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Informe de prácticas de simulación FISIOEX 7.0:​ Neurofisiología de los impulsos nerviosos Presentado por:​ Cristhian Andrés Garcia Soto Asignatura:​ Fisiología Animal Objetivos de la práctica: 1. Definir: irritabilidad, conductividad, potencial de membrana en reposo, polarización, bomba sodio-potasio, estímulo umbral, despolarización, acción de potencial, repolarización, híper polarización, periodo refractario absoluto, periodo refractario relativo, impulso nervioso, hendidura sináptica, potencial de acción compuesto, velocidad de conducción. 2. Identificar al menos cuatro diferencias del estímulo capaz de generar un potencial de acción. 3. Identificar al menos dos agentes capaces de inhibir un potencial de acción. 4. Describir la relación entre el tamaño del nervio y la velocidad de conducción. 5. Describir la relación entre la mielinización del nervio y la velocidad de conducción. 6. Definir: irritabilidad, conductividad, potencial de membrana en reposo, polarización, bomba sodio-potasio, estímulo umbral, despolarización, acción de potencial, repolarización, híper polarización, periodo refractario absoluto, periodo refractario relativo, impulso nervioso, hendidura sináptica, potencial de acción compuesto, velocidad de conducción. 7. Identificar al menos cuatro diferencias del estímulo capaz de generar un potencial de acción. 8. Identificar al menos dos agentes capaces de inhibir un potencial de acción. 9. Describir la relación entre el tamaño del nervio y la velocidad de conducción. 10. Describir la relación entre la mielinización del nervio y la velocidad de conducción. Alcance El procedimiento abarco el desarrollo de 8 actividades relacionadas con impulsos nerviosos y potencial de acción, mediante el uso del software de simulación Fisio Ex 7.0 RESUMEN El sistema nervioso es responsable de muchas de las funciones que caracteriza a los grandes organismos, como el movimiento muscular, conciencia, pensamiento, entendimiento y memoria. Las neuronas son la unidad celular funcional del sistema nervioso. Estas células son “excitables” y se comunican por la transmisión de impulsos eléctricos (“excitable” significa que son capaces de producir largas y rápidas señales eléctricas denominadas potencial de acción). Las neuronas están especializadas para recibir, integrar, y transmitir información a otras neuronas y/o a otras células efectoras. Una neurona consta de un cuerpo celular, que contiene núcleo y organelos; dendritas, que son responsables de llevar los impulsos nerviosos hacia el cuerpo de la célula; y un

axón, que es responsable de llevar los impulsos nerviosos fuera de la neurona. A la unión entre las células nerviosas se le denomina sinapsis, lugar donde una célula (la célula pre-sináptica) libera un mensajero químico llamado neurotransmisor que se comunica con los receptores en las dendritas o el cuerpo de la célula pos-sináptica. Mientras que la transmisión sináptica en el comienzo de la excitación (inicio de un potencial de acción en la célula pos-sináptica), en algunos casos se generan potenciales inhibitorios. Este proceso se debe a que la célula pos-sináptica se hiperpolariza, generando un potencial de membrana en reposo que es más negativo que el potencial de membrana en reposo normal. La neurona tiene dos principales funciones fisiológicas: 1). La Irritabilidad: que es la habilidad de respuesta a los estímulos para convertirlos en impulsos nerviosos. 2). La Conductividad, que es la habilidad de transmitir un impulso (en este caso, toma un impulso nervioso y lo pasa a través de la membrana celular). La neurona restante en reposo, (una neurona que ni recibe ni transmite ninguna señal), está cargada positivamente en el exterior y en el interior negativamente. Esta diferencia en las cargas eléctricas a través de la membrana plasmática se define como potencial de membrana en reposo, y se dice que la membrana esta polarizada. La bomba sodio-potasio dentro de la membrana mantiene la diferencia de cargas eléctricas establecidas por la difusión de iones. El mecanismo de transporte activo mueve tres iones de sodio hacia fuera de la célula e introduce dos iones de potasio. Por tanto, el principal catión en el fluido extracelular o fuera de la célula es el Sodio y el principal catión dentro de la célula es el Potasio. El interior de la superficie de la membrana celular es más negativo que el exterior, debido a las proteínas intracelulares, que al igual que las proteínas corporales tiende a cargarse negativamente. El potencial de membrana en reposo se puede medir con un voltímetro colocando un micro electrodo de registro en el interior de la membrana celular y en un lugar de referencia, o en tierra, que representaría el electrodo que esta fuera de la membrana. El axón del calamar gigante (donde se llevará a cabo la mejor de las investigaciones sobre los principios de neurología) y el axón de la rana fueron usados en este ejercicio, el potencial de membrana en reposo es -70mv. (En humanos, las medidas del potencial de membrana en reposo oscilan de - 40mv a - 90mv). PROCEDIMIENTO Para la realización de esta práctica de neurofisiología de los impulsos nerviosos, se utilizó el software de simulación Fisio Ex 7.0, y siguiendo las instrucciones del docente y la guía de aprendizaje numero 2, se realizaron los siguientes procedimientos:

ACTIVIDAD 1: Estimulo eléctrico 1. Configure el voltaje a 1,0 V dando clic en el botón (+) que está en la pantalla del voltaje. 2. De clic sobre ​Single Stimulus​ (estimulo simple o único estimulo).

● ¿Observó alguna clase de respuesta sobre la pantalla del osciloscopio? No, no se observó ningún cambio o estimulo.

● ¿Cuál fue el umbral del voltaje, o el voltaje en que usted observo el primer potencial de acción? 3.0 V

Anexo FisioEx 3. Incremente el voltaje en 0,5 V y luego de clic en ​Single Stimulus​. ¿Cómo es esta gráfica comparada con una de las que género el umbral del voltaje? (Nota: observe cuidadosamente las gráficas). R// hubo un leve cambio, se presentó una misma velocidad en el potencial de acción, pero la actividad se incrementó. 4. Continúe incrementando el voltaje en 0,5 V y de clic sobre ​Single Stimulus hasta que encuentre el punto en el cual no se produce aumento en el potencial de acción. Desde 5.5 a 7.5 V no se registra ningún cambio en el potencial de acción, es decir desde 3V a 5.5 el cambio fue diferente, pero a partir 5.5 a 7.5 se presentó estabilidad en el movimiento Registre el máximo voltaje aquí: 5.5V a partir de aquí no se presenta cambio en el potencial

ACTIVIDAD 2: Estimulación mecánica -

¿Qué observa en la pantalla del osciloscopio?

R// Se genera un potencial de acción igual que los anteriores, con la barra de vidrio a 4 voltios - ¿Cómo se puede comparar esta gráfica con otras gráficas que usted ha generado? R// Se genera el mismo potencial de acción, solo que el estímulo proviene del vidrio y no del voltaje como en los ejercicios pasados.

ACTIVIDAD 3:​ Estimulación térmica 1. Dar clic sobre la barra de vidrio y arrástrela hasta el calentador. Luego dar clic sobre el botón ​Heat​. Cuando la barra se torne roja, indica que está caliente, entonces dar clic sobre esta y arrástrela hasta la barra ubicada bajo el nervio y suelte el botón del ratón. ¿Qué pasa?

-

-

¿Cómo se comporta esta gráfica comparada con la gráfica que se generó con la barra de vidrio sin calentarse? R// En los dos Ocurrió potencial de acción y también periodo de refracción, pero el periodo de reposo con la barra de vidrio caliente fue menor que con la barra de vidrio frio, también su potencial de acción fue más alto que con la barra de vidrio frio y su periodo de refracción fue mayor ¿Qué explicación le puede dar a esto? R// El estímulo proviene del vidrio y no del voltaje como en los anteriores ejercicios.

ACTIVIDAD 4: Estimulación química 1. De clic sostenido y arrastre el cuentagotas de la botella de NaCl (solución de sal) ubicada bajo el nervio, y luego libere el botón del ratón para adicionar las gotas. ¿Se genera un potencial de acción? R//Aumenta el potencial de acción, debido a que llega a un mayor nivel de excitación. 2. Usando el método de umbral del voltaje realizado en la Actividad 1, estimule el nervio. ¿Difiere esta gráfica de la gráfica del estímulo umbral original? Si es así, ¿Cómo? R//No difiere, el potencial de acción fue igual tanto el registrado con cloruro de sodio como con el voltaje de 3 debido a que sus factores son los mismos en la fibra nerviosa.

3. De clic sostenido y arrastre el cuentagotas de la botella de ácido clorhídrico ubicada bajo el nervio, y luego libere el botón del ratón para adicionar las gotas. ¿Se genera un potencial de acción?, ¿Difiere esta gráfica de la gráfica del estímulo umbral original? R//No difiere, el potencial de acción del ácido fue igual al registrado con el voltaje 3 debido a que sus factores son los mismos a la fibra nerviosa -

NaCl

HCL

Resumiendo, los resultados de los experimentos realizados, ¿con qué tipo de estímulo se obtiene un potencial de acción? R// Se obtiene estímulos tanto con el cloruro de sodio como con ácido clorhídrico (químicos). También se obtuvieron estímulos físicos (barra de vidrio) y de calor (voltaje a partir de 3).

Anexo FisioEx

ACTIVIDAD 5: Evaluando los efectos del éter -

¿Qué pasó con el nervio? ¿Qué tipo de gráfica puede ver? R// No hubo potencial de acción, es decir hubo inhibición por parte del éter, por lo que se generó una línea horizontal. No paso nada.

-

Con el cambio en la escala de tiempo, el potencial de acción se verá como una línea recta vertical. R// Seis minutos tarda en producir el estímulo, después la excitación ocurre cada 2 minutos

-

¿Cuánto tiempo le toma al nervio regresar a la normalidad R// El estimulo fue constante, es decir no hubo tiempo límite.

ACTIVIDAD 6: Evaluando los efectos del curare. Se conoce que el curare proviene del extracto de algunas plantas que los indígenas de sur América usaban para paralizar a sus presas. Esta sustancia es una alfa toxina que se une a los sitios del acetil colina sobre la membrana de la célula post sináptica, que le impide actuar al acetil colina. El curare bloquea la transmisión sináptica impidiendo el flujo de los impulsos nerviosos de neurona a neurona. 1. Configure el estimulador como en la actividad 1 (umbral del voltaje) y estimule el nervio. ¿Se generó un potencial de acción? R// Si se generó un potencial de acción

-

¿Que explica este efecto? R// La toxina curare actúa como un simulador del acetil colinesterasa por lo que se une al acetil colina produciendo la perdida de la sinapsis entre las neuronas, pero no impide que se genere un potencial de acción

-

¿Qué efecto pensaría usted que el curare tendría en el organismo? R// ​El efecto se produce bloqueando la conducción nerviosa motora a nivel de la placa neuromuscular inhibiendo la acción de la acetilcolina (acción anticolinérgica): el curare actúa como antagonista nicotínico uniéndose los receptores nicotínicos, bloqueándolos y paralizando toda la musculatura, incluyendo la respiratoria ​Los impulsos nerviosos son mensajes electroquímicos que se propagan a lo largo de las fibras nerviosas y las células musculares para producir una acción. Cuando el curare se une a la acetilcolina, los receptores no se activan, y hay pérdida de la función muscular, parálisis y posiblemente la muerte. Los intervalos de dosificación y administración determinarán la gravedad de los efectos del curare.

ACTIVIDAD 7: Evaluando los efectos de la lidocaína. Nota: la lidocaína es un antagonista de los canales de sodio que impide que los canales de sodio se abran.

1. Dar clic sostenido y arrastre el cuentagotas que contiene Lidocaína, y suéltelo entre el estimulador y el registro de electrodos para agregar las gotas. - ¿Se genera una gráfica? NO - Estimule el nervio a un umbral de voltaje. ¿Qué tipo de gráfica observa? No hay potencial de acción, se presenta una línea horizontal en el osciloscopio

-

¿Por qué la lidocaína tiene este efecto sobre las fibras nerviosas transmisoras? R// La lidocaína es un anestésico de acción rápida y corta duración. Los efectos antiarrítmicos de la lidocaína son el resultado de su capacidad para inhibir la entrada de sodio a través de los canales rápidos de la membrana celular.

ACTIVIDAD 8: Midiendo la velocidad de la conducción nerviosa -

¿Observa un potencial de acción? NO ¿Qué cantidad de voltaje fue necesario para observar un potencial de acción? 5V ¿Cuál nervio presentó la menor velocidad de conducción y Qué velocidad presentó el nervio? R// LOMBRIZ CON 8.65 msec

-

¿Cuál nervio presentó la mayor velocidad de conducción y Qué velocidad presentó el nervio? R// EL NERVIO DE RATA # 2 CON 44.33 msec.

-

¿Cuál es la relación entre el tamaño del nervio y la velocidad de conducción? ¿Cuál es la explicación fisiológica para esta relación? R// La velocidad de conducción de un nervio hace referencia a la velocidad con la que se propagan los potenciales de acción por los axones del nervio. Entre mayor sea el diámetro de las fibras que forman el nervio, mayor es la velocidad de conducción. La velocidad de conducción también depende de la presencia o ausencia de mielina; un axón mielinizado tiene mayor velocidad de conducción que un axón no mielinizado aun teniendo el mismo diámetro.

En la práctica pudimos observar que la Lombriz es un cuerpo compuesto, mientras que el nervio solo es un conjunto de fibras nerviosas, también que, gracias a su tamaño y la mielinización del nervio, el nervio de la rata 2 fue el que obtuvo una velocidad mayor de conducción.

¿Cuál es su conclusión acerca de los efectos de la mielinización sobre la velocidad de conducción? ¿Cuál es la explicación fisiológica para su conclusión? R// Cuando un nervio tiene axones mielinizados; la mielina acelera la transmisión de los impulsos nerviosos siendo más alta la velocidad de conducción de dichos impulsos. En el experimento se puedo observar lo anterior, si un nervio cuenta con mielina como los nervios este va a tener una velocidad de conducción más elevada que uno que no, pero se debe tener en cuenta también el largo del nervio y que entre más largo así sea una velocidad alta deberá recorrer más camino el impulso, este llegara con menos efectividad. - ¿Cuáles son las ventajas en la evolución debido a la mielinización de las neuronas? R// La mielina es la encargada de la velocidad de interacción entre las neuronas ya a partir de los 40 años, la producción de esta decae. La mielinización es el recubrimiento entre las conexiones de las neuronas con una membrana que permite una mayor velocidad en el envío de señales entre las neuronas y las ventajas de esto, es el buen funcionamiento y duración de las neuronas. -

Anexo FisioEx

Tabla 1 Resultados medición de la conducción nerviosa

Rata nervio #1

Rata #2

nervio

Rana

Nervio

Lombriz (nervio pequeño)

(nervio medio, mielinizado)

(nervio medio, no mielinizado)

Umbral del voltaje

5.0

3.0

2.5

3.0

Tiempo transcurrido desde la estimulación hasta el potencial de acción

4.97

1.53

2.44

0.97

Velocidad conducción

8.65m/sec

28.9m/sec

17.20m/sec

44.33m/sec

de

(nervio largo, mielinizado)

5. EJERCICIO DE REPASO: NEUROFISIOLOGIA DE LOS IMPULSOS NERVIOSOS 1. Aparee cada definición de la columna A con el término apropiado de la columna B. Columna A

Columna B

(D)

Termino que se refiere al potencial de membrana de -70mv

a.

umbral

(F)

Inverso del potencial de membrana debido al flujo de iones de sodio

b.

sodio

(B)

Principal catión encontrado fuera de la célula

c.

potasio

(A)

Mínimo estímulo necesario para obtener una acción potencial

d.

potencial de membrana en reposo

(E)

Periodo cuando le membrana celular está totalmente insensitiva a los estímulos adicionales a pesar del estímulo de fuerza aplicado

e.

periodo refractario

(C)

Principal catión encontrado al interior de la célula

f.

despolarización

absoluto

2. Complete los espacios en blanco con las palabras o términos correctos -

R// Las neuronas, con otras células excitables del cuerpo, tienen dos propiedades fisiológicas: ​IRRITABILIDAD y ​CONDUCTIVIDAD ​Una neurona tiene carga positiva sobre la superficie de la membrana celular en parte, debido al sistema de

acción de transporte activo llamado __​SODIO/POTASIO Este sistema mueve _​3 SODIOS fuera de la célula y ​2POTASIOS al interior de la célula. El interior de la membrana celular es negativo, no solamente por el sistema de transporte activo sino también por _​PROTEINAS INTRACELURALES​, cuyos negativos permanecen debido al pH intracelular y guarda el interior de la membrana celular negativamente.

3. ¿Por qué los términos despolarización y acción potencial no significan los mismo? ​R// El potencial de acción señala lo que pasa cuando la neurona transmite información por el axón, es una explosión de actividad eléctrica creado por una corriente despolarizadora, ES DECIR la despolarización es el motor para que haya la energía necesaria y que ocurra el potencial, Si la despolarización alcanza un determinado valor umbral, se genera un potencial de acción. 4. ¿Cuál es la diferencia entre la irritabilidad de la membrana y conductividad de la membrana? R// La irritabilidad es la capacidad de la membrana de una célula nerviosa para recibir estímulos, mientras la conductividad es la capacidad de transmitir un impuso de una membrana otra o también un impulso a un órgano efector 5. ¿Por qué la acción potencial del nervio incrementa poco cuando usted aumenta de a 1?0V al umbral del voltaje y estimula el nervio? R// Porque este voltaje no genera un estímulo fuerte en el nervio, ya que el nervio necesita un estímulo con un voltaje más alto para generar un potencial de acción y así activarse para que inicie el flujo de iones 6. Si usted tuviera a disposición un laboratorio de fisiología, ¿Qué tipo de estímulo usaría y por qué? R// Estimulo del sistema nervioso; Medir la velocidad de conducción nerviosa y Analizar el efecto de la estimulación nerviosa en el reclutamiento de las fibras musculares. Porque conocer el funcionamiento y las implicaciones para llevar acabo dicho proceso ayuda a desarrollar habilidades en el entendimiento del movimiento del animal. 7. ¿Por qué a partir de la adición de cloruro de sodio se obtiene una acción potencial? R// La "causa" del potencial de acción es el intercambio de iones a través de la membrana celular. Primero, un estímulo abre los canales de sodio y entran rápidamente y el potasio sale rápidamente de la célula. Es decir, el sodio es primordial para que ocurra el potencial de acción si hay usencia de este los estímulos no se llevarían a cabo 8. ¿Cuál es el efecto del éter para obtener una acción potencial? R// Inhibición por parte del éter ​R// El éter manifiesta su acción en la membrana post – sináptica, reduciendo la sensibilidad de dicha membrana a la acetilcolina, bloqueando la acción neuromuscular. El éter reduce la amplitud y prolonga la duración del potencial de la placa terminal en la unión neuromuscular. A esta acción periférica neuromuscular hay que agregar que, en el efecto relajante del éter, interviene la depresión del sistema nervioso y de la actividad de los reflejos medulares aboliéndolos. Lo que produce de manera importante la disminución del tono

muscular. Esto disminuye la cantidad de impulsos que llegan por la vía final común de las células del hasta motora medular a los músculos, es por todas estas características que se utiliza como anestésico local, ya que suprime la actividad muscular, pero no deja inconsciente el paciente. (Karis et al 1967). 9. ¿La adición de éter al nervio causa alguna alteración permanente en la respuesta neural? ​R// El éter es un producto químico con la capacidad de bloquear la conducción nerviosa cuando se aplican localmente en el nervio en concentraciones apropiadas para este. Actúa sobre cualquier parte del sistema nervioso y fibra nerviosa; siendo el éter un anestésico local tiene la ventaja de ser reversible teniendo una recuperación total de las funciones nerviosas, sin presentar daño en las fibras o células nerviosas.

10. ¿Cuál fue el efecto del curare para obtener una acción potencial R// BLOQUEO NEUROMUSCULAR, La toxina curare actúa como un simulador del acetil colinesterasa por lo que se une al acetil colina produciendo la perdida de la sinapsis entre las neuronas. El termino bloqueo neuromuscular se refiere a la interrupción del paso del impulso nervioso entre la terminación de la motoneurona y la membrana de la fibra muscular esquelética a nivel de la placa motora. 11. Explique las razones para su respuesta en la pregunta 10.​R// Es un veneno obtenido de una planta originada en la selva amazónica. Los nativos descubrieron que cuando lo inoculaban a una presa durante la cacería, aunque el animal no moría instantáneamente, sólo debían seguir su rastro porque a poca distancia estaría vivo pero paralizado. Por lo tanto, el mecanismo de acción del curare es el bloqueo competitivo de los receptores para acetilcolina que posee la membrana de la fibra muscular en la hendidura sináptica 12. ¿Cuál fue el efecto de la lidocaína para obtener una acción potencial? R// Impidió la apertura de los canales de sodio y así evita que la membrana plasmática se vuelva más electropositiva para generar el potencial de acción. La lidocaína es un anestésico de acción rápida y corta duración. Los efectos antiarrítmicos de lidocaína son el resultado de su capacidad para inhibir la entrada de sodio a través de los canales rápidos de la membrana celular 13- ¿Cuál es la relación entre el tamaño de nervio y la velocidad de conducción? R// Entre más corto es el nervio y más cerca esta del lugar efector más rápida será la velocidad de conducción, por el contrario, si el nervio está más lejos del lugar efector o es más largo, la velocidad del impulso no será tan rápida y por ende se verá afectada la eficiencia de la conducción. ADEMÁS, Entre mayor sea el diámetro de las fibras que forman el nervio, mayor es la velocidad de conducción. La velocidad de conducción también depende de la presencia o ausencia de mielina;

es decir un axón mielinizado tiene mayor velocidad de conducción que un axón no mielinizado aun teniendo el mismo diámetro. 14- De acuerdo con su respuesta en la pregunta 13, dibuje una analogía entre los nervios del cuerpo humano y un circuito eléctrico.​ R//

Circuito eléctrico​ es el nombre que recibe una conexión eléctrica que puede servir para diferentes usos. Un circuito eléctrico puede ser más o menos grande dependiendo de la necesidad o la función pero siempre debe contar con un número de elementos importantes para que la energía pueda ser transmitida de un espacio a otro y llegar a su objetivo El circuito eléctrico es algo que muchas veces no vemos pero que está presente en todos aquellos elementos que dependan de la electricidad para funcionar, por lo cual se puede establecer que gran parte de los objetos que utilizamos hoy en día poseen algún tipo de circuito eléctrico internamente. El circuito eléctrico es la circulación de energía a través de un camino determinado por la interconexión de varios elementos. Por lo tanto, se puede comparar con un circuito eléctrico, ya que este necesita una central, es decir una fuente primaria que le suministre la corriente y la información para procesarla, y ambos al tener un flujo aferente y eferente de información podrán llegar al sitio de destino 15- Genere una hipótesis sobre ¿qué tipo de animales podrían tener las mayores velocidades de conducción? ¿Cómo afecta la mielinización del nervio la velocidad de conducción? Explique.

La velocidad de conducción también depende de la presencia o ausencia de mielina, un axón mielinizado tiene mayor velocidad de conducción que un axón no mielinizado aun teniendo el mismo diámetro. El impulso nervioso no se transmite con la misma velocidad en todas las neuronas. Depende de si el axón está o no rodeado por unas células, las células de Schwann, que

producen una sustancia blanca, la vaina de mielina, que impide el paso del impulso nervioso y hace que tenga que saltar entre los espacios sin vaina de mielina, por lo que la velocidad será mucho mayor.

16- En el experimento de velocidad de conducción nerviosa, si se invirtiera la colocación de alguno de los nervios en el lugar del estimulador y los electrodos, ¿se podría ver alguna diferencia en la velocidad de conducción? Explique R// No, debido a que solo cambia el sentido de los nervios, provocando la misma reacción por que la composición de este no se altero ni tampoco se alteró los componentes, solo la posición CONCLUSIÓN Terminadas todas las practicas del laboratorio en FisioEx 7.0 se puede concluir como funciona el sistema nervioso en los organismos, así como los procesos que se requieren para la comunicación entre las neuronas y la variedad de estímulos que se necesitan. Incluido a esto se puede identificar que el sistema nervioso tiene dos funciones fisiológicas sumamente importantes como lo son: la irritabilidad, que es la capacidad que tienen las células de responder a un estímulo y la conductividad, que es la habilidad de transmitir el impulso y pasarlo a lo largo de toda la membrana de la célula. El estimulo puede ser de tipo químico, térmico, eléctrico o de fuentes como los analgésicos. BIBLIOGRAFÍA: ● Fox, S (2014) Fisiología humana, Stuart ira fox, 12ª edición ● Agrega.educacion.es. (2017). Propagación del impulso nervioso | El Sistema Nervioso. [online] Available at: http://agrega.educacion.es/repositorio/14062013/46/es_2013061412_9103939/Siste maNervioso/propagacin_del_impulso_nervioso.html [Accessed 7 SEMP 19]. ● Poirier, J. (2004) El sistema nervioso. Siglo XXI 2004. 104p