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FACULTAD: Medicina

PROFESOR: Marcela Mardones

CARRERA: Bioquímica Clínica

ESTUDIANTE: Tania Katiuska Pinargote Ortega

FECHA: 16 de abril del 2019

REPORTE: No. 5

ASIGNATURA: Hematología

DESCRIPCIÓN: Informe de laboratorio

CONTAJE MANUAL DE GLÓBULOS ROJOS / VELOCIDAD DE ERITROSEDIMENTACIÓN / ALTERACIONES DEL GLÓBULO ROJO EN SANGRE PERIFÉRICA Resumen Contaje manual de glóbulos rojos En la práctica se realizó el recuento de glóbulos rojos manualmente para determinar el número de eritrocitos que se encuentran en el paciente por medio de una dilución isotónica más la muestra en relación 10:2000 μl que se agregó en la cámara de Neubauer con la ayuda de una pipeta automática, seguido de la visualización en el microscopio con el objetivo de 40X. Velocidad de eritrosedimentación Para la realización de la prueba de sedimentación se utilizó el método de Wintrobe para medir la velocidad con la que caen los eritrocitos en volumen y tiempo determinado, por medio de una aguja Wintrobe, se llenó el tubo de Wintrobe con la muestra hasta donde se indica aproximadamente 1 ml seguido de la colocación final en la gradilla de Wintrobe sin ningún tipo de movimiento por una hora. Alteraciones del glóbulo rojo en sangre periférica Para la realización de la observación de diferentes alteraciones que se podrían encontrar en frotis de sangre periférica, se nos fue entregado un total de 5 placas con patogenicidades sanguíneas diferentes donde con el objetivo de 100x mas aceite de inmersión fueron encontrado las células con diferentes tamaños y formas de las anomalías que se describían en la placa. Resultados Contaje manual de glóbulos rojos 

Primera experiencia

Imagen 1.1 La primera prueba realizada para el conteo de glóbulos rojos, debido a la solución salina al 0,85% hubo una hemolisis celular, observando en la dilución un característico color rojo brillante Observación

Imagen 1.2 Con el objetivo de 40x se observaron las células sanguíneas (eritrocitos) hipotónicas, con bordes irregulares y algunas destruidas por la mayor cantidad de sal que pudo encontrarse en el medio. 

Segunda experiencia

Imagen 1.2 Se observa una diferencia de color en la dilución comparada con la primera experiencia, esta dilución no estaba hemolizada. Observación

Imagen 2.2 Con el objetivo de 40x se pudo observar una mejor estructura de los glóbulos rojos, estando distribuidos en los cuadrantes debajo de la doble línea. Contaje de glóbulos rojos zona N.1 Cuadrante

Numero de glóbulos rojos

1

91

2

95

3

103

4

97

5

93

Total

479

Tabla 1.1 se determinan el número de eritrocitos contados en cada cuadrante y el total del conteo en la zona primaria de la cámara de Neubauer Cálculos 𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑔𝑙ó𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠 = 𝐺𝑙ó𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑜𝑠 × 10,000 𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑔𝑙ó𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠 = 479 × 10,000 𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑔𝑙ó𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠 = 4,790.000 𝑛𝑚3

Contaje de glóbulos rojos zona N.2 Cuadrante

Numero de glóbulos rojos

1

90

2

97

3

96

4

89

5

95

Total

467

Tabla 1.2 se determinan el número de eritrocitos contados en cada cuadrante y el total del conteo en la zona secundaria de la cámara de Neubauer Cálculos 𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑔𝑙ó𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠 = 𝐺𝑙ó𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑜𝑠 × 10,000 𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑔𝑙ó𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠 = 467 × 10,000 𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑔𝑙ó𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠 = 4,670.000 𝑛𝑚3

Velocidad de eritrosedimentación

Imagen 1.2 Se presenta la cantidad de plasma que se formó por la sedimentación de los glóbulos rojos después de haber estado en reposo por una hora. Se representa la velocidad de eritrocedimentación en 2mm/h Alteraciones del glóbulo rojo en sangre periférica 

Anemia-hipocromía

Imagen 1.3 se observan los eritrocitos con un tomo más pálido en su centro 

Macrocitos

Imagen 2.3 Se observan eritrocitos mas grandes del tamaño normal 

Células diana

Imagen 3.3 Se observan los eritrocitos en forma de sombreros ya que se visualiza el borde coloreado, con el centro pálido y un punto coloreado 

Anomalía glóbulos rojos (células diana)

Imagen 4.3 Se observa su forma elíptica de los eritrocitos 

Equinocitos

Imagen 5.3 se observa el borde irregular del eritrocito, están muy teñidos y no se evidencia su palidez central Análisis de los resultados Contaje manual de glóbulos rojos Se realizó el conteo de las dos zonas de la cámara de Neubauer; en la primera zona se calculó un valor de 4,790.000 𝑛𝑚3 y en la segunda zona 4,670.000 𝑛𝑚3, estando en un promedio normal ya que Se tomo en cuenta los valores de la guía de laboratorio que están desde 5,000.000 + - 700.000; en el caso de que estuvieran los valores bajos de lo normal se tomaría en cuenta alguna patogenicidad como: diabetes, anemia,

embarazo o alguna enfermedad sistémica; en el caso de que los valores estuvieran mas alto de lo normal se tomaría en cuenta enfermedades pulmonares, poliglobulia o cardiopatías. Velocidad de eritrosedimentación Esta prueba física se tomó en cuenta en la práctica los valores de referencia de:

1. Hombre

0-14 mm/h

2. Mujer

0-20 mm/h

Analizando el resultado del paciente que se encontraba en 2mm/h, se encuentra en un índice normal, ya que al estar mas alto se podría considerar la respuesta antinflamatoria por factores anormales de los eritrocitos, por el plasma o el aumento de proteínas. Alteraciones del glóbulo rojo en sangre periférica 

Anemia hipocrómica Al estar los eritrocitos sin tanta pigmentación comenzando desde su centro se entiende que ocurre cuando hay insuficiencia de hemoglobina causado por hipocromía o por falta de hierro.



Macrocitos Al observarse los eritrocitos con su tamaño aumentado se define que la causa más común es por macrocitosis por falta de vitaminas en especial la vitamina B12 y ácido fólico.



Células diana Célula con forma de tiro al blanco o sombreros, es producido por el incremento de la relación superficie-volumen del glóbulo rojo a causa de expansión de la superficie o por aumento de los lípidos en la membrana.



Anomalía glóbulos rojos (células diana) Se observaron en forma irregular más parecida a un Ovalocitos que pudo ser producido por la forma en cómo se realizó el extendido de sangre periférica.



Equinocitos Se observa con bordes irregulares donde parece estar despegada de la parte interna de la membrana, estos se asocian con hemólisis inducida causando estrés oxidativo relacionado por falta de glucosa 6 fosfato deshidrogenasa.

Conclusiones y recomendaciones Contaje manual de glóbulos rojos Se puede concluir que se logró la comprensión de la utilización de la cámara de Neubauer en el conteo de eritrocitos de una muestra a través del manejo del microscopio

con objetivo de 40x pudiendo adquirir los conocimientos para lograr reconocer las estructuras sanguíneas encontrada en los cuadrantes y poder cuantificarlos para un análisis correcto. Es necesario que para un correcto contaje de glóbulos rojos las medidas de la dilución sean exacta y la solución a utilizar sea inspeccionadas para que no ocurra hemolisis de la muestra y se realice un correcto conteo de eritrocitos. Velocidad de eritrosedimentación Se concluyó que al medir la velocidad de eritrocedimentación con equipos automatizados es posible que el porcentaje de error no sea tan grande y podamos identificar algún proceso antinflamatorio o infeccioso. Se recomienda que para una prueba mas confiable y con mayor sensibilidad se utilice el método de Westergreen. Alteraciones del glóbulo rojo en sangre periférica Se concluye que existen diferentes desviaciones en la forma eritrocitaria por lo que al analizar las formas eritrocitarias y al ser múltiples se puede entender la existencia de los casos patógenos de la sangre periférica y entender las distintas enfermedades insospechadas. Se recomienda que la práctica sea realizada nuevamente para poder reconocer la mayoría de las anomalías eritrocitarias y entender de mejor manera sus características. Cuestionario Contaje manual de glóbulos rojos 

Qué gráficos muestra el equipo automatizado en el contaje de glóbulos rojos. Explique Se muestran cuadrículas de recuento, son 9 cuadrados grandes, cada uno de 1 mm2 , 4 cuadrados grandes de las esquinas están divididos en 16 cuadrados con aristas de 0,25 mm. El cuadrado grande central está dividido en 25 cuadrados medianos con aristas de 0,2 mm estando cada cuadrado mediano subdividido en 16 cuadrados pequeños con aristas de 0,05 mm y una superficie de 0,0025 mm2. Los 5 cuadrados medianos se utilizan para recuento de eritrocitos y de trombocitos. Tiene especial relevancia que todos los cuadrados medianos presentan en todos los lados líneas límites triples. La línea central es la frontera y decide si las células de esta zona se deben contar o no. (Brand, 2019)

Velocidad de eritrosedimentación 

Investigue qué es: o

Rouleaux Es considerado a los eritrocitos en pila de moneda por estar apilados unos con otros formando una agrupación se debe a diversas causas,

o

o

o

como la mala preparación de la muestra o por aumento en la concentración de proteínas de la sangre. (Aterres, 2018) Wintrobe El método de Wintrobe sirve para determinar la velocidad de eritrocedimentación con alta sensibilidad en las aceleraciones bajas, ha sido visto una desventaja por el incrementado número de falsos positivos. El método de Wintrobe puede fallar para reflejar la presencia de enfermedad activa. (ROJAS, 2016) Westergreen Es considerado como una metodología de referencia y recomendado como el más confiable y más reproducible para determinar la velocidad eritrocitaria, ya que al utilizar una muestra anticoagulada con citrato de sodio o una muestra de sangre anticoagulada con EDTA, se montan las pruebas en columnas de 200 mm y a la hora se realiza la lectura, sin ninguna corrección por anemia. (ROJAS, 2016) Fibrinógeno Es el factor I de la coagulación también actúa como glicoproteína fibrosa como también adhesiva que se encuentra en el plasma, también tiene un papel importante en todas las fases de la hemostasia. Es un inhibidor de coagulación ya que se une a la trombina. (Ruiz, 2016)

Bibliografía Aterres. (2018). ATLAS DE HEMATOLOGíA. Obtenido de http://www.qualitat.cc/sitebuildercontent/sitebuilderfiles/atlas.hematologia.pdf Brand. (2019). Cámaras de recuento. Obtenido de file:///C:/Users/cliente/Downloads/GK900_05_Clinical_Lab_Zaehlkammern_s.p df Martínez, C. (2012). Manual de prácticas de laboratorio “Biometría Hemática”. Obtenido de http://www.plerus.ac.cr/docs/manual-de-practicas-biometricahermatica.pdf Maya, G. C. (2008). Utilidad clínica del extendido de sangre periférica: los eritrocitos. Caldas. Obtenido de https://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl2008/myl087-8b.pdf ROJAS, E. L. (junio de 2016). Comparación de técnicas para el análisis de velocidad de sedimentación globular en los pacientes del Laboratorio Clínico Profesional. Quito, Ecuador. Obtenido de http://www.dspace.uce.edu.ec/bitstream/25000/10100/1/T-UCE-0006-063.pdf Ruiz, Á. G. (2016). El fi brinógeno: su fi siología e interacciones en el sistema de la coagulación. Obtenido de https://www.medigraphic.com/pdfs/rma/cma2016/cmas162g.pdf Varela, M. d. (marzo de 2009). Determinación de la velocidad de sedimentación globular mediante micrométodo comparado con el método Wintrobe.