UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA FACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y ALIMENTARIAS LABORATORIO DE BIOQUÍMICA INFORME DE PRÁCTIC
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UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA FACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y ALIMENTARIAS LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
INFORME DE PRÁCTICA: ACTIVIDAD ENZIMÁTICA: TIROSINASA Docente: Karent Bravo Semestre 2018-01 Complementando con datos de los compañeros, exprese los resultados obtenidos en la práctica de Tirosinasa, en las siguientes tablas. •
Efecto de la concentración de enzima Tiempo (segundos)
1.0 Banano
0.0 20 40 60 80 100 120 140 160 180
•
Mililitros de extracto enzimático (mL) 1.5 2.0 Papa
Banano
Papa
Banano
Papa
0,121 0,160 0,192
0,212 0,240
0,261
Efecto del pH Tiempo (segundos)
3.0 Banano
0.0 20 40 60 80 100 120 140 160 180
pH 7.2 Papa
Banano
10.0 Papa
Banano
Papa
2.5 Banano
Papa
•
Efecto de la temperatura Tiempo (segundos)
Temperatura (°C) 25
0.0 Banano
Papa
Banano
Papa
37 Banano
Papa
0.0 20 40 60 80 100 120 140 160 180
1. Determine la actividad enzimática de la enzima polifenol oxidasa de banano y de papa, expresada en UPPO. Exprese los datos en la siguiente tabla: •
Efecto de la concentración de enzima Concentración de enzima (mL)
Actividad enzimático Banano
Papa R2
UPPO
R2
UPPO
1.0 1.5 2.0 2.5
•
Efecto del pH Actividad enzimática pH
Banano UPPO
Papa R
2
R2
UPPO
3.0 7.2 10.0 •
Efecto de la temperatura Actividad enzimática Temperatura
Banano UPPO
0 °C 25 °C 37 °C
Papa R2
UPPO
R2
2. Haga un análisis de los resultados obtenidos en cada uno de los factores evaluados y para cada una de las dos fuentes vegetales. Qué pH y temperatura podría ser cercana a los óptimos en cada fuente vegetal. ¿Se presentan diferencias en estos factores entre las dos fuentes vegetales? Recuerde que en los análisis de regresión lineal se aceptan valores de R2≥0.98. Para calcular las unidades de PPO omita los valores que considere necesario hacerlo para que la cinética se ajuste al modelo de regresión lineal.
3. Según los resultados obtenidos, cuál factor afecta mayormente la actividad de la enzima PPO en cada una de las fuentes vegetales. ¿A qué puede atribuir este comportamiento? 4. ¿Si se empleara un sustrato diferente a 4-metildopa, qué resultados esperaría? ¿Se presentaría el mismo comportamiento? ¿El pH y la temperatura óptima dependen del sustrato? Describa ejemplos. Para responder estas preguntas puede consultar la base de datos Brenda Database, para la enzima polifenol oxidasa (EC 1.10.3.1). https://www.brenda-enzymes.org/ https://www.brenda-enzymes.org/enzyme.php?ecno=1.10.3.1 5. Responda las preguntas del manual.
Fecha de entrega: Grupo viernes: Viernes 4 de mayo de 2018 Grupo martes: Martes 8 de mayo de 2018
Recuerde que los informes se deben elaborar a mano. Las preguntas 2 a 5 deben ser respondidas a mano.