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• jackielara

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Sirve para:

Verificar movilidad Verificar producción de indol Verificar producción de H2S Útil para identificar miembros de la familia §
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§§§

undamento: Triptófano (Tripteína) triptofanasas

Bacterias comp. rojo

indol + aldehído de reactivo De Kovac´s o Erlich

Cepas móviles: turbidez que producen alrededor de la punción de siembra. Cepas productoras de sulfhídrico se distinguen por la formación de un precipitado negro de sulfuro de hierro a partir del tiosulfato siempre que el medio se mantenga a un pH mayor a 7.2.

Vreparación Fórmula (en gramos por litro) Tripteína Peptona Sulfato de hierro y amonio

20.0 6.1

Tiosulfato de sodio

0.2

Agar

3.5

Instrucciones

0.2 Suspender 30 g del polvo por litro de agua destilada. Mezclar hasta disolver; calentar agitando y hervir durante un minuto. Distribuir unos 4 ml en tubos de hemólisis y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Solidificar en posición vertical.

pH final: 7.3 ± 0.2

Siembra: A partir de un cultivo de 18-24 horas en medio sólido, sembrar por punción profunda con aguja de inoculación recta. Se debe inocular el centro del tubo, y la punción debe abarcar 2 tercios de profundidad del medio de cultivo desde la superficie. Es importante que la siembra se realice en línea recta.



Ú

 Durante 24 horas, a 35-37 °C, en aerobiosis. Luego de la incubación, agregar 3-5 gotas de reactivo de Kovac´s o de Erlich.



D

 

 producen turbidez del medio, que se extiende mas allá de la línea de siembra.  
 
 el crecimiento se observa solamente en la línea de siembra.  
 

 ennegrecimiento a lo largo de la línea de siembra o en todo el medio.  
 
 el medio permanece sin cambio de color.  
  

 desarrollo de color rojo luego de agregar el reactivo de Kovac´s o de Erlich.  
  
 sin cambio de color.

ëovilidad

Indol

Producción de ácido sulfhídrico

. Coli ATCC 25922

+

+

-

K. pneumoniae ATCC700603

-

-

-

P. mirabilis ATCC43071

+

-

+

S. typhimurium ATCC14028

+

-

+

S. enteritidis ATCC13076

+

-

+

S. flexneri ATCC12022

-

-

-

ëicroorganismo

-

-En las bacterias aerobias estrictas, que sólo crecen en superficie, la movilidad puede ser difícil de observar. -Algunas bacterias productoras de melanina como ë   , pueden dar un color parduzco, que no debe confundirse con el color negro debido a la producción de ácido sulfhídrico.