarse para separar por magnetismo y purificar aquellas células donde se han expresado los genes del virus. Además no presentan citotoxicidad y se pueden usar en varios tipos de células 11. TES El ácido N-[tris(hidroximetil)metil]-2-aminoetanosulfónico, conocido como TES que es usado, entre otras aplicaciones, para el crecimiento de células epidérmicas a pH entre 7.4 y 7.9. Es también un buffer de Good. 12.BICINE El bicine, nombre con el que se conoce a la N,N-bis(2hidroxietil)glicina

es

un

tampón

recomendado

para

ensayos

bioquímicos que se realicen a bajas temperaturas. Tiene un pKa de 8.35 y ha sido usado en ensayos de cristalografía, determinación cuantitativa de biomoléculas y muchos otros experimentos de biología molecular. 13.TRICINE:La N-tris-(hidroximetil)metilglicina conocido como Tricine es un buffer usado en el rango de pH de 7.4 a 8.8. Este buffer se usa en la separación de péptidos y proteínas de bajo peso molecular, por la técnica de electroforesis, en gel y de membrana. Su gran fuerza iónica causa mayor movilidad de las especies iónicas y una menor velocidad de migración de las proteínas. Además es usado con gran eficacia en los ensayos de biología molecular que utilizan luciferasa para cuantificar la expresión de un vector de expresión transfectado mediante la catálisis de la reacción del ATP con la luciferina. 14.MES: El buffer preparado con MES (ácido 4-morfolínetanosulfónico) es útil para el cultivo celular de plantas en el rango de pH entre 5.8 y 6.5. Es usado como fase móvil para aislar la tubulina de cerebro por cromatografía de gel. Como otros tampones biológicos de los denominados buffers de Good presenta alta solubilidad en agua y poca en otros disolventes, fácil de sintetizar, es estable y tiene poca absorción en el visible.