• Author / Uploaded
• Santiago Rea

Citation preview

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS QUÍMICA DE PRODUCTOS NATURALES HORARIO: Miércoles 8 a 11 AM FECHA: 21/octubre /2015 CARRERA: Química GRUPO N°1 INTEGRANTES: DARWIN JACOME MAURO MUÑOZ SANTIAGO REA

TITULO: Obtención y Estandarización de las Muestras Vegetales OBJETIVO GENERAL 

Determinar los componentes químicos presentes en el extracto vegetal del mortiño, nativo de parque Nacional Cotopaxi.

OBJETIVOS ESPECIFICOS   

Extraer mediante maceración los principios activos de la muestra vegetal. Identificar mediante pruebas químicas los diversos principios activos que pueden estar presentes en el extracto total. Conocer las propiedades de la muestra vegetal

FUNDAMENTO TEORICO Métodos de Extracción de productos Orgánicos Prensado La manera más directa de "extraer" fitoquímicos de un vegetal es mediante el prensado. Al eliminar las fibras extrañas, este proceso te permite consumir concentraciones mucho más altas de los compuestos beneficiosos que si fueras a comer la verdura. Beber una taza de jugo de col es mucho más fácil y más eficiente energéticamente que comer toda la cabeza de repollo crudo. Algunos fitoquímicos, sin embargo, como la quercetina que se encuentra en las cebollas exigen métodos más sofisticados de extracción.

Homogeneización Antes de la extracción, las verduras son molidas primero con un mortero. También pueden ser finamente picadas o tratadas en una licuadora o procesador de alimentos. Este proceso rompe las células vegetales, preparando los fitoquímicos almacenados en el interior para su liberación a través de la extracción. El papel de los disolventes Si el fitoquímico es soluble en su totalidad, la materia vegetal se sumerge luego en un disolvente con la misma polaridad que el fitoquímico dirigido. El alcohol y el agua, por ejemplo, son solventes comunes de alta polaridad. Maceración En este proceso relativamente simple, el tejido de la planta se deja reposar en el disolvente a temperatura ambiente, en un recipiente cerrado. Después de que el solvente empapa los fitoquímicos, entonces se decanta y se filtra. Extracción del soxhlet Este proceso, que se utiliza para fitoquímicos no volátiles que tienen solubilidad limitada, intensifica la interacción con el disolvente a través del calor y la repetición. El disolvente se hierve en un matraz de modo que sus vapores pasan hacia arriba y luego se licuan mediante el uso de un condensador en una cámara de retención de la muestra de la planta. El disolvente pasa a través de este ciclo varias veces, cada vez extrayendo más y más del fitoquímico. Hidrodestilación Este método de extracción se utiliza para capturar compuestos más volátiles. En este proceso, la muestra de la planta se deja reposar en un matraz lleno de agua hirviendo que está conectado a un condensador, que permite que la materia destilada escape a través de la evaporación para la recogida final. Aireación Una vez que el compuesto ha sido extraído, se deja a temperatura ambiente en un espacio aireado para evaporar cualquier solvente residual. Cada proceso es delicado y complejo. Una extracción exitosa requiere una investigación profunda que represente la polaridad, la volatilidad y la solubilidad de los fitoquímicos específicos. (Patterson, 2010)

REACCIONES 

MARCHA FITOQUÍMICA PRELIMINAR

Determinación de Alcaloides 1. Prueba con el reactivo de Mayer Muestra

+ K2[HgI4]

formación de un precipitado

Esta prueba es el inicio de la afirmación de la presencia de compuestos tipo alcaloide en el extracto obtenido 2. Prueba con el reactivo de Dragendorff Muestra + Bi(NO3)3-KI /HNO3 precipitado rojo

formación de un

Segunda afirmación de la presencia de alcaloide en el extracto de mortiño Determinación de esteroles Se utilizo la sección apolar del extracto 3. Prueba de Lieberman Bourchard Muestra

+ C4H6O3 -- CHCl3/H2SO4

precipitado Rojo

Me mostro claramente en el seno de reacción la formación de un precipitado ligeramente rojo que en función del tiempo aumentaba su tonalidad, señal positiva para la presencia de esteroles en el extracto obtenido 4. Reacción de Zack Muestra verdosa

+ CH3COOH – H2SO4--/FeCl3(20%)

Coloración

Determinación de Flavonoides 5. Reacción en medio alcalino (Flavonoides) Muestra + NaOH(5%)/ETOH Coloración verdosa

coloración amarillenta + FeCL3

Positivo para la presencia de flavonoides; primero por el cambio de configuración que sufre la molécula al tratar la muestra con una base fuerte NaOH y luego por la facilidad de formar un complejo de hierro y presentar una coloración característica del mismo

Reconocimiento de Antocianos: 6. Reacción en medio ácido Muestra + gotas HCl

coloración roja +NaOH

Coloración Azul

Positivo por la clara percepción de cambio de color en función del pH de la mescla de extracción, debida a el cambio de configuración de la molécula de antocianina. Reconocimiento de Taninos 7. Cloruro férrico al 2% Muestra [6 Ar – OH] + FeCl3 Coloración Azul

[(Ar - O)6 Fe] H3 + 3HCl

Coloración que afirma la presencia de taninos en la muestra extraída, esto debido a la formación de un complejo de hierro que tiene su coloración característica. Aplicaciones El mortiño (o frutos del Vaccinium meridionale) se puede considerar como un alimento nutracéutico, porque es rica en compuestos polifenólicos que tienen la propiedad de ser colorantes y antioxidantes potencialmente protectoras de la salud. Los antioxidantes son sustancias que disminuyen o retardan las reacciones de oxidación sobre diferentes sustratos y pueden ser naturales o sintéticos. El butilhidroxianisol (BHA), y el butil hidroxitolueno (BHT) son los antioxidantes sintéticos de mayor uso en la industria de alimentos y farmacéutica; sin embargo, se han encontrado efectos secundarios, como el aumento del colesterol, hepatomegalia e inducción de cáncer hepático, entre otras debido a esto, y a la creciente importancia de los antioxidantes en la industria farmacéutica y alimenticia es necesaria la búsqueda de moléculas alternativas de origen natural con gran actividad y que no tengan efectos citotóxicos, ni genotóxicos. Muchos antioxidantes son usados en la industria de alimentos por su capacidad conservadora; porque, retardan el proceso de rancidez, disminuyen la posibilidad de generación de compuestos tóxicos, evitan la decoloración de los pigmentos, no permiten los cambios en la textura, disminuyen la pérdida de valor nutricional causada por la degradación de los ácidos grasos esenciales y por la destrucción de las vitaminas A, E y ; Rojano et al., 2008a; y muchos de estos compuestos o sus fuentes naturales, se consideran como nutracéuticos. (Cooperación Latinoamericana y Caribeña en Plantas Medicinales y Aromáticas, 2009)

METODOLOGIA EXPERIMENTAL Materiales y equipos Materiales  Molino  Tamiz  Muestra vegetal(mortiño)  Mufla  Frascos ámbar  Placa de toques  Embudo de separación  Pinza para embudo  Vaso de precipitación 250ml  Embudo  Papel filtro

Reactivos  Metanol  Propanol  Agua  HCl 5%  NaOH 20%  Cloroformo  Reactivo de Meyer  Reactivo de Dragendorff  Reactivo de Warner  Anhídrido acético  Ácido acético  H2SO4  FeCl3 20%

PROCEDIMIENTO Preparación de la muestra

Agua y HClO al 1%

CVC Mufla

Molino manual

Tamiz

Lavar

Secar

Tres días mínimo

Moler

Tamizar 2 días

Etanol

Macerar

V REGISTRO DE DATOS EXPERIMENTALES Identificación de las muestra de acuerdo a reacciones afines a la estructura de los principios activos a analizar. De los resultados de la marcha fitoquímica podemos definir las siguientes enunciar algunos de los compuestos que se encuentran en el extracto del mortiño:     

Alcaloides Esteroles Flavonoides Antocianos Taninos

Extracción por maceración con metanol Masa muestra= 25.4 g Volumen metanol= 115 mL Extracto con una coloración violeta muy intensa  Después de el tratamiento de la muestra de maceración con cloroformo se realizo una separación por diferencia de fases por no miscibilidad, se utilizo la parte acuosa para las pruebas de alcaloides y la parte apolar para la determinación de esteroles RESULTADOS REACCION

RESULTADO

GRUPO FUNCIONAL

Mayer Dragendorff Lieberman Bourchard Reacción de Zack Reacción en medio alcalino (Flavonoides) Reacción en medio ácido Cloruro férrico al 2%

Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo

Alcaloides Alcaloides Esteroles Esteroles Flavonoides

Positivo Positivo

Antocianos Taninos

CÁLCULOS

Después de preparar a la muestra, realizar el secado y la maceración para la extracción de los metabólicos secundarios y poder realizar el análisis cualitativo de los compuestos que en este macerado existen se obtuvieron los siguientes resultados 

Calculo del porcentaje de Humedad de la muestra:

humedad

=

masa muestra−inicio−mas a muestra−seca ∗100 mas amuestra−inicio

humedad

=

443.2 g−75.8 g ∗100 443.2 g

humedad

=82.90

DISCUSIONES El color característico del mortiño fue una interferencia en las pruebas de identificación, ya que su intensidad no permitía percibir el cambio físico en la reacción; obtuvimos positivo para antocianinas, esto se debió al viraje de pH de color rojo a azul, la reacción con alcaloides fue positiva en la práctica aunque teóricamente no lo es; esto pudo deberse a ínfimas cantidades en la muestra o el factor error humano en la práctica, en la teoría se sabía que el mortiño posee propiedades antioxidantes, en la práctica tuvimos reacciones positivas para fenoles (Flavonoides) pudiendo darnos cuenta de su buena capacidad antioxidante dada por los sustituyentes OH en las posiciones o-p del anillo bencénico CONCLUSIONES    

Se determinó los componentes químicos activos de interés a estudiar de la muestra vegetal por medio de la metodología (guía). Se maceró la muestra vegetal previamente tratada para sacar sus principios activos. Se realizaron las pruebas de identificación siendo positivas para: Alcaloides, Esteroles, Flavonoides, Antocianos y Taninos. Se conoció las propiedades y usos de los principios activos de la muestra vegetal.

Bibliografía

Acosta, G. J. (2002). ALCALOIDES Y COMPUESTOS NITROGENADOS . Medellín: Universidad de Antioquia . Cooperación Latinoamericana y Caribeña en Plantas Medicinales y Aromáticas. (Noviembre de 2009). BLACPMA. Recuperado el 19 de Octubre de 2015, de Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas : http://www.unap.cl/docs/quimicafarmacia/2009/1.pdf Morales, E. O. (Agosto de 2008). Tamizaje Fitoquimico de la especie Quararibea yunckeri Standley Subsp. izabalensis W.S. Alverson ex. Tamizaje Fitoquimico de la especie. Guatemala: UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA . Patterson, R. (2010). eHow en Español . Recuperado el 19 de Octubre de 2015, de http://www.ehowenespanol.com/metodos-extraccion-fitoquimicosvegetales-info_202276/