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PARTE 1 1. ¿Qué precauciones se deben tener antes de sembrar en medios para anaerobios? La muestra que se desea cultivar en búsqueda de bacterias anaerobias debe ser sometida a una siembra inicial en mínimo cuatro medios para incubación en condición anaerobia con atmósfera de 5% CO2 , 5% H, 90% N; los medios de cultivo deben contener vitamina K para promover el transporte de electrones y síntesis de esfingolípidos, también debe contener hemina para estimular en algunos anaerobios la expresión de enzimas como superóxido dismutasa y catalasas, y poder defenderse del oxígeno y sus productos tóxicos. 2. ¿Qué medios de cultivo se utilizan cuando se sospecha de: ? ▪ Vibrio cholerae: Los cultivos con sospecha de ser V. cholerae deben subcultivarse en un medio no selectivo (por ejemplo, agar infusión de corazón [AIC] o agar triptona soya [ATS]) como preparación para la identificación por serología en lámina y pruebas bioquímicas. Las cepas de V. cholerae requieren de 0,5% de ClNa (sal) para un crecimiento óptimo en medio de agar; algunas formulaciones comerciales de agar nutriente no contienen sal y no deben usarse para el cultivo de V. cholerae. ▪ Clostridium botulinum: Durante el cultivo en el laboratorio, en los medios de cultivo adecuados; en este caso el “Agar Base” para clostridium (Detección y enumeración selectiva de Clostridium botulinum en conservas, productos cárnicos y todo tipo de alimentos), se produce la toxina en caso de que exista la bacteria y al preparar un filtrado del cultivo se puede investigar su presencia ▪ Brucella spp: En general, los medios que se emplean para el cultivo de Brucella contienen peptonas o triptonas a las que se adiciona extracto de levaduras, suero o sangre para favorecer el crecimiento de estas bacterias. Se siembra por duplicado en placas de agar sangre al 10%, en agar soya tripticasa (TSA) con extracto de levaduras al 0.5% y en agar Mac Conkey. ▪ Campylobacter jejuni: En 1973, Butzler desarrolló un medio selectivo con cinco antimicrobianos. En 1977, Skirrow informó acerca de un medio de cultivo selectivo con tres antimicrobianos. Aquellos medios de cultivo son el BD Campylobacter Agar Butzler y Skirrow

PARTE 2 1. ¿Por qué el agar Nutritivo es un medio de uso general para el cultivo bacteriano? ¿Qué sustancia se le puede agregar para hacerlo enriquecido para bacterias Gram positivas? El agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo debacteria. Es muy útil porque permanece sólido incluso a relativas altas temperaturas. Además, elcrecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor lascolonias pequeñas. Por las características de sus componentes es un medio usado para el cultivo de microorganismos poco exigentes en sus requerimientos nutricionales. No contiene inhibidores del desarrollo bacteriano. La pluripeptona es la fuente de carbono y nitrógeno para el desarrollo bacteriano. El agregado de cloruro de sodio permite el enriquecimiento con sangre de carnero u otras sustancias para facilitar el cultivo de microorganismos exigentes. Para un crecimiento de bacterias gram positivas además de las sustancias nutritivas normales se incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento de estos microorganismos, por ejemplo, se hace por adición de sangre u otros productos biológicos (suero, leche, huevo, entre otros.).

Con la excepción de sales biliares y cristal violeta, que inhiben el crecimiento de las bacterias gram positivas. 2. ¿Cuál es la importancia de un cultivo puro? 

Un cultivo puro es aquel en el que todos los microorganismos provienen de una sola célula por lo cual nos va a permitir estudiarlos, caracterizarlos e identificarlos detalladamente.

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Facilitar el crecimiento y el aislamiento de las bacterias presentes en una muestra clínica.

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Determinar qué bacterias entre las que se desarrollan tienen más probabilidades de ser las causantes de la infección y cuáles son sus posibles contaminantes o colonizadores.

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Se utiliza para identificar y trabajar con organismos que son causantes de infecciones, fermentaciones, fijación de nitrógeno y otros.

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Hace uso de La técnica de aislamiento que consiste en sembrar en un medio de cultivo sólido en placa de tal manera que los microorganismos generen colonias separadas visualizando su forma, tamaño y color característico.

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Un medio de cultivo intenta el crecimiento y reproducción in vitro de las bacterias, para observar sus propiedades y conseguir un mejor estudio bioquímico e inmunológico, al contar con material en cantidad suficiente